酶联免疫吸附方法分析海水和贝类中的滴滴涕及代谢物

采用间接竞争酶联免疫吸附分析(Ind irect Competitive Enzym e-linked Immunosorbent Assay,ELISA)方法测定海水样品和海洋贝类中的有机氯农药滴滴涕及其主要代谢产物的含量。采用碳二亚胺法,将半抗原DDA分别与载体蛋白牛血清白蛋白(Bovine serum album in,BSA)和卵清蛋白(Ovalbu-m in,OVA)偶联,得到包被抗原和免疫抗原。以DDA-OVA作为免疫抗原,免疫雌性BALB/c小鼠,免疫数次后,测定血清中抗体效价。以DDA-BSA为包被抗原,免疫多克隆抗血清为多克隆抗体,建立间接竞争酶联免疫吸附方法分析检测海水样品和海洋贝类中的有机氯农药二氯二苯三氯乙烷(DDT)及其代谢产物2,2-双(4-氯苯基)乙酸(DDA)、2,2-双(4-氯苯基)-1,1-二氯乙烷(DDD)、2,2-双(4-氯苯基)-1,1-二氯乙烯(DDE)的方法。最低检出限分别为DDT:25 ng/m l,DDA:1.56 ng/m l,DDD:25 ng/m l,DDE:25 ng/m l。贝类样品DDA回收率为96.37%~100.88%,批内变异系数为2.28%~5.13%;贝类样品DDT回收率为93.86%~100.08%,批内变异系数为4.71%~7.68%;海水样品DDT回收率88.23%,批内变异系数6.60%。     

常见酶联免疫吸附试验及注意事项

重大动物疫病强制免疫工作做为防治重大动物疫病发生的有效措施,在保障社会公共安全和畜牧业生产健康发展都具有十分重要的意义,而免疫抗体监测作为评估免疫效果、预警疫情动态最直接的手段,被越来越多的养殖户所认可。     

水产品中庆大霉素直接竞争酶联免疫吸附测定法的建立

建立了测定水产品中庆大霉素(GM)残留的直接竞争酶联免疫吸附测定法(dcELISA),为进一步开发商业化的ELISA试剂盒提供技术支持。通过碳二亚胺法和戊二醛法分别制备了免疫原GM-KLH和包被原GM-OVA,经动物免疫后获取的多克隆抗体与辣根过氧化物酶偶联制备酶标抗体GM-PAb-HRP。优化确立了dcELISA最佳检测条件:包被原质量浓度0.2μg/m L,GM-PAb-HRP稀释度1/3 200,抗体反应时间40 min,缓冲液为PBS(pH 8.0,10 mmol/L)。该方法的半抑制浓度(IC_(50))为0.99μg/L,定量检测线性范围为0.27~3.64μg/L。水产样品加标回收率为77.7%~104.5%,RSD为6.7%~13.2%,最低检测限为2.0μg/kg。该方法可用于水产品中庆大霉素残留的快速测定,为食品安全风险监测提供一种有效的技术手段。     

竞争酶联免疫吸附方法检测氯霉素假阳性原因和质量控制的探讨

氯霉素是一种价格低廉的广谱抗生素,曾经是我国水产品等动物养殖中常用的抗菌药物之一。但由于氯霉素对人类存在潜在的危害,可引起再生障碍性贫血、粒状白细胞缺乏症、新生儿、早产儿灰色综合症等疾病,因此动物源性食品中氯霉素的残留受到世界各国和地区的高度重视。欧盟、美国     

生猪防疫工作中出现的问题及解决方法

随着农业产业结构的逐渐调整,生猪养殖是目前农业发展的重要部分,需要多种途径提高生猪养殖的质量。通过对相关学术研究资料进行汇总得知国内生猪养殖通常是以散养为主,养殖群体以农户为主,在饲养方式上体现出多样化的特征。但是在生猪养殖过程中出现多种防疫工作问题,如果不能做好生猪防疫的控制工作则会影响生猪养殖的质量,给养殖行业造成负面影响。分析在生猪防疫工作中出现的问题,立足问题制定针对性的解决方案以保障养殖质量。     

