Pseudomonas putida ZWL73经龙胆酸途径分解代谢3-羟基苯甲酸

一株4-氯硝基苯(4-CNB)的完全降解菌Pseudomonas putida ZWL73能利用3-羟基苯甲酸(3-HBA)为惟一碳源和能源生长,而且ZWL73在对3-HBA降解的过程中,有中间产物龙胆酸生成;酶学分析的分光光度法证实,ZWL73通过GSH依赖型的龙胆酸途径代谢3-HBA,并且该途径需经3-HBA或龙胆酸诱导.     

五氯硝基苯降解菌株的分离筛选及应用效果

从多年施用五氯硝基苯的栽参地土壤中分离出8株可降解五氯硝基苯的菌株，并对其降解效果进行了研究。结果表明：其中细菌B1、B2、真菌R、放线菌S1的降解效果最好，降解率分别为73．6％、81．0％、73．4％、72．0％。将这4株优势菌株制成复合菌剂，对复合菌剂中各组成菌种的生长情况及其对五氯硝基苯代谢效果的研究结果表明：复合菌剂A、B、C、D、F、G对五氯硝基苯的代谢能力强于单一菌株。     

参后地土壤中五氯硝基苯微生物修复效应及影响因素研究

从长期使用五氯硝基苯(PCNB)的栽参土壤中筛选对PCNB具有降解效能的菌株(S1、S2、S3),研究其对PCNB的降解效能及影响因素.结果表明:适合各菌株生长的适宜温度为20～30%;适合S1和适合S2、S3菌株生长的pH范围分别为5.5～7.5和6.5～8.5.在此pH和温度范围内,各菌株对PCNB具有良好的降解性能.在最佳生长条件下,菌株达到最大生长量和最高降解率,在PCNB初始浓度为25.0 mg/L时,经过数天的培养,对PCNB降解率最高可达89.7%.与对照相比,土著微生物和接种微生物均能加速PCNB的降解.对泥浆相修复和纯培养基条件下的PCNB降解反应的回归方程进行差异显著性检验表明:在两种条件下,PCNB生物降解速率差异显著性达到α=0.01水平.     

硝基苯降解菌Bacillus cereus yc11-1的鉴定及降解条件优化

鉴定了从处理硝基苯废水的人工湿地中分离出的一株降解硝基苯的优势菌yc11-1,并采用中心复合设计法优化影响菌株降解硝基苯的因素来提高菌株对硝基苯的降解率.经形态学和菌株的16SrDNA序列分析,菌株yc1 1-1为蜡质芽孢杆菌(Bacillus cereus).该菌株降解硝基苯的最佳条件为初始硝基苯浓度84.84 mg/L、菌种投加量12.97％、培养温度29.4℃和pH 7.1,在此条件下理论降解率可达91.14％,实际降解率为90.58％.     

人参床土中五氯硝基苯残留特性的模拟

室内模拟试验测定了湿度、温度及微生物对五氯硝基苯降解速率的影响。经修正的MICDGD程序较好地模拟了五氯硝基苯在人参床土中的残留 ,合理地预报了五氯硝基苯在吉林省东部人参产区的两种土壤中残留趋势。连续两年的监测结果比较证明 ,该模型预报与观察分析结果拟合较好     

菌株M降解硝基苯效果研究

[目的]对菌株M生长条件、对硝基苯的降解效果、耐受性和代谢产物的生物毒性进行研究,为硝基苯废水生物降解提供理论依据。[方法]从受硝基苯污染的土壤中筛选出能以硝基苯为唯一碳源的菌株M,采用锌还原-盐酸萘乙二胺分光光度法测定硝基苯浓度研究不同pH、温度、接种量、硝基苯浓度对硝基苯降解率的影响。[结果]在pH为7,温度30℃,接种量10%（v/v）的最佳条件下,浓度低于500 mg/L的硝基苯12 h内被菌株M完全降解;浓度为600～700 mg/L的硝基苯24 h内被菌株M完全降解;菌株M对硝基苯的最大耐受浓度为900 mg/L;300 mg/L的硝基苯经菌株M降解后的代谢产物的生物毒性在12 h内逐渐降低直至无毒。[结论]菌株M对硝基苯废水具有快速降解效果,可以对降解进行动力学拟合,为实际废水处理提供依据。     

