灵芝琼脂固体菌种超声均质效果及其发酵工艺

建立一种灵芝均一性菌种制作方法及其发酵工艺。超声破碎灵芝琼脂固体平板培养物,采用镜检和涂布平板法分析超声均质效果,以生物量和胞外多糖为指标优化其发酵工艺。结果表明:灵芝琼脂固体菌种破碎完全、均一性好,菌落数达到186.00 CFU/个(琼脂块直径0.5 cm);以超声均质化菌种为接种物于恒摇床发酵,生物量、胞外多糖分别为9.24、0.62 g/L,低于琼脂块菌种(分别为13.37、1.16 g/L);采用静置加摇床两阶段发酵方法(共10 d),以静置3 d、摇床7 d为最优,生物量、胞外多糖含量分别达到15.14、0.86 g/L;与琼脂块菌种恒摇床发酵相比分别提高29.96%、16.21%;超声均质菌种优化后的接种量为7 m L。     

乳酸菌发酵黑莓汁增加胞外多糖工艺初探

为增加黑莓汁中乳酸菌胞外多糖含量,利用产胞外多糖乳酸菌MB2-1和JX5发酵黑莓汁,并测定发酵过程中黑莓汁的pH值、黏度及多糖含量随时间的变化情况,以确定用于发酵黑莓汁的乳酸菌种类和碳源。结果表明,添加葡萄糖作为碳源时,乳酸菌MB2-1和JX5发酵在32 h时胞外多糖产量最高,分别为2.75 g/L和3.06 g/L,说明将乳酸菌JX5作为发酵菌株,葡萄糖作为碳源添加到黑莓汁中进行发酵,可增加黑莓汁中乳酸菌胞外多糖含量。     

深层发酵培养虎奶菇多糖的培养基优化

[目的]优化深层发酵培养虎奶菇多糖的培养基。[方法]以不同的培养基深层发酵培养虎奶菇茵丝体和多糖,分离胞内和胞外多糖,在单因素试验和正交试验的基础上,考察碳源、氮源和金属离子对虎奶菇生长及虎奶菇多糖含量的影响。[结果]葡萄糖是最佳碳源,有利于细胞生长和胞内外多糖等代谢产物的积累,从而获得高的多糖产率;酵母膏是最适氮源,可以获得最高的菌丝体生物量和胞外多糖产量;金属离子对细胞生长有影响,在EDTA离子培养基里细胞生长及代谢产物累积效果最佳。在最优培养基培养条件下,总多糖含量为3．34g／L,胞内多糖含量为1．92g/L,胞外多糖含量为80．34mg／g,多糖产率为8．13％,细胞干重为23．62g/L。[结论]该方法优化了深层发酵培养虎奶菇多糖的培养基．为虎奶菇的种植栽培提供了科学依据。     

碳氮源对杏鲍菇菌丝胞外多糖产量的影响

[目的]筛选杏鲍菇产胞外多糖的最适碳源和氮源。[方法]利用单因子试验研究不同碳氮源及碳氮源含量对杏鲍菇菌丝胞外多糖产量的影响。[结果]在供试的5种碳源中,杏鲍菇胞外多糖在以淀粉为碳源时产量最大,其最佳浓度为6％,其次是麦芽糖。葡萄糖对菌丝生物量影响最大,高于淀粉和麦芽糖对菌丝生物量的影响。在供试的6种氮源中,有机氮源更适合杏鲍菇菌丝的生长和胞外多糖的生产。其中酵母膏对菌丝生物量和胞外多糖的影响最大,为最佳氮源,其最佳浓度为0．4％。其次是蛋白胨。[结论]不同碳源对胞外多糖产量与菌丝生物量的影响不成正相关,不同氮源对胞外多糖产量及菌丝生物量的影响成正相关。     

6种中药对猴头菌液体培养的影响

在猴头菌液体发酵培养基中分别添加神曲、芡实、麦芽、谷芽、山药、薏米6种中药,研究其对猴头菌生长与发酵的影响。结果表明,这6种中药对猴头菌生长与发酵均有不同程度的影响,都能促进猴头菌的生长和胞内多糖的分泌,其中,芡实添加量为8%时,生物量最大,为对照的6.43倍;谷芽添加量为16%时,胞内多糖为对照的4.79倍;麦芽在所有添加量下都促进了猴头菌胞外多糖的含量,其他中药在合适添加量下才能促进胞外多糖的分泌。     

