蓝桉组织培养的研究

用蓝桉（Ｅｕｃａｌｙｐｔｕｓｇｌｏｂｕｌｕｓ）离体芽器官诱导培养，分化形成丛生芽，年繁殖系数３￣（１２）。０．１～０．５ｍｇ／Ｌ的６－ＢＡ或０．５～０．８ｍｇ／Ｌ的ＫＴ诱导外植体（带节茎段）腋芽萌动的效果最佳，诱导率分别达８０．３％和８１．５％。１．５～２０ｍｇ／Ｌ的６～ＢＡ或２０～２．５ｍｇ／Ｌ的ＫＴ分别与０．５～１．０ｍｇ／Ｌ的ＮＡＡ组合，对于促进腋芽分化形成丛生芽及继代培养中芽的增殖具有最佳效果。培养基中的无机盐浓度、蔗糖含量对蓝桉试管苗的生根具有显著影响；ＩＢＡ促进蓝桉试管苗的生根。至目前为止，在１／２ＭＳ无机盐培养基＋ＩＢＡ１．２～１．４ｍｇ／Ｌ＋Ｓ５ｇ／Ｌ中诱导生根，生根率最高可达２６．４％。     

马尾松离体培养条件下的微繁殖和菌根的形成*

以马尾松种胚作外植体进行不定芽诱导。基本培养基的种类对外植体不定芽的诱导起着决定性的作用，在ＧＤ附加２．０ｍｇ／ＬＢＡ的培养基上，外植体不定芽诱导率达７０％以上。ＩＡＡ或ＮＡＡ的加入不利于外植体不定芽的诱导。在不定芽生长培养基中，加入适量的ＩＢＡ能促进不定芽的伸长生长。伸长至０．５ｃｍ以上的嫩枝在１／２ＧＤ附加４．０ｍｇ／ＬＩＢＡ的培养基上，生根状况良好。生根后的小植株，在１／２ＧＤ培养基上接种Ｒｔ４９菌根真菌，菌丝侵染进入根部，形成组培菌根植株。     

蓝桉组织培养的研究

用蓝桉（Ｅｕｃａｌｙｐｔｕｓ ｇｌｏｂｕｈｕｓ）离体芽器官诱导培养，分化形成丛生芽、年繁殖系数３＾１２。０．１－０．５ｍｇ／Ｌ的６－ＢＡ或０．５－０．８ｍｇ／Ｌ的ＫＴ诱导外植体（带节茎段）腋芽萌动的效果最佳，诱导率分别达８０．３和８１．５％。１．５－２．０ｍｇ／Ｌ的６－ＢＡ或２．０－２．５ｍｇ／Ｌ的ＫＴ分别与０．５－１．０ｍｇ／Ｌ的ＮＡＡ组合于促进腋芽分化形成丛生芽及继代培养中芽的增殖具有最佳效果     

黑荆树茎尖培养技术的研究

以黑荆树无菌种子苗的茎类为材料，研究了用不同的细胞分裂素，生长的浓度及其配比，培养基成分的浓度，对茎尖诱导分化芽，芽的伸长及生根的影响，研究结果；培养基为ＭＳ＋６－ＢＡ６．０ｍｇ／Ｌ＋ＬＢＡ０．０１ｍｇ／Ｌ＋ＧＡ３０．１ｍｇ／Ｌ有利于促进茎尖丛生茎的形成和伸长，１／２ＭＳ＋ＮＡＡ０．６ｍｇ／Ｌ有利于诱导芽生根，试管苗移栽成活率达９０％，并在温室里生长正常。     

反义磷脂酶Dγ基因与几丁质酶基因转化美洲黑杨G2

建立美洲黑杨G2组培再生体系,确立美洲黑杨G2分化最适宜培养基和生根培养基.然后分别进行卡那霉素和潮霉素敏感性试验,利用叶盘法依次将反义磷脂酶Dγ(Anti-PLDγ)基因和几丁质酶(CH5B)基因转入美洲黑杨G2中.首先转入反义磷脂酶Dγ基因,经诱导不定芽及生根阶段卡那霉素(选择性抗生素)连续筛选,获得了21株卡那霉素抗性植株.抗性植株经PCR及PCR-Southern杂交检测,有13株均呈阳性,证明Anti-PLDγ基因成功整合到美洲黑杨G2基因组中.耐盐性试验表明,4株转基因植株抗NaCl能力比对照都有不同程度提高.选择4号株系继续转入几丁质酶基因,通过潮霉素(选择性抗生素)筛选不定芽及诱导生根获6株潮霉素抗性植株,经PCR及PCR-Southern杂交检测,6株均呈阳性,证明CH5B基因成功整合到美洲黑杨G2基因组中.由于CH5B基因与报告基因GUS处于同一开放阅读框(ORF)内,因此通过GUS基因的组织化学染色分析,证明了6株转化植株几丁质酶基因均获得正常表达.     

