饲粮能量水平对乌金猪脂肪组织脂类合成代谢相关基因表达的影响

本试验旨在研究不同饲粮能量水平对乌金猪脂肪组织脂类合成代谢相关基因表达的影响.选取体重约15 kg的乌金猪54头,随机分为3组,每组3个重复,每个重复6头猪,分别饲喂消化能为11.74(低能组)、12.89(中能组)和14.22 MJ/kg(高能组)的3种饲粮.分别在体重为30、60和100kg时屠宰,测定胴体脂肪率,...     

两种日粮对乌金猪脂肪组织脂类分解代谢相关基因表达的影响

为探讨不同日粮对乌金猪不同生长阶段脂类分解代谢的差异。选用乌金猪为研究对象,以本实验室前期研究确定的乌金猪适宜能量与蛋白水平的日粮和美国NRC(1998)推荐的猪营养需要量为依据,设计和配制乌金猪WJ和NRC日粮。选取体重约23kg的乌金猪36头,公母各半,随机分为2个处理组,每个处理下设3个重复,每个重复6头。分别于30kg、60kg和100kg体重时屠宰,通过real-time PCR比较了4个脂肪分解代谢相关基因在脂肪组织中表达的差异。结果显示:在各个屠宰体重,WJ日粮组HSL基因相对表达量均高于NRC日粮组(P>0.05);在各个屠宰体重,WJ日粮组LPL基因相对表达量均显著高于NRC日粮组(P<0.05);在30kg和60kg屠宰体重,WJ日粮组CPT-1基因的相对表达量显著高于NRC日粮组(P<0.05),但在100kg屠宰体重水平时,WJ日粮组CPT-1基因的相对表达量低于NRC日粮组(P>0.05);在各个屠宰体重,WJ日粮组PPARγ基因的相对表达量均高于NRC日粮组,在30kg屠宰体重达到显著水平(P<0.05)。结果提示:WJ日粮通过上调脂肪分解代谢相关基因的表达促进了脂肪组织脂肪的分解,减少了脂肪沉积。     

日粮能量水平对乌金猪肌纤维类型基因表达的影响

为了研究日粮能量水平对乌金猪肌肉组织肌纤维类型基因表达的影响,揭示能量水平对肉品质的影响机制,并为通过营养措施调控猪肉品质提供科学依据,试验选取健康、体重约15 kg的乌金猪18头,随机分为3组,设低、中、高3个能量水平（11.84、12.96、14.18 MJ/kg）,于体重100 kg时屠宰,取适量腰大肌、半腱肌、股二头肌、菱形肌、背最长肌组织样品,于-80℃保存,并检测不同肌肉组织中MyHCⅠ、2a、2x、2b基因的m RNA相对表达量。结果表明：乌金猪菱形肌以Ⅰ型纤维为主,腰大肌以2a和2x型为主,半腱肌以Ⅰ型、2a和2x型为主;背最长肌以Ⅰ型和2b型为主,股二头肌以Ⅰ型、2b和2x型为主。在低、中、高能量水平下,菱形肌Ⅰ型mRNA的比例极显著高于其他部位（P<0.01）;背最长肌2a型m RNA的比例显著低于其他部位（P<0.05）;菱形肌2b型mRNA的比例极显著低于其他部位（P<0.01）;半腱肌2x型mRNA的比例最高,极显著高于菱形肌（P<0.01）。不同肌肉组织中同一亚型mRNA比例随着能量水平的不同而变化,其中半腱肌高能量水平的2b型mRN...     

