海萝(Gloiopeltis furcata)藻体保存和容器内的培养方法

为探索海萝(Gloiopeltis furcata)藻体的陆地工厂化养殖,分三部分实验进行研究:(1)不同长度(0.5、1、1.5 cm)和断开部位(从基部断开、从顶部断开和从藻体分叉处断开)的海萝藻体培养;(2)不同培养密度(0.5、1、2、4 g/L)和培养容器(方形水槽、圆柱形透明塑料薄膜容器和亚克力筒);(3)不同风干方式(自然风干、培养箱风干和空调加风扇吹干)和保存温度(4、–18℃)对保存后藻体存活率的影响。结果显示,不同断开部位对相同长度的藻体生长影响不显著(P0.05);较小藻体(0.5 cm)的生长速率显著低于其他各组(1.0、1.5 cm)(P0.05);方形水槽中海萝藻体的生长速率显著低于亚克力筒和塑料薄膜装置中(P0.05);随着培养密度的增加,海萝的日特定生长率呈显著的下降趋势(P0.05);以空调加风扇方式进行风干的藻体成活率最高(P0.05),在?18℃保存6个月,其成活率为93.8%;在4℃下保存1个月,各组藻体的成活率都为0。较好的条件组合为:进行陆地工厂化养殖的海萝规格应大于0.5 cm,合适的培养密度范围为0.5?1 g/L;成本低且高效的塑料薄膜装置是海萝藻体培养的适宜容器;采用保存海萝藻体于?18℃的方法可使海萝陆地工厂化养殖或相关研究不受制于海萝生长季节,可按需要进行。     

营养盐对海萝生长和藻体生化成分的影响

研究了不同营养盐添加量对海萝( Gloiopeltis furcata) 盘状体萌发、生长、成活以及藻体生长和生化成分的影响。海萝盘状体和海萝藻体分别培养于添加不同质量浓度的营养盐[ 硝酸钠( NaNO3) 0 mgL-1 、10 mgL-1、40 mgL-1、80 mgL-1、10 mgL-1、40 mgL-1、80 mgL-1和相对应磷酸氢二钾( K2HPO4 ) 0 mgL-1、0 mgL-1、0 mgL-1、0 mgL-1、1 mgL-1、4 mgL-1 、8 mgL-1 ] 的天然海水中。结果表明, 添加营养盐的各组盘状体萌发出直立体的百分率和成活率没有比空白对照组的高; 添加营养盐的各组藻体质量与空白对照组没有显著性差异, 但添加NaNO3 质量浓度为40 ～80 mgL-1组的叶绿素a 和藻红蛋白含量则明显高于空白对照组( P0. 05) 。研究结果显示, 海萝盘状体阶段可不添加营养盐进行培养; 藻体阶段可添加NaNO310～40 mgL-1和K2HPO44 mgL-1进行培养。     

多肋藻雌配子体种质保存和扩培的温光条件研究

跟踪观察了温度和光照强度双因子对多肋藻雌配子体生长的影响,旨在探明其适宜的种质保存与扩增培养的温光条件.试验设置3个温度,分别为10、15和20℃,每个温度下设5个光照强度,分别为10、20、40、60和80μmol/(m2·s),实验进行了4个月.结果表明,配子体在10℃,光强≤10μmol/(m2·s)时适宜种质保...     

青霉素应用于三种海洋微藻保存培养的研究

本文采用青霉素处理三种常用海洋微藻，研究不同青霉素浓度对处理藻类的培养与保存的影响。结果得出：在第5d内2000IU／L以上浓度对三角褐指藻的生长有明显抑制，第10d以后各组生长率趋于一致；在100～1000IU／L范围内，添加青霉素有利于异胶藻的培养和保存，在青霉素浓度为500～1000IU／L时效果较好，培养至第4d的方差分析表明其对异胶藻培养有显著性差异；与对照组相比，浓度在250～1500IU／L范围内，青霉素对巴夫藻的生长有一定抑制作用，但其第4d的方差分析表明无显著性差异。     

