Pseudomonas putida ZWL73经龙胆酸途径分解代谢3-羟基苯甲酸

一株4-氯硝基苯(4-CNB)的完全降解菌Pseudomonas putida ZWL73能利用3-羟基苯甲酸(3-HBA)为惟一碳源和能源生长,而且ZWL73在对3-HBA降解的过程中,有中间产物龙胆酸生成;酶学分析的分光光度法证实,ZWL73通过GSH依赖型的龙胆酸途径代谢3-HBA,并且该途径需经3-HBA或龙胆酸诱导.     

假单孢菌PB-02对五氯硝基苯的降解动力学及影响因素的研究

从多年施用五氯硝基苯(PCNB)的栽参土壤中分离得到1株降解菌,初步鉴定为假单孢菌属,命名为PB-02,并对其降解PCNB的影响因素进行了研究.结果表明:28℃振荡培养条件下,PCNB降解曲线符合一级反应动力学方程Ct=C0e-0.129t,相关系数R2为0.931,降解半衰期T1/2为5.3 d.在pH 6～8范围内,PB-02对PCNB具有良好的降解效能,降解率>85%.金属离子对菌株的生长量和降解效能产生不同程度的促进和抑制作用.甘氧酸、色氨酸、维生素B2和丙氨酸促进PB-02对PCNB的降解效能,维生素C和谷氨酸的作用不明显.PCNB降解程度与细菌数量增长呈正相关.     

环丙沙星对睾丸酮丛毛单胞菌CT1降解4-氯硝基苯作用的影响

为了研究环境中抗生素对4-氯硝基苯(4-chloro-1-nitrobenzene,4-CNB)生物降解的影响,本文选用9种高效降解4-CNB的菌株开展试验,并通过药敏试验研究了18种常用抗生素对菌株CT1的最小抑菌浓度(Minimum inhibitory concentration,MIC)。采用4-CNB-环丙沙星联合培养,研究了不同浓度环丙沙星作用下菌体浓度、细胞活性、总超氧化物歧化酶(SOD)及降解性能的变化。结果表明:睾丸酮丛毛单胞菌CT1降解4-CNB效率最高,27℃9 h降解效率为98.4%±0.2%。仅6种抗生素存在MIC值,其中环丙沙星的MIC值最低,为4μg·mL~(-1);链霉素MIC最高,为64μg·mL~(-1)。加入低浓度环丙沙星(1/4 MIC),菌体浓度和细胞活性显著降低,4-CNB降解率下降至87.0%±3.3%,环丙沙星浓度高于最小抑菌浓度(4 MIC)时,菌株生长受到极大抑制,4-CNB降解率仅为35.7%±3.9%。SOD酶活结果显示,加入环丙沙星能显著降低菌体细胞的SOD酶活力,引起活性氧对菌体的损伤,因此环丙沙星导致的菌体细胞内SOD酶活力降低可能是4-CNB生物降解受到抑制的主要原因之一。     

金属卟啉化合物对五氯硝基苯生物降解作用的影响

在试验条件下,研究了3种金属卟啉化舍物对1株细菌和1株真菌降解五氯硝基苯（PCNB）的影响。结果表明：Meso-四（对羟基苯基）卟啉铁（THPPFe（Ⅲ））和Meso-四（对羟基苯基）卟啉锰（THPPMn（Ⅱ））对PCNB的生物降解有促进作用,表现为PCNB的生物降解残留量降低了3％～15％。在细菌和真菌降解PCNB的2个体系中,THPPFe（Ⅲ）的质量分数为6mg／L时,PCNB的生物降解率最高,分别提高了6.0％和15.2％;TH-PPMn（Ⅱ）的质量分数为8mg／L时,PCNB生物降解率最高,分别提高了12.0％和12.8％。Meso-四（对羟基苯基）卟啉锌（THPPZn（Ⅱ））则抑制了PCNB的生物降解,表现为PCNB的生物降解残留量相对于空白提高了3％～16％。金属卟啉化合物存在下PCNB的生物降解依然符合一级反应动力学模式：C=C0e^-kt。     

