鸡T淋巴细胞和B淋巴细胞分离纯化方法的建立

将鸡胸腺和腔上囊淋巴组织剪碎后与PBS磷酸盐缓冲液混合，通过密度梯度离心和尼龙棉柱过滤对T、B淋巴细胞进行了分离纯化。纯化的T、B淋巴细胞以FITC标记的鼠抗鸡CD4单抗，RPE标记的鼠抗鸡CD8单抗，FITC标记的鼠抗鸡Bu-1单抗染色，用流式细胞仪分类检测其纯度，用台盼蓝排斥试验检测T、B淋巴细胞的活力。结果表明，以本研究建立的方法分离到的T、B淋巴细胞纯度较高（均达90％以上），细胞活力强，与流式细胞仪分选的效果相当，且经济简便。     

不同日龄鸡眼结膜相关淋巴组织的形态学观察

(目的)本试验旨在观察不同日龄鸡眼结膜相关淋巴组织(conjunctiva-associate lymphoid tissue,CALT)的形态结构,从而了解其不同时期的免疫状态。(方法)选择不同日龄的雏鸡,每个时期取3只雏鸡的下眼睑结膜制成冰冻切片,片厚5μm,然后进行H.E.染色。(结果)结果发现,鸡CALT的黏膜上皮为复层扁平上皮,常见杯状细胞。固有层内的淋巴细胞随着日龄增长逐渐增多,21日龄时可观察到生发中心,与淋巴滤泡相关的上皮常缺乏杯状细胞,27日龄CALT的各种组织结构基本成熟。(结论)结果表明,鸡CALT的组织结构随着日龄增长逐渐发育成熟,并在27日龄时其免疫功能基本达到成熟水平。     

不同日龄鸡脾脏中T淋巴细胞增殖功能的动态观察

本研究采用四甲基偶氮唑盐淋巴细胞转化实验法对不同时期鸡的脾脏中T淋巴细胞的增值功能进行检测。结果发现,在胚胎20日龄和出壳后1日龄刀豆蛋白刺激组的A值很小,但到4日龄时A值迅速增大,到7日龄时达到最大,随后又减小,直至35日龄时趋于稳定。由于T淋巴细胞的增殖功能与其鸡免疫功能呈正相关,所以说脾脏中T淋巴细胞的细胞免疫功能随着日龄增长基本呈现逐渐增强的趋势,并在7日龄时达到成熟水平。     

T淋巴细胞和B淋巴细胞的研究进展

T淋巴细胞和B淋巴细胞分别介导特异性细胞免疫和体液免疫,它们是机体免疫系统的重要组成部分。笔者从T、B淋巴细胞的个体发育、表面标志、细胞亚群及功能方面进行了综述。     

艾鼬脾脏组织结构及T淋巴细胞分布规律的研究

采用酸性。α－醋酸萘醋酶（ＡＮＡＥ）反应标记淋巴细胞的细胞化学方法，石蜡连续切片，分别做ＡＮＡＥ染色和Ｈ·Ｅ、Ｗｉｌｄｅｒ法染色，对艾鼬脾脏进行组织结构及Ｔ淋巴细胞分布的研究。结果表明：艾鼬脾脏被膜较薄，被膜下淋巴组织呈弥散性分布．脾小梁不发达：白髓是以中央动脉周围淋巴鞘和脾小结的形式散布在红髓之间；牌小结未见生发中心；边缘区不发达，淋巴细胞排列疏松，在边缘区内分布有较多椭球，椭球体积较小；红髓发达，脾窦宽大。ＡＮＡＥ阳性反应淋巴细胞主要分布在中央动脉周围淋巴鞘、脾小结、边缘区和椭球内也有少量分布。     

鸡脾脏中B淋巴细胞的发育及其定位分布

应用IgM、IgG和IgA单克隆抗体的免疫组织化学方法,研究IgM+、IgG+和IgA+B淋巴细胞在鸡脾脏中的出现、迁移、数量变化规律等一系列的发育过程以及组织定位分布特点。结果显示,IgM+和IgA+细胞在胚胎15日龄时开始出现,IgG+细胞在胚胎18日龄时出现,21日龄雏鸡脾脏的红髓和生发中心中出现以IgG型为主的浆细胞。各日龄IgM+、IgG+和IgA+细胞主要分布在脾脏的特征性组织结构—椭球周围淋巴鞘和生发中心中,这些结构也随着B淋巴细胞的增多而不断发育成熟。B淋巴细胞的数量随着日龄增长持续增加,直至21日龄时趋于稳定,各日龄B淋巴细胞数量始终以IgG+细胞最多,IgM+细胞次之,IgA+细胞最少。结果表明,鸡出壳初期,脾脏的体液免疫功能逐渐增强,并在21日龄时达到成熟水平。     

