玉米、胡萝卜核DNA的提取和鉴定

以胡萝卜、玉米悬浮细胞为材料,酶解后获得大量的原生质体并从原生质体中分离出大量纯净的细胞核。通过核裂解,热变性除蛋白等步骤提取到分子量大于50kb 的 DNA,DNA 制品纯度好,能满足分子克隆和遗传转化研究的要求。     

玉米基因组DNA的提取

玉米鲜叶不经冻干处理直接用ＣＴＡＢ法提取ＤＮＡ，其分子量和纯度均较高，可用于限制酶切、基因文库构建及基因组分析等。     

三种玉米DNA提取方法探究

采用改良CTAB法、改良SDS法、快速提取法分别以玉米种子、黄化苗叶片、正常生长期绿色叶片为材料提取细胞总DNA。结果表明用3种不同方法提取的DNA纯度符合分子生物学实验要求。不同部位的材料、不同的提取方法，DNA得率不同。玉米干种子优适用于在快速提取法中提取DNA；改良CTAB法、SDS法宜从玉米黄化苗叶片和正常绿色叶片中提取DNA。     

龙眼和荔枝染色体DNA的提取与鉴定

以龙眼“大乌圆”和荔枝“三月红”两个品种的幼叶和果实组织为试材，采用有细胞核被裂解之前，去除细胞质中的酚类物质和蛋白质，而后用ＳＤＳ裂解细胞核，异丙醇和乙醇沉淀染色体ＤＮＡ的方法，成功地从两种不同组织中提取和纯化了两种果树的染色体ＤＮＡ，ＤＮＡ的得率介于２８６￣３１４μｇ／ｇＦＷ之间，凝胶电泳显示无明显解现象，适宜作为ＰＣＲ模板应用，并成功地进行特异性基因扩增。     

快速提取玉米DNA方法的研究

[目的]为了探索一种快速、简便,能够用于SSR分析的玉米DNA提取法。[方法]采用改进的常规DNA提取法和DNA快速提取法提取玉米种子胚和黄化苗叶片中的DNA,进行SSR分析,通过琼脂糖电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳对SSR产物进行检测。[结果]用常规法提取时,用氯仿∶异戊醇(24∶1)抽提1次就可获得质量好和浓度高的DNA;无须抽提,直接吸取上清液,可得到高浓度的DNA,也能满足SSR分析的需要;同样的提取法,SDS的提取效果比CTAB好。对快速提取法进行分析表明,相同的提取液和提取方法,采用种子胚提取的DNA浓度和质量明显高于叶片DNA。[结论]该研究为SSR在玉米种质及纯度鉴定上的应用提供了技术上的保证,有利于该项技术的普及和推广。     

快速提取玉米叶片DNA的新方法

以玉米自交系掖478和海9-21及其BC2F3群体的幼苗期叶片为材料建立了一种快速提取玉米叶片DNA的新方法:通过在常温下取1～2cm2大小的玉米叶片于1.5 ml离心管中,加入600μl CTAB提取液,使用组织研磨器研磨,然后加入600 μl氯仿:异戊醇(24:1),10 000r/min离心10min,取上清,最后加入冰冻的乙醇沉淀DNA即可.这种方法操作简单,耗时少,效率高,提取的玉米基因组DNA量也较可观.     

玉米单粒种子DNA提取新方法

本研究主要对玉米粒种子ＤＮＡ的提取方法进行了探讨，取得了突破性进展，研究出在不同液氮的情况下，防止ＤＮＡ降解的关键技术，该方法操作步骤简单，快速，实用性强，一天时间可以提取近３００个样品，并且采用该方法提取的ＤＮＡ分子量较大，质量好，为ＲＡＰＤ在玉米种质及纯度鉴定上的广泛应用提供了技术上的保证，有利于该项技术的普及和推广。     

玉米基因组DNA快速提取方法

探讨了用NaOH裂解法从玉米单子粒胚乳中和用十二烷基肌氨酸钠法从玉米叶片中快速提取基因组DNA的方法,分析了2种方法提取的基因组DNA的效果及应用价值.结果表明,虽然得到的DNA质量基本一致,都可用于玉米品种纯度检验和分子标记辅助选择,但优化的、从叶片中快速提取的基因组DNA可长期保存,并用于多种后续序列分析工作.     

胡萝卜色素提取工艺

胡萝卜切成丝，用０．３０ｍｏｌ／Ｌ盐酸在７０℃软化４－５ｍｉｎ，然后用氯仿或甲苯作抽提剂，胡萝卜色素抽提率可达８３．８８％－８５．７５％。     

2种玉米胚乳DNA提取方法的比较

[目的]筛选出玉米胚乳DNA提取的最佳方法。[方法]采用改进的CTAB提取液,以高温和常温2种方法提取玉米胚乳基因组DNA,用紫外分光光度计、0.8%水平的琼脂糖凝胶电泳及PCR检测法比较了2种方法的提取效果。[结果]高温法所提玉米胚乳DNA浓度和纯度均达到分子生物学要求,而常温法所提DNA的纯度未达到分子生物学的要求。电泳检测表明,高温法提取的DNA均未降解,DNA条带整齐度较好,而用常温法提取的DNA都出现了降解。PCR检测结果表明,用高温法提取的DNA作模板的PCR所得条带清晰,明亮,而用常温法提取的DNA作模板的PCR条带不清晰。最佳聚乙烯聚吡咯烷酮(PVPP)的浓度确定为玉米籽粒重的6%~10%。[结论]高温法更适宜用作玉米胚乳DNA提取。     

