耐甲氧西林金黄色葡萄球菌分离鉴定及耐药基因检测

为了解动物源性金黄色葡萄球菌对市售常见的各种兽用抗生素药物的耐药情况,掌握并分析其耐药性,指导临床合理使用抗菌药物。本研究通过常规细菌分离鉴定患病动物炎性分泌物,对分离菌株进行生化试验、耐药性试验、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(Methicillin-resistant S.aureus,MRSA)鉴定和耐药基因鉴定,获得4株耐药金黄色葡萄球菌,2株为MRSA,2株为甲氧西林敏感的金黄色葡萄球菌(Methicillinsusceptible S.aureus,MSSA);4株金黄色葡萄球菌均检测出tetA、aac(6')/aph(2')、sul1耐药基因,其中2株MRSA检测出mecA。MRSA与MSSA均表现出了多重耐药现象,其中MRSA比MSSA的耐药现象更为广泛。因此,要更加关注MRSA的流行情况,制定规范的用药行为,严控抗生素药物的滥用。     

广东省宠物源伪中间型葡萄球菌的耐药性调查研究

为调查广东省宠物源伪中间型葡萄球菌(Staphylococcus pseudintermedius)的携带和耐药情况,从小动物临床采集皮肤、耳部和鼻腔等部位的样品,分离鉴定伪中间型葡萄球菌,并采用琼脂稀释法和纸片扩散法对伪中间型葡萄球菌进行抗菌药物敏感性检测,采用PCR方法检测mecA基因。结果表明,从898个样品中共分离到144株伪中间型葡萄球菌,检出率为16.0%,皮肤、耳部和鼻腔的伪中间型葡萄球菌检出率分别为20%(64/319)、17.8%(64/359)和7.5%(3/40)。抗菌药物敏感性检测和mecA基因检测结果显示有89株(61.8%)为耐甲氧西林伪中间型葡萄球菌(MRSP)。伪中间型葡萄球菌对氨苄西林、红霉素、阿奇霉素、克林霉素和四环素的耐药率均在80%以上,对利福平和阿米卡星的耐药率低于8%,对万古霉素、利奈唑胺、喹奴普汀/达福普汀和替考拉宁均敏感。大部分(>69%)MRSP对红霉素、克林霉素、泰乐菌素、阿奇霉素、复方新诺明、四环素、环丙沙星和恩诺沙星等抗菌药物表现耐药。本研究结果表明宠物源伪中间型葡萄球菌的耐药情况严重且MRSP的检出率高,应高度重视宠物源细菌耐药问题。     

耐甲氧西林葡萄球菌的检测方法

本文对耐甲氧西林葡萄球菌的检测方法进行介绍,以期选择快速准确的检测方法,对防控该病起到一定作用。     

犬脓皮病耐甲氧西林伪中间型葡萄球菌抗菌药耐药性及消毒剂抗性研究进展

犬脓皮病是一类主要由耐甲氧西林伪中间型葡萄球菌（MRSP）感染而引起的化脓性皮肤病。葡萄球菌是一种人与动物均易感的细菌,常引起各种化脓性疾病,其中,MRSP作为一种动物源葡萄球菌还会成为耐药基因贮存库,可将耐药基因通过环境或食物链传给人类。近年来MRSP造成的皮肤疾病病例大幅上升,给感染的控制带来挑战。笔者综合了犬脓皮病致病菌的抗菌药耐药性及其消毒剂抗性的相关研究,从MRSP的致病机制出发,总结了MRSP通过破坏细胞免疫系统的功能导致感染发生的相关机制,简述了多个国家MRSP对抗菌药的显著耐药性与相关耐药基因,如mecA和cat基因等,介绍了MRSP对胍类消毒剂与季铵盐类消毒剂的抗性及抗性机制,对外排泵、基因调控与抗性基因的可转移性等多种机制进行了论述,同时为避免MRSP对抗菌药与消毒剂的共同耐药性对犬脓皮病的治疗造成干扰,笔者从移动遗传元件介导的获得性抗性与依赖于细菌细胞结构的固有抗性等方面系统地分析了MRSP对消毒剂抗性和抗菌药耐药性之间的争议与联系,以期寻找一种科学合理的治疗方案,为犬脓皮病的临床用药提供参考。     