贵州小型猪胃肠黏膜淋巴组织分布规律研究

为了观察贵州小型猪(Sus Scrofa domestica var.mino Guizhounensis Yu.)胃肠黏膜淋巴组织的分布特点,研究随机抽取封闭群健康成年贵州小型猪,采集胃肠道组织,常规H.E.染色,观察和分析其淋巴组织的分布规律。结果表明:成年贵州小型猪胃黏膜淋巴细胞主要分布于固有层;小肠黏膜的淋巴细胞较胃黏膜极显著增加(P<0.01),且从十二指肠到回肠呈上升趋势;回肠固有层及黏膜下层可见集合淋巴小结;大肠黏膜淋巴细胞由上至下呈减少趋势(P<0.01)。胃肠黏膜各段均可见上皮内淋巴细胞,其中以小肠最多,且从十二指肠到回肠呈下降趋势,大肠次之,胃黏膜最少。说明成年贵州小型猪胃肠黏膜淋巴组织分布规律与人及大鼠、小鼠等哺乳动物相似,以小肠最丰富,大肠其次,胃黏膜最少;小肠三段黏膜淋巴组织呈上升趋势,回肠最丰富,而大肠黏膜淋巴组织则呈下降趋势。     

刺五加多糖对雏鸡脾脏中T、B淋巴细胞定位分布的影响

为了研究雏鸡注射不同浓度刺五加多糖(ASPS)后脾脏中T、B淋巴细胞定位分布的变化情况,将60只1日龄雏鸡随机分为3组:对照组、低剂量组和高剂量组,每组20只,10日龄起对低、高剂量组雏鸡分别皮下注射免疫50和200 mg/m L的ASPS 0.2 m L,对照组雏鸡以相同方式注射等体积的生理盐水,连续注射4 d。于末次免疫后第7天和第14天,从每组中分别随机选取5只雏鸡,取其脾脏制作冰冻切片,采用免疫组织化学方法检测CD3+T淋巴细胞和Bu-1+B淋巴细胞的定位分布。结果显示,与对照组比较,低、高剂量组在注射后的7 d和14 d ASPS均能增加脾脏中CD3+T淋巴细胞和Bu-1+B淋巴细胞的数量,由CD3+T淋巴细胞构成的脾脏特征性结构-动脉周围淋巴鞘(PALS)的面积也显著增加,红髓中CD3+T淋巴细胞也明显增多,分布范围逐渐增加;同时,由Bu-1+B淋巴细胞构成的椭球周围淋巴鞘(EALS)的面积也明显增加,红髓和白髓中的浆细胞数量显著增多,并在注射后14 d时出现生发中心。与对照组比较,高剂量组和注射后14 d时上述变化趋势更为明显。结果表明,ASPS能够增加脾脏中T、B淋巴细胞的数量,并且能够影响其在PALS、EALS等脾脏特征性结构中的定位分布,从而从组织学角度进一步证明ASPS对鸡免疫功能具有显著的增强作用。     

犬瘟热病毒自然感染犬淋巴组织中T、B细胞变化的研究

为了调查患犬瘟热病犬淋巴组织中T、B细胞变化的特点及淋巴细胞减少的发病机制,试验通过免疫组织化学的方法观察了T细胞(用CD3和CD45RO检测T细胞)、B细胞(用IgG、IgM抗血清检测B细胞)和犬瘟热病毒(抗犬瘟热病毒抗体)在病犬淋巴组织中的分布。结果表明:在淋巴组织中的淋巴细胞、淋巴小结中树突状细胞和巨噬细胞中均检出了抗病毒阳性反应细胞。在骨髓组织的前髓细胞中也发现抗病毒阳性反应细胞和嗜酸性胞浆内及核内包涵体的存在。与对照组相比,CD3和CD45RO阳性细胞主要存在于T细胞的分布域;但CD3和CD45RO阳性T细胞的数量较少。位于淋巴组织中的巨噬细胞有的被CD45RO染成阳性。在B细胞分布的区域中,IgG、IgM阳性细胞的数量明显减少;一些位于淋巴组织的浆细胞也被IgG或IgM染成阳性。在淋巴组织中淋巴细胞减少的顺序为:IgG阳性细胞减少最明显,其次为IgM和CD45RO阳性细胞,再次为CD3阳性细胞。依据试验结果,作者认为病犬淋巴组织中淋巴细胞减少主要是由B细胞缺乏所引起的;淋巴细胞的增殖能力减弱是引起淋巴组织中淋巴细胞减少的重要原因。     