以PCR鉴定转基因番茄植株的微量DNA提取方法

微量DNA提取法是目前以PCR法鉴定转基因番茄植株T1代单株幼苗的一种简便、快速、有效的方法。该方法需约1h即可完成植物DNA的提取，样品用量仅为30-100mg，产量可达30-80μg／g，粗提DNA(溶于10μlTE缓冲液)不必经过纯化，用TE缓冲液稀释5-10倍即可直接用于PCR分析。     

水稻玉米基因组DNA提取方法的改进

以水稻、玉米为材料，对其基N组DNA的提取方法进行改进，通过减少饱和酚和氯仿等有机试剂处理次数，适当延长有机试剂的抽提时间，提高提取DNA的得率和纯度，并且能更有效地避免干扰物质的污染，得到均一的大片段的DNA，检测结果表明，该方法普遍适合玉米、水稻作物材料的DNA提取，所得DNA能够达到进一步研究要求。     

不同肠球菌基因组DNA提取方法对PCR鉴定的影响

为研究肠球菌基因组DNA的不同提取方法对16SrRNA基因序列PCR、种属多重PCR、RAPDPCR等肠球菌鉴定结果的影响,分别采用6种基因组DNA提取方法(水煮法1、水煮法2、常规酚/氯仿抽提法、chelex-100法1、chelex-100法2和试剂盒法),对1株肠球菌标准菌株ATCC29212基因组DNA进行提取,以这些分别提取的DNA为模板在相同的扩增条件下进行PCR检测.结果表明,在16SrRNA基因序列PCR和种属多重PCR检测中以水煮法1进行肠球菌DNA的提取最适宜,而试剂盒法在RAPDPCR检测中效果最佳.     

绿茶DNA提取方法及分子鉴定研究（英文）

[目的]为绿茶产品品质鉴定提供依据。[方法]以绿茶为原料,通过改进的CTAB方法来提取分离绿茶总DNA。并利用所得绿茶DNA采用ISSR分子标记对10个绿茶产品进行鉴定。[结果]所采用改进的CTAB微量提取DNA法,可以得到高质量的绿茶总DNA,1.0g茶样DNA含量在101～498μg/g之间,平均249μg/g。采用ISSR分子标记检测结果表明,ISSR标记能有效地区别不同的绿茶产品。[结论]该研究为进一步研究绿茶分子鉴定技术提取了参考依据。     

玉米大斑病菌培养与DNA提取方法

采用液体静置和振荡两种培养方法进行菌丝培养,以不同省份的玉米大斑病菌为材料,优化CTAB法提取玉米大斑病菌DNA。提取后的DNA经紫外分光光度计在260nm和280nm测定及0.4%琼脂糖凝胶电泳检测,结果表明,液体培养皿法培养菌丝快速、高效,提取DNA的质量好、纯度高。     

一种简便实用的玉米干种子基因组DNA提取方法

利用改良的CTAB法提取玉米干种子基因组DNA,DNA样品经紫外光谱吸收、琼脂糖凝胶电泳、PCR和酶切检测,表明获得的DNA样品纯度较好、无明显降解,DNA质量可满足下游分子生物学实验要求,证实该方法是提取玉米基因组DNA的一种有效方法.     

玉米种子纯度鉴定中DNA提取方法的比较研究

分别以玉米干种子胚、幼芽和幼苗为材料提取DNA,并对所得DNA的纯度和质量进行检测,结果显示,利用玉米干种子胚提取的DNA质量及分子量大小与幼苗法相当,完全可以满足SSR分子标记对玉米杂交种纯度的鉴定。     

DNA分子标记技术在玉米纯度鉴定中的应用综述

种子纯度是保证优良品种增产潜力得以发挥的关键因素,因而品种纯度检验对保证种子质量具有重要意义。DNA分子标记技术是随着分子生物学的发展而发展起来的一种新型的种子纯度和真实性的鉴定方法,它具有简便、快速、准确等优点。本文介绍了4种分子标记技术的概念、原理及特点,并对每种标记技术在玉米自交系和杂交种纯度鉴定的应用进行了综述。认为SSR技术是目前玉米种子纯度检测较适宜的分子标记技术。     

以PCR鉴定转基因番茄植株的微量DNA提取方法

微量DNA提取法是目前以PCR法鉴定转基因番茄植株T1代单株幼苗的一种简便、快速、有效的方法.该方法需约1 h即可完成植物DNA的提取,样品用量仅为30-100mg,产量可达30-80μg/g,粗提DNA(溶于10μlTE缓冲液)不必经过纯化,用TE缓冲液稀释5-10倍即可直接用于PCR分析.