萱藻丝状体的种质保存技术

采用液体保存法和胶囊化低温保存法对萱藻丝状体进行保存,探讨了液体培养法中温度、光照强度以及胶囊化低温保存法中胶球含水量对萱藻丝状体种质保存的影响。结果显示:(1)在液体保存法中,温度对萱藻丝状体的保存影响较小,当光强为5.4μmol/(m2·s)时,6~18℃均可实现萱藻丝状体的长期保存;(2)光照强度对萱藻丝状体的液体保存影响显著,16.2μmol/(m2·s)及以上的光强不利于种质的保存,5.4μmol/(m2·s)对萱藻丝状体的液体保存最有利;(3)在6~18℃,5.4μmol/(m2·s)条件下保存萱藻丝状体60 d后,萱藻丝状体细胞状态良好且存活率仍在97%以上;(4)胶球含水量过高或过低均会降低萱藻丝状体胶囊化低温保存后的存活率,15%是萱藻丝状体胶球的最适含水量,在该条件下,萱藻丝状体保存1个月后的存活率仍在50%以上。研究证明,在适宜条件下,液体保存法和胶囊化低温保存法均可实现萱藻丝状体的种质保存。     

穗花狐尾藻(Myriophyllum spicatum L.)饲喂对刺参(Apostichopus japonicus)幼参生长、体成分及消化酶的影响

为了探究穗花狐尾藻(Myriophyllum spicatum L.)替代鼠尾藻(Sargassum thunbergii)饲喂刺参(Apostichopus japonicus)幼参的效果,探讨了穗花狐尾藻添加量依次为0(对照)、15%(A1)、30%(A2)、45%(A3)和60%(A4)的5种饲料对刺参幼参[(1.66±0.61) g]生长、体成分和消化酶活性的影响。结果显示,A4组刺参的增重率(GR)显著高于其他4个组(P<0.05),刺参成活率最高,达到了97.78%;A4组刺参的粗蛋白含量最高(50.92%),显著高于A0、A1和A2组(P<0.05);A3组刺参的淀粉酶活力最高(0.83 U/g prot),显著高于A0、A1与A2组(P<0.05);A4组刺参的蛋白酶活力最高(1.62 U/g prot),显著高于其他4个组(P<0.05)。结果显示,穗花狐尾藻能够促进刺参生长。因此在刺参饲料中添加穗花狐尾藻,以替代资源日益匮乏的鼠尾藻是经济可行的。     

抗生素对共培养的萱藻丝状体和膨胀色球藻生长的影响

为抑制萱藻丝状体扩增过程中出现的膨胀色球藻的生长,采用实验生态学方法,研究了链霉素、氨苄青霉素、卡那霉素、庆大霉素和氯霉素等5种常用抗生素对共培养条件下的萱藻丝状体和膨胀色球藻生长的影响。结果显示,(1)链霉素浓度为100μg/mL时可以显著抑制膨胀色球藻生长,而不影响萱藻丝状体的生长;(2)氨苄青霉素和庆大霉素对膨胀色球藻产生明显抑制作用的浓度均为100μg/mL,对萱藻丝状体产生抑制作用的浓度分别为100和500μg/mL;(3)10μg/mL卡那霉素可强烈抑制膨胀色球藻生长,而萱藻丝状体没有出现被抑制的现象;(4)氯霉素对膨胀色球藻和萱藻丝状体均有较强的抑制作用,10μg/mL可以对膨胀色球藻的生长产生显著抑制,浓度达到50μg/mL后,萱藻丝状体生长受到抑制。研究表明,链霉素(100μg/mL)、卡那霉素(100μg/mL)和氯霉素(10μg/mL)可以用于降低萱藻种质保存和扩增过程中萱藻丝状体被膨胀色球藻污染的风险。     

