影响DNA指纹技术进行玉米亲子鉴定准确性的主要因素研究

利用DNA指纹技术,分别采用不同数量的SSR引物,对14个同母异父杂交组合及其父本进行亲子鉴定,研究影响玉米亲子鉴定结果准确性的主要因素,结果表明:(1)与母本具有共同血缘的自交系作为父本将影响亲子鉴定的准确性;(2)采用引物数量不同,检测的DNA片段数量不同,也影响鉴定结果的准确性,采用引物数量越多,检测的DNA片段数量越多,鉴定结果越准确.     

利用DNA指纹技术进行玉米亲子鉴定方法研究

利用DNA指纹分析技术 ,分析了同母异父 5个杂交组合分别与其父母本之间的遗传距离 ,结果发现 ,每个杂交组合与其相应的父本之间的遗传距离最小 ,所有组合完全一一对应。因此 ,可以通过计算遗传距离来进行玉米亲子鉴定 ,只需计算出玉米杂交种与所有可能父本自交系之间的遗传距离 ,与其遗传距离最小的自交系就是该杂交种的真正父本。     

SSR分子标记技术及其在构建玉米DNA指纹库上的应用

SSR分子标记技术是在PCR基础上发展起来的一种DNA多态性检测技术,已开始应用于植物基因组研究的各个领域。本文概述了SSR标记的原理、类型、功能及其引物的来源和利用SSR构建玉米DNA指纹库的进展以及玉米DNA指纹库在品种鉴定、品种保护及品种监测等方面的应用。     

亲子鉴定技术在玉米杂交组合组配中的应用研究

玉米杂交组合组配鉴定工作是玉米育种工作中十分重要的技术环节,需要消耗大量的人力、物力和财力,如何使玉米育种工作者从繁重的杂交组合组配、鉴定工作中解放出来,集中精力进行玉米自交系的选育,提高玉米育种效率值得研究。本试验以BA为母本,以H28、昌7-2、9502、P138、齐319、吉853、京2101、京343、京832为父本组配了9对同母异父玉米杂交组合,利用DNA指纹技术,将亲子鉴定技术应用到玉米杂交组合组配和鉴定工作之中。结果表明,将亲子鉴定技术应用到玉米杂交组合组配和鉴定之中,省时省力、结果准确可靠,是完全可行的。     

玉米杂交种泛玉398及其亲本指纹图谱构建

为构建玉米杂交种泛玉398及其亲本的指纹图谱,利用40对玉米核心引物,通过简单序列重复长度多态性(SSR)分子标记技术进行分析。结果表明,筛选出6对亲本条带互补、清晰稳定的引物,分别是bnlg439w1、umc2015k3、umc1705w1、bnlg291k4、umc1147y4、bnlg1671y17,并将所构建指纹图谱数字化,分别用“0”和“1”表示,计算得到出现相同指纹图谱的概率为5.96×10^-8。这6对引物所构建指纹图谱可以用于玉米杂交种泛玉398及其亲本的真实性鉴定。     

玉米杂交种北青340及亲本指纹图谱构建

为构建玉米杂交种北青340及其亲本的指纹图谱,以40对玉米核心引物,通过SSR分子标记技术对北青340进行分析,从中筛选出7对条带清晰、重复性好的引物(umc 1147 y 4、bnlg 1671 y 17、umc 1999 y 3、phi 299852 y 2、umc 1936 k 4、umc 2163 w 3、bnlg 2291 k 4)。并将该指纹图谱用"0"和"1"构建成数字化指纹,同时,利用相关公式计算出与其有相同指纹的概率极低,为2.98×10^-8。研究表明,这7对引物可用来鉴定北青340及其亲本的真实性。     

五个鲜食玉米新品种的DNA指纹图谱研究与应用

利用SSR标记技术，对5个鲜食玉米新品种及其亲本的DNA指纹图谱进行了研究。从88对SSR引物中，筛选出37对在鲜食玉米中表现多态性丰富、带型清晰明显且稳定的引物，分析了鲜食玉米自交系的遗传多样性，建立了各品种的特征DNA指纹图谱及数字指纹，可以有效用于种子质量检测。     

