Helical structures of ESCRT-III are disassembled by VPS4

During intracellular membrane trafficking and remodeling, protein complexes known as the ESCRTs (endosomal sorting complexes required for transport) interact with membranes and are required for budding processes directed away from the cytosol, including the budding of intralumenal vesicles to form multivesicular bodies; for the budding of some enveloped viruses; and for daughter cell scission in cytokinesis. We found that the ESCRT-III proteins CHMP2A and CHMP3 (charged multivesicular body proteins 2A and 3) could assemble in vitro into helical tubular structures that expose their membrane interaction sites on the outside of the tubule, whereas the AAA-type adenosine triphosphatase VPS4 could bind on the inside of the tubule and disassemble the tubes upon adenosine triphosphate hydrolysis. CHMP2A and CHMP3 copolymerized in solution, and their membrane targeting was cooperatively enhanced on planar lipid bilayers. Such helical CHMP structures could thus assemble within the neck of an inwardly budding vesicle, catalyzing late steps in budding under the control of VPS4.     

Crystal structure of defensin HNP-3, an amphiphilic dimer: mechanisms of membrane permeabilization

Defensins (molecular weight 3500 to 4000) act in the mammalian immune response by permeabilizing the plasma membranes of a broad spectrum of target organisms, including bacteria, fungi, and enveloped viruses. The high-resolution crystal structure of defensin HNP-3 (1.9 angstrom resolution, R factor 0.19) reveals a dimeric beta sheet that has an architecture very different from other lytic peptides. The dimeric assembly suggests mechanisms by which defensins might bind to and permeabilize the lipid bilayer.     

腺胃病变型鸡传染性支气管炎病原特性与多肽分析

从患传染性腺胃病的病鸡中分离到4 株病毒,其中H95株在SPF鸡胚上已稳定传代。病料及H95 传代后的鸡胚尿囊液经蔗糖梯度和CsCl密度梯度离心后的纯化物,电镜下为大小80～160 nm 、有囊膜的病毒颗粒,囊膜表面有纤突,呈冠状形态。病毒在CsCl中的浮密度为1.19～1.23 g/cm 3, 对热和氯仿敏感,耐酸,能抵抗1% 胰酶,无直接血凝性,经卵磷脂酶C处理后的病毒则能凝集鸡红细胞,能干扰新城疫病毒在鸡胚上的增殖。应用杂交瘤技术筛选出4 株抗H95株的阳性克隆,经Western blotting, 其中3 株单抗能识别54 kd 蛋白多肽,该条带也能与来自鸡传染性支气管炎病毒(IBV) M41 株的针对N 蛋白的单抗反应。中和试验表明, H95株与其它IBV 毒株在血清型上存在差异。上述研究结果初步表明,鸡传染性腺胃病的病原是冠状病毒科的成员,并且很可能是鸡传染性支气管炎(IB)中以腺胃病变为主要特征的一种新的致病病型。     

Virus-like particles and a spider mite intimately associated with a new disease of barley

The malting barley-producing regions in Montana and Canada are threatened with a new virus-like barley disease that appears to be etiologically novel. Ultrathin sections of diseased tissue contained enveloped, filamentous virus-like particles that measured 64 nanometers by 126 to 4000 nanometers. These lengths are unique for plant viruses. Unexpectedly, the spider mite,Petrobia latens, which has never been reported to be a vector of a pathogen, was found to transmit the causal agent from diseased plants to healthy barley, while noninfective mites failed to do so unless they were allowed prior access to diseased tissue.     