日粮蛋白质水平对乌金猪肝脏组织脂类代谢相关基因表达的影响

为探讨日粮蛋白质水平对乌金猪肝脏组织脂类代谢相关基因表达的影响,试验选取体重约15 kg的乌金猪54头,随机分为3组,每组18头,为低、中和高蛋白质组,其在15～30、30～60及60～100 kg生长阶段的蛋白质水平分别为14%、12%、10%,16%、14%、12%和18%、16%、14%。猪在体重为30、60和100 kg时屠宰,取其肝脏组织,Real-time PCR定量检测脂类代谢相关基因的表达水平。结果显示,在30、60和100 kg时,乌金猪肝脏组织中ACC、FAS、SREBP-1C基因的表达水平均随着蛋白质水平的升高而降低;CPT-Ⅰ和PPARα基因的表达水平则随着蛋白质水平的升高而升高。由此表明,日粮高蛋白质水平显著降低肝脏脂肪酸合成代谢基因(ACC、FAS和SREBP-1C)的表达(P<0.05),提高脂肪酸分解代谢基因(CPT-Ⅰ和PPARα)的表达水平(P<0.05);脂肪酸合成减少,且被氧化的量增加,两者共同作用导致用于合成甘油三酯(TG)的脂肪酸含量降低,从而减少了从肝脏组织被运输到各个组织的TG含量,使机体沉积TG的能力降低。     

日粮能量水平对乌金猪肌肉组织蛋白质翻译起始因子基因表达的影响

试验旨在研究日粮不同能量水平对乌金猪肌肉组织蛋白质翻译起始因子基因表达的影响。选取健康、体重约15 kg的乌金猪54头,随机分为3组,每组3个重复,每个重复6头猪。各组猪饲喂不同能量水平的日粮（11.84、12.97、14.18 MJ/kg）,试验分15～30、31～60、61～100 kg 3个阶段。各阶段换料过渡期为7 d,分别于猪30、60、100 kg时分批屠宰。结果显示,高能量水平日粮可降低猪的瘦肉率和肌肉粗蛋白含量,增加肌内脂肪含量,降低蛋白质翻译起始因子基因的表达。屠宰体重为30 kg时,低能量组猪的真核起始因子-2B(eIF-2B)、真核起始因子-4E(eIF-4E)表达水平显著高于高能量组（P<0.05）,真核起始因子-4B (eIF-4B)基因表达量显著高于中能量组（P<0.05）。屠宰体重为60 kg时,高能量组和中能量组猪的eIF-2B、eIF-4B、eIF-4E表达水平显著低于低能量组（P<0.05）。屠宰体重为100 kg时,高能量组猪的真核起始因子-4A (eIF-4A)的相对表达水平显著低于低能量组和中能量组（P<0.05）,低能...     

2种日粮对不同生长阶段乌金猪脂肪组织脂类合成代谢相关基因表达的影响

为探讨不同日粮对乌金猪不同生长阶段脂类合成代谢相关基因表达的影响,试验选取体重约23 kg乌金猪36头,公、母各半,随机分为2个处理组,每个处理组3个重复,每个重复6头。处理1组饲喂乌金猪日粮,处理2组饲喂NRC日粮。分别于30、60和100 kg体重时屠宰,通过Real-time PCR比较研究3个脂肪合成代谢相关基因在脂肪组织中表达的差异。结果显示,体重30 kg时,处理1组脂肪酸合成酶(fatty acid synthase,FAS)的相对表达量显著低于处理2组(P<0.05),60和100 kg时,处理1组FAS基因的相对表达量高于处理2组,60 kg时达到显著水平(P<0.05);在各个体重时,处理1组固醇调节元件结合蛋白1c(sterol regulator element binding protein-1c,SREBP-1c)的相对表达量均高于处理2组,30和60 kg时达到显著水平(P<0.05);在各个体重时,处理1组二酰基甘油酰基转移酶1(diacylglycerol acyltransferase-1,DGAT-1)的相对表达量低于处理2组,100 kg时达到显著水平(P<0.05)。提示,不同日粮调控不同体重乌金猪脂类合成代谢相关基因表达存在着差异。     