牛源耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的分离鉴定

从奶牛分离得到耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（methieillin—resistant Staphylococcus aureus,MRSA）。按常规方法复苏菌株,用血浆凝固酶试验鉴定SA。用KB法、琼脂筛选法、生化鉴定法（VITEK32）、聚合酶链反应等鉴定MRSA。常规分离鏊定的葡萄球菌468株,其中凝固酶阴性葡萄球菌（coagulase negative Staphylococcus,CNS）361株,检出率为77．149,6,金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus,SA）105株,检出率为22．44％,MRSA36株检出率为34．29％,2株未定型,占0．42％。而MRSA在乳房炎奶样中检出率高达34．29％,表明新疆兵团部分垦区牛场MRSA已经呈蔓延趋势。     

牛源耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的检测

本研究旨在了解甘肃地区奶牛乳房炎金黄色葡萄球菌的耐药性和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的感染情况,为奶牛乳房炎的防制提供理论依据。采用KB纸片扩散法,检测17株金黄色葡萄球菌对8种不同抗菌药物的敏感性;再用琼脂稀释法检测了苯唑西林、万古霉素对金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度(MICs);头孢西丁纸片扩散法和PCR扩增特异性mecA耐药基因对所有受试菌株进行全面的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌检测。结果表明,菌株对青霉素、磺胺异恶唑具有较强抗性,而对环丙沙星、头孢唑啉、万古霉素和苯唑西林全敏感;头孢西丁纸片扩散法未能检测出表型为MRSA的阳性菌株,而PCR方法却检测出8株mecA基因阳性菌株,且这些菌株的苯唑西林MIC均小于2 μg/mL。菌株的耐药情况较严重,对甲氧西林敏感而携带mecA基因的菌株高频存在于被调查地区的奶牛场中。     

动物源性耐甲氧西林葡萄球菌耐药表型及基因型鉴定

通过耐药表型及基因型检测对临床分离的41株葡萄球菌进行了鉴定，鉴定出耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）16株，耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)4株。耐甲氧西林葡萄球菌（MRS）阳性率达到48.8%，这提示兽医临床必须提高对MRS的重视，并为临床鉴定MRS提供了可借鉴的方法。     

苯唑西林敏感耐甲氧西林金黄色葡萄球菌研究进展

金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus,SA）是革兰氏阳性菌,是目前临床感染常见的一种病原菌,能引起局部化脓性感染、关节炎、心内膜炎、蜂窝织炎、败血症、脓毒血症等全身感染。近些年来,由于抗生素不合理的使用,金黄色葡萄球菌的耐药性日益严重,特别是苯唑西林敏感耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（oxacillin-susceptible methicillin-resistant Staphylococcus aureus,OS-MRSA）的出现给临床治疗增加了巨大的难度。了解OS-MRSA的流行病学特点和耐药机制可帮助临床医师更好地选择治疗药物,鉴于此,作者针对OS-MRSA的流行病学及耐药机制研究进展进行综述。     

耐甲氧西林葡萄球菌牛乳分离株耐药特征和分型研究

为了研究天津地区牛源耐甲氧西林葡萄球菌(methicillin-resistant Staphylococci,MRS)的耐药特征和分型情况,试验通过选择培养、溶源检测、革兰氏染色、PCR检测、测序分型分析、耐药基因和毒力基因检测、药敏试验对从天津市郊4个区5所规模牛场126头泌乳牛采集的499份乳样进行研究.结果 表...     

