富硒酵母细胞壁破碎方法的比较——细胞自溶法和酸-热破碎法

对影响富硒酵母自溶条件NaCl浓度、pH值、温度、时间进行了研究,结果表明3%NaCl,pH5.5,55℃,20h的条件下,自溶物中氨基酸含量最高,为最佳自溶条件;对影响酸-热破碎法的条件酸浓度、热处理时间、浸泡时间进行了研究,结果表明3mol/LHCl,浸泡60min,热处理3min,迅速冷却的条件下,氨基酸含量最高,为最佳破碎条件.将两种方法进行比较,发现破碎后内容物溢出量及硒含量非常接近,差别不明显.     

酸-热处理法破碎酵母细胞的研究

本试验研究了酸-热处理法进行酵母细胞破碎时,其酸浓度大小、热处理时间、浸泡时间、酸用量对破碎效果的影响。正交试验结果表明,破碎条件的最佳组合为HC l浓度1 mol/l,HC l用量12 m l/g干细胞,浸泡时间60m in,热处理时间4 m in。     

两种物理方法破碎大肠杆菌比较试验

采用超声波和反复冻融两种物理方法,对一定浓度的标准致病性大肠杆菌进行破碎率比较试验。结果表明:在试验条件下,超声波破碎法达到97%以上的破碎率所需时间为30~50min,尤其是菌液浓度为每毫升50亿,用Ф10变幅杆破碎,30min破碎率可达99.9%。而反复冻融破碎,无论液氮的低温冷冻人为速溶或自溶,还是采取冷冻箱的冻融,达到50%以上的破碎,要耗时数小时,且要经过预冷冻的过程。     

富硒调味料的研究

对影响富硒酵母自溶物中硒含量的４个因素：培养基种类、加硒时间、加入硒浓度以及用浓度北度法加入硒进行了比较研究。结果表明：用浓度梯度法加入硒,即在总硒为１５ｕｇ／ｍｌ浓度下,按１０ｈ,１２ｈ,１４ｈ,１５ｈ,１６ｈ的时间分别加入１ｕｇ／ｍｌ,２ｕｇ／ｍｌ,３ｕｇ／ｍｌ,４ｕｇ／ｍｌ,５ｕｇ／ｍｌ的亚硒酸钠,得到的富硒酵母自溶物硒含量最高;对曩富硒酵母自溶的条件：ＮａＣｌ的浓度、ｐＨ值、温度、时间进行了研究,结果表明：３％ＮａＣｌ,ｐＨ５．５,５５℃,２０ｈ的上其氨基氮含量很高,为最佳自溶条件。     

4种破碎方法对古尼虫草内含物提取的初步研究

以不溶固形物含量、腺嘌呤含量为指标比较了微波法、酶解法、自溶法和酸热法对交织顶孢霉菌丝体中内含物提取率的差异.结果表明,浓度为0.1%的纤维素酶在50℃条件下处理样品3 h破壁效果最佳,能较好地使细胞内含物包括核苷类物质溶出,其次是微波法.由于纤维素酶的价格较高,不利于大规模工业化生产,从经济角度考虑选用微波低温解冻档处理4 min的细胞破碎方法来提取菌丝体中内含物较理想.     

酵母β-1,3-D-葡聚糖制备过程中细胞破碎方法研究

通过正交试验设计,研究了细胞自溶法和超声波法的工艺条件,结果表明:在T=50℃、pH=7.0、浓度=10%、t=15 h的自溶条件下和在功率240W、占空比0.8、浓度5%、t=20 m in的超声波条件下,细胞破碎程度(即Y,用单位细胞干物质的损失率表示)分别为44.03%、35.87%,达到各自工艺的最优值,并且自溶法具有较好的细胞破碎效果。     

超声破碎酵母细胞提取蔗糖酶条件优化

采用单因素试验和L9(33)正交试验确定酿酒酵母的最佳超声破碎条件。结果表明,酿酒酵母的最佳超声破碎条件为:破碎功率350 W、总工作时间25 min、工作时间/间歇时间15 s/25 s。     

向日葵叶中绿原酸提取方法的比较研究

采用4水平5因素（乙醇浓度、乙醇用量、回流时间、pH值、浸泡温度）正交试验，优选从向日葵叶中提取绿原酸的最佳提取工艺．结果表明：稀醇法为最佳提取方法；最佳提取工艺为以10倍70％乙醇为浸提液，pH值调至6．0，80℃水浴浸泡，回流3h，所得绿原酸含量最高．     

冷磨法提取柑橘精油工艺研究

以甜橙和柠檬为主要原料,采用冷磨法进行柑橘精油提取,研究了浸泡剂浓度、浸泡时间、果皮破碎度、破乳剂添加量等对柑橘精油得率的影响。结果表明,柑橘精油提取最佳工艺条件为:浸泡剂石灰水浓度为3%,浸泡时间为1h,果皮破碎度为0.25cm,破乳剂NaCl添加量为0.75mg/mL。在此工艺条件下,甜橙精油得率为0.51%,柠檬精油得率为0.58%。     

