一种从马鹿粪便中提取DNA的改进方法(英文)

[目的]介绍一个从马鹿粪便中提取DNA的改进方法。[方法]本实验采用的是,在传统的CTAB裂解法的基础下,根据马鹿粪便的特征摸索出来的改进方法。[结果]采用该方法从天山马鹿粪便中提取了高质量的粪便DNA并扩增了天山马鹿线粒体细胞色素b基因片段,通过测序检测,同时提取马鹿肌肉和皮毛样品的DNA作为对照,进一步证实了提取的可靠性。[结论]该方法提取过程中不需要用蛋白酶K;所提取的DNA不需要用DNA纯化试剂盒纯化,可直接用PCR扩增,因此,费用量很低。     

马鹿粪便样品保存方法对DNA提取质量的影响

采用冷冻法采集、保存马鹿粪便DNA样品,并将冷冻保存、乙醇浸泡保存和干燥后保存的样品进行DNA提取测试、比较分析。结果表明,采用冷冻保存法保存的马鹿粪便样品DNA提取的质量明显优于酒精浸泡和干燥保存方法,此方法采集和保存简单,试验省时、经济,可应用于寒冷地区冬季各种动物的粪便取样。     

两种方法从林麝粪便提取DNA效率及分析

采集林麝DNA样本获得快捷、有效的DNA提取方法是其分子标记,良种遗传选育的分子基础。以林麝粪便为研究对象,用常规和改良的方法比较提取林麝粪便DNA的效率,两种方法分别设为对照组和试验组。采集林麝粪便后分别在空气暴露0、2、4、6d。用对照组和试验组两种方法提取粪便DNA,以林麝GAPDH为目的基因,用PCR方法扩增样本。琼脂糖凝胶电泳分离DNA目的条带,以空气暴露0d的粪便DNA条带光密度值为参考,2、4、6d粪便DNA条带光密度值与0d进行比较获得相对光密度值。结果发现,随着时间延长,林麝粪便逐渐失去光泽,表面粗糙;对照组和试验组两种方法均能有效提取林麝DNA。试验组2d和4d与0d相比较DNA水平显著上升,6d与0d没有显著差异;对照组仅在2d提取的DNA水平上升,而4d和6d显著下降到0d的水平。以对照组为参照,两组各时间点相比,试验组获得的DNA水平显著高于对照组。研究结果表明,试验组提取DNA的方法可显著提高林麝粪便DNA的获得率。     

三种试剂盒提取粪便隐孢子虫微量DNA的效果比较

[目的]筛选一种高效、简单、快速、价格合理的粪便微量DNA提取试剂盒。[方法]用3种不同的试剂盒提取粪便DNA,通过比较所提取DNA的浓度、纯度、提取率及巢式PCR产物等评价提取效果。[结果]Genmed试剂盒提取的DNA浓度最高、PCR产物条带最亮,但提取时间相对较长,成本相对较高。天根试剂盒提取的DNA纯度最高,DNA浓度适中,成本适中,提取时间最短。碧云天试剂盒提取的DNA纯度、浓度均不高且提取时间最长,但成本最低。[结论]Genmed试剂盒提取粪便微量DNA最灵敏。天根试剂盒提取DNA适于DNA纯度要求较高的分子生物学研究。     

一种提取核桃基因组DNA的改进方法

以核桃幼嫩叶片为材料,针对核桃体内富含酚类、多糖等次生物质,采用改良的CTAB法,提取其基因组DNA,经0.8%琼脂糖凝胶电泳检测,蛋白、多糖、RNA等去除较干净,适用于分子标记及其分子生物学的研究。     

珍稀濒危鸡种不同取样方法DNA提取的研究

为了克服珍稀濒危鸡种在分子生物学研究中存在的取样局限性,拓宽取样范围,对鸡的血液、精液、羽毛和死胎蛋的DNA提取进行了研究。结果表明不同取样部位所提DNA浓度均适合于生物学实验要求。该研究中有关方法的应用将为珍稀濒危鸡种的分子生物学研究提供更广阔的DNA来源。     

一种从松针中快速提取DNA的方法

探索了从松针中快速微量提取ＤＮＡ的方法，结果表明，该法用材量少，步骤简单，所提ＤＮＡ质量高，ＰＣＲ效果好，适于ＲＡＰＤ分析。     

三种玉米DNA提取方法探究

采用改良CTAB法、改良SDS法、快速提取法分别以玉米种子、黄化苗叶片、正常生长期绿色叶片为材料提取细胞总DNA。结果表明用3种不同方法提取的DNA纯度符合分子生物学实验要求。不同部位的材料、不同的提取方法，DNA得率不同。玉米干种子优适用于在快速提取法中提取DNA；改良CTAB法、SDS法宜从玉米黄化苗叶片和正常绿色叶片中提取DNA。     

马鹿粪便样品微卫星基因型的可靠性评价

[目的]评价马鹿粪便DNA的微卫星基因型可靠性,为后续保护遗传学方面的研究提供参考。[方法]选择7个多态性较高的微卫星位点,扩增167份马鹿粪便DNA,通过3～4次的重复扩增统计等位基因丢失率和假等位基因出现率。[结果]7个位点的等位基因丢失率平均为0.034,假等位基因出现率平均为0.023。[结论]对于杂合体,3～4次的重复扩增可以满足基因型后续分析要求,而纯合体需要7次以上的重复扩增。     

