玉米小斑病菌C小种毒素的分离纯化新方法

魏建昆等证实在中国存在玉米小斑病菌C小种。后来，崔洋等提纯了C毒素（HMC－toxin)。通过硅胶柱层析（silica-gel）对C毒素的粗提液进行纯化，并对所纯化的C毒素进行活性检测。结果发现：所得到的C毒素使C细胞质玉米叶片失绿并且严重萎蔫。     

嘧肽霉素一种新的生物活性组分分离纯化研究

通过生物活性检测发现Streptomyces tz92菌株嘧肽霉素发酵液中一种新的抗细菌生物活性物质,为了明确其适宜的分离纯化工艺,试验研究了利用大孔吸附树脂,硅胶柱层析和分子筛层析分离纯化该组分的条件和效果。试验结果显示,发酵液经过大孔树脂SP825L吸附50%甲醇洗脱、硅胶柱层析氯仿∶正丁醇∶甲醇∶乙酸=42∶2∶4∶2(体积比)洗脱、Sephadex LH-20 70%甲醇洗脱可以得到该组分纯品。     

一种高效分离水稻细菌性条斑病菌的新方法

[目的]介绍一种将常规方法改进成为一种适用于分离存放时间过久的细条病样本的新方法。[方法]用注射器渗压法将病害标本的研磨液接种水稻叶片形成新鲜病斑后,再按改进的常规方法进行分离纯化。[结果]该新方法分离纯化可直接得到单菌落。[结论]该方法是一种适用于分离存放时间过长的水稻细菌性斑条病菌标本的方法。     

陈山红心杉基因组DNA提取方法的比较与分析

采用尿素法、柠檬酸钠法、改良的CTAB法和SDS法4种方法提取陈山红心杉基因组DNA,并对提取效果进行比较和分析。结果表明,改良的CTAB法较适合陈山红心杉基因组DNA提取,其提取的DNA纯度高、质量好,具有典型的天然DNA分子的标准紫外吸收光谱特点,A₂₆₀/A₂₈₀比值在1.8左右,且凝胶检测条带整齐清晰,杂质少、无明显降解。而尿素法和柠檬酸钠法难以提取基因组DNA,SDS法因提取的DNA有蛋白质、多糖等杂质污染均不太适用陈山红心杉基因组DNA提取。酶切分析也证明,改良的CTAB法提取的DNA适用于进行后续分子生物学分析。采用改良的CTAB法能够提取得到陈山红心杉幼叶、老叶、嫩芽和幼茎的基因组DNA产率不同,分别为158.4μg/g、129.6μg/g、177.6μg/g和98.40μg/g。考虑到幼叶样品的采集要比嫩芽方便,因此,可以直接采用幼叶进行陈山红心杉基因组DNA提取。     

一种快速提取蚤蝇DNA的新方法

以蛆症异蚤蝇为试材,提出一种盐酸胍结合NaCl的DNA快速提取新方法.并用随机引物对提取的DNA进行扩增.结果表明:该方法可以快速提取蚤绳幼虫、蛹、成虫及乙醇浸泡成虫的DNA.RAPD结果显示,该法提取的DNA能够满足蚤蝇分子生物学研究的需要.     

大孔吸附树脂提取多杀菌素的方法

采用大孔树脂吸附法提取多杀菌素。通过树脂选型,筛选出XAD-4作为多杀菌素提取的吸附剂;吸附最适pH值为11.0,流速为1/6(1/min),加入2%氯化钠;采用丙酮梯度解吸,总收率达64.7%。     

板栗基因组DNA几种提取方法比较研究

通过对板栗基因组ＤＮＡ几种提取方法获得的ＤＮＡ质量分析,表明改良ＳＤＳ法是最为理想的提取方法,能满足ＲＡＰＤ及其他分子生物学研究的需要。     

一种快速纯化相思子凝集素的方法

介绍了一种快速提取、纯化相思子凝集素(Abrus agglutinin,AGG)的方法。以Sepharose 6B(琼脂糖凝胶)为亲和层析介质,结合Hiload 26/60 Superdex 75凝胶层析柱,粗提物经2步层析分离纯化,获得了高纯度的AGG。SDS-PAGE电泳时其相对分子量约为65.4 kD,凝集兔红细胞的最小浓度约为0.5μg/mL,LD50为3.6 mg/kg。采用该方法可从相思豆中快速制备高纯度AGG。     

乳铁蛋白的分离纯化

乳铁蛋白的分离纯化方法较多,本文采用3次盐析法和1次凝胶层析法从来源丰富的牛初乳中分离纯化LF并利用电泳和分光光度法法检测其纯度和含量,所获得的乳铁蛋白的分子质量为90000u,纯度大约为92%。     

一种新型血栓溶酶的分离提纯及等电点测定

中国根霉12（Rizopus chinesis 12）菌株产生的血栓溶酶存在于发酵液中,首先经过饱和度为60%的硫酸铵盐析处理,再经半透膜透析去离子浓缩后,通过CM-C和Sephadex-G100凝胶层析,浓缩含有活性组分的层析洗脱兴,得到血栓溶酶组制品。经等电聚焦法证明为一纯组分,而且得到它的等电点为8.2。     

辣椒辣素的提取工艺与纯化方法研究

试验采用溶剂浸提法、超声波浸提法研究了辣椒中活性成分辣椒素的最佳提取工艺条件,用FAO双比色法测辣椒素得率,并对2种方法进行了比较。结果表明,辣椒素提取率与乙醇浓度呈正相关。溶剂浸提法提取的优化组合为提取液乙醇体积分数70%,浸提温度50℃,浸提时间60 min,浸提料液比1︰10,最佳的提取次数为2次;超声波浸提法的最佳提取条件为功率100 W,料液比为1︰5,超声时间为40 min;超声波法较溶剂浸提法提取率高。用正交试验法对辣椒素的提取工艺进行优选,并对辣椒素进行了初步纯化。     

