膜超滤分离美洲大蠊抗肿瘤活性部位小分子肽的研究

[目的]建立美洲大蠊抗肿瘤活性部位小分子肽的超滤膜分离工艺。[方法]采用中空纤维超滤膜(3 kDa)对美洲大蠊抗肿瘤活性部位小分子肽进行分离,通过单因素试验考察了转速、浓缩比、pH及操作时间对分离效果的影响,并在单因素试验的基础上通过正交试验优化了分离工艺条件。[结果]超滤膜分离美洲大蠊抗肿瘤活性部位小分子肽的最佳工艺条件为转速4 500 r/min、浓缩比30%以及pH 11,其中转速是最主要的影响因素。[结论]为膜超滤分离美洲大蠊抗肿瘤活性部位小分子肽的工业化奠定了基础。     

美洲大蠊蛋白质的提取工艺优化及其对伤口愈合的影响

[目的]优化美洲大蠊蛋白质的提取方法,并研究美洲大蠊蛋白质对小鼠伤口愈合的影响。[方法]采用碱提法、盐提法和酶提法对美洲大蠊蛋白质进行分离和提取,测定不同方法提取美洲大蠊蛋白质的含量,优化美洲大蠊蛋白质的提取工艺;并用提取的美洲大蠊蛋白质进行小鼠伤口愈合试验,研究美洲大蠊蛋白质对小鼠伤口愈合的影响。[结果]在碱浓度为1.5%、提取温度为80℃、提取时间为1.0 h时,美洲大蠊蛋白质提取率最高;在盐浓度为1.0%、提取温度为40℃、提取时间为2.0 h时,美洲大蠊蛋白质提取率最高;在酶占样本比为0.6%、酶解温度为45℃、酶解时间为2.0 h时,美洲大蠊蛋白质提取率最高。小鼠伤口愈合试验表明,美洲大蠊提取的蛋白质可以促进伤口愈合,且愈合时间比正常情况下缩短近一半。[结论]碱液浓度、盐浓度和酶浓度对美洲大蠊蛋白质提取的影响最大。3种方法提取美洲大蠊蛋白质的效果从大到小依次为酶提法、碱提法、盐提法,即美洲大蠊蛋白质提取的最优方法为胰蛋白酶提取法。美洲大蠊蛋白质对小鼠伤口愈合有促进作用。     

美洲大蠊黄酮提取工艺条件研究

[目的]研究美洲大蠊黄酮类化合物的提取方法,确定美洲大蠊黄酮的最佳提取条件。[方法]采用单因素试验确定黄酮提取条件,通过分析不同提取温度、提取时间和料液比等条件对美洲大蠊黄酮提取率的影响,确定最佳的提取条件与方法。[结果]通过试验分析得出美洲大蠊黄酮的最佳提取条件:提取温度25℃,提取时间12 h,料液比为1∶8(g/m L)。美洲大蠊黄酮含量与提取温度、提取时间、料液比呈相关性。[结论]该研究对美洲大蠊黄酮类化合物的开发与利用具有较高的科学意义。     

美洲大蠊对免疫性肝纤维化大鼠肝功能的影响

[目的]探讨美洲大蠊对免疫性肝纤维化大鼠肝功能的影响。[方法]采用腹腔注射猪血清法诱导大鼠免疫性肝纤维化模型,在造模的同时分别用不同剂量的受试药物(美洲大蠊总提取物和美蠊氨)干预,以秋水仙碱为阳性对照药,分别于试验第4周和第12周结束时取血检测血清中ALT(谷丙转氨酶)、AST(谷草转氨酶)和TBIL(总胆红素)的含量,并在第12周结束时处死大鼠,取肝脏称重并计算肝脏指数。[结果]试验4周后,美洲大蠊总提取物能明显降低大鼠血清中ALT、AST、TBIL的含量。试验12周后,美蠊氨能明显降低大鼠血清中ALT、AST、TBIL的含量,但此时美洲大蠊总提取物对3个指标的影响不大。[结论]美洲大蠊对免疫性肝纤维化具有一定的防治作用,能明显改善肝功能。     

稀碱法提取美洲大蠊多糖工艺条件的研究

[目的]确定美洲大蠊多糖提取的稀碱液浓度、提取时间及提取温度等参数。[方法]采用梯度浓度稀碱液及不同条件进行美洲大蠊多糖的提取试验,以稀碱液浓度、提取温度及提取时间作为单因素因子,并进行了正交试验;采用苯酚-硫酸分光法测定试验样品中的多糖含量,将葡萄糖作为标准品进行对照,比较不同提取条件所得到多糖的含量。[结果]各因素对美洲大蠊多糖提取含量的影响主次顺序为稀碱液浓度、提取时间、提取温度,美洲大蠊多糖的最优提取条件为稀碱液浓度0.02 mol/L、提取温度70℃、提取时间1.5 h。[结论]该研究为进一步开发具有功能活性昆虫食品及药物奠定了理论和试验基础。     

3种昆虫黄酮提取物的大肠杆菌抑菌活性研究

[目的]测定美洲大蠊、中华稻蝗、芫菁3种昆虫体内黄酮提取物的抑菌作用效果。[方法]采用溶剂萃取法(SFE)提取3种昆虫总黄酮,根据公式计算不同浓度的黄酮提取物对大肠杆菌的抑制率。[结果]其他条件相同时,美洲大蠊、中华稻蝗、芫菁3种昆虫的黄酮浓度与抑制大肠杆菌繁殖的作用效果呈正相关;浓度相同时,美洲大蠊黄酮体内提取物抑菌效果最佳,中华稻蝗次之,芫菁的抑菌效果最弱。[结论]美洲大蠊、中华稻蝗、芫菁3种昆虫黄酮提取物对大肠杆菌有一定的抑制作用。     

木瓜蛋白酶提取蜚蠊多糖最佳工艺研究

[目的]优化木瓜蛋白酶提取美洲大蠊多糖的工艺参数。[方法]利用不同梯度木瓜蛋白酶对美洲大蠊进行蜚蠊多糖提取试验,采用单因素和正交试验的方法,考察最佳酶用量、提取时间、温度等相关参数对提取液中多糖的含量的影响,确定蜚蠊多糖提取的工艺。[结果]试验表明,蜚蠊多糖提取的最佳条件为:酶用量为300μg/g,提取温度60℃,提取时间1.0 h。[结论]研究可为建立高效、实用的蜚蠊多糖提取途径提供技术参考,同时也为美洲大蠊的保健药品及功能性食品开发提供可靠的科学依据。     

美洲大蠊提取物对四氧嘧啶性糖尿病小鼠作用研究

[目的]研究美洲大蠊(MZDL)提取物对四氧嘧啶性糖尿病小鼠血糖的影响。[方法]四氧嘧啶诱发糖尿病小鼠后,随机分为模型组(MC),二甲双胍组(250 mg/kg),美洲大蠊提取物低剂量(25 mg/kg)、中剂量(50 mg/kg)、高剂量(100 mg/kg)5个组,模型组给予同体积生理盐水,分别于试验第7、14、212、8天各测定小鼠空腹血糖和体重,第25～28天每天记录进食饮水量。28 d后取血测血清中一氧化氮合酶(NOS)含量。[结果]3个剂量的美洲大蠊提取物均能减缓糖尿病小鼠消瘦和多饮多食的症状。在试验中中、高剂量组糖尿病小鼠血糖降低(P<0.05)。MZDL中、高剂量组NOS含量低于MG(P<0.01)。[结论]美洲大蠊提取物对四氧嘧啶致糖尿病小鼠具有一定的保护作用,其机制可能与其降低一氧化氮合酶水平有关。     

活性炭与大孔树脂对美洲大蠊脱脂膏的脱色效果比较(英文)

[目的]探讨活性炭及大孔树脂两种脱色工艺对美洲大蠊脱脂膏的脱色效果,对比两种脱色工艺的优缺点。[方法]美洲大蠊脱脂膏用活性炭和大孔树脂脱色后,进行冷冻干燥得到固体脱色物,然后通过考察收得率、脱色率、蛋白保留率及脱色的操作过程,比较两种脱色工艺的有缺点。[结果]两种方法均能用于脱色。从收得率及蛋白保留率看,大孔树脂优于活性炭;从脱色率及操作过程看,活性炭脱色优于大孔树脂。[结论]该研究结果表明,若试验所需成分以蛋白为主,可采用大孔树脂脱色;若所需成分不是以蛋白为主,则可采用活性炭脱色。     

居室黑胸大蠊食性和食物范围研究

[目的]探讨居室黑胸大蠊的食性和食物范围。[方法]对黑胸大蠊的食性和食物范围进行调查研究。[结果]黑胸大蠊的食谱范围较广,但不喜啃噬大竹象、金龟子等昆虫尸体。黑胸大蠊为杂食性动物,但比较偏向于肉食。[结论]该研究可为黑胸大蠊的养殖和防治提供基础依据。     

蜈蚣及其混淆品的鉴别研究

[目的]对蜈蚣及其混淆品的性状与凝胶电泳图谱进行研究。[方法]采用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法,测定并比较它们的电泳图的谱带数目和种类。[结果]蜈蚣及其混淆品的电泳谱带数目和种类均不相同。[结论]SDS-PAGE图谱可以作为蜈蚣及其混淆品的有效鉴别依据。     

