鸡传染性支气管炎病毒呼吸型和肾型毒株的血清交叉中和试验

利用SPF鸡制备了肾型传染性支气管炎山东分离株(KIBV-SD)和呼吸型传染性支气管炎M41株的单因子血清,进行了肾型传支(KIBV-SD)与呼吸型传支(M41)血清交叉中和试验,计算肾型和呼吸型传支病毒抗原性的相关系数(R)。结果表明:KIB-SD单因子血清与其自身病毒进行中和试验,测得血清中和抗体几何平均效价值为23.56;KIB-SD单因子血清与M41V进行中和试验,测得血清中和抗体几何平均效价值为3.56;M41单因子血清与其自身病毒进行中和试验,测得血清中和抗体几何平均效价值为24.51;M41单因子血清与KIBV-SD进行中和试验,测得血清中和抗体几何平均效价值为6.07。经免疫学方法计算,2个毒株间抗原性相关系数R=19.34%(<25%),说明KIBV-SD和M41分别属于不同的血清型,二者之间的抗原性交叉较低。     

牛流行热病毒微量血清中和试验

病毒中和试验是最敏感而特异的血清学方法。一些研究者以牛流行热病毒与血清混合对乳鼠(1～3日龄)脑内接种的方法,或接种于转管培养的BHK_(21)细胞上或接种在微量滴定板上培养的Vero细胞上进行了常量或微量的中和试验。在澳大利亚,将微量血清中和试验作为牛流行热流行病学调查的必要手段,也是实验室诊断牛流     

用微量间接血凝试验检出牛传染性鼻气管炎(IBR)病毒血清抗体的试验报告

用于检出牛传染性鼻气管炎病毒血清抗体的最普通方法是病毒——血清中和试验,此法检出的抗体水平较低,且费钱、费时,手续繁锁,很难适应港口检疫的需要.微量间接血凝试验(Micro—Passive hemagglutin～(a)tion·test简写MPH)为我们提供了一种简便、快速、敏感的血清学试验方法,很有希望取代中和试验而成为新的常规检疫手段.本文着重介绍微量间接血凝试验的操作程序,同时,用MPH试验与中和试验进行了比较.     

从细胞培养液中提纯狂犬病病毒和分离糖蛋白抗原的初步试验

在狂犬病诊断和实验研究中需要比较纯的病毒抗原,以便进行检测和制备免疫血清,在研制狂犬病病毒单克隆抗体(McAb)时,更需要纯而专一的抗原筛选杂交瘤细胞株;在筛选具有中和活性的McAb时,以诱导产生中和抗体的糖蛋白作抗原,具有明显的适用性和针对性,为此进行了本课题研究.1 材料和方法     

蓝舌病血凝抑制试验中非特异性反应排除方法的试验

蓝舌病病毒迄今已发现24个血清型,定型工作对该病的诊断、防制都有着重要的意义。该病毒的定型方法除各种形式的中和试验(包括蚀斑抑制试验)外,其他方法也在探索和发展中,八十年代许多学者先后发展和建立了血凝抑制试验,并认为该试验具有     

应用HI试验进行传染性支气管炎的血清学诊断

传染性支气管炎病毒(IBV)的血球凝集抑制试验(HI)是70年代中、后期由欧洲的科学工作者首先提出来的。因为其不似病毒中和试验(VN)那样,HI 试验的操作程序相当简单,而且可大约在数小时内取得结果,因此人们对     

PEDV 流行毒株抗体对不同亚型毒株的中和试验

猪流行性腹泻病毒(PEDV)是一种通过小肠感染,引起猪呕吐、腹泻、脱水的急性高度接触性传染病。2010年起在我国迅速暴发,对仔猪的致死率高达80%～100%。PEDV可分为G1 (G1a、G1b)与G2 (G2a、G2b)基因亚型,各亚型病毒纤突(S)蛋白基因序列存在缺失、插入和大量点突变。为进一步研究S蛋白序列的差异是否造成病毒抗原性的差异,本试验采集猪流行性腹泻流行毒感染猪只肛拭子进行PEDV-S蛋白基因序列比对分析,并对感染康复猪只采集血清进行中和试验,研究PEDV流行毒株血清抗体与不同基因亚型毒株中和反应情况。结果显示,流行毒(G2a)感染猪只血清抗体中和PEDV不同亚型病毒株,中和能力存在显着差异。对PEDV-A (G2a)毒株的中和能力最强,均值为1:60,对PEDV-B(G2b)株中和能力次之,均值为1:20,对CV777 (G1a)毒株无中和能力。     