蓝花大叶醉鱼草组培快速繁殖的研究

通过蓝花大叶醉鱼草组培快繁的实验，研究了对外植体的不同取材部位及不同激素种类、浓度对芽诱导及增殖的影响。结果表明，采用母株基部的茎段作外植体诱导率高，分化增殖系数大，在做不同激素对茎增殖比较中，生长素在其中起着决定作用。同时，筛选出最佳　分化培养基ＭＳ＋ ６ － ＢＡ１－０ ｍｇ／ｌ＋ ＩＢＡ０－０５ ｍｇ／ｌ，根的诱导培养基１／２ ＭＳ＋ ＩＢＡ０－５ ｍｇ／ｌ，并对蓝花大叶醉鱼草组培中的一些问题进行了讨论     

猕猴桃的组织培养及繁殖能力的研究

以猕猴桃的顶芽作外植体进行离体培养,芽分化率最高,为７９．１％,其次是侧芽和茎段,两者的芽分化率分别可达４５．８％和２４．４％,叶片的芽分化率为０,以顶芽为外植体,在添加１．５ｍｇ／Ｌ ＢＡＰ和０．２ｍｇ／Ｌ ＮＡＡ、Ｎ素减半的改良培养基上进行芽分化和继代培养,芽分化率可达到９７．７％,在继代培养中补充１０ｍｇ／Ｌ的谷氨酸盐,可大大提高继代增殖系数β１,到第三次继代时,β１可达到１２７．５,而此时     

几种针叶树种离休培养条件的研究

取油松、白皮松、华山松、青杵的休眠芽外植体，进行了离体培养条件的研究。结果表明：基本培养基以ＷＰＭ和ＭＳ为宜，ＳＨ次之；激素ＢＡ比ＫＴ作用明显，浓度以０．１－０．７５ｍｇ／ｌ为宜；ＮＡＡ０．５－１．５ｍｇ／ｌ配合使用少量ＩＢＡ，利用于务组织的诱导和分化；ＢＡ／ＮＡＡ＜１适宜于针叶树种离体培养，从而为优良针叶树种的无性转化和针叶树组培快速繁殖提供了依据。     

扁桃茎尖组织培养的研究

为快速繁殖扁桃,以从美国引种的５个品种为试材,从取材、材料的处理、外植体的诱导分化,芽的增殖、生根以及影响试管苗形成的重要因子等方面探讨了扁桃组织培养的技术和方法。经研究得出生长素与细胞分裂素对芽的诱导分化及芽的增殖最佳配比浓度为：在改良ＭＳ基本培养基上添加０．５ｍｇ／Ｌ的ＨＡＡ：０．５ｍｇ／Ｌ的ＫＴ,０．１ｍｇ／Ｌ的ＢＡ,此配比浓度产生的扁桃有效苗最多,而添加１．５～２．０ｍｇ／Ｌ的ＩＢＡ生长素     

几种针叶树种离体培养条件的研究

取油松、白皮松、华山松、青的休眠芽外植体，进行了离体培养条件的研究。结果表明：基本培养基以ＷＰＭ和ＭＳ为宜，ＳＨ次之；激素ＢＡ比ＫＴ作用明显，浓度以０．２～０．７５ｍｇ／ｌ为宜；ＮＡＡ０．５～１．５ｍｇ／ｌ配合使用少量ＩＢＡ，利于愈伤组织的诱导和分化；ＢＡ／ＮＡＡ＜１适宜于针叶树种离体培养，从而为优良针叶树种的无性转化和针叶树组培快速繁殖提供了依据。     

抗菌肽LcI基因转化杨树的阶段研究

抗菌肽ＬｃＩ基因转化杨树的阶段研究＊李陈颖李铃韩一凡关键词抗菌肽ＬｃＩ基因、转化、杨树杨树（Ｐｏｐｕｌｕｓｓｐｐ．）是“三北”防护林和四旁绿化的主要树种，在防风固沙、农田林网、四旁绿化及水土保持方面起着重大作用［１］。目前，我国林木抗虫抗病主要以化...     

