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非电泳法PCR牛早期胚胎性别鉴定研究 总被引:5,自引:0,他引:5
为选出更高效、实用的牛胚胎性别鉴定方法,分别用成年牛血样提取的基因组DNA和冷冻的牛早期胚胎细胞DNA为样本,以电泳法和非电泳法用相应的性染色体DNA引物做胚胎PCR性别鉴定实验,以相对比。血液模板DNA结果与胚胎样本结果都表明,使用DYZ-1引物的非电泳法在比使用SE引物的电泳节约1h以上时间的同时,具有比SE更高的灵敏度。这次研究在我国首次成功地把非电泳PCR法应用到牛胚胎性别鉴定之中,减少了胚胎性别鉴定的操作步骤,并大大缩短了性别鉴定所需要的时间,从而使胚胎移植现场性别鉴定更加可行。 相似文献
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家畜胚胎早期性别鉴定的方法 总被引:7,自引:0,他引:7
魏雅萍 《青海畜牧兽医杂志》2003,33(1):41-42
本文简要综述了胚胎早期性别鉴定的几种不同方法。并特别对PCR方法在胚胎性别鉴定中的研究历程,应用及基本过程作了简介。 相似文献
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应用PCR技术鉴定牛早期胚胎性别方法优化的研究 总被引:7,自引:0,他引:7
研究的目的是优化胚胎PCR性别鉴定方法的条件,建立实用的鉴定方法。试验设计获得了牛种属和公牛特异的引物,利用聚合酶链反应(PCR)对模板DNA进行扩增,通过常规双重PCR法和巢式PCR法的比较研究,结果表明巢式PCR法大大提高了鉴定牛早期胚胎性别的灵敏度。对组织DNA样品、血样、颗粒细胞和公牛冷冻精子进行检测,结果全部与实际性别一致;对于胚胎样品,判定结果与产犊性别一致。通过批量胚胎现场的检测,证明建立的胚胎性别鉴定方法可用于生产。 相似文献
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牛早期胚胎的性别鉴定已有十几年的发展历史,从早期的免疫学方法到胚胎细胞的染色体核型分析,取得了巨大的进展,但真正进入实用化阶段是PCR技术在牛早期胚胎性别鉴定中的应用. 相似文献
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家畜胚胎性别鉴定的研究进展 总被引:5,自引:0,他引:5
家畜早期胚胎的性别鉴定是家畜胚胎移植的重要内容 ,对实现动物性别的人为控制具有重要意义。近年来随着性别鉴定技术的不断发展 ,出现了许多鉴定方法。本文对性别决定基因、动物性别决定机理和早期胚胎性别鉴定的方法作一简要综述 ,特别是对PCR方法在胚胎性别鉴定中的应用及其基本过程作一简述 相似文献
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随着科学技术的进步,实现家畜性别人为控制已成为现实.目前,出现了许多性别鉴定控制方法,但PCK方法以其灵敏、高效、准确、迅速等特点而成为家畜早期胚胎性别鉴定常用的方法,特别是非电泳PCR性别鉴定方法倍受人们青睐.本文主要从家畜早期胚胎性别鉴定PCR方法的原理和在PCR分析鉴定中常用的核酸染料及其研究进展做一概述. 相似文献
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牛早期胚胎性别鉴定PCR反应体系的优化研究 总被引:29,自引:2,他引:29
根据牛SRY基因序列设计合成2对巢式PCR引物作为性别鉴定引物,根据牛酪蛋白基因序列设计了一对引物作为内标引物建立了牛胚胎性别鉴定的PCR反应体系。同时对常规PCR和巢式PCR在牛早期胚胎性别鉴定中的实用性进行比较。15头公牛、13头母牛的DNA样品检测结果表明:使用巢式PCR公牛可以扩增出205bp的SRY基因片段和403bp的酪蛋白基因片段,母牛只能扩增出403bp的酪蛋白基因片段;而使用常规PCR时公牛扩增出255bp的SRY基因片段和403bp的酪蛋白基因片段,母牛只能扩增出403bp的酪蛋白基因片段,其性别鉴定结果和实际完全一致。由于巢式PCR只需10个细胞就可以在紫外透射分析仪下看到扩增结果,而常规PCR则需要20~30个细胞,所以胚胎性别鉴定时使用巢式PCR效果更好。试验采用巢式PCR鉴定了10个奶牛胚胎的性别,同时还对血清是否会对试验结果产生影响进行了研究。 相似文献