零价铁处理4-氯硝基苯影响因素的研究

[目的]去除废水中有机污染物4-氯硝基苯（4-ClNB）。[方法]采用零价铁还原技术,研究初始pH值、4-ClNB初始浓度和Fe0投加量3个因素对Fe0还原4-ClNB的影响。[结果]pH值对Fe0还原4-ClNB影响较大,初始pH值为3和5时,4-ClNB还原率达100%;pH值为7时,4-ClNB还原率达90%左右,而pH值为9和12时,4-ClNB还原率为80.7%和33.3%。4-ClNB还原转化速率随4-ClNB初始浓度的增加而减小。试验范围内,Fe0投加量越大,4-ClNB的去除率越高。[结论]零价铁还原技术可以有效去除废水中的4-ClNB。     

五氯硝基苯降解菌的降解效能及影响因素研究

从长期施用PCNB的栽参土壤中,筛选出2株对PCNB具有降解作用的菌株,其中1株为细菌PB-1,另1株为放线菌PS-5,对其降解性能和影响生物降解的因素进行了研究。结果表明,适合PB-1和PS-5菌株生长的pH范围分别为pH5～7和pH6～8;适合PB-1和PS-5菌株生长的温度范围分别为20～30℃和25～35℃;在此pH和温度范围内,二菌株对PCNB具有良好的降解性能。菌株生长和降解PCNB的最佳条件,对于PB-1是pH6、温度28℃;对于PS-5是pH7、温度30℃。在最佳生长条件下,菌株达到最大生长量和最高降解率,在PCNB初始浓度为20.0mg.L-1时,经过4d的培养,降解率分别达到83.5%和76.9%。金属离子对各菌株的生长量和降解性能产生不同程度的促进和抑制作用,在添加浓度范围内,Cu2 和Mo6 对菌株PB-1有毒,Mn2 对菌株PS-5有毒;Fe2 和Co2 能促进菌株PB-1对PCNB的降解,分别比对照提高了8.9%和7.1%;Ca2 、Zn2 能刺激PB-1菌株的生长;Fe2 、Ca2 、Zn2 、Cu2 和Mg2 不同程度地促进菌株PS-5对PCNB的降解,降解率提高7%～20%,其中Mg2 也刺激菌株PS-5的生长。维生素B2和丙氨酸可以显著提高PB-1和PS-5菌株的生长和降解性能,维生素C和甘氨酸具有促进PS-5菌株降解PCNB的作用,其他生长因子的作用不明显。在甲醇、柠檬酸纳、甲苯(电子供体)和乙酸铵(电子受体)存在下,菌株降解PCNB的能力有明显差异,添加柠檬酸纳和甲苯能促进PS-5菌株对PCNB的降解;柠檬酸钠促进PB-1菌株的生长,甲醇促进PS-5菌株的生长;乙酸铵对菌株的生长和PCNB降解具有明显的抑制作用,降解效果与菌株生长量不存在一致性。试验结果为在PCNB污染土壤中应用降解微生物进行生物修复具有很好的参考价值。     

五氯硝基苯降解菌生长特性及降解活性

从施用过五氯硝基苯（Pentachloronitobenzene,PCNB)的土壤中分离得到1株高效细菌菌株－－吉氏拟杆菌（Bacteroides distasonis),并在生长条件和降解机理进行了初步研究。结果表明：该菌株的最适生长条件为：温度25－30℃，pH值6．0－7．0；该菌株依靠共代谢作用还原PCNB，在培养液和土壤悬液条件下均能加速PCNB的降解，半衰期均低于27d。     

2-氯硝基苯对鲫鱼体内抗氧化酶的影响

采用半静态染毒试验方法研究了2-氯硝基苯暴露浓度分别为0,0.10,0.50,1.00,5.00 ng/L时对鲫鱼肝脏和鳃中总超氧化物歧化酶和过氧化氢酶活性的影响.结果表明:2-氯硝基苯暴露浓度高于0.5 mg/L时对鲫鱼肝脏和鳃中总超氧化物歧化酶和过氧化氢酶的活性均有一定的影响;低浓度的2-氯硝基苯对酶活性具有一定的刺激诱导作用,高浓度时则对酶活性起抑制作用.相同试验条件下,2-氯硝基苯对肝脏中酶活性的刺激诱导作用强于对鳃的刺激诱导作用,而鳃中对酶活性的抑制作用则大干肝脏中对酶活性的抑制作用.鲫鱼肝脏中超氧化物歧化酶和过氧化氢酶的活性均高于鳃中相应酶的活性.试验结果可为研究2-氯硝基苯对鲫鱼体内抗氧化机理提供基础数据.     

