担子菌纤维素酶的分离与纯化

本实验以高产纤维素酶担子菌LKY01发酵液出发分离获得纤维素酶。将担子菌七天发酵液收集后,经30%-80%硫酸铵分级沉淀、0.45mm滤膜过滤、10kd截留超滤管超滤除盐浓缩,得浓缩酶液。将浓缩酶液上DEAE-SepharoseFastFlow阴离子交换柱,进行梯度线性洗脱。合并酶活最高主峰洗脱液,浓缩后上Superdex75凝胶层析柱,得到的两个酶活蛋白组分,FPA酶和CMC酶。经测酶活及电泳实验分析,所得FPA酶和CMC酶分子量分别为36.2和34.6,纯化倍数分别为26.86倍和24.42倍。     

纤维素酶高产菌的分离纯化与产酶工艺优化

从自然界采集到的各种样本中分离纯化纤维素酶产生菌,运用透明圈法进行初筛,将通过初筛的菌株进行摇瓶液体培养,测定各菌株的酶活,筛选出了一株酶活较高的纤维素酶产生菌.通过对该菌株在不同产酶条件(包括碳源、氮源、pH、温度、发酵时间)下羧甲基纤维素(CMC)酶活和滤纸酶活(FPA)的测定,发现其最佳产酶工艺条件为麸皮作碳源,黄豆粉作氮源,pH 6.5.在30℃下培养92 h.     

团头鲂肠道菌株MA35产纤维素酶分离纯化及性质分析

对团头鲂肠道菌株Aspergillus niveus MA35发酵得到一种内切型纤维素酶采用Q-琼脂糖凝胶FF阳离子交换层析和葡聚糖G-100凝胶层析进行分离纯化。酶的比活力由22.3 U/mg提高到30.6 U/mg。SDS-PAGE结果显示,酶的分子量约为45 ku。该酶水解羧甲基纤维素钠的最适温度为45 ℃,最适pH 4.5,在pH 4.0~8.0以及30~55 ℃之间具有良好的稳定性。在终离子浓度为1 mmol/L以及10 mmol/L下,Zn²⁺、Mn²⁺对酶的活性有激活作用,Mg²⁺、Cu²⁺、Fe²⁺、Cd²⁺、Co²⁺对酶的活性有抑制作用,其中Mg²⁺、Cu²⁺、Fe²⁺抑制作用较强,Na⁺、K⁺、Ca²⁺对酶的活性几乎没有影响。     

几种担子菌菌丝原生质体的分离与再生

本实验从几种食用担子菌的菌丝中运用纤维素酶和β-葡糖醛苷酸酶的混合酶解液分离出原生质体并进行了培养。这些原生质体在培养中再生了管状的初生菌丝,并在继代培养中形成克隆。本论文报道了原生质体从菌丝释放的形态学观察结果,并对原生质体分离与再生的条件进行了讨论。     

绿色木霉内切纤维素酶的分离纯化及酶学性质的研究

绿色木霉AS3.5455经固体发酵,提取胞外纤维素酶,经硫酸铵分级沉淀、透析、DEAE Cellulose-52离子交换层析、SephadexG-150凝胶柱层析等纯化出单一组分的内切β-葡聚糖苷酶,经SDS-PAGE电泳分析,该内切酶的相对分子量约为58.7KD,内切β-葡聚糖酶的最适作用温度为55℃,最适反应pH为5.5。     

茶多酚提取与分离纯化研究进展

综述了有关茶多酚提取及儿茶素的单体分离纯化技术研究的最新进展,对茶多酚提取及分离纯化技术方法简要介绍,并探讨此研究领域的技术发展前景。     

绿色木霉Fn10-1纤维素酶的分离纯化及酶学特性测定

试验研究了绿色木霉Fn10-1纤维素酶的初步纯化及酶学性质开展研究。结果表明,该纤维素酶的最适催化温度为70℃,最适pH 7.6,在温度为4~50℃下均能保持较稳定的酶活,高于50℃以后,热稳定性变差,酶活力开始急剧下降。pH在5.6~7.6时该酶有较好的稳定性。Na+、Mn2+、Fe2+、Mg2+、Co2+、Ca2+、Ba2+、Al3+对纤维素酶具有一定的激活作用,Ag+、Fe3+、Cu2+、Zn2+、K+对该酶有一定的抑制作用,其中Cu2+的抑制作用尤为明显。     

茶黄素的提取分离与纯化研究进展

综述了国内外茶黄素的提取和分离纯化方法的研究成果和研究现状，并分析评价了柱层析法和高速逆流色谱法的优缺点，认为两者结合是理想的分离纯化工艺。     

蛋白质分离纯化策略

系统地介绍了蛋白质分离纯化的依据、原则、过程、特点、问题和对策,为提高我国蛋白质分离纯化水平提供参考。     

魔芋葡甘露聚糖的分离纯化方法综述

综述了自７０年代以来，魔芋葡甘露聚糖（ＫＧＭ）的分离纯化方法。     

贻贝抗菌肽的分离纯化

[目的]从贻贝中提取具有抗菌作用的多肽。[方法]以紫贻贝为原料,采用0.5%的乙酸直接提取方式提取抗菌肽,再经过Sephacryl S-100聚丙烯酰胺凝胶色谱进行纯化,收集各馏分并用滤纸片扩散法测定其抗菌活性及对各种细菌的最低抑菌浓度,使用SDS-PAGE测定抗菌肽的分子质量,测定其在100℃条件下不同处理时间和不同pH条件下抗菌活性的变化。[结果]使用0.5%的乙酸作为提取液粗提取抗菌肽具有较高的提取效率,使用Sephacryl S-100纯化抗菌肽,可将抗菌肽纯化为单一物质。分离纯化出的贻贝抗菌肽具有较强的抗菌性,分子质量为5 908,且具有耐高温、耐酸碱的性质。[结论]该研究为抗菌肽的大规模生产奠定了基础。     