3种硝基苯污染物对锦鲤鱼的急性毒性

采用静水生物测试研究了对氯硝基苯(P-NCB)、间二硝基苯(M-DNB)和2,4-二硝基氯苯(CDNB)对锦鲤鱼的急性毒性.以锦鲤鱼(Brocarded Carp)为试验生物,将其暴露于3种化合物不同浓度的试液中,通过鱼类的死亡率求出96 h半数致死浓度(LC50).试验结果表明,对氯硝基苯、间二硝基苯、2,4-二硝基氯苯96 h LC50分别为22.13、14.53、0.692 mg·L-1.对氯硝基苯、间二硝基苯和2,4-二硝基氯苯对锦鲤鱼的急性毒性顺序为2,4-二硝基氯苯＞间二硝基苯＞对氯硝基苯,3种化合物的安全浓度分别为2.213、1.453和0.069 2 mg·L-1,2,4-二硝基氯苯对锦鲤鱼的安全浓度低于地表水环境标准,间二硝基苯和对氯硝基苯安全浓度高于标准限值.     

氯代硝基苯类生产废水厌氧-好氧序列生物处理研究Ⅰ. 反应器起动过程的特性

结果表明,以对氯硝基苯、邻氯硝基苯等目标污染物或氯代硝基苯生产废水和模拟有机废水混合水样作为厌氧/好氧(A/O)序列生物处理反应器进水,通过逐步提高目标污染物浓度与负荷,可驯化富集得到转化、降解硝基苯类、苯胺类的厌氧与好氧污泥;除硝基苯类在厌氧段得到转化外,苯胺类也可得到转化与降解.处理氯代硝基苯生产废水的厌氧/好氧系统在控制COD＜600 mg/L,HRT 44 h (A段20～24 h,O段22 h)的条件下,COD、硝基苯类(NAC)、苯胺类(AAC)的平均去除率分别为68%、97.4%及98.8%, 出水主要污染物指标可达到GB 8978-1996二级排放标准,对氯硝基苯、邻氯硝基苯等在系统中得到有效转化或降解.因此,厌氧/好氧序列生物工艺处理氯代硝基苯类生产废水是有效的.     

低温硝基苯降解菌的降解动力学研究

[目的]研究一株低温硝基苯降解菌的降解动力学。[方法]对一株耐低温硝基苯降解菌进行研究,考察了其最适生长条件及在不同硝基苯初始浓度下的生长和降解情况,并进行降解动力学研究。[结果]当温度为15℃,p H为7,摇床转速为140 r/min,接种量为10%时,最适宜该菌株生长。该菌株培养48 h对200 mg/L硝基苯的好氧降解率达60.53%。当硝基苯初始浓度100 mg/L时,该菌株的降解动力学符合Andrews抑制方程-非竞争性底物抑制模型。[结论]该研究可为硝基苯实际废水生化处理提供理论依据。     

水体中硝基苯厌氧降解微生物的筛选及其降解特性研究

以硝基苯为碳源,采用间歇式曝气方式,经90d驯化培养,从处理硝基苯废水的生物活性污泥中分离得到13株高效降解菌,在厌氧环境条件分离纯化,筛选得到降解能力最强的MY4菌,并研究了其对不同浓度硝基苯的降解特性。结果表明,经16SrRNA鉴定,MY4菌属于兼性葡萄球菌属(Staphylococcus sp),其在104～107CFU·mL-1范围内对硝基苯的去除率没有显著差异,降解率均为65%,硝基苯的降解速率在3～5d期间达到最大。高浓度的硝基苯对微生物的降解过程存在抑制作用,随着浓度的增高,其降解半衰期明显延长。GC-MS分析表明,硝基苯经MY4菌株降解后的主要产物为苯胺。     

节杆菌(Arthrobacter sp.)CN2对对硝基苯酚的趋化性研究

利用已获取的对硝基苯酚降解菌CN2,以对硝基苯酚为底物,通过游动平板趋化性、土壤趋化性实验以及毛细管趋化性实验对该菌株的趋化特性进行了研究,同时通过模拟土壤原位修复探究了菌株在实际应用中的效果。高效液相色谱检测结果表明,72 h内菌株CN2对对硝基苯酚的降解率大于99%。CN2在平板趋化性与土壤趋化性实验中均表现出对对硝基苯酚的趋化性特征,毛细管趋化性实验中,当对硝基苯酚浓度在一定范围内(5~800 mg·L~(-1))时,菌株的趋化性与对硝基苯酚浓度呈正相关,当其浓度高于800mg·L~(-1)时,菌株的趋化性逐渐受到抑制。模拟土壤原位修复实验的结果表明,菌株CN2在未灭菌土壤中的对硝基苯酚降解速率高于灭菌后土壤中的降解速率,在14 d内其降解率可达95%。研究表明,该菌株对环境具有良好的适应性,其对污染环境修复具有应用价值与潜力。     