新疆玉米主要杂交种及其亲本指纹图谱构建

品种稳定、内在的特征,可供种子纯度检验及品种鉴定与管理,构建品种的指纹图谱具有重要的现实意义.采用脂酶同工酶、种子贮藏蛋白电泳及RAPD技术,初步建立了新疆玉米主要推广杂交种及其亲本自交系的三种指纹图谱.结果表明,种子脂酶同工酶、种子贮藏蛋白电泳谱带,在各供试品种与其亲本自交系间其图谱均具有较大差异,供试的24个材料间RAPD多态性差异明显.此三种图谱均可作为供试材料稳定、内在的特征,为准确地鉴定品种纯度及品种认定提供参考和标准,具有一定应用前景.     

我国玉米品种标准DNA指纹库构建研究及应用进展

介绍了我国玉米品种标准DNA指纹库构建的进展及应用情况。我国玉米品种标准DNA指纹库规模已达到22 089份,经与国内外作物品种DNA指纹库比较,是全球品种数量和建库规模最大的DNA指纹库,并且在区域试验、品种权保护及种子质量管理等方面都得到了广泛应用。至今已开展玉米品种真实性鉴定等达40 000多份次。同时,对DNA指纹库构建未来发展进行预测,建议继续发挥SSR标记的作用、加快推进SNP标记的研发、发掘In Del标记的应用潜力并持续关注测序技术的发展。     

建立小麦品种DNA指纹的方法研究

建立小麦DNA指纹对遗传资源评价、品种权益保护、种子质量鉴定具有重要的意义。本研究采用15个SSR标记和20个AFLP-SCAR标记，分析了来自我国不同麦区的455个小麦品种，证明用两种分子标记建立小麦DNA指纹可以更加全面地反应品种的遗传多样性。从而，在提出采用SSR标记与AFLP-SCAR标记构建小麦品种DNA指纹的技术路线的基础上，建立了构建DNA指纹的方法模式。按此方法获得的品种指纹代码可以经条形码软件转换为条形码，使为每个品种建立身份证的设想成为可能。     

上海地区水稻已知品种SSR指纹图谱库构建

用24对引物构建上海地区53份水稻品种的DNA指纹图谱,为当地水稻新品种保护、遗传资源评价及亲缘关系分析提供理论依据和技术支持。结果显示,实验中共检测出109条多态性片段,变幅2~9条,平均每对引物4.5417条多态性片段,有效等位基因数为70.8187,平均每个标记2.9508个;Shannon多样性指数(Ⅰ)平均值为1.1296,变幅0.4949~1.8402;多态性信息含量(PIC)平均值为0.5415,变幅0.2656~0.8001。用24个标记建立53份材料的DNA指纹图谱,这些字符串就构成了这53份材料的“身份证号码”,本实验中,各材料的分子身份证号码是唯一的;聚类分析表明,在遗传相似系数0.21处可以将53份材料分为2个类群,分别为粳稻组和籼稻组,但是组内遗传距离较近。由此可见,上海地区水稻品种的遗传多样性相对狭窄。     

应用SSR标记技术鉴定登海11号玉米杂交种纯度的研究

以登海11号玉米杂交种及其亲本和9对玉米SSR位点引物为材料,筛选出了适合该杂交种纯度鉴定的SSR位点引物;并对利用幼苗和干种子为材料提取DNA的效果进行了比较,建立了一套利用SSR标记技术进行玉米杂交种纯度鉴定的技术规程.该操作程序简单、快速、对仪器设备要求较低,易于推广.     