芳香烃化合物降解菌CP5的降解特性及降解基因

以苯酚作为碳源从化工厂污水样品中富集筛选出降解能力较强的降解菌CP5,该菌能利用多种芳香烃化合物生长。16SrDNA序列系统发育分析表明,该菌属于假单胞菌属(Pseudomonas)。CP5可以在48h内将500mg/L的苯酚完全降解。从该菌株中扩增获得邻苯二酚2,3-双加氧酶基因,该基因编码氨基酸序列与P.putida NCIB9816-4以及P.fluorescens PC20的双加氧酶具有最高同源度,均为99%。CP5菌株对芳香烃化合物的生物修复有较大的应用前景。     

Cloning and Sequence Analysis of a Novel Cold-Adapted Lipase Gene from Strain lip35 （Pseudomonas sp.）

A combination method of the usual-PCR and reverse-PCR for the cloning of a novel lipase gene directly from the total genomic DNA of strain lip35 （Pseudomonas sp.） is described, whereby a lipase gene （lip） was cloned directly from genomic DNA. The sequence data have been deposited in the GenBank and EMBL data bank with the accession number EU414288. The nucleotide sequence showed a major open reading frame encoding a 59-kDa protein of 566 amino acid residues, which contained a lipase consensus sequence GXSXG. The lipase lip had 74 and 70% homologies with the lipases of an uncultured bacterium and P. fluorescens PfO-1, respectively, but it did not show any overall homology with lipases from other origins. The functional lipase was obtained when the lip gene was expressed in Pichia pastoris GS115.     

具有解钾活性假单胞菌的分离与鉴定

[目的]分离并鉴定具有解钾活性假单胞菌。[方法]以农田土壤为样本,在钾长石粉为唯一钾源的选择性培养基上分离并纯化解钾菌,并通过形态观察和16S r DNA序列分析对分离到的细菌进行鉴定。[结果]经梯度稀释涂布和平板划线分离,经初筛获得8株生长良好并具有解钾透明圈的细菌。将初筛后获得的细菌菌株进行发酵培养,利用原子吸收分光光度法测定发酵上清液中的速效钾含量,从中筛选出解钾能力较强的1株假单胞菌K3。通过形态观察发现,该菌株为革兰氏阴性杆菌。16S r DNA序列分析结果表明,该菌株与荧光假单胞菌F113亲缘关系最近,初步确定该菌株属假单胞菌属。[结论]该研究为微生物钾肥的开发提供了新的试材。     

一株拮抗姜瘟根际青枯假单胞杆菌的沙雷氏菌的分离与鉴定

从生姜连作地土壤中分离到1株对生姜青枯假单胞杆菌(Pseudomonos solanacarum Smith)有强拮抗作用的沙雷氏菌株R11,对该菌株进行了形态特征、培养特征、生理生化和16S rDNA序列分析的系统鉴定,发现R11为革兰氏阴性菌,端生一根鞭毛.以16S rDNA序列为基础构建了包括11株相关种属细菌在内的系统发育树,R11与沙雷氏菌(Serratia sp.)十分接近,序列相似性值达99％.     