黑林1号杨抗生素敏感性测定

以黑林1号杨叶片和茎段为材料,针对蜘蛛杀虫肽+Bt毒蛋白嵌合基因的遗传转化进行了抗生素筛选。结果表明,随2种抗生素浓度的增加,叶片分化率和不定芽率逐渐下降,卡那霉素和头孢噻肟钠临界浓度分别为15、600mg/L;在茎段生根筛选阶段,卡那霉素和头孢噻肟钠的适宜浓度分别为25、700mg/L。     

矾根‘莓果’不定芽诱导与快速繁殖

【目的】为了筛选出适于矾根‘莓果’组培快繁的最佳培养基配方,并初步建立其离体繁殖技术体系,从而给矾根种质保存和分子育种提供技术支撑。【方法】分别以矾根‘莓果’的叶片和叶柄为试材,研究了不同浓度的植物生长调节剂对其不定芽诱导率、增殖和生根的影响情况:先分别将叶片和叶柄接种于添加了不同浓度TDZ或6-BA的MS培养基上,55 d后统计其诱导率和出芽数;然后将诱导的丛生芽转移至添加了不同浓度6-BA的MS培养基上进行增殖培养,30 d后观察并记录其增殖系数和生长状况;再将试管苗置于添加了不同浓度的NAA和IBA的1/2MS培养基上进行生根培养,30 d后观测其生根率、生根数和根长。【结果】在适宜的培养基上,矾根叶片和叶柄的不定芽诱导率分别达到86.11%和91.67%,其平均出芽数分别为3.20和2.73个;其丛生芽的增殖系数达到3.97,且植株生长快,长势健壮;其试管苗的生根率达到95.0%,试管苗的生长健壮,且其单株平均生根数最高,达到47.6条。【结论】建立了高效的矾根离体培养体系:矾根叶片和叶柄不定芽诱导的最适培养基均为MS+1.0 mg/L的6-BA+0.1 mg/L的NAA;其丛生芽增殖的适宜培养基是MS+0.5 mg/L的6-BA;其试管苗生根的适宜培养基是1/2MS+1.0 mg/L的NAA。     

杨树不同品种插穗自身含水量与扦插成活的关系

以中黑防、晚花杨、小黑杨14号3个杨树品种为试验材料,设计自然失水24 h、48 h、72 h三个梯度(处理)研究插穗自身含水量与扦插成活的关系.结果表明:在相同的自然失水时间里,晚花杨失水率最大,自然失水处理72 h,失水率可达30.7%,小黑杨14号为29.6%,中黑防也达到了27.9%.中黑防在穗条自身失水率达到30%时,生根与成活率才会显著下降;而小黑杨14号和晚花杨在穗条自身失水率达到20%时,生根与成活率就会显著下降.     

正交设计在杨树最佳遗传转化体系的建立

本试验以建立的南林95杨高频再生体系为基础,利用正交试验设计,通过GUS组织染色分析法研究了预培养时间、茵液浓度、As浓度、侵染时间和共培养时间5个因素在4个水平上对南林95杨遗传转化的影响,并探讨了南林95杨转化中添加卡那霉素的适宜浓度。运用DPS软件对试验结果进行分析,建立了杨树遗传转化体系。结果表明：外植体预培养7d,在含As200μmol／L的茵液浓度为0．6的农杆菌液中侵染20rain,共培养3d为最佳遗传转化体系,适宜的卡那霉素筛选浓度为50mg／L;本试验共获得6株转化植株,经GUS染色检测和PCR分析表明．GUS基因已初步整合进入南林95杨基因组中。     

欧美杨渤丰1号高效组培再生体系建立

与白杨派树种相比,黑杨派树种一直因组培再生困难而限制了其在林木基因工程研究中的应用。本文以欧美杨优良新品种——渤丰1号为试验材料,以其再生培养基中的植物生长调节剂配比、铜离子浓度、光照强度、卡那霉素选择压等方面为切入点开展研究,建立了渤丰1号杨高效组培再生体系。使用该再生体系时,外植体的分化率和生根率均达100%,叶片的平均分化芽数多达20个以上,组培苗移植成活率可达98%,40 mg·L^-1卡那霉素可以抑制渤丰1号杨叶片的诱导与分化,20 mg·L^-1卡那霉素可以抑制渤丰1号杨不定芽的生根;同时发现铜(Cu)元素是渤丰1号杨外植体分化再生的一个关键因素,增加Cu²⁺浓度能显著促进不定芽的诱导和分化。     