细胞破碎法提取草珊瑚总黄酮的工艺优化

采用单因素试验与L9(34)正交试验研究了超声波细胞破碎法提取草珊瑚总黄酮的最佳工艺条件,并与传统草珊瑚总黄酮提取方法进行对比。结果表明:超声波细胞破碎法提取草珊瑚总黄酮最佳工艺条件为乙醇40%、液料比1∶10(g∶mL)、提取功率450 W、提取时间40min,提取率达8.32%。与传统方法相比,超声波细胞破碎法提取草珊瑚总黄酮工艺简便、效率高,耗能小,得率比传统方法好,具有很好的应用前景。     

重组褐藻胶裂解酶基因工程菌超声波破碎条件研究

褐藻胶裂解酶是制备褐藻胶寡糖的重要工具酶,利用工程菌进行褐藻胶裂解酶基因的克隆与高效表达是提高酶活的主要途径之一。工程酶位于胞内,需采取有效破碎手段获取。对重组褐藻胶裂解酶基因工程菌E.coli TOP10采用超声波破碎,分析了超声波破碎强度、总工作时间、NaCl浓度对菌体破碎程度及酶活力的影响。通过单因素试验和正交试验得出重组大肠杆菌的最佳破碎条件为:菌液浓度40 mg/mL,菌液体积50 mL,超声波工作时间4 s,间歇时间8 s,超声波破碎强度50%,总工作时间6min,NaCl浓度为0.15 mol/L。在该条件下获得褐藻胶裂解酶粗酶液的酶活为21 U/mL。     

超声波破碎法提取多食鞘氨醇杆菌中17β-雌二醇降解酶的优化及酶学性质

采用超声波破碎多食鞘氨醇杆菌细胞壁的方法提取雌二醇降解酶,通过单因素条件研究确定各因素对超声波破碎影响的高低,依据Box-Benhnken设计原则对破碎条件进行响应面回归模型分析(RSA)。研究得到最佳条件为:菌体浓度188 mg/mL,破碎功率400 W,总破碎时间29 min(超声3 s,间隔5 s),认为破碎功率对超声波破碎的影响最大。预测破碎后得到的粗酶液总酶活力为1.484 U,实际测得的粗酶液酶活力为1.477 U。根据试验结果认为:采用超声波破碎方法可以较好地提取氨肽酶,运用响应面分析法优化超声波破碎条件是可行的。     

扇贝加工废弃物自溶技术的研究

对扇贝加工废弃物的自溶水解技术进行了研究。结果表明:用紫外线照射扇贝加工废弃物后能够激活自溶酶,当照射40 m in时,自溶水解液中游离氨基酸态氮含量最高(3.389 g/L);pH对自溶水解影响较大,pH为7.0时水解效果最佳;采用40-65℃(5℃/h)的梯度升温自溶水解4 h或60℃恒温下自溶水解3 h,其水解效果最佳;无机离子Na 、Ca2 对自溶酶具有激活作用,当Na 的浓度为0.07 mol/L、Ca2 的浓度为0.03 mol/L时,自溶水解效果最佳,而Zn2 对自溶酶的影响很小;扇贝加工废弃物在最佳条件下自溶水解3 h后(60℃恒温),其水解液中氨基酸态氮的含量为4.006 g/L。用SephadexG-15葡聚糖凝胶柱层析法对扇贝加工废弃物的自溶水解产物进行分析,结果显示,水解液中蛋白肽相对分子质量集中分布在784.25左右,说明自溶水解产物多为小分子的蛋白肽,可进一步对其开发利用,制备海鲜调味料等。     

红酵母类胡萝卜素提取工艺及色素稳定性研究

从细胞壁破碎方法及类胡萝卜素提取条件等方面对红酵母类胡萝卜素提取方法进行了优化;研究了红酵母色素的光稳定性、热稳定性及山梨酸钾对其保存的作用。结果表明,酸热法是红酵母破壁较理想的方法,最佳优化提取条件为盐酸摩尔浓度2 mol/L,盐酸用量10 mL/(g干菌体),浸泡时间60 min;红酵母色素的热稳定性和光稳定性较差,红酵母色素保存时添加一定浓度的山梨酸钾对防止其氧化有一定的作用。     

富硒酵母培养条件的优化

对1株经过DES(硫酸二乙酯)、紫外线和氯化锂复合诱变后的产朊假丝酵母进行富硒发酵条件的研究,通过单因素及正交试验,确定葡萄糖为培养基的最佳碳源,添加4%～5%时可得到最高生物量与硒含量;蛋白胨和尿素的复合氮源为最佳氮源.分别添加蛋白胨0.5%,尿素0.9%,辅助氮源酵母膏0.4%,硒 25 μg /mL,摇瓶(250 mL)装液量30 mL,转速200 r/min,培养温度 28 ℃,pH 5～6,培养时间40 h,此条件下酵母生物量达到7.942 g/L,总硒含量达到16 486.48 μg /L.     