不同中药提取物对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的抑菌作用和逆转机制

采用(K-B)药敏纸片扩散法检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的药物敏感性,并用二倍稀释法分别测定10种中药提取物对MRSA的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC),选取抑菌效果最好的中药提取物(黄芩)通过棋盘法测定其与5种常用抗生素的联合抑菌效果。观察黄芩不同亚抑菌浓度作用下对MRSA耐药性的逆转效果,并通过荧光实时定量PCR法检测耐药基因mec A在mRNA表达水平上的变化。结果表明,MRSA具有多重耐药性,10种中药提取物里黄芩的抑菌和杀菌效果最为显著,MIC和MBC均为156 mg/L,但其与5种抗生素没有显著的联合抗菌作用,在黄芩亚抑菌浓度130 mg/L作用20 h后,MRSA主要耐药基因mec A的表达量下调并恢复了对药物的相对敏感性。     

动物源耐甲氧西林金色葡萄球菌的耐药性分析

金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,SA)是一种人类共生菌,并引起全球感染。SA感染的高发率主要是由细菌很容易对抗生素产生耐药性导致的,而耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)产生特别是多药耐药SA的出现使得动物临床治疗变得异常困难。本文针对MRSA的耐药机制和其多药耐药机制以及耐药基因的传播作简要概述,旨在为兽医临床合理指导抗生素用药和控制细菌耐药性的发展提供理论依据。     

奶牛乳房炎致病型耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的分离鉴定

为探究引起奶牛乳房炎的耐药性致病菌,本研究针对西安地区显性乳房炎奶样中的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）进行系统研究。采用常规细菌学鉴定法对34头（次）荷斯坦牛76个乳区152份奶样的金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus,S.aureus）进行了分离培养,共检出92株阳性菌株,检出率为60.5%;对其进行S.aureus致病基因nuc的特异性PCR检测,共检出28株含nuc基因的阳性菌株,检出率为30.4%;进一步针对MRSA耐药基因mecA进行特异性PCR扩增,共检出5株MRSA,检出率为17.9%。研究结果为MRSA耐药菌的有效检测及奶牛乳房炎的治疗提供了指导。     

牛源耐甲氧西林金黄色葡萄球菌研究进展

金黄色葡萄球菌是引起奶牛乳房炎的最主要病原菌之一。然而,在治疗奶牛乳房炎的过程中由于抗生素滥用,造成乳汁中药物残留及耐药菌株增多。近年来,尤其是耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)检出率逐年呈上升趋势,成为危害人畜健康的重要致病菌之一。同时也给奶牛乳房炎的治疗带来巨大的挑战。论文对牛源耐甲氧西林金黄色葡萄球菌检测方法、流行病学、致病性及致病因子、耐药机制、预防与治疗措施及未来发展前景及展望进行了综述,希望为深入研究MRSA,减少其耐药性,研制有效的药物和疫苗起到参考作用。     

耐甲氧西林伪中间型葡萄球菌的分离鉴定及其生物被膜形成能力的检测

为了对从临床患病犬皮肤采集的样品进行分离菌鉴定,并了解犬源伪中间型葡萄球菌(Staphylococcus pseudintermedius)的生物被膜形成能力,试验对采集的临床患犬的皮肤样品通过染色镜检、触酶试验、血浆凝固酶试验、耐热核酸酶试验进行鉴定,并对分离菌进行药敏试验,对16S rRNA基因、凝固酶(Coagulase)基因、MecA基因及生物被膜主要基因(ica、sarA)进行PCR扩增,同时对Coagulase、MecA基因的PCR扩增产物测序并进行BLAST比对分析。结晶紫染色定量法检测分离菌的生物被膜形成能力,扫描电镜(SEM)观察生物被膜的形态结构。结果表明:染色镜检、触酶试验、血浆凝固酶试验初步确定分离菌为葡萄球菌,耐热核酸酶试验初步确定为伪中间型葡萄球菌。分离菌对红霉素、头孢哌酮、哌拉西林等抗菌药物表现为中介或耐药,对多西环素、四环素、米诺环素等敏感。16S rRNA基因、Coagulase基因、MecA基因及生物被膜主要基因(ica、sarA)PCR扩增结果均为阳性,16S rRNA基因、MecA基因扩增产物测序结果表明,分离菌为耐甲氧西林伪中间型葡萄球菌。结晶紫染色定量法检测结果表明,该分离菌可形成中等黏附。电镜检测可见菌体呈球形,菌体聚集成簇,细菌间有黏液样物质,且菌体表面被大量丝状黏性物质包裹,即菌体分泌的大量胞外物质。说明本试验分离得到耐甲氧西林伪中间型葡萄球菌,该分离菌具有生物被膜形成能力。     