测定狂犬病病毒中和抗体的微量免疫酶试验

在Kazuakz等报道的微量免疫酶技术(MIET)的基础上,以健康细胞对照孔OD值均数加3倍标准差作为间接ELISA判定标准,进而建立了求中和剂量的新方法.通过用中和99%病毒的一致判定标准同经典的小鼠中和试验(MNT)比较看,本试验所建立的方法可代替MNT.     

赤羽病微量血清中和试验方法的建立与应用

以自美国、澳大利亚引进的赤羽病病毒和标准阳性血清,参考国际上常规微量血清中和试验方法,建立了赤羽病(AKV)微量血清中和试验方法。用以对澳大利亚进口的四批绵羊(共1092头)作赤羽病检疫,检出血清阳性反应绵羊70头,有效地防止了国外赤羽病的传人。     

马病毒性动脉炎病毒中和试验的建立以及与ELISA方法的比较研究

参照世界动物卫生组织(OIE)《陆生动物诊断与疫苗手册》,建立了马病毒性动脉炎病毒中和试验,并采用马病毒性动脉炎病毒中和试验(Virus Neutralization Test,VNT)和酶联免疫吸附试验(ELISA)两种方法,对广东省部分地区马场共182匹马血清和7份标准阴阳性血清进行马病毒性动脉炎抗体的检测,并对两种方法进行比较分析,结果两种方法的阳性符合率和阴性符合率分别为43.48%和96.34%,总符合率为93.12%;以我们建立的VNT作为马病毒性动脉炎抗体检测的"金标准",试验中所用的ELISA方法的敏感性和特异性分别为71.43%和93.96%。因此,我们认为在马病毒性动脉炎抗体检测中,ELISA的敏感性以及与VNT的阳性符合率较低,不适合作为VNT的替代方法。     

牛睾丸原代细胞在牛病毒性腹泻/粘膜病中和试验上的应用

牛病毒性腹泻/粘膜病(BVD—MD),是我国进口检疫应检疫病之一。常用的实验室诊断方法有中和试验和血清病毒分离。由于犊牛睾丸原代细胞(BT细胞)对BVD—MD病毒最敏感,常用于病毒分离。而在检测中和抗体效价时,人们常用牛肾次代细     

用微量酶标抗体血清中和试验检测猪瘟病毒抗体的初步研究

检测猪瘟病毒(HCV)抗体的实验室诊断方法有琼脂扩散试验、对流免疫电泳试验、补体结合试验、间接酶标抗体试验和间接荧光抗体试验等。但这些实验的敏感性都比较低,而且不能区分出HCV和牛病毒性腹泻病毒(BVDV)的抗体。据报道,用酶标抗体和荧光抗体血清中和试验检测HCV     

血清学诊断传染性支气管炎的血凝抑制试验

传染性支气管炎病毒(IBV)的血凝抑制试验在70年代末首先由欧洲学者提出,由于它比病毒中和(VN)试验简单、快速,故引起广泛重视。 与新城疫病毒不同,大多数IBV毒株不能自然凝集鸟类红细胞,但用磷脂酶C1型     

狂犬病中和抗体检测FAVN方法的建立、应用和CMA资质认证

狂犬病荧光抗体病毒中和试验(FAVN)为细胞水平的病毒中和试验,检测的敏感性、特异性和重复性均较好,是世界动物卫生组织(OIE)推荐进行动物狂犬病中和抗体定量检测的标准方法而广泛应用。本单位严格依照《OIE陆生动物检测与免疫手册》狂犬病章节的2.1.13.2.a,建立了动物狂犬病荧光抗体病毒中和试验(FAVN)方法,内部稳定运行后,又依据相关要求,先后3次与长春兽医研究所OIE狂犬病参考实验室进行平行比对,符合率100%,重复性良好。并以此获得广东省质量技术监督局实验室资质认定证书(CMA),FAVN方法正式纳入本单位的CMA资质检测项目,可面向社会出具相应资质检测报告,为狂犬病综合防控,临床检测等提供帮助和服务。     