农杆菌介导的山苍子遗传转化体系的构建

目的 筛选适合山苍子愈伤组织分化的激素比例,研究其对抗生素的耐受性,构建山苍子遗传转化体系。 方法 以山苍子无菌苗茎段诱导的愈伤组织为试验材料,研究不同激素浓度配比对山苍子愈伤组织诱导不定芽及不定芽生根的影响,探讨愈伤组织对潮霉素和头孢霉素的临界筛选浓度,并通过农杆菌介导法将外源基因导入山苍子愈伤组织中。 结果 筛选出诱导愈伤组织不定芽分化培养基为：MS + 2.0 mg·L−1 6-BA + 0.01 mg·L−1 IBA + 0.05 mg·L−1 TDZ,分化率为16.67%～36.67%;不定芽生根培养基为1/2MS + 0.5 mg·L−1 IAA,生根率为97.33%。遗传转化初期筛选抗性愈伤组织的潮霉素浓度为5 mg·L−1（约7～10 d）,通过逐步增加潮霉素浓度至30 mg·L−1进行筛选培养,头孢霉素最适浓度为300 mg·L−1。采用农杆菌介导法将外源基因转入愈伤组织中,并设计PCR引物进行鉴定,共检测16株抗性苗均含有目的条带,表明目的基因已插入山苍子基因组中,转化率为0.67%。通过Southern检测表明,目的片段已插入山苍子愈伤组织中。 结论 初步建立山苍子再生及遗传转化体系,且已获得多个基因的抗性愈伤组织,为进一步开展基因功能研究及遗传改良提供技术支持。     

西南桦节间茎段植株再生体系的建立

目的 探究西南桦间接器官发生过程的愈伤组织诱导、不定芽分化、生根诱导等各阶段的适宜培养基配方,建立西南桦高频再生体系,为其遗传转化和良种繁育提供理论依据和技术支持。 方法 以西南桦TC2号无性系的节间茎段为外植体开展愈伤组织诱导、不定芽分化以及生根培养基筛选试验,并优化了预培养条件,揭示了愈伤组织诱导阶段基本培养基、激素浓度、暗培养时间,愈伤组织分化阶段激素组合,以及预培养条件等因素对不定芽分化的影响。 结果 (1) 预培养的适宜条件为：弱光培养 (1 000 lx) 15 d后转至暗培养7 d,再正常光照 (2 000 lx) 培养8 d,该条件下可获得适度黄化的植株,其平均株高和节间长度分别为6.6 cm和3.1 cm; (2) 适合西南桦节间茎段愈伤组织诱导的培养基为WPB5 + 1.0 mg·L−1 TDZ + 0.2 mg·L−1 NAA + 20 g·L−1蔗糖 + 5.8 g·L−1琼脂 (pH5.8),适宜暗培养时间为15 d;(3) 适合愈伤组织分化的培养基为WPM + 0.8 mg·L−1 6-BA + 0.5 mg·L−1 GA3 + 30 g·L−1蔗糖 + 5.8 g·L−1琼脂 (pH5.8);(4) 采用上述最优方案,其茎段诱导的愈伤组织分化率和净增殖系数为88.9%和6.2以上,平均每个预培养植株可产生56.8个不定芽;(5) 适宜生根培养基为WPM + 0.1 mg·L−1 NAA + 20 g·L−1蔗糖 + 5.8 g·L−1琼脂 (pH5.8),培养30 d后生根率可达100%。 结论 本研究完整构建了高效稳定、重复性好的西南桦节间茎段高频再生体系,该体系不仅愈伤组织分化率和增殖系数较高,还可提升节间茎段取材的效率,为今后开展西南桦组培快繁以及利用基因工程进行其遗传性状改良奠定了基础。     

银中杨茎段离体培养再生植株研究

以银中杨茎段为外植体,建立组织培养系统.试验结果表明,MS为最适基本培养基;各激素对诱导不定芽的作用大小为TDZ＞6-BA＞KT,诱导不定芽的最佳培养基为MS+0.1 mg·L-1TDZ+蔗糖20 g·L-1+琼脂0.7%;诱导不定芽再生的最佳光质为白光或黄光;生根培养基以1/2MS+0.5 mg·L-1IBA+蔗糖2...     

长白落叶松离体再生体系的建立

以长白落叶松成熟合子胚诱导出的不定芽为外植体,通过筛选不定芽增殖的最适培养基及激素配比、探讨不同浓度赤霉素(GA_3)及活性炭(AC)对不定芽伸长的作用以及比较不同处理对试管内及试管外生根的影响,最终建立离体再生体系。结果表明:BM+1.0 mg/L TDZ时,不定芽增殖最快,增殖系数为5.0;GA_3对不定芽的伸长有毒害,2.0 g/L活性炭(AC)对不定芽伸长促进作用明显,伸长比率达262%;1/2BM+0.5 mg/L IBA+1.0 mg/L NAA为试管内生根的最佳组合,生根率达26%,不定芽在750 mg/L NAA中浸泡25 s,试管外生根率(37%)最高。