兔斯氏艾美耳球虫感染模型的建立及病理学初步研究

建立兔斯氏艾美耳球虫感染模型,为研究斯氏艾美耳球虫感染兔的有效防治方法提供适合的动物模型。2月龄普通级新西兰兔16只,分组单笼饲养。从自然感染的肝脏中收集斯氏艾美耳球虫卵囊,培养孢子化,孢子化的卵囊1.0×105个/mL,3mL孢子化卵囊口服感染新西兰兔,建立兔斯氏艾美耳球虫感染模型,并对感染1个月后的新西兰兔的肝脏、十二指肠进行病理学观察比较。结果显示:斯氏艾美耳球虫对新西兰兔部分致病性观察发现,新西兰兔在感染后出现明显的临床症状,严重制约了其生长发育。形态学观察发现肝脏感染严重,表面布满白色结节,胆囊中胆汁浓稠,颜色呈金黄色,而十二指肠虽未感染球虫,却也有较显著的病变。病理学观察发现肝脏中存在大量斯氏艾美耳球虫,十二指肠中不存在球虫,但组织结构亦被破坏,十二指肠绒毛遭到严重破坏。结果表明:本试验成功建立了兔斯氏艾美耳球虫感染模型。     

斯氏艾美耳球虫感染兔肝脏组织超微结构观察

为了给兔斯氏艾美耳球虫感染的有效防治方法和途径提供理论依据,试验通过孢子化的斯氏艾美耳球虫卵囊口服感染6只2~3月龄的无球虫新西兰兔,6只不感染兔为阴性对照组,30 d后,对其肝脏、胆管以及十二指肠进行超微结构观察比较。结果表明:肝脏、胆管以及十二指肠均出现显著病变,器官和细胞结构严重破坏。肝脏组织中肝细胞结构破坏,细胞器消失,可清晰地观察到斯氏艾美耳球虫的超微结构;胆管上皮细胞亦有部分细胞器消失;十二指肠微绒毛断裂、脱落。说明斯氏艾美耳球虫感染兔后,对兔的消化器官造成了极大的损害。     

斯氏艾美耳球虫感染兔血常规及肝脏功能分析

为了对斯氏艾美耳球虫感染兔的血常规、肝功能和凝血4项进行检测分析。通过孢子化的斯氏艾美耳球虫卵囊口服接种的途径感染8只2月龄的无球虫新西兰兔,8只不感染的设为阴性对照组。感染30 d后,心脏采血采集血液样本,测量血常规、肝功能和凝血4项等血液指标。血液检测结果显示,与肝功能相关的8项指标中,仅有谷氨酰肽转移酶、血清胆碱酯酶差异显著,其余均差异极显著,血常规和凝血4项亦差异极显著。表明兔感染斯氏艾美耳球虫1个月后肝功能严重受损。     

SPF级新西兰兔血液生理生化指标的测定

为了解SPF级新西兰兔血液生理生化指标 ,为毒理学实验提供相关的实验动物背景资料 ,试验测定了SPF级新西兰雌、雄兔各 1 0只的 3 4个血液生理生化指标 ,并且对其进行比较。结果显示 ,SPF级新西兰雌、雄兔之间的血液成分中除了红细胞平均体积和血小板压积值有显著性差异外 (P <0 .0 5) ,其它各项指标几乎没有显著性差异。     

引入西藏高原的家兔血液生化参数的比较研究

对引入西藏高原多年的加利福尼亚兔和中国白兔的12项血清生化指标进行测定,并与SPF新西兰兔进行比较。结果显示：①3个品种公兔之间,加尼福利亚兔与中国白兔比较,AST、TP、ALB、GLO、A／G、GLU、CRE、LDH差异极显著（P〈0．01）,TG、BUN差异显著（P〈0．05）,其中TP、ALB、A／G、CRE、CHOL、LDH表现极强的公兔特征,而ALT、GLU母兔明显高于公兔;加利福尼亚兔与SPF新西兰兔比较。ALT、A／G、CRE、TG、BUN差异显著（P〈0．05）,AST、CHOL、LDH差异极显著（P〈0．01）;中国白兔与SPF新西兰兔比较,ALT、AST、TP、ALB、GLO、A／G、CRE、CHOL、TG差异极显著（P〈0．01）;②3个品种母兔之间,加利福尼亚兔与中国白兔比较,ALT、GLO、CRE、TG差异显著（P〈0．05）,AST、TP、BUN、LDH差异极显著（P〈0．01）,加利福尼亚兔与SPF新西兰兔比较,ALT、TP、ALB、GLO、A／G、BUN、CRE、LDH差异极显著（P〈0．01）,AST、TG差异显著（P〈0．05）;中国白兔与SPF新西兰兔比较,ALT、TP、ALB、GLO、A／G、CRE、CHOL、TG、LDH差异极显著（P〈0．01）,BUN、AST差异显著（P〈0．05）。     

