酶解啤酒废酵母生产橘小实蝇蛋白饵剂的研究

水解蛋白液是橘小实蝇蛋白饵剂的核心组成成分,研究利用酶解法从啤酒废酵母中提取水解蛋白的加工工艺。通过正交试验,对水解温度、pH、时间和加酶量4个水解影响因素进行分析,结果显示,最佳工艺条件为pH值6.0,温度50℃,时间18h,加酶量为2.0mg/mL。室内生物测定的结果表明,水解蛋白液对橘小实蝇的引诱率可达60.00%,其中雌性和雄性的引诱率分别为63.30%和56.70%。总糖与蛋白质含量的比例是影响引诱率的重要因素,当二者之比为200:1时,引诱率最高。     

橘小实蝇引诱蛋白——啤酒废酵母酶解液的挥发性成分分析

[目的]分析橘小实蝇引诱蛋白——啤酒废酵母酶解液的挥发性成分。[方法]采用固相微萃取法(SPME)收集新鲜啤酒废酵母水解蛋白中的挥发性成分,并气质联用仪(GC-MS)对其进行了分析。[结果]鉴定出乙醇、丙酮3、-甲基-1-丁醇、甲氧基-苯基-肟、苯甲醛、己酸、苯乙醇、苯乙腈、辛酸、辛酸乙酯、乙酸辛酯、甲酸苯乙酯、壬酸乙酯9、-烯癸酸乙酯、癸酸乙酯和十二烷酸乙酯共16种物质,其中乙醇、丙酮3、-甲基-1-丁醇、苯甲醛、苯乙醇、己酸、辛酸和辛酸乙酯曾被不同学者在实蝇其他食物诱剂中发现,且乙醇和辛酸乙酯已被证实对一些实蝇种类具有引诱活性,未见其他8种物质在实蝇食物诱剂中的检出报道。[结论]为该实蝇蛋白诱剂的进一步改良提供了理论依据。     

不同浓度啤酒废酵母酶解蛋白与硼砂组合对橘小实蝇的捕杀效果

于阳桃园和番石榴园,田间测定了不同浓度啤酒废酵母酶解蛋白与硼砂组合对橘小实蝇的诱捕和诱杀效果。结果表明:在诱捕和诱杀试验中,随着蛋白浓度和硼砂浓度的增加,酶解蛋白硼砂组合对橘小实蝇的捕杀数量呈逐渐增加趋势,以25 g/L蛋白、0.09 mol/L硼砂组合最高。通过诱捕和诱杀试验确定啤酒废酵母酶解蛋白的最佳田间使用浓度为20~25 g/L,硼砂的添加量为0.06~0.12 mol/L。     

橘小实蝇啤酒废酵母酶解蛋白中多杀菌素添加量的研究

为确定橘小实蝇(Bactrocera dorsalis)啤酒废酵母酶解蛋白中多杀菌素的添加量,室内测定了多杀菌素与啤酒废酵母酶解蛋白组配后对橘小实蝇的LC90、LT90及取食行为的影响.结果表明,多杀菌素对橘小实蝇雌、雄成虫在24 h内的LC90分别为5.461 5、7.308 5 mg/kg.2.5、6.3、16.0、40.0、100.0 mg/kg多杀菌素对橘小实蝇雌成虫的LT90分别为56.769 6、49.647 6、16.283 2、7.431 8、4.462 2 h,对雄成虫的LT90分别为57.388 8、52.165 2、17.615 2、7.562 8、4.834 5 h.40 mg/kg和100 mg/kg多杀菌素对6日龄和3日龄橘小实蝇雌雄成虫的取食量和吐出率均无显著影响.     

7种啤酒废酵母酶解液挥发性成分对橘小实蝇的引诱作用

测试了啤酒废酵母酶解液7种挥发性成分(3-甲基-1-丁醇、苯甲醛、乙酸辛酯、乙酸苯乙酯、辛酸乙酯、苯乙腈和苯乙醇)及其混合物对不同发育期橘小实蝇的引诱效果.结果显示,乙酸辛酯、乙酸苯乙酯和辛酸乙酯对橘小实蝇雌雄成虫的引诱作用显著;利用正交试验方法得到200μL·m L-1乙酸辛酯、200μL·m L-1乙酸苯乙酯和100μL·m L-1辛酸乙酯的混合物对橘小实蝇的引诱效果最好,引诱率达到88.6%.     