网状内皮组织增殖病病毒感染SPF雏鸡外周血液T,B淋巴细胞数量变化

应用ＳＰＡ菌体花环法检测网状内皮组织增殖病病毒（ＲＥＶ）感染ＳＰＦ雏鸡外周血液Ｔ、Ｂ淋巴细胞数量动态变化。结果发现,１日龄ＳＰＦ雏鸡感染ＲＥＶ后７～４９ｄ外周血液Ｔ淋巴细胞数量,１４～４９ｄＢ淋巴细胞数量均明显低于对照组。表明感染ＲＥＶ的ＳＰＦ雏鸡外周血液的细胞免疫和体液免疫水平均下降。     

1～28日龄AA肉鸡VE需求参数的研究

试验采用单因子随机设计法,设4个不同的VE水平,每个水平3个重复。选取96只1日龄爱拔益加(AA)肉鸡,采用玉米—豆粕型基础饲粮,饲粮VE添加量分别为5、15、150及1 500 IU/kg。各处理间除VE水平不同外,其他营养及饲养管理条件均一致。试验期28 d,试验结束时,计算各组AA肉鸡的日采食量、日增重、料肉比、吞噬指数、免疫器官指数和新城疫抗体滴度。试验结果表明,当饲粮中的VE适当超量(150~1 500 IU/kg)供给时,可提高AA肉鸡新城疫抗体滴度、脾脏指数和法氏囊指数,但肉鸡生产性能下降。综合生产性能及免疫机能各项指标得出,1~28日龄AA肉鸡日粮中VE适宜添加水平为5 IU/kg。     

有机锗与MD疫苗接种对感染vMDV雏鸡血清干扰素和T淋巴细胞的影响

通过给父母代蛋鸡饲喂一定剂量Ｇｅ－１３２，获取富锗种蛋并孵化出雏鸡，取３６０只随机分成８组，即Ｃ，Ｄ，Ｅ，Ｆ，Ｉ，Ｊ，Ｋ和Ｌ组，每组４５只，另取普通雏鸡２７０只，随机分成４组，Ａ，Ｇ组各７５只，Ｂ，Ｈ组各６０只，以上各组施行人工感染ｖＭＤＶ，ＭＤ疫苗接种和饲料加锗等３种处理，于第１，１５，３０，４５，６０日龄时检测血清干扰素（ＩＦＮ）含量和外周血Ｔ淋巴细胞数，结果显示：（１）１日龄富锗雏鸡血清ＩＦ     

不同剂型乳酸菌对雏鸡生长性能和小肠黏膜形态的影响

本文旨在比较不同剂型乳酸菌对雏鸡生长性能和小肠黏膜组织形态的影响.试验选用1日龄健康肉雏鸡240只,随机分成4组,每组5个重复,每个重复12只鸡.Ⅰ组为固体制剂组,饲喂基础饲粮+0.2％草乳杆菌固体制剂;Ⅱ组为液体制剂组,饲喂基础饲粮+0.2％草乳杆菌液体制剂;Ⅲ组为抗生素组,饲喂基础饲粮+0.01％黄霉素;Ⅳ组为对照...     

不同日龄牦牛大脑视皮质发育的组织形态学研究

为探明不同发育阶段牦牛大脑视皮质的组织形态结构,应用组织学技术及图像分析软件对不同发育期(1日龄、30日龄、180日龄和成年)对牦牛大脑视皮质厚度、神经元密度和神经元截面积进行分析测量。结果表明,随着年龄的增加,牦牛大脑视皮质的厚度增厚、神经元截面积增大和神经元密度在30日龄时最大,显著高于180日龄和成年组(P<0.05)。结果提示,牦牛大脑视皮质的厚度和神经元截面积从出生到成年逐渐增加,神经元密度从30日龄到成年则逐渐减少。     

左旋咪唑对HVT免疫雏鸡免疫器官中T细胞数量影响的观察

观察了左旋咪唑对HVT免疫雏鸡免疫器官中T细胞数量的影响,结果表明:雏鸡在1日龄接种火鸡疱疹病毒(HVT)冻干苗后,同时连续4 d应用15 mg/kg左旋咪唑组和空白对照组相比,免疫后7、14、21、28 d,胸腺、法氏囊和脾脏等免疫器官的不同区域中T淋巴细胞的数量均呈现不同程度的增多,并在大部分时间内差异显著(P＜0.05).     