四种抗生素对共培养的萱藻丝状体和膨胀色球藻的影响

为抑制或消除萱藻丝状体扩增阶段出现的膨胀色球藻,本研究探讨了头孢噻肟钠、阿莫西林、四环素和红霉素4种抗生素对共培养的萱藻丝状体和膨胀色球藻产生的影响。结果显示,浓度为50和100 mg/L的头孢噻肟钠均显著抑制膨胀色球藻的生长,进而保证萱藻丝状体正常生长与发育;浓度为50~1 000 mg/L的阿莫西林对膨胀色球藻和萱藻丝状体均无抑制作用,阿莫西林不适于去除共培养体系中的膨胀色球藻;浓度为100和200 mg/L的四环素对膨胀色球藻有显著的抑制作用,但此浓度下萱藻丝状体细胞质萎缩,生长状况较差;浓度为0.10~1.00 mg/L的红霉素对膨胀色球藻的生长均有显著的抑制作用,但当其浓度超过0.50 mg/L时,萱藻丝状体的生长亦受到抑制,甚至死亡。     

大叶藻生殖枝的室内离体培养及种子早期发育研究

对大叶藻不同生长状态的生殖枝进行离体培养,探究室内暂养大叶藻离体生殖枝获取成熟种子的可行性,观察并描述了大叶藻离体生殖枝的开花、传粉、种子成熟、种子萌发、幼苗发育的动态过程以及大叶藻生殖枝、成熟种子、胚的解剖结构。实验结果表明,大叶藻生殖枝的结构对海水环境是高度适应的;花柱的形态变化是大叶藻开花过程的显著特点;大叶藻种子胚的结构较特殊,“U”型子叶包裹胚根、胚芽、胚轴,这导致了其特有的萌发过程;为了不错失种子收集良机,在不了解某地区大叶藻物候特性时,提前采收生殖枝并进行室内培养,是一种获取大叶藻种子的有效方法。     

中肋骨条藻的培养和应用

本文介绍了中肋骨条藻藻种的分离和保种方法,室外大规模生产性培养方法,藻的营养价值及在对虾育苗中的应用。     

环境因子对海萝藻体生长及成活的影响

研究了温度、光照强度、盐度和营养盐对海萝（Gloiopeltis furcata）藻体生长的影响以及 pH、干露、淡水浸泡对藻体成活的影响。海萝藻体分别培养在不同温度（10℃、14℃、18℃、22℃和26℃）、不同光照强度（2500 lx、4500 lx、6500 lx、8500 lx 和10500 lx）、不同盐度（15.5、18.0、20.5、23.0、25.5、28.0、30.5、33.0、35.5和38.0）和添加不同质量浓度的营养盐[硝酸钠（NaNO3）10 mg·L -1、20 mg·L -1、40 mg·L -1、80 mg· L -1和相对应的磷酸氢二钾（K2 HPO4）1 mg·L -1、2 mg·L -1、4 mg·L -1、8 mg·L -1]21 d。结果表明,海萝藻体生长的最合适温度为10～14℃,光照强度为6500～10500 lx,盐度为18～38;不同营养盐质量浓度对藻体生长的影响不明显。海萝藻体在不同 pH（5.5～10.0）条件下培养10 d,结果显示藻体正常成活的 pH 范围为6.5～9.0。海萝藻体分别经不同时间的阴干、泡淡水、晒干,结果显示阴干24～48 h 或泡淡水24～48 h 以下藻体仍然能够正常成活;阴干3 h 后泡淡水3 h,藻体也能正常成活;在阳光下晒干超过2 h,藻体不能正常成活。     