胆固醇对鸡传染性支气管炎病毒感染鸡胚肾细胞的影响

胆固醇是维持细胞膜脂筏稳定结构重要组分。一些囊膜病毒感染过程依赖胆固醇。研究利用Real Time PCR和病毒滴度试验,分析细胞膜和病毒囊膜胆固醇是否影响鸡传染性支气管炎病毒(IBV)感染鸡胚肾(CEK)细胞。结果表明,胆固醇萃取剂甲基-β-环糊精去除细胞膜胆固醇后,可抑制IBV感染CEK细胞并呈剂量依赖性,补充外源性胆固醇后,IBV感染力部分恢复,说明IBV感染依赖细胞膜胆固醇;去除细胞膜胆固醇可影响IBV感染侵入和释放过程。去除病毒囊膜胆固醇对IBV感染力无显著影响。IBV感染CEK细胞时依赖细胞膜胆固醇,而非病毒囊膜胆固醇。     

抗菌肽作为饲料添加剂的研究进展

抗菌肽是生物体内经诱导产生的一种具有生物活性的小分子多肽,具有广谱抗革兰氏阳性、阴性菌活性,对真菌、某些有包膜的病毒、寄生虫以及某些肿瘤细胞也有抑制作用。由于其独特的抗菌机制,其有可能成为新的抗生素替代品,同时也可作为一种高效优质的绿色饲料添加剂。本文介绍了抗菌肽的分类、功能、作用机理及在畜禽生产中的应用发展前景。     

套大袋时期对翠冠梨果实品质的影响

以"翠冠"梨为试材,研究两次套袋中套大袋时期对梨果实品质的影响。结果表明:和CK相比,果实成熟时,过早套大袋的,单果重变小,晚套大袋的单果重大。果实可溶性固形物含量和果实硬度降低。5月2日套小袋的基础上套大袋的果实可溶性固形物含量最高,属于套大袋的最佳时期,即5月12日前后,其他处理差异不显著;迟套袋的果实硬度有所降低,且套袋越迟,白袋和黑袋的果实硬度差别越大。果皮厚度只有套大袋最早的a白比CK果皮厚度低,而其他处理都增厚。果点密度增加,且大袋套得越早,同处理间套黑袋的与套白袋的差异显著,套的晚差异不显著。果点直径减小,且随着套大袋时间越晚,同处理间套黑袋的与套白袋的差异减弱。果实亮度L*值增加,套黑袋的比CK果面绿色度极低,且果面黄色度低,套白袋的比CK果面偏绿,而偏黄色值差异不大。套黑袋的随着套大袋时间越晚,则越偏向绿色、黄色。     

红壤施用不同有机酸解铝毒效果的比较

以黑麦草为供试植物,进行了施用柠檬酸和草酸解除红壤铝毒的生物盆栽试验。结果表明,施用包膜有机酸比非包膜有机酸具有更好的解铝毒效果,其效果随施用浓度的增加而显著提高,且包膜柠檬酸比包膜草酸的效果更佳。     

粉纹夜蛾核型多角体病毒在同源寄主细胞系中复制和连续传代的研究

本文研究了粉纹夜蛾单粒包埋核型多角体病毒(TnSNPV)在同源寄主细胞系Tn5B_(1—4)中的生长特性。结果表明,接种36h 后,无包涵体游离病毒(TnSNPV—NOV)的增殖达到高峰;在60代的连续传递过程中,TnSNPV-NOV 毒力随传递代数的增加而减低,但不明显。传至60代时仍可保持感染力1×10~5TCID_(50)(组织感染中量)/mL;而多角体的毒力变化十分显著,前几代能使粉纹夜蛾幼虫死亡率迭95%以上,传递到30代以后产生的多角体对粉纹夜蛾的幼虫几乎失去毒力;多角体的产量也明显降低,前几代病毒在每个细胞中可达670PIB,但20代以后,每细胞中多角体的产量仅在100PIB 以下.     

