琼脂扩散法和酶标斑点试验结合确诊马传贫病

琼脂扩散法和酶标斑点试验结合确诊马传贫病为巩固马传贫病防治已取得“稳定控制区”的成果，１９９１年开始，在市场、运输、产地等环节开展了血清学疫情监测，三年共琼扩血检马类牲畜３０９４头（匹），其中有两次在市场采集血清中，检出琼扩阳性马。被检马匹血清经琼脂...     

应用斑点酶标法诊断耕牛血吸虫病

应用斑点酶标法诊断耕牛血吸虫病四川省兽医总站（６１００４１）毛光琼谢智明阳爱国德阳市兽医站朱庭荣什邡市畜牧局吴兴国目前，全省各地均采用粪孵法诊断耕牛血吸虫病。但由于该方法劳动强度大、时间长、检出率低，一般情况下，每天每人只能检测３０头份粪便，检出率...     

斑点酶标法与斑点金标免疫渗滤法检测牛血吸虫病初探

目的比较宽点酶标法与癍点金标免疫渗滤法检测牛血吸虫病的效果。方法选择疫区水牛,耳静脉取血制备血纸,作为待检样品。分别采用斑点金标免疫渗滤法与癍点酶标法检测,比较检测结果。结果癍点金标渗滤法检测仅需30min,而斑点酶标法则需160min。结论疵点金标免疫渗滤法检测牛血吸虫病,操作简便易行、快捷,省时、省工,工作效率成倍提高。     

应用酶标斑点纸条法诊断水貂阿留申病的研究

水貂阿留申病(Aleutian Disease)在我国已普遍流行,感染率甚高,目前无疫苗及药物治疗,只能通过检测手段来净化貂群。目前在国际上采用的CIEP检验方法,因成本高,条件复杂,不易在国内推广。本文提出了一种快速、检出率高、易掌握、便于推广的酶标斑点纸条法。该法是一种新发展起来的免疫学新技术,其原理是用过碘酸钠化学交联方法将酶分子交联到水貂阿留申病的免疫球蛋白分子上,通过底物的反应作用,生成肉眼可见的颜色反应。此方法优于通常诊断水貂阿留申病的对流免疫电泳法(CIEP)和碘反应法,其特点是:1.灵敏度高,特异性强;2.设备简单,方法简便,标本持久;3.成本低廉,适于批量检验,便于普及推广。     

重组马传染性贫血病病毒核心蛋白抗原在 A GID 和ELISA中应用的评价

用昆虫杆状病毒表达系统获得的马传染性贫血病病毒（ Ｅ Ｉ Ａ Ｖ） 核心蛋白（ Ｇａｇ） 和 Ｐ２６ 蛋白, 作为免疫琼脂双扩散（ Ａ Ｇ Ｉ Ｄ） 和酶联免疫吸附试验（ Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ） 抗原。对７６ 份已知马传贫非特异性血清进行检查, 同时与市售 Ａ Ｇ Ｉ Ｄ 和 Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ 试剂盒作比较。证明, 用表达蛋白作抗原的 Ａ Ｇ Ｉ Ｄ 和 Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ 检测结果均为阴性反应, 而用市售 Ａ Ｇ Ｉ Ｄ 试剂盒检查有５４ 份马血清出现非特异性反应, 市售 Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ 试剂盒检查也出现了非特异性反应, Ｏ Ｄ 值比表达抗原 Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ 高３５ 倍。初步证明在 Ａ Ｇ Ｉ Ｄ 和 Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ 法中, 表达抗原优于常规马传贫病毒抗原。     

鸡传染性法氏囊病（IBD）琼脂扩散试验（AGP）诊断试剂的研制

用典型发病鸡的法氏囊制备抗原,以免疫鸡卵黄抗体代替阳性对照血清,研制出鸡传染性法氏囊病（ＩＢＤ）琼脂扩散试验（ＡＧＰ）诊断试剂,用于检测免疫鸡群的ＩＢＤ抗体,指导疫苗免疫;检测发病鸡群的法氏囊组织ＩＢＤ抗原,达到确诊     

应用琼脂扩散法检测小鹅瘟抗原抗体

近年来,养鹅业在我省发展十分迅速,但由于鹅种蛋来源复杂,使小鹅瘟在我省呈流行趋势,造成了严重的经济损失。为了更好地防制本病,建立快速、准确、方便的诊断方法十分重要。过去常以病毒分离鉴定和剖检的病理变化进行确诊,需要较长时间,操作也较复杂。另外,检测小鹅瘟免疫...     