枣树叶片蛋白质提取及SDS-PAGE单向电泳条件优化

[目的]对枣树叶片蛋白质提取方法及其SDS-PAGE单向电泳条件进行优化。[方法]对枣树5种蛋白质提取方法和影响SDS-PAGE单向电泳的因素进行比较研究。[结果]改良丙酮沉降法提取出的蛋白质杂质较少,条带数量多且清晰,同时通过研究确定了一套适用于枣树蛋白检测的SDS-PAGE凝胶制备及电泳方法。[结论]该研究为进一步从分子生物学的角度研究枣树与枣疯病植原体的互作机制提供了技术的基础。     

双向电泳中4种常用染色方法的比较

采用SDS-PAGE电泳技术,比较分析了双向电泳中常用4种染色方法的优、缺点。结果表明:常规银染法灵敏度低;改进的双胺硝酸银银染法与质谱分析不兼容;考染方法-银染复合染色法的灵敏度稍低于双胺硝酸银银染法,但它的质谱兼容性最高;改进后的银染方法灵敏度高、背景清晰、与质谱兼容。因此后两种方法较广泛适用于蛋白质组学研究。     

几种SDS-PAGE凝胶电泳染色方法的比较

[目的]对几种SDS-PAGE凝胶电泳染色方法进行比较。[方法]从凝胶背景颜色、染色时间及灵敏度的角度对6种SDS-PAGE凝胶电泳快速染脱色方法进行比较研究,并对适用于椰子和油棕总蛋白质SDS-PAGE凝胶电泳的实用方法进行总结。[结果]方法 F最快速,条带清晰,染料及试剂都较少,是一种经济、快速、安全、实用的染色方法,整个过程仅需1 h左右。[结论]试验比较了几种SDSPAGE凝胶电泳染色方法,对进一步开展椰子和油棕蛋白质组学研究具有重要意义。     

双向电泳中4种常用染色方法的灵敏度比较

采用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳技术,比较分析双向电泳常用4种染色方法的灵敏度,以筛选适合蛋白质组学研究所使用的染色方法。结果表明：银染GE法的灵敏度在5 ng的水平,对于BSA为0.5 ng;银染Blum法的灵敏度在10 ng的水平,对于BSA为0.1 ng;银染Schevchenko法的灵敏度在50 ng级的水平,对于BSA为5 ng;普通考染法的灵敏度在0.25μg的水平,对于BSA为0.025μg。根据结果比较,提出适合一般蛋白质组研究分析的快速灵敏的蛋白质染色方法。     

双向电泳过程中的常见问题及解决方法

[目的]研究蛋白质组双向电泳中出现的问题及解决方法。[方法]培养野生型K12菌株Escherichia coli MG1655，分离其蛋白质样品并进行SDS-PAGE聚丙烯酰胺凝胶电泳。[结果]双向电泳中存在蛋白质点没有出现或很少，纵纹与横纹现象严重等问题。[结论]该研究为以后开展双向电泳试验打下了基础。     

魟鱼软骨多糖的聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴别

[目的]用聚丙烯酰胺凝胶电泳对魟鱼软骨多糖（RCG）进行定性鉴别。[方法]利用纯化RCG,进行聚丙烯酰胺凝胶电泳。[结果]RCG经纯化,基本实现了多糖的分离;根据聚丙烯酰胺凝胶电泳迁移率,可明显鉴别出魟鱼RCG。[结论]该法重现性较好,简单易行,可用于魟鱼RCG的定性鉴别。     

番茄幼苗根系总蛋白SDS-PAGE方法的优化

[目的]建立一套适合番茄幼苗根系蛋白质组分析的SDS-PAGE方法和获得清晰的电泳图谱。[方法]以番茄幼苗根系为试材,对根系蛋白的提取方法和上样量等因素进行了优化。[结果]上样量为60μg时,改良后的TCA-丙酮沉淀法提取的蛋白能够获得分辨率较高、图像清晰、重复性好的SDS-PAGE图谱。[结论]该法可以基本满足番茄幼苗根系蛋白质组学的研究。     

番茄幼苗根系总蛋白SDS-PAGE方法的优化

[目的]建立一套适合番茄幼苗根系蛋白质组分析的SDS-PAGE方法,获得清晰的电泳图谱。[方法]以番茄幼苗根系为试材,对根系蛋白的提取方法和上样量等因素进行了优化。[结果]上样量为60μg时,改良后的TCA-丙酮沉淀法提取的蛋白能够获得分辨率较高、图像清晰、重复性好的SDS-PAGE图谱。[结论]该法可以基本满足番茄幼苗根系蛋白质组学的研究。