日粮蛋白质水平对乌金猪脂肪代谢相关酶活性的影响

为研究日粮不同蛋白质水平对乌金猪脂肪代谢相关酶活性的影响。选取体重约15 kg的乌金猪54头,随机分为3组,每组3个重复,每个重复6头,在15~30 kg体重阶段饲喂18%(高蛋白质组)、16%(中蛋白质组)和14%(低蛋白质组)蛋白质水平的日粮,30~60 kg体重阶段饲喂16%(高蛋白质组)、14%(中蛋白质组)和12%(低蛋白质组)蛋白质水平的日粮, 60~100 kg体重阶段饲喂14%(高蛋白质组)、12%(中蛋白质组)和10%(低蛋白质组)蛋白质水平日粮,在体重30、60和100 kg体重时分批屠宰,取肝脏及背部皮下脂肪组织测定脂肪酶(LPS)、葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G-6-PDH)和苹果酸脱氢酶(MDH)活性。结果表明,在30 kg体重时,日粮蛋白质水平对乌金猪肝脏和脂肪组织中脂肪代谢相关酶活性差异不显着(P>0.05),在60和100 kg体重时,高蛋白质日粮组乌金猪肝脏和脂肪组织LPS的活性明显高于低蛋白质日粮组(P<0.05),G-6-PDH和MDH活性则明显低于低蛋白质日粮组(P<0.05)。因此,高蛋白质日粮增加了生长中后期乌金猪的内源性能量释放,可能影响了体脂沉积比例。     

断奶仔猪饲粮能量水平和饲粮组成对小肠黏膜形态的影响

该试验研究了低能量水平饲粮对断奶仔猪肠黏膜形态的影响，同时观测饲粮组成(通过改变乳糖／蛋白质比)与肠黏膜形态的关系。试验分三个处理组，分别是令断奶仔猪采食低乳糖／高蛋白质饲粮(LL/HP)、对照饲粮(C)和高乳糖／低蛋白质饲粮(HL/LP)，三种饲粮能量水平相同。仔猪断奶后第四天剖杀取小肠前段、中段、后段作组织切片，在显微镜下观察其绒毛高度和隐窝深度。结果表明，采食三种低能量饲粮的仔猪，其绒毛都有不同程度的缩短，隐窝都表现加深。与采食其它两种饲粮的仔猪相比，采食HL/LP饲粮的仔猪小肠前段有较高的绒毛高度(P＜0．01)和较浅的隐窝深度(P＜0．01)。说明断奶仔猪饲粮的能量水平和饲粮组成对其肠黏膜形态都有影响。     

不同日粮蛋白水平对乌金猪生长性能和胴体品质的影响

旨在研究日粮不同蛋白水平对乌金猪生长性能及胴体品质的影响及最佳生长性能和胴体品质所需的日粮适宜蛋白水平。选取体重15妇左右的乌金猪90头,随机分为5组,每组18头。试验采用单因子随机分组设计,在15～30、30～60和60～100kg阶段的日粮蛋白水平分别为最高蛋白水平（HHP,18％、16％和14％）、中高蛋白水平（HMP,17％、15％和13％）、中蛋白水平（MMP,16％、14％和12％）、中低蛋白水平（MLP,15％、13％和11％）和最低蛋白水平（LLP,14％、12％和10％）。试验期至体重达100kg,统计日增重及料重比;分别在30、60和100kg体重时屠宰,测定胴体组成指标,采用模糊综合评定系统分析并确定最佳生长性能和胴体品质日粮适宜蛋白水平。结果表明,随日粮蛋白水平的降低,各生长阶段的日增重逐渐降低,料重比逐渐升高,15～30k阶段（除HHP与LLP外）日增重无显著差异（P〉0．05）,30～60和60～100kg阶段日增重差异显著（P〈0．01或P〈0．05）,由高到低5个蛋白水平达100kg体重的时间分别为163、168、173、179和185d。胴体品质在30kg体重时,除板油重和眼肌面积外其他性状无明显差异（P〉O．05）。在60和100kg体重时随日粮蛋白水平的降低,瘦肉重、瘦肉率和眼肌面积降低,脂肪重、脂肪率和背膘厚增加,高、中、低蛋白组间差异显著（P〈0．05或P〈0．01）。以无脂瘦肉重为指标,通过拟合曲线确定15～30、30～60和60～100kg阶段最佳生长性能所需的日粮适宜蛋白水平分别为15．95％、14．30％和11．81％。以瘦肉率、背膘厚、眼肌面积为评定胴体品质的代表指标,通过综合评定确定30、60和100kg体重时最优胴体品质适宜的日粮蛋白水平分别为16．47％、13．71％和10．72％。综合评定无脂瘦肉重和胴体品质,15～30、30～60和60～100kg阶段乌金猪获得最佳无脂瘦肉重和胴体品质的日粮适宜蛋白水平分别为14．98％、11．34％和11．71％。研究结果为乌金猪的合理饲养提供科学依据。     