啤酒废酵母自溶过程强化研究

[目的]研究啤酒废酵母强化自溶过程,优化强化作用因素。[方法]对影响啤酒废酵母自溶后释放的超氧化物歧化酶(SOD)、氨基酸、葡萄糖内容物含量及SOD的活性提取的各因素进行单因素试验,并设计物理因素正交试验进行各因素参数优化;同时对啤酒酵母自溶后释放的上述活性物质进行添加葡聚糖酶、木瓜蛋白酶促进自溶过程的单因素影响研究,并设计化学因素正交试验进行各因素参数优化。[结果]物化因素影响的正交试验表明,啤酒废酵母自溶过程氨基酸含量提取的最优组合为pH 5.0、加水量300%、加盐量3%,葡萄糖含量提取的最优组合为pH 5.0、加水量250%、加盐量1%,SOD含量提取的最优组合为pH 5.5、加水量300%、加盐量2%,SOD活性提取的最优组合为pH 5.5、加水量250%,加盐量1%。生化因素影响的正交试验表明,氨基酸含量提取的最优组合为pH 6.0、温度60℃、酶用量6 g/kg葡聚糖酶+4 g/kg木瓜蛋白酶,葡萄糖含量提取的最优组合为pH 6.0、温度55℃、酶用量6 g/kg葡聚糖酶+4g/kg木瓜蛋白酶,SOD含量提取的最优组合为pH 6.0、温度55℃、酶用量6 g/kg葡聚糖酶+2 g/kg木瓜蛋白酶,SOD活性提取的最优组合为pH 6.5、温度60℃、酶用量6 g/kg葡聚糖酶+4 g/kg木瓜蛋白酶。[结论]在优化的啤酒废酵母自溶过程强化作用各提取物的最优组合条件下,可简化操作过程、降低操作难度,提高酵母菌成分的利用率及其得率。     

螺旋藻的破碎及藻蓝色素的提取

研究螺旋藻细胞的三种破碎方法及其对提取藻蓝色素的影响。实验结果表明，最佳破碎方法为酶溶－高压均质结合法。其破碎条件为：均质压力20Kpa、酶用量100mg/100g干粉、而循环次数应为3次，酶解温度为45℃。     

不同培养条件对高山红景天愈伤组织红景天甙含量的影响

采用高山红景天种子、试管苗叶片诱导的愈伤组织在不同条件下进行培养，测定红景天甙含量．结果表明：红景天甙含量受光温条件的影响，在温度为16，20，24，28℃条件下，24℃时含量最高，在光照时间为10，12，14，16h条件下，14h时含量最高；在蔗糖浓度分别为2％，2．5％，3％，3．5％，4％条件下，3．5％浓度时含量最高；不同继代时间对含量无明显影响．     

辅酶Q10超声波破碎法提取工艺条件研究

为了获得超声波提取辅酶Q10的最佳工艺条件,系统研究了利用超声波法提取时输出功率、每次辐射时间、工作总时间、水添加量等因素对细胞破碎和辅酶Q10提取效果的影响。结果表明,超声波提取辅酶Q10的最佳工艺条件为:输出功率500 W,每次辐射/间歇时间12 s/10 s,工作总时间12 min,水添加量45 mL/g;采用优化的超声波提取工艺,辅酶Q10提取量可达到1.196 mg/g。证明超声波破碎法提取辅酶Q10是可行的,与未破壁提取、研磨法及反复冻融法提取效果相比,辅酶Q10提取效果良好。     

响应面法优化制备高富硒产朊假丝酵母

考察了发酵条件对产朊假丝酵母富硒能力的影响。通过单因素的筛选,对酵母富硒能力影响较大的3个因素:亚硒酸钠浓度、初始pH值及培养温度,以胞内总硒含量为响应值,利用响应面法对其进行优化。结果显示:在培养时间30 h、加硒时间对数生长中期、亚硒酸钠浓度35 mg·L^-1,初始pH 6.6、接种量10%、培养温度27℃、装液量150 mL/500 mL的条件下,最大的菌体生物量为6.87 g·L^-1;胞内总硒含量达到12 639.7μg·L^-1,硒含量为1 839.8μg·g-1,其中亚硒酸钠转化率为79.1%,有机硒含量占90%以上;胞内实际总硒含量与数学模型理论值12 518.8μg·L^-1相差不显著,响应面法能较好地优化产朊假丝酵母富硒工艺条件。