用间接免疫过氧化物酶抗体试验测定猪传染性胃肠炎病毒抗体

免疫辣根过氧化物酶抗体(IPA)试验已被应用于检查猪传染性胃肠炎(TGE)病毒的抗体。从82头猪采集血清的IPA抗体滴度比其血清中和试验大约高7倍。IPA试验和血清中和试验二者的抗体滴度呈正相关(λ=+0.74)。IPA试验似乎有可能于常规实验室用于IGE的血清学诊断。     

影响病毒补体结合试验与中和试验的因素

补体结合试验与中和试验是血清学的诊断方法,许多家畜病毒病如口蹄疫、狂犬病,马脑脊髓炎可用补体结合试验帮助诊断,补体结合试验已被广泛的应用于人类及动物病毒疾病的流行病学及病原学的研究。中和试     

用酶联免疫吸附试验检测牛传染性鼻气管炎病毒抗体的敏感性和特异性

应用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测牛血清中牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)抗体的技术已经得到了发展。我们用ELISA方法检测从无IBR病毒牛群中采集的304份血清,其特异性为100%;检测经鼻内疫苗接种免疫后采集的62份牛血清,其诊断敏感性在免疫后第一个月为27.4%,第六个月为100%,检测标准血清中和抗体滴度≥1:2的303份牛血清,其敏感性为100%;463份随意诊断样品经比较试验证明ELISA检出血清阳性牛(61.6%)比标准血清中和试验(49.9%)要高。因此,我们认为ELISA具有技术上的优越性,可以作为一种常规诊断试验来检测牛血清中IBR病毒抗体。     

气管环组织培养中和试验及间接血凝试验检测鸡传染性支气管炎病毒抗原交叉反应的相关性研究

本试验利用气管环组织培养中和试验和间接血凝试验检测鸡血清中传染性支气管炎病毒(IBV)抗体,由此确定7株IBV之间的抗原交叉范围,从而比较这两种检测方法之间的相关性。结果表明,在间接血凝试验中7株IBV之间的抗原相关性R值介于3.13～100之间,而气管环组织培养中和试验R值介于O.78～100之间。中和试验R值变化范围较血凝试验宽得多,两种检测方法相关系数R可达0.853。     

应用间接免疫过氧化物酶抗体试验检測猪传染性胃肠炎病毒抗体

免疫过氧化物酶抗体检测猪传染性胃肠炎(简称TGE,下同)病毒抗体取得进展。从82头猪采集的血清中,其免疫过氧化物酶抗体效价比血清中和试验的抗体效价约高七倍。TGE抗体效价,其免疫过氧化物酶试验与血清中和试验之间呈正相关(r= 0.74)。免疫过氧化物酶抗体试验似乎可以作为一般实验室应用于TGE的血清学分析。     

狂犬病病毒特异性抗体保护致死性疾病攻击的效价测定

抗体在对抗多种感染源中扮演重要角色。中和作用是抗体最主要的功能,这些多功能蛋白的Fc及补体依赖活性是其在提供对抗多种病毒感染的保护能力中最关键的。体内抗病毒的保护作用很复杂,其中病毒中和作用(抗体使病毒失去感染力的能力,通常在体外进行)很重要,通常它仅仅占保护作用的一部分。荧光焦点抑制试验仍是检测狂犬病病毒中和抗体的金标准。除了中和试验,抗体的狂犬病病毒特异性抗原结合活性也可以通过酶联免疫吸附试验及其他备用方法进行测定。对于任何一种疾病,选择适当的试验测定抗体滴度,验证检测及如何进行判定是重要的考率因素。在替代保护分析试验和结果判断方法的选择中,必须仔细考虑检测狂犬病病毒抗体的单一实验室方法的固有局限性及所选方法的有效性。