海萝凝集素的分离纯化及性质

海萝(Gloiopeltis furcata)经PBS缓冲液抽提、硫酸铵分级、DEAE-52纤维素离子交换层析和SephadexG-200分子筛层析，从中纯化出海萝凝集素(GFL)，在PAGE和等电聚焦电泳上各显示单一蛋白染色带，其等电点为9．0。用SephadexG-200分子筛层析测得其相对分子质量为8318。海萝凝集素除对人血型红细胞无凝集活性外，对单胞藻及兔、鲤、鲫的红细胞均表现出一定程度的凝集活性，对兔红细胞的凝集活性最强，且不被已测试的D-果糖、D-半乳糖、葡萄糖、蔗糖、乳糖所抑制，而被D-甘露糖、牛甲状腺球蛋白、鸡卵白蛋白、γ-球蛋抑制。该凝集素在pH4．0～10．2均有活性，而在pH6．5～9．1时活性较高。该凝集素在90℃加热1h，活力并未减弱，说明这种凝集素具有很强的耐热性。     

海萝中抗紫外辐射物质的提取工艺优化研究

类菌胞素氨基酸( MAAs) 是具有抗紫外辐射功能的小分子水溶性活性化合物。为了最大程度提取海萝 ( Gloiopeltis furcata) 中MAAs 成分, 采用甲醇溶剂超声提取法, 通过单因素实验确定超声温度、超声时间、液料比、甲醇体积分数、提取次数的最佳范围, 并用响应面法进一步优化提取海萝中MAAs 的工艺参数。经Box-Behnken 实验设计优化出最佳提取工艺条件为超声温度为41 ℃, 超声时间为81 min, 液料比为67 mLg-1 , 甲醇体积分数为12% 。在此条件下预测MAAs 的提取率为1.311 5 mgg-1 , 实际提取率为1.306 4 mgg-1。     

盐度对海萝孢子附着、萌发和成活的影响

通过4个试验研究了盐度对海萝（Gloiopeltisfurcata）孢子附着、萌发及成活的影响。1）不同盐度（16．0—38．5）对海萝种藻所释放孢子的影响。2）不同盐度（13．5～41．0）对海萝孢子附着、萌发和成活的影响。3）不同盐度（6．0—66．0）对已附着24h、48h孢子发生体成活的影响。4）淡水浸泡不同时间（2h、4h、6h和8h）对已附着24h、48h孢子发生体成活的影响。结果表明,盐度为23．5～36．0时海萝种藻释放的孢子能正常附着和萌发;海萝孢子附着、萌发及成活的合适盐度为31．0～36．0;盐度为31．0～56．0时对已附着24h海萝孢子发生体的成活没有影响,不同时间的淡水浸泡则对其成活有影响;盐度为16．0～61．0或者2h的淡水浸泡对已附着48h孢子发生体的成活没有影响。     

基于AFLP的海萝野生群体遗传多样性分析

应用AFLP分子标记技术对广东深圳、汕头和山东长岛的海萝(Gloiopeltis furcata)群体进行遗传多样性分析。应用筛选出的10对多态性丰富的AFLP引物,对这3个地理群体的90个个体进行扩增,共得到427个位点,多态性位点数为392(91.75%),各引物扩增位点数为30~59。长岛群体扩增位点最多,多态性也最高。群体内的等位基因数(Na)、有效等位基因数(Ne)、遗传多样性指数(H)和Shannon信息指数(I)变化趋势一致,均由高到低依次为长岛群体、汕头群体、深圳群体,表明长岛群体遗传多样性最高。3个海萝群体遗传变异主要来自群体间。群体间的基因流为0.368 9,群体分化系数(Gst)为0.575 4,表明群体间有高度分化。深圳群体和汕头群体的遗传距离最小(0.110 2),与长岛群体的遗传距离最大(0.357 7)。UPGMA聚类分析显示广东深圳和汕头群体聚为一支,山东长岛群体为另一支,表明群体间的遗传差异与地理距离有关。本研究结果为海萝资源的保护与利用提供了基础数据。     