山羊源伪中间葡萄球菌的分离鉴定及耐药性检测

伪中间葡萄球菌是一种常见的致病菌,多引起宠物不同程度感染。2016年3月初,吉林省某羊场育肥羊出现零星死亡,病羊主要表现为呼吸系统症状。采集病羊呼吸系统各器官,以进行细菌的分离、培养。分离菌株经培养特性、染色镜检、生化试验及16S r DNA序列分析,确定为伪中间葡萄球菌,其对小鼠有致病性。对分离到的菌株通过微量稀释法进行药物敏感性测定,结果显示,对庆大霉素、链霉素、红霉素、阿莫西林、头孢氨苄、磺胺间甲氧嘧啶、恩诺沙星、强力霉素耐药;对阿米卡星、氟苯尼考、环丙沙星敏感。     

牛源金黄色葡萄球菌耐药性及甲氧西林敏感和耐甲氧西林菌株演化相关性研究

为研究牛源金黄色葡萄球菌耐药性以及甲氧西林敏感(MSSA)和耐甲氧西林(MRSA)菌携带的耐药基因、MRSA的SCCmec基因型,揭示牛源MSSA与MRSA之间的演化相关性和MRSA起源和扩散途径,对2009年以来中国五省区不同牛场分离的54株金黄色葡萄球菌进行了药敏试验.对确定的12株MSSA和MRSA进行了耐药基因检测、SCCmec基因型分型和多位点测序分型(MLST)研究.54株菌的药敏结果显示,对红霉素、克林霉素、青霉素、复方新诺明、多西环素、四环素、氯霉素、环丙沙星、庆大霉素的耐药菌株分别为88.8％、81.5％、88.9％、90.7％、92.6％、94.4％、79.6％、63.0％和70.4％.其中,对所测10种抗生素完全耐药的占5.6％,对5种以上耐药的占85.2％,6株(11.1％)对头孢西丁耐药.12株MSSA和MRSA菌株的药敏和耐药基因检测结果显示,3株MRSA对10种抗生素耐药;6株MSSA菌中,新疆分离株对2～4种抗生素耐药,其它省区分离株对7种以上抗菌素耐药.12株MSSA和MRSA菌均检出ermC和tetK基因;6株MRSA中均检出aac(6′)/aph(2")基因,5株检出tetM基因,4株检出aph(3′)-Ⅲ基因;6株MSSA均未检出aac(6′)/aph(2")和aph(3′)-Ⅲ,4株检出tetM基因.用多重PCR对MRSA进行SCCmec基因分型显示,5株为SCCmec Ⅳ,1株未能分型;12株菌的MLST分型发现,所有菌株分为ST50、ST965、ST6、ST97和ST9序列型.经eBURST v3分析,MRSA分布在CC7、CC4、CC21和CC9四个克隆复合群(CCs)中,MSSA分布在CC7和CC32克隆复合群中.以上研究表明,我国牛源金黄色葡萄球菌不仅耐药严重,且表现多重耐药;MRSA基因型以SCCmec Ⅳ为主.对牛源SCCmec Ⅳ型MRSA与同型人源MRSA的耐药谱分析发现有较大差异,推测位于质粒或转座子上的耐药基因可能插入到金黄色葡萄球菌基因组中,导致耐药基因在不同菌株间传播.根据ST97中有MSSA和MRSA以及牛源MRSA与人源MRSA的MLST比较,确认我国牛源MRSA是在抗生素的选择压力下由来源于不同克隆复合群的MSSA获得SCCmec Ⅳ而产生,推测同一克隆株MRSA的扩散并不是MRSA大范围出现的主要原因.     