不同微生物控制等级SD大鼠血液生化指标的测定和比较

为了测定不同微生物控制等级普通级、SPF级 SD大鼠的血液生化指标并对其进行比较 ,采用 coulter-JT全自动血液生化指标检测仪自动检测。结果表明 ,普通级、SPF级 SD大鼠白细胞计数、红细胞计数、血红蛋白、血小板计数、血小板平均分布宽度、红细胞平均分布宽度差异极显著 (P <0 .0 1 ) ;血红蛋白量、血小板计数、血小板平均分布宽度差异极显著 (P<0 .0 5) ,其它指标差异极显著。不同微生物学环境控制对 SD大鼠的血液生化指标有较大影响     

兔中型艾美耳球虫广西株分离鉴定及致病性研究

采用单卵囊分离技术,从广西壮族自治区玉林市某兔场兔球虫混合感染样品中获得1株球虫,用其接种SPF兔进行增殖,根据其寄生部位、形态、大小等指标确定其种类,并对其生物学特性和致病性进行研究。结果显示,该虫株寄生于十二指肠、空肠,卵囊呈长卵圆形,橙黄色,卵膜孔开口于窄端,有残体,潜隐期为98h,最短孢子化时间为24h。通过随机测定100个孢子化卵囊后发现,孢子化卵囊的大小为(31.8~39.0)×(19.5~23.4)μm,平均大小35.80×21.36μm,形状指数1.68。对照相关文献,确定该虫株为纯种中型艾美耳球虫。SPF兔感染该虫株后,出现食欲减退,精神萎顿,排出软粪或稀粪,且增重显著低于空白对照组。致病性试验结果显示该虫株具有一定的致病性。     

3种兔对斯氏艾美耳球虫成都分离株的耐受力比较

为初步探讨3种兔对斯氏艾美耳球虫的耐受力差异及该球虫的毒力,本文分离得到成都地区的斯氏艾美耳球虫,用两种不同剂量的该球虫对新西兰白兔、比利时兔、福建黄兔进行致病性试验。结果发现:感染1×105个孢子化卵囊时,3种兔的死亡率分别为90%、80%和80%;平均增重差异不显著;肝脏病变计分差异不显著;平均死亡时间为感染后的18.67天、20.88天和21天。当感染5×104个孢子化卵囊时,3种兔的死亡率分别为80%、80%和70%;平均增重、肝脏病变计分和肝指数差异不显著;平均死亡时间为感染后的18.63天、20天和21天。结果表明:3个品种兔在感染相同剂量该球虫后,死亡率和死亡时间有差异,福建黄兔死亡时间偏后,死亡率相对较低,但3者在增重和病变计分上并无显著差异;斯氏艾美耳球虫成都分离株的致病力强,5×104个孢子化卵囊可造成幼兔至少70%的死亡。     

缓解普通级实验兔运输应激的措施探讨

运输应激是普通级实验兔生产与使用过程中最常见的一种应激,对普通级实验兔质量的影响也极为显著。有效缓解普通级实验兔的运输应激,对保证普通级实验兔的质量有着重要意义。本文根据实践探讨了几项缓解运输应激的相关措施,为保证普通级实验兔质量提供技术指导。     

中药提取物对兔大型艾美耳球虫的预防效果观察

本试验以大型艾美耳球虫为攻虫虫种,研究中药提取物和氯羟吡啶对兔肠球虫的防治效果,开展抗球虫药物筛选.选择28日龄新西兰白兔162只随机分成中药1组、中药2组、中药3组、氯羟吡啶药物组、阳性对照组、阴性对照组.试验结果表明,各试验组之间的初重、末重、平均日增重差异不显著(P>0.05);但阴性对照组和中药3组死亡率显著低...     