一种少量提取植物组织DNA的快速方法

为了从植物组织中快速提取核酸,从多种DNA提取方法中遴选出2种基本方法。通过优化基本方法的操作步骤、试剂用量与作用时间,建立了一种改良的DNA快速提取方法。在此方法中,用氯仿代替液氮或提取液进行植物组织研磨,之后加入提取液抽提DNA,并用氯仿-异戊醇反复抽提,可显著降低蛋白质含量;通过应用RNA酶可获得纯度较高的DNA。该方法的特点是在室温下即可进行简便操作,快速(提取核酸的过程仅需30min),污染器皿少,实用性强,提取物产量高,纯度好。     

改良CTAB法提取益智基因组DNA

益智叶片中多酚和多糖等杂质的含量较高,为获得高质量的益智基因组DNA,试验在传统CTAB法的基础上加以改良,提取益智基因组DNA,并对所得DNA的质量和浓度进行了检测。结果表明,改良后的方法较之传统方法简单高效,所获得的基因组DNA质量较好,OD260/OD280在1.7~2.0之间,RNA消化彻底,DNA无明显降解,进行ISSR分析条带清晰,多态性好。适合于进行以PCR为基础的DNA多态性的研究。     

改进的CTAB法提取黄瓜DNA

DNA抽提是对生物体进行基因操作的基础性工作.经多次实验,我们对CTAB法提取黄瓜DNA进行了改进,并对所得DNA的质量和浓度进行了检测.结果表明,这是一种提取植物DNA的省时简单而高效的方法.通过很少量的样品即可以提到DNA.     

兴安落叶松DNA提取-试剂盒改良法

[目的]寻找一种快速简便的兴安落叶松基因组DNA的提取方法。[方法]对DNA提取试剂盒进行改良,与原试剂盒法(离心柱)进行比较,并用琼脂糖凝胶电泳、蛋白核酸测定和ISSR-PCR对所提取的总DNA进行检测。[结果]试剂盒改良法提取的总DNA纯度和浓度较高,电泳显示其主条带较清晰,无降解现象,A260/A280值为1.75～1.84。[结论]改良后的DNA提取方法更适合兴安落叶松基因组DNA的提取。     

甘薯薯块DNA提取方法研究

甘薯薯块富含淀粉、酚类等物质,不利于DNA提取。为了研究甘薯薯块DNA提取的最佳方法,采用经典CTAB法、改良CTAB法一、改良CTAB法二和SDS提取法,对甘薯薯块总DNA提取效果进行比较,以试剂盒法提取结果作对照。结果表明:采用经典CTAB提取法和SDS提取法获得的薯块DNA含有较多杂质,且降解严重,样品质量低;CTAB改良法一能降低DNA样品中多糖等物质的含量,但DNA存在一定程度降解,且耗时较长;CTAB改良法二提取效果最佳,杂质含量低且DNA降解少,与试剂盒提取效果最接近,是一种较为理想的甘薯薯块DNA提取方法。     

改良CTAB法提取核桃总RNA试验

从植物组织中提取高质量的RNA是进行基因克隆和基因表达分析的基础。不同植物的组织由于组成成分的差别,其RNA的提取有不同的难点。本试验针对核桃嫩叶内含物复杂的典型特点,在对比各种提取方法的特点及总结他人研究的基础上改良了CTAB法。此方法提取的核桃嫩叶总RNA的电泳结果可见清晰完整的条带,表明改良CTAB法能有效去除多糖和多酚以及色素等次生代谢物的污染,提取RNA纯度较高、完整性好,易于进行RT-PCR和cDNA文库的构建。此方法简单易行而且所用试剂成本较低。     

An Improved Method of Extracting Artemisia abrotanum Genomic DNA

[Objective] The objective of this study is to explore a rapid and efficient method of extracting genomic DNA from Artemisia abrotanum. [Method] Three methods of Cutting [Method],Liquid Nitrogen [Method] and Quartz Sand [Method] based on SDS method were employed to extract Artemisia abrotanum genomic DNA from tender leaf at seedling stage,tender spike and old leaf at heading stage. The obtained DNAs were detected by absorbance detection,agarose gel and PCR amplification. [Result] Cutting [Method] performed better than the other two methods compared in purity,extracting cycle and cost,accordingly more suitable for PCR amplification. The results also show that young spike is the best material for extracting genomic DNA from Artemisia Annua.     

青蒿组织中快速有效DNA提取方法的研究

传统的CTAB法成本高、毒性较大且操作繁琐,往往仅在需DNA量较大的RFLP等分析中采用。SDS提取的DNA产率接近CTAB产率的2倍,但纯度、完整性不如后者。常用的植物DNA简易提取方法有碱处理法及高温水煮法等。这些简易提取方法大都速度快、成本低,但提取DNA质量差、保存时间短、不适于PCR扩增。该文以SDS法为依据,在此基础上比较了3种方法的提取效果,从而摸索出一种快速有效的提取青蒿DNA的方法（以下简称“剪碎法”）。     

An Improved Method of Extracting Artemisia abrotanum Genomic DNA

[Objective] The objective of this study is to explore a rapid and efficient method of extracting gonomic DNA from Artemisia abrotanum. [Method] Three methods of Cutting Method, Liquid Nitrogen Method and Quartz Sand Method based on SDS method were employed to extract Artemisia abrotanum genomic DNA from tender leaf at seedling stage, tender spike and old leaf at heading stage. The obtained DNAs were detected by ahsorbance de-tection, agarose gel and PCR amplification. [Result] Cutting Method performed better than the other two methods compared in purity, extracting cycle and cost, accordingly more suitable for PCR amplification. The results also show that young spike is the best material for extracting genomic DNA flora Artemis-ia Annua.