分子标记在杂交水稻种子纯度鉴定中的应用

对杂交水稻种子纯度鉴定的蛋白质指纹鉴定法和DNA分子标记法的研究与应用作了介绍，讨论了各种方法的优缺点，并指出SSR技术将是最有潜力的杂交水稻种子纯度鉴定方法。     

SSR分子标记技术在杂交玉米种子纯度鉴定中的应用

玉米种子的纯度是产量的保证,把握好纯度非常重要。传统形态鉴定法及同工酶法不能对非常相似的系及品种进行鉴定,SSR分子标记技术能克服传统技术的缺陷,利用筛选的10个玉米纯度鉴定核心引物,对玉米种子进行纯度鉴定;结合玉米DNA图谱可以对玉米种子进行真实性鉴定。技术简单,结果可靠,随着技术的成熟,成本的降低,将会得到普及。     

分子标记在杂交水稻种子纯度鉴定中的应用

对杂交水稻种子纯度鉴定的蛋白质指纹鉴定法和DNA分子标记法的研究与应用作了介绍,讨论了各种方法的优缺点,并指出SSR技术将是最有潜力的杂交水稻种子纯度鉴定方法.     

利用SSR标记鉴定杂交水稻种子纯度

用SSR标记和田间观察鉴定了5份杂交稻材料的纯度,其中1份材料采用6个标记和田间观察鉴定同样的158个单株,4份材料分别选用3个标记鉴定200个单株、采用田间观察鉴定另外800个单株。标记检测和田间观察鉴定结果高度吻合,但不同标记上存在差异,选用3个标记可以较好地平衡效率和可靠性。     

SSR标记技术在种子纯度鉴定中的研究进展

种子纯度在种子生产中的地位日益提高,以往的形态鉴定等方法难以满足种子强度鉴定的要求。分子标记技术越来越多地被应用到种子纯度鉴定中。本文介绍了SSR分子标记技术的基本原理和特点,简要叙述了SSR标记技术在农作物种子纯度鉴定上的研究进展,并就其在杂交种纯度方面的应用潜力进行了探讨。     

利用微卫星DNA标记进行杂交水稻种子纯度鉴定的研究

利用微卫星分子标记，对湖南目前推广的6个杂交稻组合及其亲本之间的多态性进行了研究。在已筛选的178对引物中，有52对能在一个或多个组合中显示稳定的多态性，杂种表现为父母本互补带型。不同组合间多态性的比例具有差异。用表现多态性的两对引物分别对掺假的威优46和金优207进行纯度鉴定，都能有效地将掺入组合中的假种子区分开。该方法具有准确可靠、多态性高、稳定性好、易于操作的特点。     

杂交水稻种子纯度分子鉴定技术研究

为了鉴定杂交水稻种子的纯度,用49条ISSR引物时供试的5组三系杂交水稻F1和父母本进行扩增,结果28条引物能扩增出DNA带,随机选取其中3条引物用于指纹分析,3条ISSR引物共扩增出32条DNA带,其中多态性条带为27条,并将这些多态性条带进行聚类分析。     

利用SSR分子标记快速鉴定杂交水稻种子纯度技术体系的优化

针对目前SSR分子标记技术快速鉴定杂交水稻种子纯度方法商业化应用的限制因素,从DNA提取、PCR反应体系和程序及凝胶电泳等方面进行了技术体系的优化。原方法经优化后,DNA提取时间从每次5h以上减少到2.5min,PCR反应过程从200min缩短至65min,改聚丙烯酰胺凝胶电泳为琼脂糖凝胶电泳,电泳时间由3.0-3.5h缩短为1h,且通过减少dNTP、Taq酶的用量,对琼脂糖凝胶反复利用,大大降低了成本,减少了废弃物的污染,从而建立了准确、简单、快速、成本低廉的快速鉴定杂交稻种子纯度的技术体系。     

SSR分子标记技术在杂交棉纯度鉴定中的应用

 利用SSR(Simple sequence repeats)分子标记技术,对湖北惠民农业科技有限公司的3个品种的棉花杂种F₁共计31份田间材料进行分子标记纯度鉴定。通过田间纯度鉴定与SSR分子标记纯度鉴定对比,运用相关分析和回归分析的统计方法,研究SSR分子标记纯度鉴定在杂交棉花制种中的可行性。结果表明,相关分析得出SSR分子标记鉴定纯度和田间鉴定纯度具有很强的相关性,相关系数在0.7以上;回归分析得出SSR分子标记鉴定纯度与田间鉴定纯度呈现极显著正相关,SSR分子标记鉴定纯度能够准确预测田间纯度。因此,SSR分子标记纯度鉴定能够应用于棉花杂交制种。     

不同引物鉴定同一杂交水稻种子样品纯度结果的差异及其原因分析

在对冈优158、Ⅱ优808、五优308及天丰优316的杂交种子样品进行室内纯度鉴定时,发现不同SSR引物鉴定的纯度结果存在明显差异。为了探讨其原因,将这4个组合的种子样品在海南进行田间种植鉴定,并按单株进行了分子与田间表型的对比分析。结果表明,冈优158、Ⅱ优808、五优308和天丰优316分别用引物RM208、RM264、RM242和RM164鉴定种子纯度时,只能鉴定出不育系(母本)杂株,室内分子鉴定纯度均高于相应的田间纯度;而分别用引物RM341、RM297、RM21、RM110鉴定时,不仅能鉴定出不育系(母本)杂株,还能鉴定出串粉株,室内分子鉴定纯度与田间鉴定纯度相当。因此,室内纯度鉴定应采用多对引物进行检测,以增加识别串粉株的几率。     