牡蛎糖蛋白的纯化分离研究

用DEAE-52阴离子交换柱提取、纯化牡蛎糖蛋白,分离纯化的牡蛎糖蛋白命名为糖蛋白GⅠ,糖蛋白GⅡ。用葡聚糖凝胶柱层析分别分析纯化糖蛋白GⅠ,糖蛋白GⅡ,结果表明:牡蛎糖蛋白GⅠ中分离出1种糖蛋白组分GⅠ-1;牡蛎糖蛋白GⅡ纯化出4种糖蛋白组分(GⅡ-1,GⅡ-2,GⅡ-3,GⅡ-4),GⅠ-1为未经洗脱的透过峰,该组分可能是糖蛋白凝聚体,由凝胶电泳分析估算得知GⅠ-1,GⅡ-1,GⅡ-2,GⅡ-3的分子量分别为42.5kDa,100.0kDa,55.3kDa,41.4kDa。     

1株出芽短梗霉的分离·纯化及鉴定

[目的]为出芽短梗霉的进一步开发利用提供理论依据。[方法]采用平板稀释法从土壤中分离出1株出芽短梗霉,用YPD培养基培养菌丝体,显微成像获得菌丝微观形态,利用分子生物学方法对其rRNA基因内转录区段（ITS区）进行克隆测序,并与Genbank中已知序列进行比较。[结果]ITS区PCR扩增产物测序结果表明,所扩增序列的长度为606 bp,与Genbank中短梗霉的同源率为98%～99%,与Aureobasidium pullulans wb 149、A.pullulans HK58-1（2）属于同一单独分枝;形态及分子鉴定结果表明,出芽短梗霉培养成功。[结论]该研究采用经典与现代分子技术相结合的方法鉴定出了1株出芽短梗霉,为出芽短梗霉的分类鉴定提供了依据。     

新疆卡拉库尔羊腔前卵泡体外机械分离与采集的一种新方法

采用一种新方法机械分离卡拉库尔羊卵巢的腔前卵泡:用Φ3mm的钢丝内芯刮擦卵巢表面,用PBS溶液冲洗,收集冲洗液;将刮过的卵巢用组织剪剪碎,经不同直径的网筛过滤,在90倍以上体视显微镜下镜检检卵。这种方法提高了检卵率,每小时可达57.11±4.05枚(n=5小时)。     

成都样品中粘细菌的分离纯化

[目的]为进一步研究粘细菌中生物活性物质奠定基础。[方法]从成都各区县采集35份水样、土样、兔粪、羊粪、风化岩石以及朽木样品,预处理后使用不同方法进行分离纯化,观察分离粘细菌的营养细胞、粘孢子、子实体和菌落形态等特征,并进行鉴定归属。[结果]共分离纯化得到42株粘细菌,鉴定为粘球菌属、囊球粘细菌属、粒状粘细菌属、堆囊粘细菌属、蜂窝粘细菌属、标桩菌属和原囊粘细菌属,共7个属。其中,水样中粘细菌的出菌率最高。[结论]水样中有丰富的粘细菌资源。     

黔北一新鱼种遵义小钝吻鮠线粒体DNA的分离纯化

用差速离心法和改进的碱裂解法分离纯化遵义小钝吻鮠线粒体DNA,紫外检测其OD260/OD280在1.78～1.85,并计算出该鱼肝组织线粒体DNA的含量为0.613μg/g。纯化样品经紫外分析仪在200～290 nm波长范围内扫描,呈现典型的DNA吸收峰,其最大吸收峰在259～260 nm。以λDNA/HindⅢ的完全酶切片段作为相对分子量标准,利用电泳迁移率与分子量的对数的线性关系,由已知片段大小推算出遵义小钝吻鮠mtDNA分子大小为(15.44±0.16)kb。     

烟草原生质体分离纯化条件的优化

为提高烟草原生质体的产量和活力,对影响烟草原生质体分离纯化的酶解液组合、酶解时间、酶解渗透压、离心转速、基因型等因素进行了优化。结果表明:以1%纤维素酶+0.5%果胶酶+0.6mol/L甘露醇+0.1%MES的酶解液组合经6h酶解,700r/min离心5min得到的原生质体产量和活力相对较高;生理状态相近的不同烟草材料在产生原生质体的能力上存在一定差异。     

一种新型丁醇产生菌的鉴定及发酵条件初探

[目的]对一株新型丁醇产生菌进行鉴定,并研究其发酵条件。[方法]通过富集培养、分离筛选纯化微生物菌株,利用气相色谱仪检测分离菌株的丁醇产量,并利用形态学观察、生理生化分析及16S rDNA分子鉴定确定分离菌株的种类。[结果]试验得到一株高产丁醇菌HIT1,其发酵时适宜的葡萄糖浓度为25 g/L,适宜的发酵初始pH为6.5,且与酵母粉相比,其能更好地利用蛋白胨作为氮源;试验确定HIT1为多粘类芽孢杆菌(Paenibacillus polymyxa)。[结论]该研究在一定程度上拓宽了产丁醇菌种的资源库,为综合开发利用生物丁醇奠定了菌种多样性基础。     

大米淀粉的提取及纯化方法研究

以早籼米为原料,通过碱酶复合法提取高纯度的大米淀粉(蛋白质含量<0.4%).试验发现超声波辅助酶法提纯大米淀粉的最佳工艺条件为:超声波处理时间25 min,加酶量为5 mg/g,酶解时间为2 h,酶解温度为45℃,固液比为1:6,测得大米淀粉提取率为91.2%,纯度为98.7%.