降解菌Pseudomonas sp.对阿特拉津的降解条件优化

为微生物降解菌在农药污染土壤修复工程中应用提供参考,以从长期受阿特拉津污染的农田土壤中筛选出的一株降解菌Pseudomonas sp.为研究对象,采用单因素试验研究其在不同培养条件下对阿特拉津的降解效果,并采用正交试验进一步优化该菌的降解条件。结果表明:碳源对降解效果的影响不大;培养时间48h,底物浓度100mg/L,温度25~35℃,pH 5.0~8.0,盐度0.1%~1%时,该菌对阿特拉津的降解效果较好,降解率大于90%;该菌对阿特拉津降解的最佳组合条件为温度30℃,pH 7.0,盐度0.5%;且3因素对降解效果的影响依次为温度pH盐度。     

利用玉米芯酸解液生产假单胞菌胞外多糖的研究

假单胞菌 (Pseudomonassp .)可利用玉米芯酸解液生长和产胞外多糖 ,其产品性能受玉米芯水解方法、发酵条件等的影响。在 12 1℃直接用稀酸水解玉米芯 3 0min ,产糖率高 ;用水预处理玉米芯后 ,再酸解 ,其水解液发酵所得多糖产量虽略低 ,但生物量稍高 ,且产品外观色泽均一。MnSO4 、FeSO4 和CaCl2 可明显提高发酵液的粘度。力学性能测试表明多糖粗制品在高浓度时为非牛顿流体 ;在pH值 2～ 12范围内粘度稳定 ;5 0℃加热 3 0min粘度不受影响。多糖制品无细胞毒性。在优化条件下发酵液最高粘度达 3 80 0mPa·s。     

Induction of Tolerance to Fusarium Wilt and Defense-Related Mechanisms in the Plantlets of Susceptible Berangan Banana Pre-Inoculated with Pseudomonas sp.(UPMP3) and Burkholderia sp.(UPMB3)

This study is aimed at assessing the ability of two endophytic bacteria originally isolated from healthy oil palm roots,Pseudomonas sp.(UPMP3) and Burkholderia sp.(UPMB3) to induce resistance in susceptible Berangan banana against Fusarium oxysporum race 4 (FocR4).Increased accumulation of resistance-related enzymes such as peroxidase (PO),phenylalanine ammonia lyase (PAL),lignithioglycolic acid (LTGA),and pathogenesis-related (PR) proteins (chitinase and β-1,3-glucanase) has been observed in plantlets treated with endophytic bacteria UPMP3 and UPMB3 singly or as mixture under glasshouse conditions.Pre-inoculation of banana plantlets with UPMP3 showed a significant reduction in Fusarium wilt incidence 72 d after challenged inoculation with FocR4.UPMB3 was less effective in suppressing Fusarium wilt compared to UPMP3,whereas,the mixture of both endophytes showed an intermediate effect.Based on these results,it is concluded that UPMP3 could be a promising biological control agent that can trigger resistance against Fusarium wilt in susceptible Berangan banana.     

假单胞菌HYS菌株对油菜种子发芽的影响

为了研究假单胞菌HYS菌株及其上清液对油菜种子发芽的作用,采用LB培养假单胞菌HYS菌株,分别用水(CK)、LB和HYS菌液浸种油菜种子或在油菜发芽过程中分别添加这3种液体。结果表明,HYS菌液浸种不影响油菜种子最终的露白和发芽,但显著抑制油菜种子的露白和发芽进程;在油菜发芽过程中添加HYS菌液也会抑制油菜种子的露白进程,同时还抑制油菜种子的发芽和芽苗生长,而LB抑制油菜根的生长。油菜在发芽过程中,头1~2 d感染HYS菌株则显著抑制油菜种子的发芽,且感染时间越早其抑制效果越强,连续感染HYS菌株对油菜种子发芽和芽苗生长的抑制作用更强,且这种抑制作用主要在发芽的头1~3 d发挥作用。将HYS菌液离心过滤除菌,用水倍比稀释LB和上清液后培养油菜种子,发现上清液经100和1 000倍稀释后促进油菜种子的发芽。上述结果表明假单胞菌HYS菌株在油菜种子发芽和早期生长过程中不适宜用其进行生物防治,但适当稀释HYS上清液可促进油菜种子发芽和生长。     