分子标记结合田间观察快速鉴定外源DNA导入玉米的变异后代

本研究通过花粉管通道导入技术将甜高粱总DNA导入优良玉米自交系4112和8902中,并应用RAPD标记技术从导入后代中筛选出变异后代。从306个RAPD引物中筛选出79个引物对供受体及导入后代进行鉴定,其中10个随机引物在供、受体和导入后代间有多态性。对D1和D2代进行田间茎秆糖分调查,并对D2代室内考种,发现糖分含量和穗长、穗重、轴粗、穗粒重等穗部性状都发生了明显变异。结合分子鉴定结果,最终获得了一批变异材料。     

利用SSR技术快速准确鉴定杂交玉米种子纯度

利用一种快速、廉价的DNA提取方法,提取了两个玉米杂交种及其亲本的DNA用于SSR分子标记分析。分析结果显示,10对被分析的引物中有4对在两个杂交种双亲之间显示出多态性,可以用于相应的杂交种纯度分析。另外,分别利用同工酶技术和SSR分子标记技术同时分析了来自这两个杂交种的种子样品的纯度,分析发现,对于一个杂交种,两种方法都能可以鉴定,并且两者检测的结果是一致的,但是对于另外一个杂交种,由于其父母本非常接近,同工酶不能将其区分。因此,这些结果显示SSR分子标记技术可以很好地用于杂交玉米种子的纯度鉴定,即使是这个杂交种是来自两个非常接近的自交系的。     

新疆彩色棉23个品种指纹图谱的构建及遗传多样性分析

以新疆截止2012年审定的23份新彩棉品种为材料,利用SSR标记进行DNA指纹图谱的构建和遗传多样性分析。从5000对SSR引物中,挑选出多态性高、稳定性好、均匀分布在棉花26条染色体上的52对引物,在23份新彩棉品种中筛选出核心引物47对,SSR扩增检测到多态性基因型位点数共计162个,每个标记检测到的基因型位点数在2~7之间,平均为3.45个;引物多态信息量(PIC)值介于0.4537~0.8686之间,平均值为0.7096。结果显示:在23份新彩棉品种中,14份品种采用特异或特征引物可以一次性区分开,其余9份品种需要采用引物组合来实现区别该品种与其他品种。最少选用18对特异引物及组合引物就可以完全区分开新彩棉1~23号品种。利用18对SSR标记构建了新彩棉1号至23号品种的指纹图谱。利用NTSYS-pcV2.10软件聚类分析表明:23个新彩棉品种遗传相似系数变化范围是0.3781~0.9298,平均为0.5511,表明新彩棉品种之间存在着丰富的遗传多样性。     

玉米种子DNA快速提取及杂交种纯度的快速鉴定

本研究用玉米杂交种渝单8号及其双亲的干种子作为材料,使用NaOH溶液研磨玉米种子胚,提取基因组DNA,并利用多重PCR扩增进行玉米杂交种子的纯度鉴定.结果表明,利用玉米种子快速提取方法获得的DNA可进行正常的SSR扩增,并且从20对玉米核心引物中筛选出了8对扩增谱带呈双亲互补型的引物,将其中3对引物YISSR、phi072和phi299852组合起来扩增,扩增谱带清晰可辨,对渝单8号杂交种子的纯度进行准确鉴定.初步表明利用多重PCR技术鉴定玉米种子纯度是可行的,不仅简便快速,而且降低了检测成本.     

山东省玉米骨干自交系和杂交种的SSR指纹图谱构建

构建骨干品种（系）指纹图谱,可为新品种的审定和品种保护建立准确可靠的依据,也是适应玉米育种快速发展的需要。分别利用74对SSR引物对35份骨干自交系和19份主栽杂交种进行了SSR分析。筛选出10对和20对适于玉米自交系和杂交种分析的核心引物,分别检测出115和124个等位变异,将扩增条带数字化,构建了自交系和杂交种的指纹图谱,出现相同指纹图谱的概率分别为3.13×10-11和5.59×10-25。构建的指纹图谱用于玉米品种鉴定是可行的,对玉米新品种审定和品种权保护具有重要意义。