枯草芽孢杆菌C-36纤维素酶的纯化及酶学性质

枯草芽孢杆菌C-36纤维素酶经硫酸铵、SephadexG-75、SephadexG-100分离纯化后,得到一个电泳纯的葡聚糖内切酶。SDS-PAGE结果表明,该酶分子量约为35kD。最适反应温度和pH分别为65℃和pH6.8,Zn2 、Pb2 、Fe3 对酶有抑制作用,Ba2 、Fe2 对酶有激活作用,在50℃,pH6.8条件下,酶对CMC-Na的米氏常数Km为0.34g/L,最大反应速度Vmax为0.17mg/(min.mL)。     

农用抗生素分离纯化的研究进展

目前我国农用抗生素大规模生产的品种主要有井冈霉素、阿维菌素和赤霉素,而未能大规模生产的抗生素共同存在的问题是技术不成熟,生产成本较高,进而限制了其在生产实践中的应用;另外我国农用抗生素研究的人力、物力过于分散.对一些优良品种投入太少,也是造成大规模生产的农用抗生素品种少的主要因素.阐述了国内外农用抗生素有效成分分离、提取、纯化技术特点与发展趋势.     

番茄红素分离纯化研究

以5%番茄红素粉为原料,研究了应用不同型号树脂对番茄红素进行分离纯化的效果。结果表明,不同型号树脂对番茄红素的分离纯化效果不同,其分离纯化效果顺序为X-5AB-8S-8离子交换树脂,最适静态吸附样液浓度为0.03 g/L、最适静态解吸时间为1 h、最适动态上样速度为2 BV/h、最适洗脱剂为乙酸乙酯。番茄红素经X-5吸附后,以乙酸乙酯为洗脱剂,可将番茄红素浓缩5.9倍,具有良好的富集纯化效果。     

聚乙二醇修饰蛋白的快速分离与纯化

【目的】建立聚乙二醇修饰蛋白的快速分离纯化方法。【方法】以4种聚乙二醇化药用蛋白为研究对象,采用阳离子交换树脂进行纯化。纯化条件:Hiprep 16/10 CM Sepharose FF(1 mL)预装柱;流动相:A液为20mmol/L pH4.0的醋酸缓冲液;B液为A液中加入1 mol/L NaCl;B液以0~100%离子强度线性梯度洗脱100 min,流速0.2 mL/min,波长280 nm检测,收集各洗脱峰。【结果】一步纯化可将单点修饰产物与聚乙二醇、多点修饰产物以及未修饰蛋白分离开来,单点修饰产物经SDS-PAGE检测呈单一条带,经质谱检测其相对分子质量与预期相符。【结论】所建立的纯化方法可快速分离纯化聚乙二醇修饰蛋白。     

水磨年糕中微生物的分离纯化与鉴定

通过对年糕内部和表面的微生物进行分离纯化,并通过形态观察、生化测定的方法来鉴定微生物的组成,结果表明:年糕表面的微生物主要有6种细菌、3种霉菌和2种酵母菌。细菌中4种是芽孢杆菌,分别为巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium)、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus)和短芽孢杆菌(Bacillus brevis),2种是非芽孢杆菌,分别为乙酰短杆菌(Brevibacterium acetylicum)和乙酸钙不动杆菌(Acinetobacter calcoaceticus);霉菌分别为米根霉(Rhizopus oryzae)、构巢曲霉(Aspergillus nidulans)和米曲霉(Aspergillus oryzae);酵母菌分别为茁芽丝孢酵母(Trichosporon pullulans)和白色假丝酵母(Candida albicans)。年糕内部的微生物有巨大芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、短芽孢杆菌和白色假丝酵母,无霉菌。     

蛋黄卵磷脂的分离纯化研究进展

该文介绍了卵磷脂的理化性质、生理功能,综述了国内外对蛋黄卵磷脂的分离提取和精制方法及其在食品中的应用等方面的研究进展,展示了其在食品、药品等研究开发方面的广阔前景.     

纤维素酶纯化方法与原生质体的制备

以绿色木霉为材料,经稻草粉固体发酵、浸提得纤维素酶粗酶液,然后经硫酸铵分级沉淀,超滤,SephadexG-75柱层析3种方法纯化,利用得到的纤维素酶,分别制备幼嫩番茄叶片的原生质体。结果发现高度纯化的纤维素酶几乎得不到原生质体,而经超滤后的纤维素酶制备原生质体效果最佳。     

磷脂酶的分离纯化技术研究进展

为了充分认识磷脂酶的酶学性质及应用技术,笔者对磷脂酶A1/A2、C、D的分离纯化方法及其发展前景进行了综合论述。