酶联免疫吸附法在水产养殖中的应用

简要介绍了酶联免疫吸附法，并且就其在水产养殖中的应用进行了较详细的评述，主要包括ELISA用于水产品安全检测、水产动物病原菌检测和水产养殖其它领域的应用，旨在能促进该技术在水产养殖领域中的发展。     

用酶联免疫吸附受体法检测鱼类生长激素的生物活性

根据激素一受体反应的原理，结合酶联免疫吸附测定法（ＥＬＩＳＡ）和放射受体测定法（ＲＲＡ）的优点，应用我们纯化的Ａ昌鱼生长激素（ｇｃＧＨ）和大鳞大马哈鱼生长激素（ｓＧＨ）及其特异抗体，采用鱼类肝细胞膜受体制剂，首次建立了测定鱼类ＧＨ生物活性的酶联免疫吸附受体测定法（ＥＬＩＳＡ－ＲＡ）。此法检测草鱼ＧＨ的灵敏度达０．０６３￣０．１２５ｕｇ／ｍｌ，检测大马哈鱼ＧＨ与草鱼肝膜受体结合的灵敏度达０．２５ｕｇ     

酶联免疫吸附试验(ELISA)在水产品药物残留检测中存在的问题及对策

酶联免疫吸附试验(ELISA)具有操作简便、灵敏度高、样品容量大、仪器化程度和分析成本低的优点,已成为目前水产品药物残留检测中使用最普遍的方法之一,几乎所有重要的水产品药残检测都已建立或试图建立ELISA,如氯霉素、四环素、链霉素、己烯雌酚等.但ELISA也有影响因素较多,易出现假阳性结果等缺点.现将操作过程中需要注意的问题,作如下探讨.     

畜牧兽医工作中出现的问题及解决措施

论述了畜牧兽医工作存在的主要问题,并针对这些问题提出了相对的解决措施,希望能为我国畜牧业的发展提供一定的参考价值,从而促进我国畜牧业的发展。     

酶联免疫吸附法在饲料“瘦肉精”检测中的应用

<正>瘦肉精猪肉问题时常出现在新闻报道中,它在动物饲料中的添加,对人体健康危害很大,从而造成人类社会食品安全隐患。如何检测饲料中是否有瘦肉精,以便采取有效控制措施,避免给消费者身体健康造成危害,是每个畜牧工作者义不容辞的责任。虽然高效液相色谱法(HPLC)、气相色谱质谱法(GC—MS)、液相色谱质谱联用法(LC—MS)等仪器测定方法的假阳性率低,但检测过程比较繁琐,并受到     

斑点酶联免疫吸附试验检测猪瘟血清抗体最佳条件的研究

以硝酸纤维膜为固相载体,以猪瘟病毒为抗原,确定了Dot-PPA-ELISA检测猪瘟抗体的最佳反应条件。试验表明,猪瘟兔化弱毒经仔猪睾丸原代细胞培养纯化,以0.05mol/LpH9.5CBS缓冲液稀释至浓度为0.98～1.15mg/mL制备诊检抗原膜片;采用4%蛋清蛋白0.05mol/LpH9.5CBS封闭;检测反应稀释液应用0.01MPPBST(含0.1%PEG、0.05Tween-20),酶结合物工作浓度以1∶30,底物选取4-氯1-萘酚等为检测猪瘟血清抗体的最佳反应条件。重复试验证明了其检测稳定性好。交叉试验、阻断试验证明了其特异性强。     

斑点酶联免疫吸附试验检测猪瘟血清抗体最佳条件的研究

以硝酸纤维膜为固相载体，以猪瘟病毒为抗原，确定了Dot—PPA—ELISA检测猪瘟抗体的最佳反应条件。试验表明，猪瘟兔化弱毒经仔猪睾丸原代细胞培养纯化，以0．05mol／LpH9．5CBS缓冲液稀释至浓度为0．98～1．15mg／mL制备诊检抗原膜片；采用4％蛋清蛋白0．05mol／LpH9．5CBS封闭；检测反应稀释液应用0．01 M PPBST（含0.1％PEG、0．05Tween-20），酶结合物工作浓度以1：30，底物选取4-氯1-萘酚等为检测猪瘟血清抗体的最佳反应条件。重复试验证明了其检测稳定性好。交叉试验、阻断试验证明了其特异性强.     