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根据兔SRY基因序列设计两对引物作为兔雄性特异性引物,根据兔APP基因序列设计1对引物作为内标引物,分别建立了兔早期胚胎性别鉴定的双重PCR和巢式PCR反应体系,在不同浓度的基因组DNA和兔早期胚胎上进行性别鉴定应用,同时,对兔SRY巢式PCR引物特异性进行了分析。结果表明,多重PCR扩增兔基因组DNA可以准确判定其性别,扩增灵敏度为100pg基因组DNA;多重PCR鉴定24枚兔32细胞桑椹胚性别,只能对整胚成功鉴定。巢式PCR,公兔基因组DNA扩增出282bp的SRY基因片段,母兔没有扩增产物,扩增灵敏度为10pg;对24枚兔32细胞桑椹胚性别鉴定结果表明,巢式PCR可以对少至4个胚胎细胞进行准确鉴定,同一胚胎结果符合率为100%(24/24)。SRY引物只对兔雄性基因组DNA特异,而其他动物(人、牛、绵羊、小鼠)雄性DNA及兔的冲卵液,均无PCR产物。 相似文献
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牦牛胚胎性别鉴定PCR反应体系的建立 总被引:1,自引:0,他引:1
研究旨在建立牦牛胚胎性别鉴定准确、可靠的PCR反应体系及研究切割取样对胚胎发育能力的影响.根据牦牛SRY和HSL基因序列分别设计合成2对巢式PCR引物作为性别鉴定引物和2对引物作为内标引物,通过优化PCR反应条件,对已知性别牦牛血液基因组DNA和牦牛杂种胚胎DNA采用巢式PCR进行性别鉴定.结果表明,血液样本性别鉴定与实际性别完全相符,准确率100%.从早期胚胎取8个细胞进行性别鉴定,结果雄性为45.8%(11/24),雌性为54.2%(13/24),取样后胚胎发育率为56.7%.结果说明已成功建立牦牛胚胎性别鉴定的PCR体系. 相似文献
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本试验以优化PCR条件,建立快速性别鉴定方法为目的,从家鸡雏鸡血样、鸡胚羊水和尿囊液中获得DNA进行性别鉴定.通过对家鸡的两个性别鉴定候选基因CHD1和xho Ⅰ重复片段进行PCR扩增引物筛选和反应体系的优化.结果显示CHD1基因PCR法可稳定、准确地用于鉴定家鸡性别,该体系经改进和优化后,缩短了鉴定时间,提高了鉴定的稳定性和准确性.在此基础上利用12.5日龄鸡胚羊水和尿囊液建立了早期胚胎的性别鉴定体系.该方法为家鸡早期胚胎性别鉴定批量化的快速操作提供了可行的依据,同时也为鸟类性别决定机制的研究奠定了基础. 相似文献
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自主设计2对引物,提取已知性别小鼠肝细胞DNA,扩增雄性小鼠特有的Sry基因及雌、雄小鼠共有的ZFX基因,建立双重PCR性别鉴定方法.提取小鼠早期8细胞胚胎单卵裂球、双卵裂球DNA,分别进行双重PCR性别鉴定,选择出早期8细胞胚胎的适宜模板量;将已测性别的8细胞胚胎按照雌、雄性别分开培养,观察统计雌、雄8细胞胚胎发育至囊胚的比率.试验结果显示,与单个卵裂球DNA模板量相比,双卵裂球的模板量检出率高,两者之间差异显著(75.00%Vs 93.33%,P<0.05);经过性别鉴定的雄性8细胞胚胎比雌性8细胞胚胎发育至囊胚的比率高,两者之间差异显著(53.33%Vs 33.33%,P<0.05).结果表明,采用双重PCR性别鉴定方法,以双卵裂球的DNA量为模板能够有效的对小鼠早期8细胞胚胎进行性别鉴定;雄性胚胎在体外培养条件下比雌性胚胎具有更好的发育潜力. 相似文献
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在16~32细胞阶段的胚胎上取下单个分裂球,利用聚合酶链反应(PCR)进行早期半胚胎性别鉴定。胚胎由体外受精获得,在体外受精后第5天进行活组织检测。活组织检测过的胚胎在单层卵丘细胞上培养直到移植。利用一对牛的特异引物和一对Y-染色体特异引物进行PCR。根据PCR扩增产物得到的信号表明,从植入前牛胚胎上分离的单个分裂球利用PCR足可以进行性别鉴定,准确率为95.4%。把19个经活组 相似文献
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哺乳动物早期胚胎性别鉴定技术研究进展 总被引:6,自引:0,他引:6
哺乳动物早期胚胎性别鉴定是人们实现性别控制的重要途径。随着科学技术的发展和各种新的研究工具在性别鉴定中的应用,性别鉴定已越来越接近于能够在生产实践中应用。目前应用较多、重复性较好的性别鉴定方法主要有细胞遗传学方法、生物化学方法、免疫学方法和分子生物学方法等。文章主要综述了哺乳动物早期胚胎性别鉴定技术的研究现状,并分析了这些方法存在的问题及发展前景,为哺乳动物早期胚胎性别鉴定的研究提供借鉴。 相似文献
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