鸡源致病性大肠埃希氏菌血清型鉴定

鸡大肠埃希氏菌病是由埃希氏大肠杆菌(E·Coli)的某些血清型所引起鸡的不同类型疾病的总称。从现有的资料看,各地区流行的鸡致病性大肠杆菌的血清型不尽相同。其中以O_1、O_2、O_(78)在世界各地流行普遍,致病力也最强。近几年在国内也相继报导了由O_1、O_(78)、O_7、O_(73)和O_(88)等所引起的鸡大肠杆菌病的主要血清型。虽然在我省各养鸡场致病性大肠杆菌病时有发生,但却很少了解这些致病菌株     

鸡源大肠埃希氏菌大质粒的探讨

用碱裂解法提取分离的１０株鸡源大肠埃希氏菌的质粒。结果：多数大肠埃希氏菌株含有大质粒，分子量为５０￣２３０ｋｂ。这些大质粒可能含有毒力相关基因，与细菌的耐药性，大肠埃氏菌素的产生及质粒的传递功能等有关。     

鸡源致病性大肠埃希菌菌毛基因研究进展

菌毛是鸡大肠埃希菌的重要致病因子之一。文章对鸡源致病性大肠埃希菌菌毛的特点及分类,各型菌毛亚单位基因结构及其功能与控制,鸡源致病性与其他动物源大肠埃希菌菌毛之间的同源性进行了综述。这对了解菌毛亚单位基因结构与致病力的关系,探讨鸡源大肠埃希菌的致病力与分布有重要意义。     

宁夏部分地区鸡大肠埃希菌的分离与血清型鉴定

为调查宁夏地区鸡大肠杆菌病的流行情况,采集宁夏4个地区的103个规模化鸡场疑似病料151份,通过病原菌分离鉴定及生化试验,鉴定出鸡大肠埃希菌109株,平均分离率为72.19%(109/151);动物试验证实,59株分离菌有致病性,占分离菌54.13%(59/109);对致病性菌株进行血清型鉴定,确定血清型种类13种38株,占致病性菌株64.41%(38/59);优势血清型分别为O15、O18、O78、O88,占定型菌株63.16%(24/38)。     

抗鸡致病性大肠埃希氏菌O88单克隆抗体的研究

用纯化的鸡致病性大肠埃希氏菌Ｏ８８菌株（ＭＧ３８ｅ）热灭活抗原免疫ＢＡＬＢ／ｃ雌性小鼠,再用该菌株粗提的脂多糖尾静脉注射加强免疫后,取其脾细胞与ＳＰ２／０细胞融合,经有限稀释法克隆,用间接ＥＬＩＳＡ及凝集试验（ＩＨＴ）筛选,获得４株能稳定分泌该菌株单克隆抗体的杂交瘤细胞。哪样我瘤细胞培养液ＥＬＩＡＳ和ＩＨＴ效价分别为１：１００～１：１０００和３ｌｏｇ２～４ｌｏｇ２;腹水效价分别为１：１００～１：４     

温州地区鸡肠道大肠埃希菌耐药性分析及血清型鉴定

为研究温州地区鸡肠道大肠埃希菌的耐药性和血清型,从27家养鸡场采集泄殖腔拭子355份,分离并鉴定出346株鸡大肠埃希菌,分离率为97.46%。在346株分离株中,对3种以上抗菌药物耐药的菌株占84.39%(292/346),呈现多重耐药性。O血清型鉴定结果显示,分离菌株分别属于13个血清型,其中O138、O146、O136、O45占分离菌株的39.02%(135/346),为优势血清型。     

东北地区鸡源大肠埃希菌耐药性试验

为了选择敏感药物以避免抗药性的产生,选用新霉素、头孢噻肟钠、甲磺酸培氟沙星等8种抗菌药对东北地区主要养鸡场分离出的优势血清型致病性大肠埃希菌进行药敏试验.结果8种抗菌药的抑菌圈直径分别是氟苯尼考30 mm,头孢噻污钠28 mm,新霉素27 mm,甲磺酸培氟沙星21 mm,丁胺卡那25 mm ,磷霉素钙19 mm,庆大霉素6 mm,阿莫西林15 mm.根据药物敏感试验结果表明,抑菌作用较强的为氟苯尼考、头孢噻肟钠和新霉素.     

致病性大肠埃希菌HPI研究进展

强毒力岛(HPI)首先在耶尔森菌属中发现,由于水平转移等原因在致病性大肠埃希菌中也有发现,这在基础生命和生命科学领域已成为对HPI研究的热点.随着研究的不断深入,HPI与人及动物的致病关系非常密切,目前研究发现铁载体与细菌致病性有着重要的关系.论文主要对致病性大肠埃希菌HPI的基本特征、流行病学特征、HPI的获取机制、HPI与致病性关系的研究现状做以综述.     

昆明市鸡源大肠埃希菌耐药基因的流行特征研究

为了解昆明市区农贸市场鸡源大肠埃希菌耐药基因的携带情况,采用PCR技术对140株鸡肝中大肠埃希菌的22个耐药基因进行了检测。研究表明,140株大肠埃希菌中TEM和Gyra(QRDR)基因检出率最高为100%;aph(3)-Ⅱa基因的检出率最低为22.86%,且13个耐药基因检出率在50%以上。呈贡区、官渡区、盘龙区、五华区、西山区检出率最低的耐药基因分别为aph(3)-Ⅱa、OXA、tetB和OXA、SHV、aac(3)-Ⅱa基因。研究结果可为大肠埃希菌病的临床用药提供理论指导,为公共卫生安全提供参考依据。     

鸡源大肠埃希氏菌血清型鉴定及药敏试验

为了有效防控鸡源性大肠埃希氏菌病、指导科学用药,本站从2005年11月至2007年5月对商丘市129个发病鸡场送检的病料进行了大肠杆菌分离鉴定、药敏试验和血清型鉴定。结果发现本地区出现了大量耐药的菌株,通过药敏试验筛选出的敏感药物及其有效率如下:壮观霉素75%、阿米卡星73%、氨苄西林(舒巴坦钠)65%、头孢噻肟钠50%、磷霉素45%、庆大霉素41%、新霉素41%。血清型鉴定结果发现O78、O15两个血清型为本地区的优势血清型,另本地区还存在O1、O2、O5、O18、O35、O50、O86、O88、O111等多种血清型。本调查研究的结果,对指导本地区乃至其他地区鸡源大肠杆菌病的防治有重要的参考价值。     

iss基因与鸡大肠杆菌毒力相关性的分析

对20株鸡源大肠杆菌的致病性进行测定。并对不同致病性鸡大肠杆菌的iss基因进行了扩增。结果表明：鸡E．coli O1、O2、北京1、北京3、贵州1、新大、田大、E10、E11、E27对1日龄雏鸡具有较强的毒力;O78、E5、E21的致病性较弱;而E．coli E1、E4、E7、E8、E9、E14、E18接种雏鸡均无死亡。iss基因在致病性鸡E．coli O1、O2、O78、北京1、北京3、贵州1、新大、田大、E5、E21、E10、E11、E27中的扩增频率为92．31％;在毒力较强的致病性鸡Ecoli O1、O2、北京1、北京3、贵州1、新大、田大、E10、E11、E27中的扩增频率为100％;在无致病性(或低毒力)的鸡Ecoli E1、E4、E7、E8、E9、E14、E18中的扩增频率为14．29％。结果表明：iss基因在致病力强的菌株中的扩增频率明显高于其它菌株,iss基因的存在与鸡大肠杆菌的毒力问有一定的相关性。     

鸡大肠杆菌iss基因的克隆测序及原核表达

本实验对鸡大肠杆菌O2血清型菌株进行iss基因克隆测序，并在此基础上设计出两对套式引物，分别对含信号肽Miss基因序列和不含信号肽Miss基因序列进行扩增，并与原核表达载体pGEX-6p-1连接进行原核表达。iss基因克隆测序的结果与两组国外发表Miss基因序列进行比对，其同源性达100％。SDS—PAGE鉴定显示融合蛋白获得了较理想的表达，融合蛋白分子量分别约为36kD和33kD。     

鸡大肠杆菌P型菌毛结构基因(papA)的克隆与序列测定

根据国外发表的 4种来源不同的人尿道致病性大肠杆菌 pap A基因序列 ,在其保守区设计了带有 Sac /Bam H 酶切位点及保护碱基的 1对引物 ,应用 PCR从 1株带有 MRHA特性的鸡大肠杆菌染色体上扩增到 1个阳性产物 ,经酶切、连接、转化和筛选 ,得到 PCR产物的阳性克隆。通过对 PCR产物核酸序列测定 ,确证所扩增和克隆的 DNA片段为 pap A基因     

禽源大肠杆菌和沙门氏菌耐药性研究

本试验主要对山东、河南及安徽共5个养禽场分离的大肠杆菌和沙门氏菌进行耐药性研究．研究结果表明：所有分离菌株对大多数抗菌药物的耐药率都非常高,并且多重耐药情况严重．大肠杆菌和沙门氏菌对磺胺类药的耐药性几乎达到100％,对氨苄西林、四环素、氟喹诺酮类的耐药性也非常严重。     