酸联免疫吸附法测定盐酸克伦特罗常见误差分析及解决对策

盐酸克伦特罗俗称“瘦肉精”,化学名:2-[(叔丁氨基)甲]-4-氨基3,5-二氯苯甲醇盐酸盐;为我国兴奋剂目录中列出的蛋白同化制剂类化学物质,属于beta兴奋剂,添加于饲料中能提高几种家畜包括猪的瘦肉率。由于瘦肉精在动物体内可蓄积,人在摄取含有一定量瘦肉精的动物食品就会发生中毒现象,尤其对于患有高血压、心脏病的人来说可危及生命。     

牛改人工授精工作中存在的问题和解决的方法

<正>黄牛改良冷冻精液人工授精技术是一项推广应用面大、投入多、科技含量高、可操作性强的一项新技术,也是推广难度较大的群众性工作。经过多年的黄牛改良工作,杂种牛的初生重,日增重、产肉、产奶和肉的品质都有了较大幅度的提高,取得了明显的效益。     

应用酶联免疫吸附法检测暴发病病原—嗜水气单胞菌的研究

作者制备了暴发病病原——嗜水气单胞菌TPS—30株的免、鸡抗血清,在此基础上建立了双抗体夹心酶联免疫吸附法。该法可测出10ng抗原,对点状气单胞菌、温和气单胞菌等菌株不发生交叉反应,且能有效地测出人工感染白鲫中的病原体,整个过程可在1.5h内完成,是一种有前途的暴发病快速诊断方法。     

当前农村养殖中出现的问题和对策

<正>畜牧养殖一直是我国农民脱贫致富、成家立业的首选项目,在我国的农村经济中占有举足轻重的地位,在一些养殖大县甚至占有半壁江山。但是近年来,农村养殖业中出现了一些问题,致使养殖效益降低,养殖积极性受挫,极大地阻碍了农村畜牧养殖业的健康稳定发展。1当前农村养殖中出现的问题1.1疾病方面的问题     

甲鱼控温养殖中存在的主要问题和解决方法

近一个月来,大部分稚鳖已进入温室养殖。在养殖过程中,我们发现了一些问题。一、控温养殖中的一些问题1．越冬养殖期间的问题由于甲鱼全价配合饲料所具有的优越性,许多原来用鲜活饲料的甲鱼生产场转用配合饲料,选用什么样的配合饲料,选用什么生产厂家的配合饲料是养殖户比较关注的问题。2．养殖环境不好控制由于控温养殖水温较高,因此,水质变化非常迅速,换水2～3天后水就变黑、发臭,不彻底换水不会有质的改变,彻底换水对甲鱼有较大的惊扰,会影响甲鱼生长,而且换水后底砂还是黑色,2～3天水就不会变黑。3．由于温室养殖多用地下…     

水产配合饲料使用中存在的问题及解决对策

我国是世界上最大的水产品养殖国,同时也是唯一一个养殖产量超过捕捞产量的国家,而现有水产养殖品产量中,仅有20%左右是以饲料喂养生产的。根据我国目前的政策,海洋和江河捕捞产量保持零增长,水产品总量的增长将基本上由养殖产量来提供,采用饲料养殖的比例预期将提高到35%以上,2010年水产饲料的市场     

刺参人工育苗和养殖过程中存在的问题及其解决方法

近年来,随着刺参虾池养殖和浅海养殖规模的不断扩大,其人工育苗技术得到迅速发展,同时,新问题也不断出现,导致刺参育苗与养殖效果并不十分理想。现将刺参育苗和养殖过程中存在的问题总结如下,并提出相关解决方法,供大家参考。     

怎样解决“以船核算”出现的问题

海南行政区的海洋群众渔业,于1981年全面实行以船核算以后,普遍增产增收,经济效益十分显著.但是,这场变革初时由于缺乏经验,引导不够,也出现了一些新问题.如有的渔船基础不牢,成员经常变动,甚至互相拆台,影响生产;单船经营经济力量弱,抗灾能力差;船员之间在分配上还存在“小范围内的平均主义”;许多渔船没有建立财务管理制度,等等.针对这些问题,我们在深入调查研究、总结渔民管理经验的基础上,采取了以下措施: