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农杆菌介导rolC基因转化烟草植株的研究 总被引:7,自引:1,他引:7
通过根癌农杆菌介导手段,将来自发根农杆菌的rolC基因转化到烟草(Nicotiana tabacum)植株的基因组,并借助GUS组织化学法,PCR扩增法和Southen杂交进行了鉴定证实。 rolC基因改变转基因烟草植株某些性状的特点,如植株高变矮,花冠变小,雄蕊 变短等,还发现rolC基因具有延迟转基因烟草植株花期的作用。 相似文献
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将拟南芥早花基因FPFI(flowering promoting factor 1)插入双元高效表达栽体pBI 121中,构建了植物表达载体pBIUbi-FPFI.以"双低"甘蓝型晚熟油菜品种2000F4102,2000F4153的下胚轴为转化受体,通过农杆菌介导的遗传转化获得抗卡那霉素的再生转基因植株,并探讨了影响油菜再生频率以及遗传转化效率的几个因素.对部分经卡那霉素筛选得到的再生植株进行了PCR检测,其中70%以上的卡那霉素抗性植株表现阳性,初步证明FPFI基因已整合到油菜细胞核基因组中. 相似文献
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农杆菌介导法将FPFJ基因导入油菜的研究初报 总被引:8,自引:2,他引:8
将拟南芥早花基因FPF1(flowering promoting factor 1)插入双元高效表达载体pBI 121中,构建了植物表达载体pBIUbi-FPF1。以“双低”甘蓝型晚熟油菜品种2000 F4102,2000 F4153的下胚轴为转化受体,通过农杆菌介导的遗传转化获得抗卡那霉素的再生转基因植株,并探讨了影响油菜再生频率以及遗传转化效率的几个因素。对部分经卡那霉素筛选得到的再生植株进行了PCR检测,其中70%以上的卡那霉素抗性植株表现阳性,初步证明FPF1基因已整合到油菜细胞核基因组中。 相似文献
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研究不同的番茄基因型、培养基类型、苗龄、外植体类型、植物表达载体和选择系统等对番茄再生和遗传转化效率的影响.结果表明,7 d苗龄的子叶或13 d苗龄的下胚轴,预培养2 d,侵染20 min,培养基中添加适宜浓度的玉米素(1.0~2.0 mg·L-1)和IAA(0.1~0.2 mg·L-1),以75~100 mg·L-1的卡那霉素筛选,番茄的转化频率最高,分别为51.4%和37.5%.且以卡那霉素抗性基因为筛选标记的质粒p2301 和pBI121作为植物表达载体,其转化频率高于以潮霉素抗性基因为筛选标记的植物表达载体p1301. 相似文献
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农杆菌介导转化为目的的水稻组培体系的建立 总被引:2,自引:2,他引:2
高效可靠的组培再生体系是水稻农杆菌遗传转化的基础。该试验通过对培养基类型、光照条件和水稻基因型的研究,发现富含脯氨酸的N6D培养基能明显促进愈伤组织的生长,光照条件也可显著改善其生长。Calrose76和合系41号被证实为易于组培高效再生的粳稻品种,该高效组培体系的为云南栽培良种合系41号的进一步农杆菌转化体系的建立铺平了道路。 相似文献
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转BG2基因黑杨植株的获得 总被引:9,自引:0,他引:9
利用根癌农杆菌介导法将β-1,β-葡聚糖酶基因(BG2)转人黑杨G1。本研究建立了黑杨G1的继代及高频再生系统,对传统农杆菌侵染方法进行了改良,通过抗生素筛选获得大量抗性植株。对抗性植株进行了PCR和PCR-Southem杂交鉴定,证实BG2基因已整合人杨树核基因组中。 相似文献
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甘蓝型油菜遗传转化体系的研究 总被引:29,自引:0,他引:29
以甘蓝型油菜9506品系的下胚轴为受体,用根癌农杆菌介导,进行了除草剂Glufosinate抗性基因(pat)的转化试验,得到了抗卡那霉素(Kan)选择剂的小植株,并对影响转化的一些因素进行了研究。试验结果表明:Kan和羧苄青霉素(Cb)对芽再生均具有很强的抑制作用;用含2,4-D的培养基对下胚轴进行预培养和选择培养基中附加AgNO3均能促进转化细胞的生长和芽的再生。转化植株对Glufosinat 相似文献
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石楠抗寒基因AmGS高效转化体系的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
本研究以石楠为受体材料,利用农杆菌浸染方法开展沙冬青抗寒基因AmGS转化试验,通过对不同的受体材料浸染部位、菌液浓度、乙酰丁香酮和浸染时间对转化材料的死亡率%、分化率%、分化芽数(个)、芽苗长度(cm)以及芽苗颜色的分析,得出最佳转化方法为:采用茎尖为转化材料,菌液浓度为2/3~1/2原液,浸染时间为10 min,添加乙酰丁香酮浓度为25~30 mg/L.其中浸染部位是影响基因高效转化的最主要因素,菌液浓度、乙酰丁香酮和浸染时间的作用次之,经在50 mg/L浓度的卡那霉素培养基筛选培养,获得一批的抗性植株,经PCR检测获得6株转化株系. 相似文献
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利用发根农杆菌转化实美橙子叶外植体的研究 总被引:2,自引:0,他引:2
以过夜培养的发根农杆菌 R_(1000)、15834、A)4感染实美橙子叶外植体,与菌体共培养3天后,转移至含头孢霉素的无激素 MT 培养基上进行选择培养,10天后开始产生毛状根,转化率为23%~36%。毛状根在继代培养中,稳定地保持激素自主性生长的特性.纸电泳检测证明,毛状根中含有甘露碱和农杆碱,表明发根农杆菌 Ri 质粒的 T-DNA 转移并整合入实美橙子叶细胞核基因组中,得到了表达,部分毛状根已分化产生不定芽和苗. 相似文献
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大叶女贞抗寒基因AmEBP1高效转化体系的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
本研究以大叶女贞为受体材料,利用农杆菌浸染方法对沙冬青抗寒基因AmEBP1进行转化试验,通过对不同的受体材料浸染部位、菌液浓度和浸染时间对转化材料的死亡率%、分化率%、分化芽数(个)、芽苗长度(cm)以及芽苗颜色影响进行了分析,结果表明:转化材料为茎段,菌液浓度稀释为50%,浸染时间15 min;其中浸染部位是影响基因高效转化的最主要因素,菌液浓度和浸染时间的作用次之;方差分析进一步发现,浸染部位的三个水平对于外源基因在植物体内的转化显著差异,因此选择合适的浸染部位、适宜的菌液浓度和浸染时间能提高基因转化效率;经在50 mg/L浓度的卡那霉素培养基筛选培养,获得一批抗性植株,经PCR检测获得5株转化株系. 相似文献
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晚籼“金晚3号”和 Jaya/233在减数分裂期喷洒不同浓度的赤霉酸(GA_3 10、15、20ppm)和乙烯利(CPA 600、1000、1400 ppm),部分幼穗结合低温处理,结果表明:单独用低浓度激素处理对“金晚3号”绿苗的诱导有抑制作用。随着浓度提高,绿苗诱导率均有所提高。激素结合低温处理能大幅度提高愈伤组织诱导率,但绿苗分化率普遍降低。而低浓度激素结合低温处理,花粉绿苗诱导率显著提高。激素对“Jaya/233”作用表现则不同。单独用激素处理能大幅度提高愈伤组织诱导率,但不能正常增殖,也未分化绿苗。低温处理愈伤组织能正常增殖,并分化绿苗。而激素结合低温处理能提高愈伤组织的分化力,从而提高花粉绿苗的诱导率。 相似文献
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反义Wx基因导入我国常规籼稻品种的研究 总被引:5,自引:1,他引:5
经农杆菌介导,将自行克隆并构建的反义Wx基因导入4个高直链淀粉含量的常规籼稻品种绿黄占、清芦占11号、三芦占7号和特青中,经潮霉素抗性筛选获得抗性植株。聚合酶链反应(PCR)和Southern杂交检测证明反义Wx基因已整合进转基因水稻植株的基因组中。对成熟种子直链淀粉含量的分析表明,部分转基因水稻植株T1或T2代种子中的直链淀粉含量有不同程度的下降,最低的已降至16.52%,较对照下降了40.5%;在此基础上筛选获得了部分转基因纯合株系。研究结果还表明,盲链淀粉含量的改变会导致相应稻米的胶稠度和糊化温度的变化。 相似文献