产芽孢木质素降解菌MN-8的筛选及其对木质素的降解

【目的】分离、筛选产芽孢的高效木质素降解细菌,并进一步研究其对木质素的降解作用,为木质素微生物降解规模化应用提供理论依据。【方法】采用苯胺蓝（Azure-B）变色圈法,结合木质素降解酶活力测定从牛粪中分离筛选出产芽孢的木质素降解菌。通过形态特征观察、生理生化试验、16S rDNA以及gyrB序列分析对其中活性最强的菌株进行种属鉴定。利用菌株进行玉米秸秆堆积发酵,监测发酵过程中木质素过氧化物酶（LiP）酶活力、锰过氧化酶（MnP）酶活力以及玉米秸秆中木质素含量的变化,考察菌株对玉米秸秆木质素的降解作用。利用气相色谱-质谱联用（GC/MS）方法对菌株发酵后玉米秸秆中的木质素降解产物进行分析,推测菌株对木质素的降解机制。【结果】分离筛选到一株活性较高的产芽孢的木质素降解细菌MN-8,经形态特征观察、生理生化试验以及16S rDNA序列分析,鉴定菌株MN-8属于芽孢杆菌属（Bacillus）。利用16S rDNA序列分析发现MN-8菌株与地衣芽孢杆菌（Bacillus licheniformis）和解淀粉芽孢杆菌（B. amyloliquefaciens）同源性均高于99%。而基于gyrB序列构建的系统发育树显示,该菌株与解淀粉芽孢杆菌同源性最高,为99%。因此确定MN-8菌株为解淀粉芽孢杆菌。在玉米秸秆堆积发酵16 d后木质素降解率可达24%;发酵的6-8 d及10-12 d 两个阶段内,分别出现MnP酶活力及LiP的产酶高峰期,相对应两个阶段内秸秆木质素的降解最为显著;GC/MS分析显示菌株MN-8可将玉米秸秆中木质素降解成4-羟基-3,5二甲氧基苯乙酮等芳香族类化合物及短链脂肪酸类等小分子物质。【结论】高效木质素降解菌解淀粉芽孢杆菌MN-8可以通过断裂木质素单体之间的连接键β-O-4,高效降解秸秆木质素成为小分子芳香族化合物等物质,且其对秸秆木质素的降解依赖于LiP及MnP的产生。     

一氯苯的微生物厌气降解及其降解性质粒的研究

以一氯苯为唯一碳源，从某化工厂废水处理厂的活性污泥中分离得一株一氯苯长解菌，初步鉴定属于气单胞菌属（Ａｅｒｕｍｕｎａｓ），用气相色谱测得该菌在３周内的氯苯降解率为３３％，不同的质粒消除试验表明，该菌质粒很稳定，已成功地将质粒转移到大肠杆菌（Ｅ．ｃｏｌｉＪＦ８０３）中，该转化能利用一氯苯为唯一碳源生长，且转化子中有与原菌株电泳迁移率相同的质粒，因此，可以认为该质的携带有降解一氯苯的基因。     

Role of chemotaxis in establishing a specific nitrogen-fixing cyanobacterial-bacterial association

A specific association with the cyanobacterium Anabaena oscillarioides was established by positive bacterial (pseudomonad) chemotaxis to Anabaena oscillarioides heterocysts. This association enhanced nitrogen fixation in A. oscillarioides, and positive chemotaxis was particularly strong during periods of active nitrogen fixation. Addition of compounds known to elicit positive chemotaxis in pseudomonads interfered with the establishment of the association, while removal of these compounds led to reestablishment of the association. Anabaena oscillarioides excretion products, some of which are exuded from heterocyst-vegetative cell junctions, are likely to be responsible for positive chemotactic responses. Chemotaxis-controlled associations such as this one explain in part why aquatic bacterial-algal and bacterial-particle associations occur sporadically and are heterogeneously distributed in time and space.     