防御素基因克隆和表达载体构建

人防御素(HNP)是一类广谱抗菌阳离子小肽的总称,一般具有3个分子内二硫键。防御素对于细菌、真菌乃至某些被膜病毒有广谱杀伤作用,是免疫系统中的重要组分。实验根据已发表的HNP-1cDNA序列,设计并合成了一对引物。以HL-60细胞总RNA为模板,利用RT-PCR技术扩增目的片段并克隆到pUC18载体上,经筛选获得阳性重组子pUC18-HNP-1(pDFS1)。测序分析证实,扩增片段即为HNP-1cDNA。pDFS1再经SmaI与SalI酶切、插入pGEX-6p-1质粒构建HNP-1表达载体。利用PCR技术和酶切反应筛选转化子最终获得pGEX-6p-1-HNP-1(pDFS2)重组质粒。     

几种核型多角体病毒感染性的检测

通过共转染法获得重组绿色荧光蛋白GFP基因的苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒AcMNPV,并通过检测荧光的产生来分析昆虫是否受到感染。观察多种病毒组合感染的BmN细胞,分析病毒对细胞的影响规律,从而了解不同病毒在同一宿主体内的相互作用情况。结果表明,亲缘关系较近的病毒之间更容易相互感染。该结论可以对宿主域拓展的研究提供有价值的信息。     

1-Adamantanamine hydrochloride: inhibition of Rous and Esh Sarcoma viruses in cell culture

I-Adamantanamine hydrochloride, added to chick embryo cells, inhibited focus production upon subsequent inoculation of the cells with Rous and Esh sarcoma viruses. Addition of the chemical to suspensions of Rous and Esh viruses before they were added to chick cell cultures did not inactivate the viruses; and the addition to chick cells did not prevent plaque formation following their inoculation with Newcastle disease virus. This indicates that cells treated with 1-adamantanamine hydrochloride are capable of supporting viral replication, and these observations suggest that the drug inhibits growth of two oncogenic viruses by prevention of virus penetration, but not by a virucidal effect or cell intoxication.     

海藻酸钠包埋保藏对食药用菌种活性的影响

采用海藻酸钠包埋食药用菌种 ,并于液体石蜡中封藏 3年后测定其活性。结果表明 :食药用菌种平均萌发率为 84.0 % ,平均萌发时间为 3 2h ,菌丝生长速度为 0 .75 8cm/d。     

微量双板荧光法——一种新的病毒克隆的简易方法

本文以网状内皮增生病毒(REV)为模式,建立了一种用间接荧光抗体技术(IFA)检测微量细胞培养中感染细胞内病毒抗原的方法。尤其适用于在细胞培养中生长,但不能产生细胞病变的病毒克隆。此法极大地简化了这类病毒克隆的程序,缩短了时间。在此基础上,用IFA方法在微量培养板上可对这类病毒进行样品检测、毒价测定、中和试验和分泌特异性单克隆抗体的杂交瘤细胞株筛选。这是一种快速而实用的方法,优于常规方法。     

鸡传染性支气管炎病毒在鸡胚肾细胞和气管环培养中的适应性比较

将６株鸡传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ）分别接种鸡胚肾细胞（ＣＥＫＣ）和气管环培养（ＴＯＣ）。６株病毒无论是否已经适应于鸡胚，都在气管环培养中能引起病变。病毒适应于ＣＥＫＣ，是与病毒在鸡胚和细胞培养上的传代次数有关。分别用ＳＰＦ鸡胚、非免疫鸡胚和普通鸡胚制备的ＴＯＣ测定ＩＢＶ－Ｍ４１株的ＩＤ５０，结果用ＳＰＦ鸡胚和非免疫鸡胚制备的ＴＯＣ测定的ＩＤ５０都获得较高滴度，而在普通鸡胚制备的ＴＯＣ中ＩＤ５０明显低。     

小RNA病毒致病机理的研究

很多小RNA科病毒感染宿主细胞后可通过自身的核酸序列或病毒性蛋白产物控制靶细胞的生命活动,而被感染细胞也会通过自身的调控机制对侵染的病毒进行有限的反击,这种现象被认为是宿主细胞对抗小RNA科病毒侵染的防御机制.这种侵染与抵抗的互作机制可由某些病毒蛋白对细胞产生信号干扰或细胞自身翻译合成的细胞因子对病毒的复制路径进行封堵来实现.虽然这些信号通路的上游事件是不同的,但最后的效应却很统一,即使细胞崩解或者细胞将自身按照一定程序与所侵入的病毒同归于尽.此外,一些病毒蛋白具有抑制细胞程序性自杀的功能,它们能够令感染病毒后的细胞不死亡,形成病毒与宿主细胞共存的持续性感染状态.     