一起兔球虫病爆发病例的介绍

北京某獭兔养殖场于2001年9月份爆发了一起以兔腹泻、脱水、消瘦、肝脏出现点状坏死及结节为主要特征的病例，经流行病学调查、临床症状、病理剖检、实验室检查及药物治疗，确定这是由球虫感染引起的爆发性疾病。现将有关情况报告如下：     

清洁级獭兔在猪瘟活疫苗质量检定中的敏感性研究

[目的]观察清洁级獭兔在猪瘟活疫苗质量检定中的敏感性,筛选出最适合猪瘟活疫苗热原检查的试验兔品种。[方法]选择清洁级日本大耳白兔、清洁级獭兔、普通级日本大耳白兔、非等级獭兔、非等级福建黄兔分别接种不同稀释度的猪瘟病毒,通过监测兔体温反应判断是否感染猪瘟病毒,从而对比出不同品种兔对猪瘟病毒的敏感性。[结果]日本大耳白兔、獭兔、福建黄兔三个品种兔对猪瘟病毒均有较高的敏感性。在低稀释度时几个品种兔的敏感性差异不显著(P0.05);在1:3 800高稀释度时,清洁级实验兔的反应率明显优于普通级或非等级实验兔(P0.05),而清洁级獭兔又显著高于清洁级日本大耳白兔(P0.05),敏感性顺序为清洁级獭兔清洁级日本大耳白兔非等级獭兔非等级黄兔普通级大耳白兔。[结论]在高稀释度时清洁级獭兔敏感性最高,热原反应最稳定,是猪瘟活疫苗质量检定目标性等级试验兔,适合进行实验动物资源开发与研究。     

兔球虫病的有效防治

兔球虫主要危害3-16周龄的幼兔，感染率70％-100％，死亡率颇高。按球虫寄生的部位分为三种：①肝球虫病。肝脏内有沿肝小管分布的乳白色或淡黄白的病灶结节，肝脏常肿大，镜检时发现胆管上皮受到破坏和再生。表面胆管扩张、隆起，切面有白色液体外流，可引起肝细胞发生局部缺血性坏死。管腔中有大量的球虫，病兔厌食、虚弱不堪，便秘时有发生。肝肿大而造成病兔腹部增大而下垂，慢慢出现黄疸。②肠球虫病。病兔感染后出现水样腹泻伴有血丝黏液。常常脱水和继发其他细菌感染而死，因球虫卵侵袭部位不同，小肠、大肠、十二指肠、空肠、回肠、盲肠黏膜出现不同程度充血和发炎。肠道上皮细胞往往会出现溃疡，死时病兔侧卧、头部及后肢发生强直性痉挛，鼻孔有水样分泌物，随后尖叫儿声便死亡。死后肛门处和膀胱处积聚黄白色尿液．③混合球虫病。肠道和肝脏各部位病变都存在，便秘下痢交叉出现。常常作排尿状，肝肿大，腹部增大，走路有水碰撞声，不久便营养衰竭而死。现将防治球虫病的有效方法介绍如下。     

科技前沿

<正> 三项实验动物的研究课题通过成果鉴定由中国农业科学院哈尔滨兽医研究所实验动物中心主任——陈洪岩副研究员主持研究的黑龙江省科技计划项目"黑龙江省清洁级实验动物质量检测方法的研究"和"黑龙江省普通级实验动物质量检测方法的研究"课题及夏长友助理研究员主持研究的"SPF种鸡培育技术"课题,圆满地完成了合同规定的各项技术、经济指标,于2002年11月末通过了黑龙江省科技厅主持的科技成果鉴定。"黑龙江省清洁级实验动物质量检测方法的研究"和"黑龙江省普通级实验动物质量检测方法的研究"是在国家实验动物质量有关检测标准的基础上,开展黑龙江省清洁级和普通级实验动物的微生物学、寄生虫学和遗传学监测方法的研究,建立了黑龙江省清洁级和普通级实验动物的质量监测方法和标准操作程序(SOP),为黑龙江省内开展清洁级和普通级实验动物质量检测工作的顺利进行奠定基础。"SPF种鸡培育技术"研究是在建立的SPF种鸡群的基础上,     

L-NMMA对鸡球虫早熟弱毒疫苗免疫鸡增重的影响

为了研究鸡球虫早熟弱毒疫苗对免疫鸡增重的影响及一氧化氮合成酶抑制剂(L-NMMA)对免疫鸡增重和免疫效果的影响。取40只SPF雏鸡,分为空白对照组(C1、C2)和单剂量重复接种组(T1、T2),T1、T2组按推荐免疫剂量单剂量重复接种鸡球虫早熟弱毒疫苗,C1和T1、C2和T2分别于二次接种后第7、14天逐只空腹称重,剖检记录十二指肠、空肠和盲肠病变记分,取心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、腺胃、肌胃、十二指肠、空肠和盲肠进行病理组织学检查。另选取40只SPF雏鸡,分为空白对照组C20、攻毒对照组T21、免疫对照组T22和免疫加药组T23,T22和T23按推荐免疫剂量两次免疫鸡球虫早熟弱毒疫苗,T23在免疫的同时腹腔注射L-NMMA,二免后第14天T21、T22和T23均接种鸡球虫混合强毒,测定SPF雏鸡平均增重、相对增重、肠道(十二指肠、空肠和盲肠)病变记分、病变记分减少率(RLS)、血便记分、死亡率及卵囊产量等指标。结果显示,接种组的平均增重显著低于未接种组(P0.05),接种组的十二指肠、空肠和盲肠有轻微病变且黏膜上皮细胞均有不同程度损伤和脱落;免疫加L-NMMA组一免、二免后及攻毒后试验鸡的平均增重均极显著高于免疫攻毒对照组(P0.01),且与空白对照组鸡的平均增重无显著差异(P0.05),且免疫对照组和免疫加药组肠道病变记分和卵囊产量无显著差异(P0.05)。说明鸡球虫早熟弱毒疫苗对雏鸡肠道有轻微损伤,且对鸡增重有一定影响;L-NMMA可降低鸡球虫早熟弱毒疫苗对试验鸡增重的影响,且不影响疫苗的免疫效果。     

L-NMMA对鸡球虫早熟弱毒疫苗免疫鸡增重的影响

为了研究鸡球虫早熟弱毒疫苗对免疫鸡增重的影响及一氧化氮合成酶抑制剂(L-NMMA)对免疫鸡增重和免疫效果的影响。取40只SPF雏鸡,分为空白对照组(C1、C2)和单剂量重复接种组(T1、T2),T1、T2组按推荐免疫剂量单剂量重复接种鸡球虫早熟弱毒疫苗,C1和T1、C2和T2分别于二次接种后第7、14天逐只空腹称重,剖检记录十二指肠、空肠和盲肠病变记分,取心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、腺胃、肌胃、十二指肠、空肠和盲肠进行病理组织学检查。另选取40只SPF雏鸡,分为空白对照组C20、攻毒对照组T21、免疫对照组T22和免疫加药组T23,T22和T23按推荐免疫剂量两次免疫鸡球虫早熟弱毒疫苗,T23在免疫的同时腹腔注射L-NMMA,二免后第14天T21、T22和T23均接种鸡球虫混合强毒,测定SPF雏鸡平均增重、相对增重、肠道(十二指肠、空肠和盲肠)病变记分、病变记分减少率(RLS)、血便记分、死亡率及卵囊产量等指标。结果显示,接种组的平均增重显著低于未接种组(P<0.05),接种组的十二指肠、空肠和盲肠有轻微病变且黏膜上皮细胞均有不同程度损伤和脱落;免疫加L-NMMA组一免、二免后及攻毒后试验鸡的平均增重均极显著高于免疫攻毒对照组(P<0.01),且与空白对照组鸡的平均增重无显著差异(P>0.05),且免疫对照组和免疫加药组肠道病变记分和卵囊产量无显著差异(P>0.05)。说明鸡球虫早熟弱毒疫苗对雏鸡肠道有轻微损伤,且对鸡增重有一定影响;L-NMMA可降低鸡球虫早熟弱毒疫苗对试验鸡增重的影响,且不影响疫苗的免疫效果。     

新西兰兔Nrf2基因的克隆、序列分析及组织表达

为分析Nrf2基因在新西兰兔不同组织的表达差异情况,本试验根据GenBank公布的穴兔Nrf2基因序列设计了特异性引物,从兔肝脏中扩增出Nrf2基因并进行了生物信息学分析,同时采用实时荧光定量PCR技术研究了Nrf2基因在新西兰兔各组织中的表达差异。结果显示,扩增出的新西兰兔Nrf2基因长度为1 758 bp,编码585个氨基酸。序列比对结果显示,新西兰兔与穴兔、人、牛、鼠、斑马鱼等各种属动物Nrf2基因的核苷酸一致性为50.70%～99.83%。进化树分析表明Nrf2在物种间具有较高的保守性。实时荧光定量PCR结果显示,Nrf2基因在新西兰兔的心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏和脑中均有表达,且肾脏中表达量最高,脾脏中表达量最低。本试验克隆了新西兰兔Nrf2基因,并研究了其mRNA在兔各组织中的表达情况,为开展兔Nrf2/ARE信号通路的研究奠定了基础。     

齐兴肉兔与新西兰兔胃肠道发育和盲肠纤维素酶活性研究

实验旨在比较齐兴肉兔和新西兰兔肠道发育和盲肠纤维素酶活的变化规律。选择35日龄断奶齐兴肉兔与新西兰兔各90只,每个品种为1个处理,每个处理3个重复,每个重复30只,公、母各半。试验期21 d,试验期间所有试兔的饲粮和饲养管理一致。结果表明:35、42、56日龄新西兰兔的体重和小肠长度显著高于齐兴肉兔,盲肠重极显著低于齐兴肉兔,盲肠相对重显著低于齐兴肉兔,同日龄齐兴肉兔与新西兰兔的胃重和小肠重差异不显著;35、56日龄新西兰兔的十二指肠、空肠和回肠黏膜绒毛高度和绒隐比显著高于齐兴肉兔,42日龄黏膜绒毛高度和绒隐比差异不显著,35、42、56日龄齐兴肉兔的小肠黏膜肌层厚度显著高于新西兰兔;35、42、56日龄齐兴肉兔盲肠羧甲基纤维素酶、水杨苷酶和木聚糖酶活力显著高于新西兰兔。由此可见,齐兴肉兔盲肠、小肠黏膜肌层及盲肠纤维素酶发育优于新西兰兔,而新西兰兔小肠长度及其黏膜绒毛高度和绒隐比发育优于齐兴肉兔。     

兔球虫病防治

正1病原兔艾美耳球虫的生活史与鸡艾美耳球虫的生活史相同,但寄生于兔胆管的斯氏艾美耳球虫的生活史则略不同。斯氏艾美耳球虫的感染性卵囊可在兔的十二指肠内经酶的作用释放出子孢子,其钻入肠黏膜,再经门脉循环或淋巴循环移行到肝脏,最后钻入胆管的上皮细胞开始裂殖增殖,产生大量的卵囊、裂殖体和裂殖子等。2流行特点断奶到3月龄的兔易感本病。幼兔对球虫的抵抗力弱,感染率可达100%,     

斯氏艾美耳球虫感染对兔肝脏和血清抗氧化功能的影响

为研究斯氏艾美耳球虫对兔肝脏及血清抗氧化功能的影响,本实验以30日龄～45日龄兔为研究对象,测定兔接种斯氏艾美耳球虫后,血清和肝脏中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和过氧化氢酶(CAT)的活性及丙二醛(MDA)含量。结果表明:感染斯氏艾美耳球虫后,SOD、CAT和GSH-Px的活性均有不同程度的下降,MDA含量高于对照组水平,各指标在感染急性期后逐步回升至对照组水平。表明病理氧化应激参与了球虫感染过程,损伤了机体的抗氧化平衡,同时其变化规律也符合球虫自限性感染的特点。