淋巴细胞凋亡抑制与鸡马立克氏病的发生

本研究证明,外源性糖皮质激素（ＧＣ）可以诱导正常鸡和马立克氏病毒（ＭＤＶ）疫苗免疫鸡淋巴细胞ＤＮＡ出现１８０～９００ｂｐ的阶梯状小分子断片,即诱导淋巴细胞凋亡过程启动。尤其是疫苗免疫鸡淋巴细胞对体内生理浓度ＧＣ就有相当高的致ＤＮＡ阶梯状小分子断裂的敏感性。而这种诱导反应可以被ＲＵ４８６阻断,人工感染ＭＤＶ鸡同样有抑制该反应的作用,这暗示ＭＤＶ引起无免疫活性淋巴细胞在鸡体内堆集直到形成肿瘤,可能与ＭＤＶ抑制淋巴细胞凋亡,使自体生理性清除非功能性淋巴细胞的机制受阻有关。本研究还以ＲＵ４８６阻断鸡淋巴细胞糖皮质激素受体（ＧＲ）。结果使鸡对ＭＤＶ敏感性提高,ＭＤ病变形成提前。     

The Localization Changes of CD4+ and CD8+ T Lymphocytes in Chicken Lung at Different Ages

The aim of this study was to investigate the immune state of chicken lung in different periods.With lung tissue of Hy-line White chicken at different ages,the distribution and quantity changes of CD4⁺ and CD8⁺T lymphocytes in lung were studied using immunohistochemistry staining.The results showed that CD8⁺T lymphocytes appeared firstly in embryonic at 18 d,while CD4⁺T lymphocytes appeared at 1-day-old chicken.At 4-day-old,there were aggregates of lymphocytes at the junction of the primary and secondary bronchi,which formed obvious broncho-associated lymphoid tissue (BALT).CD4⁺T lymphocytes of each age mainly occupied the central area of BALT,while CD8⁺T lymphocytes mainly surrounded the periphery.Since 56 days old,CD8⁺T lymphocytes are distributed in the inner wall of third-order bronchial airway,atrial septum,gas exchange area and interlobular connective tissue,and are distributed throughout the lung.In terms of quantity change,with the growth of daily age,the number of CD4⁺T lymphocytes and CD8⁺T lymphocytes gradually increased,and the number of CD4⁺ T lymphocytes was more than that of CD8⁺ T lymphocytes before 35 days of age,while the number of CD8⁺ T lymphocytes was significantly more than that of CD4⁺ T lymphocytes at the same age thereafter.The results showed that the distribution and number of CD4⁺ and CD8⁺T lymphocytes in the lungs of chickens were correlated with the age,and the changes could reflect that the lungs before the age of 35 days were dominated by humoral immunity,while the lungs after that tended to be cellular immunity.     

90～100日龄慢速型黄羽肉鸡常规能量和糠麸类饲料原料代谢能评定

试验旨在为慢速型黄羽肉鸡日粮配制提供数据参考并完善我国黄羽肉鸡饲料原料基础数据库,选用90日龄清远麻鸡168只,按体重随机均分成7组,每组6个重复,每个重复4只鸡。试验预饲3 d,全收粪3 d。7组分别饲喂基础日粮、30%玉米日粮、30%大麦日粮、30%小麦日粮、30%高粱日粮、25%麦麸日粮、30%米糠日粮。采用全收粪和套算法测定总能(GE)代谢率、表观代谢能(AME)和氮校正代谢能(AMEn)。结果表明:玉米、大麦、小麦、高粱、麦麸和米糠的总能代谢率分别为83.0%、82.5%、83.3%、83.9%、39.5%、65.9%,AME分别为13.56、12.98、13.10、13.61、6.99、11.92 MJ/kg,AMEn分别为13.41、12.61、12.93、13.41、6.54、11.52 MJ/kg。