乌金猪日粮能量水平对生长性能和胴体品质的影响

本文旨在研究日粮不同能量水平对乌金猪生长性能及胴体品质的影响,采用模糊综合评定系统分析确定最佳生长性能和胴体品质所需的日粮适宜能量水平.试验采用单因子随机分组设计,选取体重15 kg左右的乌金猪90头,随机分为5组,每组18头.日粮能量水平分别为14.22、13.60、12.98、12.36和11.74 MJ/kg.结果表明,随日粮能量水平的降低,不同生长阶段的日增重逐渐降低,料重比逐渐升高,15～30 kg阶段日增重无显著差异(P>0.05).在60和100 kg体重时随日粮能量水平的降低,瘦肉重、瘦肉率和眼肌面积增加,脂肪重、脂肪率和背膘厚降低.通过拟合曲线确定15～30 kg、30～60 kg和60～100 kg阶段最佳生长性能所需的日粮适宜能量水平分别为14.01、13.15和12.98 MJ/kg.确定15～30 kg、30～60 kg和60～100 kg阶段时获得最优胴体品质时,适宜的日粮能量水平分别为11.13、11.36和11.71 MJ/kg.综合评定生长性能和胴体品质,15～30 kg、30～60 kg和60～100 kg阶段,乌金猪获得最佳生长性能的胴体品质的日粮适宜能量水平分别为13.55、12.81和13.20 MJ/kg.研究结果为乌金猪的合理饲养提供科学依据.     

UCP3基因在巴马猪和藏猪脂肪组织中的表达和甲基化分析

为探究解偶联蛋白3（uncoupling protein 3,UCP3）基因在巴马猪和藏猪皮下脂肪组织中的表达和甲基化水平,试验采用实时荧光定量PCR技术检测UCP3基因在巴马猪和藏猪皮下脂肪组织中的mRNA表达水平;针对猪UCP3基因启动子区域（-3 580~+920 bp）,利用在线软件MethPrimer对该区域进行CpG岛预测,并采用亚硫酸氢盐测序法（bisulfite sequencing PCR,BSP）检测其甲基化水平,探究UCP3基因甲基化水平在巴马猪和藏猪中的差异。结果显示,巴马猪皮下脂肪组织UCP3基因表达量显著高于藏猪（P<0.05）;在UCP3基因启动子区预测到3个CpG甲基化岛,分别是CpG island1（-3 171~-2 928 bp）、CpG island2（-154~-2 bp）和CpG island3（+648~+806 bp）,其中CpG island1和CpG island3的甲基化水平在巴马猪和藏猪中差异较小,而藏猪CpG island2的甲基化水平（42.61%）高于巴马猪（24.49%）。本研究绘制了2个猪种CpG island2甲基化水平的黑白点图,其中CpG位点为4、8、9、10、11、12、15,藏猪甲基化频率分别比巴马猪高28.26%、17.39%、26.09%、26.09%、26.09%、23.91%和34.78%。在CpG island2处预测到3个转录因子结合位点（SP2、PPARγ和EGR1）。结果表明,巴马猪和藏猪皮下脂肪组织中UCP3基因mRNA水平的表达差异可能是由于CpG island2的甲基化水平不同所导致,藏猪DNA甲基化水平在一定程度上阻碍了转录因子与启动子调控区域的结合,从而抑制了UCP3基因的表达。     