Delftia tsuruhatensis AD9苯胺双加氧酶基因的过量表达及多功能降解工程菌的构建

Delftia tsuruhatensis AD9和Acinetobacter calcoaceticus PHEA-2分别能利用苯胺和苯酚作为唯一碳源生长,降解的第一个中间产物均为邻苯二酚,随后裂解为参与三羧酸循环的中间产物。通过PCR方法克隆到苯胺高效降解菌AD9的苯胺双加氧酶基因,并构建表达苯胺双加氧酶的广宿主质粒载体pVD,通过三亲接合,导入到AD9和PHEA-2中。对两种重组菌中苯胺双氧酶基因的表达及苯胺降解特性的分析结果表明,增加苯胺双加氧酶基因的拷贝数可以提高野生型AD9的苯胺降解速率,同时该基因的表达使PHEA-2菌获得苯瞎隆觎能寸1．     

以luxAB为报告基因的大豆根瘤菌的竞争结瘤研究

将来自pHN101的luxAB基因和来自pTR102的parCBA /DE基因,经过一系列中间载体整合到PLAFR3上构建成广宿主、稳定性质粒PHN158。通过三亲本杂交将pHN158导入费氏中华根瘤菌得到4株能在癸醛的激发下发出荧光的转移接合子WZRL、HWRL、HZRL和WWRL。将它们与3株大豆慢生根瘤菌WHB1、WHB2和WWB组配成12对组合,并以黑龙33和Williams为宿主以luxAB为报告基因进行竞争结瘤试验。结果表明,费氏中华根瘤菌与大豆慢生根瘤菌之间的平均竞争结瘤能力相当;同类型根瘤菌不同菌株之间的竞争结瘤能力存在着显著的差异;同时根瘤菌的竞争结瘤能力也明显受到宿主的影响。表明费氏中华根瘤菌与大豆慢生根瘤菌之间的竞争结瘤是一个菌株之间、菌植之间复杂的相互作用的过程。     

一株氨氮降解菌的筛选及其降解特性的初步研究

从上海崇明警备区富民养猪场污水处理池的污泥中分离得到1株去除氨氮效果较好的菌株（代号CM3）,对其氨氮降解特性进行了研究。初步研究表明,CM3菌株降解氨氮的最适温度和pH值分别为30℃和8．0,在氨氮初始浓度为300mg／L时,4d内其氨氮降解率可达40％以上,并可利用多种含碳化合物作为碳源生长。因此,CM3菌株具有一定的降解氨氮能力和潜在的应用价值。     

健康鸡源肺炎克雷伯菌检测到质粒介导喹诺酮耐药qnrA基因

通过PCR技术检测195株健康动物肠杆菌中qnrA基因的流行情况;琼脂稀释法对qnrA阳性菌株进行8种抗菌药物的药物敏感性试验;质粒接合转移试验研究qnrA的可转移性;Southern杂交对qnrA基因进行定位;PCR检测qnrA阳性菌中Ⅰ类整合酶intI基因的携带情况.结果表明,195株肠杆菌中检出1株qnrA阳性的肺炎克雷伯菌Klebsiella pneumoniae GDKA1,经Blast鉴定为qnrA1.药物敏感性试验表明GDKA1对磺胺甲恶唑、氨苄西林、大观霉素、氯霉素、四环素耐药,对环丙沙星(MIC=0.019 mg·L-1),头孢噻肟(MIC=0.047 mg·L-1)表现敏感,对萘啶酸(MIC=12 mg·L-1)表现为部分敏感.接合试验表明qnrA1位于可转移的质粒上,且可以通过接合试验水平传播.接合子TGDKA1对喹诺酮类药物的敏感性比大肠埃希菌Escherichia coli J53 AzR稍高,但远低于GDKA1·South-ern杂交进一步证实了qnrA1基因位于质粒上.TGDKA1的质粒扩增出intI1,表明qnrA1阳性菌株携带I类整合子.可见,qnrA1基因已在健康鸡源肺炎克雷伯菌中出现且同时携带I类整合子位于质粒上,整合子灵活多样的存在方式和传播方式为qnrA基因的传播提供了便利条件,整合子可能携带qnrA基因通过食物链传播给人,因此健康动物共生菌携带qnrA1基因值得注意.     

煤气废水酚降解菌生长条件及降解特性研究

煤气废水是一种难处理的高浓度有机废水,是危害严重的工业废水之一,酚类物质是其中最主要的有机污染物,毒性大、难降解。对煤气废水活性污泥振荡培养,经驯化、分离筛选出两株能转化间苯二酚和间甲酚的优势降酚菌,分别命名为JS-4和JD-2,对其进行特性研究(温度、pH值、外加碳源效应)正交试验,并进行原水降解试验。结果表明,温度条件对降解效果影响最大,其次是pH值条件,影响最小的是外加碳源,同时可知最优处理条件为:JS-4为温度30℃,pH值7,外加碳源量1 000 mg·L-1;JD-2为温度30℃,pH值7,外加碳源量500 mg·L-1;对原水中酚类物质降解试验显示,在前6 h,单一菌株JS-4降解效果好于混合菌株,经过一段时间的适应,混合菌株表现出良好的降解能力。