节杆菌(Arthrobacter sp.)CN2对对硝基苯酚的趋化性研究

利用已获取的对硝基苯酚降解菌CN2,以对硝基苯酚为底物,通过游动平板趋化性、土壤趋化性实验以及毛细管趋化性实验对该菌株的趋化特性进行了研究,同时通过模拟土壤原位修复探究了菌株在实际应用中的效果。高效液相色谱检测结果表明,72 h内菌株CN2对对硝基苯酚的降解率大于99%。CN2在平板趋化性与土壤趋化性实验中均表现出对对硝基苯酚的趋化性特征,毛细管趋化性实验中,当对硝基苯酚浓度在一定范围内(5~800 mg·L~(-1))时,菌株的趋化性与对硝基苯酚浓度呈正相关,当其浓度高于800mg·L~(-1)时,菌株的趋化性逐渐受到抑制。模拟土壤原位修复实验的结果表明,菌株CN2在未灭菌土壤中的对硝基苯酚降解速率高于灭菌后土壤中的降解速率,在14 d内其降解率可达95%。研究表明,该菌株对环境具有良好的适应性,其对污染环境修复具有应用价值与潜力。     

节杆菌AD26的分离鉴定及其与假单胞菌ADP对阿特拉津的联合降解

用富集培养法,从农药厂的工业废水中分离到高效降解除草剂阿特拉津的AD26菌株,通过16S rRNA基因序列分析,该菌株被鉴定为节杆菌(A rthrobacter sp.).降解基因的PCR分析表明,AD26含有阿特拉津降解基因trzN和atzBC,它能以阿特拉津为唯一氮源、蔗糖或柠檬酸钠为碳源生长,将阿特拉津降解成氰尿酸,降解速度快但降解不完全.假单胞菌(Pseudomonas sp.)ADP是Waekea实验室分离的阿特拉津降解菌株,含有阿特拉津降解基因atzABCDEF,能以阿特拉津为唯一氮源、柠檬酸钠为碳源(不能以蔗糖为碳源)生长.将阿特拉津降解成NH3,和CO2,降解完全但降解速度慢.在阿特拉津浓度为200 mg·L-1的无机盐培养基中进行的AD26和ADP混合培养表明,它们对阿特拉津的降解发生了互补和增强作用,两个菌株能在以阿特拉津为唯一氮源、蔗糖为碳源的培养基中生长,而且生长和降解速率都好于单个菌株,培养72 h后阿特拉津去除率达到99.9%,其中76.7%的阿特拉津被降解成NH3和CO2.这表明由节杆菌AD26和假单胞菌ADP组成的混合菌株在阿特拉津废水处理和污染土壤的生物修复中有很好的应用潜力.     

节杆菌与施氏假单胞菌对甲基对硫磷的共降解研究

为实现对有机磷农药甲基对硫磷的彻底降解,研究利用有机磷农药降解菌施氏假单胞菌YC-YH1与对硝基苯酚降解菌CN2对甲基对硫磷进行共降解试验,同时克隆了参与降解过程的相关基因,并对2株菌株在对甲基对硫磷污染土壤的原位修复中的效果进行研究。结果表明,与YC-YH1单独降解相比,YC-YH1和CN2共降解在处理前32 h无较大差异;但之后,甲基对硫磷和对硝基苯酚的降解速度明显加快,处理48 h后甲基对硫磷即被完全降解,比单独用YC-H1降解时提前了16 h,处理64 h时对硝基苯酚就被完全降解。而土壤修复的研究结果表明,菌株YC-YH1与CN2能够高效降解甲基对硫磷,72 h对土壤中100 mg/kg甲基对硫磷的降解率接近100%,尤以未灭菌土壤中降解效果更好。     

大庆油田低渗透油藏假单胞菌的筛选及性能评价1）

从来自大庆油田低渗透油藏采出液中筛选出1株以原油为唯一碳源的细菌菌株,命名为QSJU002。QSJU002菌株的生理生化特征和16S rDNA分子生物学鉴定等结果表明,菌株QSJU002与Pseudomonas aeruginosa strain JBP－16亲缘关系最近,属于假单胞菌属。 QSJU002菌株液体培养基石油的降解试验、排油圈试验、产酸试验、乳化性能试验和矿化度耐受性试验结果表明,QSJU002菌株具有降解原油、产表面活性剂、产酸、乳化原油和耐盐等采油性能。