Identification and Purity Test of Super Hybrid Rice with SSR Molecular Markers

Five super hybrid rice combinations, i.e. HYS-1/R105, Pei‘ai 64S/E32, Liangyoupeijiu (Pei‘ai 64S/9311), 88S/0293, and J23A/Q611, and their parental lines were tested by means of SSR analysis. A total of 144 SSR primer pairs distributed on 12 rice chromosomes were used, out of which 47 detected polymorphism among the tested rice lines. Among all these primers, RM337 and RM154 produced polymorphic patterns in four or more of the tested experimental materials respectively, and they could distinguish among most rice genotypes tested. Twenty-four primer pairs, two on each rice chromosome, were selected to make a reference SSR marker-based fingerprinting for the rice lines. For most of the primer pairs, F1 hybrids mainly showed complementary pattern of both parents, which could be very useful to distinguish the F1 from its parental lines. In addition, 5 primer pairs were selected as special primer pairs for five hybrid rice combinations respectively. By combining the rapid, simple method on DNA extraction, it is suggested that SSR technique has wide prospective in variety authentication and purity identification.     

应用SSR分子标记鉴定超级杂交水稻组合及其纯度

 应用SSR分子标记技术对超级杂交稻5个组合（HYS 1/R105、培矮64S/E32、两优培九、88S/0293、J23A/Q611）及其9个亲本进行了鉴定。用144对SSR引物进行筛选，有47对能够在实验材料中显示较好的多态性，其中，RM337与RM154呈现丰富多态性，可鉴别供试组合并分别与其亲本区分开。对于水稻的每一条染色体，各筛选出两条产生多态性的引物，共24对，并提供一组作为鉴定参考的图谱；通过杂种表现为父母本互补带型的特点，找到在杂交稻组合及其亲本间具有多态性的引物，筛选出5对引物分别作为鉴定上述5个超级杂交稻组合的特异引物，进而针对杂交稻不同的纯度问题设计鉴定方法。     

两系杂交稻亲本SSR指纹图谱的建立及其在种子纯度鉴定中的应用

利用筛选到的20对SSR引物建立了两系杂交稻32个亲本(24个光温敏不育系和8个恢复系)的DNA指纹图谱,针对所涉及的9个杂交稻组合,获得能在父、母本间表现出多态性的特异SSR标记48个.以杂交稻组合两优932为例,在实验室用一个特异SSR标记(RM302)对200粒种子样本进行了纯度鉴定,结果鉴定纯度为90.50%,与田间种植鉴定结果90.60%(海南鉴定)和91.57%(武汉鉴定)基本一致,表明SSR标记技术适用于构建DNA指纹图谱和种子纯度鉴定.     

两优培九种子纯度的RAPD快速鉴定

用100个0peron引物，对两优培九及其双亲之间的多态性进行扩增RAPD分析，发现OPN9等4个引物能显示稳定的多态性。用OPN9对人为混有培矮64S的两优培九种子样本进行纯度鉴定，结果该引物能准确地将掺人杂种中的不育系鉴别出来。该方法具有快速、准确、成本低等特点。     

播种期对杂交稻种子纯度海南种植鉴定结果的影响

通过比较不同播种时期杂交水稻种子样品在海南种植鉴定的农艺性状表现,发现播始历期、株高、结实率等主要性状均表现出不同程度的变化,且部分组合与其亲本的变化幅度不同,从而影响鉴定的准确性。根据品种特性,确定最佳播种时期,并采用合理的栽培与管理技术,是提高杂交水稻种子纯度种植鉴定结果准确性的关键。     

我国主要杂交水稻组合及其亲本SSR标记和纯度鉴定

选用分布于水稻12条染色体上的26对SSR引物对我国9个主要的杂交水稻组合及其亲本进行了SSR标记分析,21对多态性引物共扩增出62条条带,平均2.95条,能够有效地区分所有恢复系和大部分不育系。杂交种条带均为父母本的互补型,很适合做杂交种纯度鉴定。用引物RM17对杂交稻组合汕优63和两优培九进行了100粒单种子SSR鉴定,所测纯度分别为96.0%和98.0%,与田间纯度96.2%和97.7%非常接近,显示出SSR技术在品种认证和纯度鉴定中有广阔的前景。     

鉴定玉米杂交种郑单958种子纯度的SSR标记筛选

利用SSR标记技术,选用50对SSR引物以玉米杂交种郑单958及其父母本DNA为材料,筛选出了4对在杂交种中呈现双亲互补带型的引物。研究表明：这4对引物均可用于玉米杂交种郑单958种子的纯度鉴定。     

杂交稻杂株的表现型及保纯对策

根据５６２份样品的海南纯度鉴定，从遗传学角度把杂株的表现型分为当代表现型、隔代表现型、多代表现型、变异表现型等四类，并提出了防杂保纯的对策．