禽致病性大肠埃希菌黏附素研究进展

黏附素是具有黏附宿主细胞能力的细菌表面结构的统称,是直接介导细菌对宿主细胞黏附的物质,故又称定居因子(colonization factor)。在禽致病性大肠埃希菌侵袭宿主组织并引起宿主发病的过程中,黏附是病原菌接触和感染细胞的第一步,因此,黏附素黏附宿主上皮细胞并使宿主致病的作用机理引起了研究者的广泛关注。论文通过对禽致病性大肠埃希菌黏附素的组成成分、黏附机制、种类、分子生物学特性以及相应的黏附素受体等进行相关综述,为研究禽大肠杆菌病的发病机理及对该病进行免疫预防提供理论依据。     

狂犬病病毒糖蛋白基因在原核细胞中的表达

将狂犬病病毒糖蛋白（ＲＶｇｐ）基因ＢｇｌⅡ片段（１６７５ｂｐ）分别正向插入到原核高效表达载体ｐＥＴ－１７ｂ和ｐＥＴ－１７ｂ２（用ＳａｃⅠ－ＮｄｅⅠ缺失掉ｐＥＴ－１７ｂ６０ｂｐ含起始密码子ＡＴＧ小片段）的ＢａｍＨⅠ切点，构建重组质粒ｐＥＴ－１７ｂＲＶｇｐ和ｐＥＴ－１７ｂ２ＲＶｇｐ。将其分别转化表达受体菌Ｅ．ｃｏｌｉＢＬ２１（ＤＥ３）和Ｅ，ｃｏｌｉＢＬ２１（ＤＥ３）ｐｌｙｓＳ．ＩＰＴＧ诱导表达，菌体经超声波裂解处理后ＳＤＳ－ｐＡＧＥ，染色，在分子量约６００００处可见重组质粒表达的较宽的蛋白带，以抗ＲＶｇｐＭｃＡｂ进行Ｗｅｓｔｅｒｎ－ｂｌｏｔ检测，表明该表达蛋白为ＲＶｇｐ。通过扫描显示，表达的ＲＶｇｐ占菌体总蛋白的１０％～１４％，其中ｐＥＴ－１７ｂ２ＲＶｇｐ在Ｅ。ｃｏｌｉＢＬ２１（ＤＥ３）中的表达量最高。     

耐氟喹诺酮类药物禽源大肠埃希菌gyrA基因的检测分析

探讨不同禽源大肠埃希菌中喹诺酮类药物的耐药情况及耐药基因gyrA的分布和突变特征。采用K-B药敏纸片法、gyrA基因的PCR扩增,对9株大肠埃希菌进行喹诺酮类药物试验,并将gyrA基因的PCR产物测序,对测序结果采用DNA MAN、DNA Star、MEGA6等软件分析。药敏试验结果表明,C1、C2、C3菌株对左氧沙星、氧氟沙星、环丙沙星、诺氟沙星敏感,D1、D2、D3、B1、B2和B3菌株对左氧沙星、氧氟沙星、环丙沙星、诺氟沙星均表现为耐药和中介;gyrA基因的测序结果表明,除B1菌株有1处核苷酸突变位点和B2菌株有14处核苷酸突变位点;B2菌株gyrA基因的氨基酸突变发生在87位Ile→Val替代、101位Leu→Met替代、102位Ala→Ser替代、129位Lys→Gln替代。9株禽源大肠埃希菌的同源性和进化树分析表明,不同禽源耐氟喹诺酮类药物的大肠埃希菌菌株中B2菌株gyrA基因与其他9株菌株相比,同源性在90%左右,进化树不在一个分支上,研究中的B2菌株将为大肠埃希菌的氟喹诺酮类耐药机制的研究提供候选菌株。     

禽大肠杆菌毒力因子的研究进展

禽致病性大肠杆菌是毒力基因的贮存宿主,多种毒力因子的协同作用使其产生致病性,而耐药性的产生加大了对其防治的难度。本文主要对禽大肠杆菌毒力因子的种类、毒力特性及分子流行病学等研究进展进行了概述,为深入研究禽大肠杆菌病的致病机理和制定防控措施提供理论依据。     

大肠杆菌多重耐药基因AcrA的PCR检测

临床分离的大肠杆菌多重耐药菌株越来越多,大肠杆菌形成多重耐药的原因主要与大肠杆菌染色体上存在的AcrAB外排系统有关。本试验首先用环丙沙星、四环素和氯霉素对敏感大肠杆菌进行多重耐药诱导,使敏感大肠杆菌具有了多重耐药性。然后对多重耐药性大肠杆菌的基因组DNA进行了提取,以基因库中AcrA基因的编码序列设计引物,以多重耐药性大肠杆菌基因组为模板,对AcrA基因进行了PCR扩增和测序,得到了1005bp的片断,并与基因库中AcrA基因的序列进行了比较,同源性为99．8％。结果表明：AcrA基因与大肠杆菌的耐药性有关。