琼脂扩散试验检测羊口疮病毒

以羊口疮痂皮毒抗原接种家兔制备高免血清,经琼扩试验检测血清价为1∶16;通过抗原与兔抗羊口疮高免血清的方阵分析,确定兔抗羊口疮高免血清诊断抗体的最佳稀释度为1∶4;该诊断抗体对5份不同地区的羊口疮疑似病料都呈现特异性反应,不与山羊痘疫苗毒、口蹄疫疫苗毒和羊正常皮肤抗原发生交叉反应。琼脂扩散试验检测羊口疮病毒是一种简便、易于判断、实用性强的诊断方法。     

EIAV反式激活蛋白(TAT)基因的分子克隆与序列测定

以马传染性贫血病毒 (EIAV)疫苗毒感染驴巨噬细胞培养物 ,在病毒繁殖期提取细胞总 RNA,反转录后使用特异引物扩增病毒基因组拼接产物。将扩增产物克隆、测序并与基因组全序列比较 ,确定了编码 EIAV反式激活蛋白(TAT)的转录产物及阅读框架 ,发现至少有 2种拼接产物编码 TAT。比较 2种阅读框架 ,以保守序列作为模板扩增得到完整的编码 EIAV反式激活蛋白的基因。     

四川省马传染性贫血病防控的回顾与思考

马传染性贫血病（简称马传贫）是严重危害马属动物的一种传染病。四川省于1989年在凉山州越西、昭觉两县发现了阳性马匹,经确诊后,即采取了普查、检疫、免疫注射、扑杀等综合性防控措施,1998年全省达到稳定控制马传贫标准,2003年达到消灭马传贫标准。从2003年至今,各项防控措施不停,监测表明均未发现阳性病例,成效显著。     

马传染性贫血病病毒核心蛋白基因的克隆和表达

根据美国马传染性贫血病病毒（EIAV）Wyoming株基因序列,设计扩增EIAVgag和p26基因的引物,用PCR法能忠实的分别扩增出全长gag和p26基因。经用杆状病毒表达系统对所获gag和p26基因进行克隆和重组,获得了高效稳定表达Gag和p26蛋白的重组杆状病毒（rBVs）。含有gag和p26基因的重组杆状病毒感染昆虫Sf21细胞,经无血清昆虫细胞培养基增殖和纯化,每升培养物能获得2mgCag或12mgp26蛋白。     

Equine Infectious Anemia: Preliminary Investigation of the Complement-Fixation Test for the Demonstration of Antibodies and Antigen

Clinical field cases of equine infectious anemia were studied and the disease was reproduced experimentally in horses. Attempts were made to adapt the complement-fixation test to the detection of antibodies in the serum of infected animals and to the demonstration of antigens in tissue extracts.

A moderate complement-fixing antibody response was demonstrated in the serum of horses shortly after primary exposure to the infectious agent. However, this reactivity was of short duration and occurred with normal as well as with infected saline tissue extracts. It was therefore concluded that this reaction was not specific for equine infectious anemia. Possibly it is due to the appearance of auto-tissue antibodies. The value of this reaction in the diagnosis of the infection was limited because of its short duration and absence in chronic infection and following re-exposure to the infectious agent.

     

编码EIAV核输出因子蛋白Rev的cDNA克隆和序列测定

ＥＩＡＶ在繁殖过程中涉及到多种转录因子的调节,其中Ｒｅｖ蛋白是病毒编码的转录后调节因子,决定了病毒复制由早期到晚期的过渡。Ｒｅｖ是非结构蛋白,由病毒基因组全长转录产物经多次拼接而成。本研究使用ＥＩＡＶ疫苗毒感染驴巨噬细胞培养物,在病毒繁殖早期提取细胞总ＲＮＡ,反转录后使用中国ＥＩＡＶ毒株特异引物扩增病毒基因组拼接产物。将扩增产物克隆后经过核苷酸序列分析,和与基因组全序列的比较,确定了编码Ｒｅｖ蛋白的病毒基因组转录产物的编码序列和拼接位点。