Virus: mixed infection with herpes simplex and simian virus 40

Mixed infection, the infection of a single cell by two distinguishable viruses, has been demonstrated by electron microscopy in cultures of African green monkey kidney cells after inoculation with simian virus 40 and herpes simplex. Mixed infection occurs rarely when the two viruses are inoculated simultaneously, but if herpes is inoculated 24 hours after SV40 both viruses are found in the same nucleus in about 5 percent of intact cells.     

Intestinal M cells: a pathway for entry of reovirus into the host

Thirty minutes after inoculation of reovirus type 1 into the intestinal lumen of the mouse, viruses were found adhering to the surface of intestinal M cells but not other epithelial cells. Within 1 hour, viruses were seen in the M cell cytoplasm and were associated with mononuclear cells in the intercellular space adjacent to the M cell. These findings suggest that M cells are the site where reovirus penetrates the intestinal epithelium.     

手机病毒分析及预防措施

随着移动通讯技术的飞速发展,智能手机给我们提供了许多便捷服务,但越来越多的手机病毒也开始悄然出现并干扰着手机更多功能的使用。首先介绍了手机病毒的概念及发展现状,接着对手机病毒的特征进行了描述,最后提出了预防手机病毒的几种方法。     

羊口疮的研究

本文报道了对羊口疮的病原学、流行病学、实验病理学、血清学诊断以及免疫预防等问题所进行的系列研究结果。应用电镜技术,首次在国内观察到了羊口疮的病原——羊口疮病毒。对该病毒的某些生物学特性和理化学特性进行研究的结果表明,该病毒的感染范围比较广泛,对干燥耐受性强,对热、紫外光和福马林敏感;在奶山羊睾丸细胞上生长良好,CPE变化显著,并有多倍性现象;通过系统取样和超薄切片,在电镜下观察到了病毒在培养细胞中的主要复制过程,以及培养细胞本身的亚微结构变化。试用差速离心联用30—45％蔗精密度梯度超速离心,能有效地提纯病毒,为纯化痘类病毒提供了一种较为理想的方法。中性无离子去污剂TritonX—100与2—巯基乙醇联合,可使病毒裂解,便于分离囊膜蛋白亚单位;用SDS—PAGE分析法,发现病毒最少可泳动出28条多肽区带,而病毒的囊膜亚单位则由18条多肽区带组成。将病毒亚单位作为抗原免疫羔羊,可激发羊只产生抗全病毒抗体和迟发性变态反应,这在国内属首次报道。流行病学的调查表明,羊口疮在甘肃省存在历史已久,分布广泛,对养羊业危害严重;病的自然感染主要见于绵羊和山羊,以羔羊最为易感,除口唇感染外,未见其他临诊病型;采取不同地区的病羊痂皮在羊体作交叉免疫试验,未发现病毒有型别差异。人工感染病羊的血常规检查和血清蛋白的电泳分析未见异常;病理组织学变化以表皮的网状变性、真皮的炎性浸润和结缔组织增生为最特征。首次在国内将反向间接血凝、对流免疫电泳、酶联免疫吸附,琼脂凝胶扩散以及血清中和等五种血清学方法用于羊口疮的诊断,填补了国内在这方面的空白,其中前三种方法在当时的国外文献中也未见有报道。以改良、完善现行方法为目的,对活毒苗免疫接种法作了系统的研究,证明是一种行之有效的应急性免疫措施,有在疫区推广应用的价值;对灭活苗所进行的探索性试验表明,灭活的病毒似能激发羊体产生一定程度的免疫,为今后进一步提高灭活苗的免疫效果以及研究其在实践中应用的可能性打下了有益的基础。