橘小实蝇幼虫液体人工饲料正交设计优化

采用正交试验设计方法,对橘小实蝇幼虫液体人工饲料组成成分啤酒废酵母、蔗糖、防腐剂及饲料pH值4种因素3个水平进行优化筛选,以橘小实蝇化蛹率、蛹重、羽化率、产卵高峰期的单雌产卵量和F1卵孵化率为考察指标,求出橘小实蝇幼虫液体人工饲料的最佳配方为啤酒废酵母17.89 g,蔗糖10.34 g,防腐剂0.3 g,蒸馏水100 mL,pH值5.5.     

橘小实蝇对啤酒废酵母酶解液挥发性成分的触角电位反应

采用触角电位技术系统测试了橘小实蝇对啤酒废酵母酶解液挥发性成分的反应.结果表明:在啤酒废酵母酶解液挥发性成分中,3-甲基-1-丁醇、苯甲醛、苯乙腈、辛酸乙酯、乙酸辛酯、乙酸苯乙酯是对橘小实蝇起引诱作用的主要物质,其对橘小实蝇激发的触角电位相对值均超过了参照正己醇.当v样品∶v石蜡=1∶100时,乙酸苯乙酯对雌性橘小实蝇激发的触角电位相对值和3-甲基-1-丁醇对雄性橘小实蝇激发的触角电位相对值与正己醇相比差异显著;苯甲醛对雄性橘小实蝇激发的触角电位相对值达1.7895,与正己醇相比差异极显著.当v样品∶v石蜡=1∶10时,对雌性橘小实蝇而言,苯甲醛、乙酸苯乙酯激发的触角电位相对值与正己醇差异显著,3-甲基-1-丁醇激发的触角电位相对值与正己醇差异极显著;对雄性橘小实蝇而言,苯甲醛、乙酸苯乙酯激发的触角电位相对值与正己醇差异显著,3-甲基-1-丁醇、乙酸辛酯激发的触角电位相对值与正己醇相比差异极显著.     

响应面法优化鳙鱼鱼肉蛋白的酶解工艺

[目的]为鳙鱼及其他淡水鱼鱼肉蛋白资源的高价值利用提供指导。[方法]首先比较6种不同蛋白酶水解鳙鱼鱼肉蛋白的能力,找出酶解能力最高的蛋白酶。通过响应面分析法优化酶解鳙鱼蛋白的工艺条件,探讨酶解过程中酶底物浓度比（[E]/[S]）、pH值和温度对酶解物水解度的影响。并分析酶解物的氨基酸组成。[结果]碱性蛋白酶水解鳙鱼鱼肉蛋白的能力最强,蛋白回收率最高。其酶解鳙鱼鱼肉蛋白的最佳工艺条件为：[E]/[S]1.7%、pH值9.7,温度57℃。鳙鱼鱼肉蛋白在该条件下水解度理论值为25.24%。氨基酸组成分析结果表明,该工艺下所得酶解物的氨基酸组成与鳙鱼鱼肉蛋白的氨基酸组成差别不大,酶解物很好地保持了鱼肉蛋白的特定氨基酸模式。[结论]优化了镛鱼鱼肉蛋白的酶解工艺。     

胃蛋白酶水解松仁蛋白的研究

[目的]优化得到胃蛋白酶水解松仁蛋白的酶解工艺,并检验水解蛋白清除自由基的效果。[方法]选用胃蛋白酶水解松仁蛋白,并进行酶解工艺优化,同时检测了松仁蛋白胃蛋白酶水解物的还原能力和清除羟基自由基的效果。以可溶性蛋白质量浓度为响应值,进行了单因素及正交试验。[结果]确定了胃蛋白酶水解松仁蛋白的最佳水解条件:酶添加量7.5 U/g干蛋白质、水解温度50℃、水解时间3.75 h、pH 2.0,各因素对结果的影响程度大小依次为pH、水解时间、酶添加量、温度。抗氧化试验表明,松仁蛋白胃蛋白酶酶解物具有清除羟基自由基的能力和还原能力。[结论]研究可为松仁的精深开发利用提供参考依据。     

啤酒废酵母自溶过程强化研究

[目的]研究啤酒废酵母强化自溶过程,优化强化作用因素。[方法]对影响啤酒废酵母自溶后释放的超氧化物歧化酶(SOD)、氨基酸、葡萄糖内容物含量及SOD的活性提取的各因素进行单因素试验,并设计物理因素正交试验进行各因素参数优化;同时对啤酒酵母自溶后释放的上述活性物质进行添加葡聚糖酶、木瓜蛋白酶促进自溶过程的单因素影响研究,并设计化学因素正交试验进行各因素参数优化。[结果]物化因素影响的正交试验表明,啤酒废酵母自溶过程氨基酸含量提取的最优组合为pH 5.0、加水量300%、加盐量3%,葡萄糖含量提取的最优组合为pH 5.0、加水量250%、加盐量1%,SOD含量提取的最优组合为pH 5.5、加水量300%、加盐量2%,SOD活性提取的最优组合为pH 5.5、加水量250%,加盐量1%。生化因素影响的正交试验表明,氨基酸含量提取的最优组合为pH 6.0、温度60℃、酶用量6 g/kg葡聚糖酶+4 g/kg木瓜蛋白酶,葡萄糖含量提取的最优组合为pH 6.0、温度55℃、酶用量6 g/kg葡聚糖酶+4g/kg木瓜蛋白酶,SOD含量提取的最优组合为pH 6.0、温度55℃、酶用量6 g/kg葡聚糖酶+2 g/kg木瓜蛋白酶,SOD活性提取的最优组合为pH 6.5、温度60℃、酶用量6 g/kg葡聚糖酶+4 g/kg木瓜蛋白酶。[结论]在优化的啤酒废酵母自溶过程强化作用各提取物的最优组合条件下,可简化操作过程、降低操作难度,提高酵母菌成分的利用率及其得率。     

啤酒废酵母蛋白的提取工艺研究

[目的]探讨啤酒废酵母中蛋白质的最佳提取方法及工艺条件。[方法]采用超声波法、冻融法、盐热法、碱热法4种提取方法。[结果]超声波法、冻融法、盐热法、碱热法在最佳工艺条件组合时,蛋白质提取率分别为3.47%、4.15%、5.66%、22.81%。啤酒废酵母蛋白质的提取以碱热法最佳,其最佳条件组合为：菌液比3∶10,氢氧化钠浓度1%,提取时间1 h,提取温度60℃。[结论]该研究为啤酒废酵母工业化大量提取提供了理论和试验依据。     

水稻SGR酵母双杂交诱饵载体的构建及鉴定

[目的]揭示SGR基因的作用机理。[方法]构建水稻SGR基因在酵母双杂交体系中的诱饵载体,并对其表达进行鉴定,将目的基因SGR与诱饵质粒载体pGBKT7通过双酶切定向重组构建诱饵质粒pGBKT7-SGR,将pGBKT7-SGR转入酵母菌株Y187中,利用Western印迹法检测其在酵母中的表达,通过缺陷性培养基培养进行自激活检测。[结果]将鉴定正确的重组质粒测序结果与SGR基因比较,序列完全一致,阅读框分析正确。载体pGBKT7-SGR在酵母菌株Y187中可以正确表达出融合蛋白。重组诱饵pGBKT7-SGR质粒对酵母无毒性,其表达产物不能激活酵母菌株Y187的营养缺陷型报告基因。[结论]该重组诱饵质粒可用于酵母双杂交体系,该研究为从cDNA文库筛选水稻诱饵蛋白SGR的互作蛋白奠定了基础。     

基于逐步回归分析的桔小实蝇种群数量变动及其影响因子的研究

[目的]研究影响桔小实蝇种群变动的显著影响因子。[方法]利用逐步回归分析方法对云南建水县桔小实蝇种群数量变动的规律及影响其发生的气象因子进行分析,并建立回归模型,最后通过云南建水县2004～2006年数据对回归模型进行回检。[结果]影响桔小实蝇发生量的主要气象因子为相对湿度、月最低气温和降雨量。[结论]该研究为桔小实蝇发生时期、发生量以及发生高峰期的预测提供了参考。     

啤酒酵母多糖的分离纯化与初步鉴定

[目的]从啤酒废酵母中分离纯化出多糖，并对其组成和性质进行初步鉴定。[方法]用常规方法分离纯化啤酒酵母多糖，并用HPLC、比旋度测定和醋酸纤维薄膜电泳等方法测定BPS2。[结果]粗多糖收率为9．7％，为浅色粉灰。BPS2为均一组分，苯酚-硫酸法测定其糖含量为95．2％，GC分析其单糖组成为Man和Glc，摩尔比为1．08：1．00。[结论]试验提取的粗多糖为一种新多糖，其主要成分为BPS2，为啤酒酵母的利用提供了基础。     

啤酒酵母海藻糖提取工艺研究

[目的]研究优化啤酒酵母海藻糖提取工艺.[方法]以啤酒废酵母为原料,使用各种不同的方法（微波破壁法、高温处理破壁、煮沸提取法）提取海藻糖,以海藻糖得率以及工艺的效益性为指标考察料液比、浸提时间、浸提温度、辅助因素处理等单因素对海藻糖提取的影响,从而确定从废酵母中提取海藻糖的较佳工艺.[结果]试验得出,微波破碎法耗时少,但不易工业化且提取率不高,比较发现煮沸提取的工艺方法相对最佳.以水作提取剂从废酵母中提取海藻糖的最佳条件是：煮沸80 min,海藻糖提取率为8.147 mg/g干酵母.[结论]研究可为海藻糖的提取及进一步开发利用提供参考.     

酶法制取丝素降胆固醇肽的工艺研究

[目的]利用废蚕丝制取具有降胆固醇的活性肽。[方法]考察不同水解度的丝素活性肽对胆固醇在胆汁胶束溶液中溶解度的抑制率,并以此作为碱性蛋白酶水解蚕丝蛋白的评价指标,采用单因素试验对碱性蛋白酶的水解工艺进行了探讨。[结果]其最佳工艺条件：产物浓度为20g/L,酶用最为0.4g/L,反应温度为40℃,pH为9.5。[结论]碱性蛋白酶水解丝素蛋白的水解度为16.5%时,产物具有最佳活性。     

桔小实蝇幼虫呼吸代谢研究

[目的]明确桔小实蝇幼虫的呼吸代谢特征。[方法]以重要的水果害虫桔小实蝇幼虫为对象,研究其呼吸代谢特征。[结果]桔小实蝇整个幼虫期总耗氧量达21.61 mL,耗氧量随着幼虫的生长发育而增加。各日龄幼虫的呼吸代谢存在显著差异,而这种差异与它们的生活特性有直接相关性。[结论]研究结果为进一步了解桔小实蝇为害规律和制定检疫处理技术提供了参考。     

罗汉果蛋白酶对酒糟中蛋白质的水解作用研究

[目的]为酒糟中蛋白质的水解提供新方法。[方法]采用酶解法,用罗汉果蛋白酶提取酒糟中的蛋白质,测定酶解酒糟上清液中蛋白质的含量,计算单位体积蛋白质增量。在加酶量、酶解温度、酶解时间、pH值单因子试验的基础上,采用正交试验确定酒糟中蛋白质的最佳提取条件。[结果]各因素对单位体积蛋白质增量的影响依次为:pH值>水解时间>加酶量>水解温度。酶解酒糟的最佳条件为:pH值8.0,水解时间10 min,加酶量0.75 ml/100 g湿酒糟,温度65℃。在最佳条件下,单位体积蛋白质增量可达98.78%。[结论]该研究确定了酶解法提取酒糟中蛋白质的最优条件,使酶解上清液中蛋白质含量增加了近1倍。