日粮代谢能水平对北京油鸡脂肪沉积和LPL基因表达的影响

试验旨在研究不同日粮代谢能水平对北京油鸡脂肪沉积及脂蛋白酯酶（LPL）基因mRNA表达影响。试验以3周龄北京油鸡公鸡为研究对象,将480只公鸡随机分为4组,分别饲喂4个代谢能水平的日粮（12.122、12.540、12.958和13.376 MJ/kg）,每个处理组5个重复,每个重复24只鸡。试验期为10周。采用荧光定量PCR方法检测LPL基因mRNA表达水平。结果表明,日粮代谢能水平对鸡体脂沉积各项指标和LPL基因mRNA表达水平影响极显著,随日粮代谢能水平提高,各项体脂沉积指标极显著上升,胸肌和腿肌IMF、皮脂重和皮脂率在ME3达到峰值,LPL基因mRNA表达水平在ME2组达到峰值（P＜0.01）。LPL基因mRNA表达水平与腹脂率、皮脂重和皮脂率呈显著正相关（P＜0.05）。研究结果提示,日粮代谢能水平显著影响北京油鸡体脂沉积和LPL基因mRNA表达;LPL基因表达影响北京油鸡体脂沉积状况。     

Effects of Dietary Energy Density on Plasma Glucose and Lipid Profile, Morphological Aspects and Chemical Characteristics of Adipose Tissue in Finishing Pigs

Peroxisome proliferator-activated receptor-γ (PPAR-γ) plays a pivotal role in controlling adipogenesis. We hypothesized that changes in dietary energy density might alter fat deposition in finishing pigs via modulation of the expression of PPAR-γ. To test this hypothesis, thirty female finishing pigs were fed diets containing low (LD), medium (MD) or high (HD) energy density. Blood samples were collected on day 53, and then the pigs were sacrificed to collect samples of the dorsal subcutaneous (ST), abdominal (AT) and mesenteric (MT) adipose tissue. Compared with pigs fed the MD diet, malate dehydrogenase activity was increased in the ST and MT of pigs fed the HD diet, while activity was decreased in the MT of pigs fed the LD diet (P < 0.05). Glucose-6-phosphate dehydrogenase activity was increased in all three fat depots of pigs fed the HD diet (P < 0.05) in comparison with pigs fed the MD diet. Both HD and LD diets increased the size of the adipocytes in the AT and MT (P < 0.05). Pigs fed the HD diet had a higher cell proliferation index in the ST compared with pigs fed the other two diets (P < 0.05). Compared with pigs fed the MD diet, a decreased apoptosis index was seen in the ST of pigs fed the HD diet, and in the AT of pigs fed the LD diet, as well as in the MT of both HD and LD fed pigs (P < 0.05). PPAR-γ positive percentage was elevated in the ST and MT of HD fed pigs compared with pigs fed the MD and LD diets, while it was decreased in the ST of LD compared with MD fed pigs (P < 0.05). These results suggest that dietary energy density may regulate fat deposition in finishing pigs. It is possible that feeding a high energy diet may induce fat deposition via up-regulation of  PPAR-γ expression.     

大白猪ZnT基因家族生物信息学分析及组织表达研究

【目的】 分析大白猪溶质载体30A （ZnT）基因家族成员的生物学特性,并检测其在猪不同组织中的表达水平,为研究ZnT基因家族调控锌的代谢提供科学依据。【方法】 使用多种生物信息学软件对猪ZnT基因家族10个成员（ZnT1~ZnT10）进行序列分析,包括基序、保守结构域、跨膜结构域、进化树、蛋白相互作用分析;使用实时荧光定量PCR方法检测ZnT基因家族在6月龄大白猪心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、卵巢、乳腺中的表达差异。【结果】 ZnT1~ZnT10基因定位到猪的8条染色体上,分子质量在41.61~85.30 ku之间;等电点介于6.27~9.30之间,其中ZnT6等电点最高为9.30,ZnT1等电点最低为6.27。ZnT基因家族中,除ZnT3外都属于稳定蛋白,除ZnT5、ZnT9外都含有6层跨膜结构域,除ZnT6、ZnT9外所含基序顺序均一致,Cation-efflux是ZnT基因家族共有的保守结构域。ZnT6与ZnT2、ZnT3、ZnT7、ZnT9蛋白关联程度最高,ZnT1与ZnT3蛋白关联程度最高,ZnT8与其他家族成员间关系较远。ZnT基因家族序列在哺乳动物进化过程中相对保守。ZnT基因家族的10个基因在大白猪肺脏中相对表达量较高,在心脏中相对表达量较低,除ZnT5、ZnT7、ZnT9外的ZnT基因家族的其他成员在肌肉中几乎不表达。【结论】 ZnT家族属于跨膜结构蛋白,所含基序顺序基本一致,Cation-efflux是ZnT基因家族共有的保守结构域。ZnT基因家族多数成员在大白猪肺脏中表达量最高,在心脏和肌肉中相对表达量较低。     