广东沿海海萝属藻类生态与分布调查

调查研究了广东沿海海萝属藻类的种类、分布、生长与繁殖特征。广东沿海以海萝、鹿角海萝为主,扁平海萝仅为局部分布,其中海萝的最高生物量可达2801.1g.m-2。粤西海域资源量小于粤东海域,大亚湾为全省该资源最丰富的海域。海萝属藻类分布于月平均表层盐度不低于20的高盐、高透明度海域,在水平分布上鹿角海萝的外海性特征更明显。海萝主要分布于中潮区,鹿角海萝的垂直分布略低于海萝,海萝属藻体能忍耐退潮干露6～8h的能力。调查表明,海萝属藻类生长季节的表层水温一般为23℃以下,生长中期水温低于18℃时生长快,藻体消长存在明显季节变化。广东沿岸海萝生殖器官形成于12月至翌年4月,鹿角海萝生殖器官形成于1～4月。     

2种海萝室内培养成熟及孢子放散、附着的初步研究

在实验室条件下研究了水温、光照、营养液对培养海萝(Gloiopeltis furcata)和鹿角海萝(G.tnax)成熟放散孢子的影响.结果表明,在水温10-20℃培养条件下,海萝能成熟放散孢子;在水温12～24℃时,鹿角海萝能成熟放散孢子;在光照2 500～8 500 lx的范围内,2种海萝均能成熟放散孢子;培养海水中不添加营养盐对2种海萝的成熟没有影响,培养液的浓度高达硝酸钠80 mg·L-1、磷酸二氢钾8 mg·L-1时反而不利于藻体的成熟及孢子放散附着.     

Preliminary Studies on Cryopreservation of Vegetative Thalli of Some Economically Important Seaweeds of India

The effects of cryoprotectants and their concentrations, prefreezing temperature, equilibration time, thawing temperature, and the regenerative efficacy of cryopreserved vegetative thalli (apical tips) of Gracilaria corticata J. Agardh., Ulva lobata Duetzing, and Hypnea musiformis (Wulfar) Lamouroux were evaluated. The apical tips were suspended in various cryoprotective solutions and slowly cooled to ?40?C over a period of 4 h. After the slow cooling step, the suspensions were immediately immersed in liquid nitrogen (LN), which were thawed after 2 days. Both U. lobata and H. musiformis survived maximally in 10% DMSO, whereas 10% glycerol was found most suitable for G. corticata. A slow cooling temperature of ?40?C and thawing temperature of 40?C were found most suitable irrespective of the species. The equilibration time of 60 min was found most suitable for G. corticata, while 45 min was sufficient for both H. musiformi and U. lobata. Cryopreserved vegetative thalli were then successfully regenerated, though the survival was considerably reduced up to a period of 28 days after which it was stabilized.     

天荒坪抽水蓄能电站水位变化对水体营养状态的影响

为了探究抽水蓄能电站水位波动、营养物质时空分布以及浮游植物分布特性,分析水体营养状态及其成因,为后期控制水体富营养化提供指导。2014-2015年在浙江天荒坪抽水蓄能电站的上水库(S1)和下水库(S3-S4)设置4个采样点,获取相关的监测点数据,分析了水库水位、水体稳定性、营养盐以及叶绿素a的分布规律,讨论了水库水位剧烈波动对水体稳定、营养盐以及叶绿素a浓度的影响。结果表明:(1)天荒坪抽水蓄能电站水库水体稳定性较小,各监测点浮点频率均在0.2×10~(-4)s~(-2)以下。总氮、溶解性硅酸盐浓度较高,总氮范围在1.8~2.8 mg/L,已达到Ⅴ类水标准;硅酸盐浓度为3.30~8.00 mg/L;叶绿素a浓度较低,为1.60~6.24μg/L;(2)抽水蓄能电站水库水位频繁波动致使水体垂向掺混加强,混合层增大,水体在上、下库内滞留时间减短,致使游植物生长受到抑制,水体中叶绿素a浓度降低。大幅度水体交换、冲洗造成营养物质在一定程度上被稀释;(3)天荒坪抽水蓄能电站水库处于中营养状态,各监测点富营养化指数在30~40。总氮对水体富营养化贡献最大,基准指标叶绿素a贡献反而较小。抽水蓄能电站频繁水位波动稀释了水体中的营养物质,并限制了浮游植物的生长,减轻了水库的富营养化程度。