裂解酶LysGH15对金黄色葡萄球菌体外生物被膜的影响

从临床分离得到17株金黄色葡萄球菌,经鉴定后发现其中8株为耐甲氧西林金黄色葡萄球菌。前期研究发现的裂解酶LysGH15经表达并纯化后,对17株菌株都表现出高效的杀菌作用,而与耐药性无关。进一步试验发现150mg/L的LysGH15不仅能有效抑制所有菌株形成生物被膜,而且对已经形成的生物被膜也有极强的破坏作用(P0.01)。结果表明,LysGH15在控制金黄色葡萄球菌持续性感染及解决耐药性方面具有很大的应用潜力。     

黄芩和蜂毒肽配合物抑耐甲氧西林金黄色葡萄球菌试验研究

蜂毒肽与黄芩醇提物体外抑菌试验显示,二者配伍对MRS的抑菌圈直径最大为38mm,最小抑菌圈直径为25mm,而万古霉素对MRS的抑菌圈直径仅为23mm,因此可看到二者配伍所产生的抑菌效果均高于万古霉素;体内抑菌试验中,通过急性攻毒实验测出106个/mL浓度的菌液为正式感染攻毒标准,小鼠腹腔注射各种浓度配伍的蜂毒肽与黄芩提取物测定小鼠存活率,以及小鼠肝脏、脾脏和胸腺免疫器官重量。结果显示D组（中等剂量的蜂毒肽和高剂量黄芩提取物）小鼠肝脏均重为65．24±6．58mg／g,万古霉素组59．11±6．12mg／g,二者差异显著。D组对小鼠脾脏和胸腺重量的均数8．29±1．25mg／g、2．87±0．61mg／g,万古霉素组为6．30±1．36mg／g和2．03±0．59mg／g,二者差异极显著。D组提高小鼠的存活数量,可以达到13只,存活率为86．7％,万古霉素组小鼠的存活率仅有66．7％。说明蜂毒肽与黄芩提取物配伍对MRS引起的感染具有很好的治疗效果。     

牛源耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的分子流行特征和耐药性研究进展

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA)是WHO公布的重要的人医临床病原菌,同时也是重要的人畜共患病原菌,对其感染的治疗是临床上难题之一。目前,世界范围内牛源MRSA呈现多重耐药现象,部分相同分子分型的MRSA克隆株已在牛和猪等不同家畜中检出,提示存在通过携带者向社区人群和医院患者传播的风险。目前的报道显示我国牛源MRSA分离株已表现出多重耐药性和分子多样性,应引起我国公共卫生领域的重视。本文综述了欧美和亚洲国家牛源MRSA耐药性和分子流行特征相关的研究成果,以期为评估我国MRSA的流行传播风险提供参考依据。     

家禽及其制品中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌菌株的分子生物学和耐药性研究

近期,德国研究者开展了2项研究以期深入了解耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的流行情况及耐药特性.22个源自患病火鸡和鸡MRSA菌株以及32个源自火鸡和鸡肉/肉制品的MRSA菌株研究显示,分离菌株中,CC398为优势菌株,同时CC5和CC9的MRSA菌株也被检出;除了2个MRSA菌株外,其他所有菌株均具有多重耐药性,且至少对3类抗菌剂具有耐药性.采用DNA微阵列分析和分子分型来获得MRSA的分子生物学特征有助于追溯其在家禽及食物链中的传播.