不同饲养环境合作猪脂肪组织生脂基因 mRNA表达水平的比较研究

合作猪是生长在高寒草原以放牧为主的珍稀高原型猪种,为了探讨其品种特性的分子机制,分析测定了原产地合作猪及长期在不同环境和饲养条件下异地饲养合作猪脂肪组织脂肪生成的关键酶脂肪合成酶(FAS)、乙酰辅酶A羧化酶(ACC)1和转录因子固醇调控元件结合蛋白(SREBP)-1c、碳水化合物调控元件结合蛋白(ChREBP)mRNA表达水平,并与杜×大×长三元杂交猪进行了对比。试验结果发现,合作猪脂肪组织FAS、ACC1及ChREBP mRNA水平显著低于三元杂交猪(P<0.05),在长期异地饲养后,这些基因mRNA表达水平提高(P<0.05),而SREBP-1c mRNA表达水平在3个群体中没有明显变化(P>0.05)。结果提示,合作猪由于对低能量、低碳水化合物粗饲的长期适应,表现出脂肪组织生脂基因表达水平较低的生理学特性。     

能量水平和来源对后备母猪卵母细胞质量及相关基因表达的影响

选择初始体质量（59&#177;4．2）kg的长白&#215;大白杂交母猪54头,采用3&#215;2试验设计,研究日粮能量水平和来源对后备母猪卵泡发育和卵母细胞体外成熟以及排卵前卵丘-卵母细胞复合物（COCs）中生长分化因子-9（GDF-9）、骨形态发生蛋白-15（BMP-15）、促黄体素受体（LHR）、促卵泡素受体（FSHR）mRNA表达的影响。3个能量水平分别为NRC推荐能量需要的87．5％、100％和112．5％;每个能量水平分别以淀粉和油脂为主要能量来源。试验母猪在第2个发情期的第19天屠宰。结果表明：随能量水平升高,大卵泡数增多（P〈0．05）,能量来源对卵泡数量没有显著影响（P〉0．05）;高能量水平下卵丘扩散程度（P〈0．05）和卵母细胞成熟的比例最高（P〈0．01）,能量来源对卵丘扩散程度影响差异不显著（P〉0．05）,淀粉组卵母细胞成熟的比例高于油脂组（P〈0．05）;基因分析表明,饲喂低能量水平组的GDF-9和BMP-15mRNA的表达量最高（P〈0．05）,淀粉组上调GDF-9mRNA的表达（P〈0．05）,能量来源对BMP-15mRNA表达影响差异不显著;各处理小卵泡的卵丘-卵母细胞复合物中GDF-9和BMP-15mRNA表达量高于大卵泡（P〈0．01）;高能量水平组的LHR和FSHRmRNA表达量最高（P〈0．05）,能量来源对大卵泡卵丘-卵母细胞复合物中FSHRmRNA表达无显著影响,淀粉组上调LHRmRNA表达（P〈0．05）。研究表明,提高日粮能量水平增加母猪排卵前大卵泡数量和卵母细胞成熟的比例,以淀粉为能量来源对卵泡数量没有显著影响,但提高了卵母细胞成熟的比例;能量影响卵泡数量和卵母细胞成熟可能与GDF-9、BMP-15和LHR、FSHRmRNA表达有关。