分批与流加培养对萼状粒毛盘菌生物量和胞外多糖产量的影响

通过摇瓶实验对萼状粒毛盘菌(Lachnumcalyculiforme)生物量及其产胞外多糖的发酵条件进行研究;并在5L发酵罐中进行分批与流加培养,比较二者对萼状粒毛盘菌生物量及其多糖产量的影响.结果表明:在25℃时,粒毛盘菌生物量和产胞外多糖的最佳碳、氮源及其浓度为葡萄糖30g L-1、酵母膏5g L-1,pH值为6.0;10g L-1橄榄油能显著加速菌丝体的生长,而10g L-1大豆油能明显提高胞外多糖的产量;分批培养时粒毛盘菌的最大生物量和多糖产量分别为6.40和8.28g L-1,而在葡萄糖浓度低于5g L-1时进行流加培养可以显著提高粒毛盘菌的生物量和多糖产量,最大生物量和多糖产量分别为7.72和11.82g L-1.     

白背毛木耳43-28胞外多糖的提取与纯化

[目的]对白背毛木耳43-28胞外多糖进行提取和纯化。[方法]利用液体深层发酵进行培养,水提-醇析法分级提取胞外多糖,通过DEAE—cellulose52和SephadexG-200柱层析纯化胞外多糖。[结果]提取得到白背毛木耳43—28胞外多糖,粗多糖得率为2．4％,总糖含量为54．67％;胞外多糖粗提物经DEAE—cellulose52柱层析后分成酸性和中性多糖,这2种多糖分别经SephadexG-200柱层析后。酸性多糖分离成大分子酸性多糖AP5和小分子酸性多糖AP62个组分,中性多糖只有AW1个组分。[结论]成功提取得到白背毛木耳43-28胞外多糖并进行了纯化,为对白背毛木耳多糖的综合利用提供参考。     

鸡腿菇液体发酵工艺的优化

[目的]对鸡腿菇液体发酵培养基和培养条件进行筛选及优化。[方法]以鸡腿菇为供试材料,胞外多糖和菌丝体生物量为指标,通过单因素试验和正交试验对鸡腿菇液体发酵培养基配方及培养条件进行筛选及优化。[结果]鸡腿菇液体发酵产胞外多糖的最佳培养基组合为：葡萄糖2．0％,酵母膏0．75％,CaCl0．2％;鸡腿菇液体发酵产菌丝体的最佳发酵培养基组合为：葡萄糖2％,酵母膏0．75％,KH2PO4 0．2％;鸡腿菇液体发酵产胞外多糖和菌丝体的最佳发酵条件均为：起始pH值7．0,接种量20．0％,装液量120ml,培养天数6d;[结论]该研究为鸡腿菇的进一步开发提供了科学依据。     

一株产多糖真菌的筛选、鉴定与发酵条件优化

以马铃薯汁（PDA）培养基为筛选培养基，从自然界枯枝腐木中筛选产多糖真菌，经平板初筛、摇瓶复筛获得最优菌株TL-8，胞外多糖产量达1.1 g/L。经形态观察和分子生物学鉴定，TL-8菌株鉴定为白囊耙齿菌（Irpex lacteus）。在发酵基本培养基初始条件下，分别以培养条件（如温度、摇床转速、pH值、发酵时间等）和培养基成分（如氮源、碳源）作单因素优化，并根据单因素优化结果筛选影响较大的因素进行正交试验优化，以确定白囊耙齿菌TL-8产胞外多糖的最优发酵条件。结果表明：在发酵基本培养基的基础上，采用乳糖（12 g/L）和葡萄糖（28 g/L）作复合碳源，采用酵母膏（6.0 g/L）和豆渣粉（9.0 g/L）作复合氮源，pH值6.0，摇床转速160 r/min，装液量为100 mL/250 mL，培养温度30℃的条件下培养8 d，白囊耙齿菌TL-8的生物量达15.78 g/L，胞外多糖产量达5.49 g/L。     

高产胞外多糖乳酸菌的筛选及培养条件优化

从酸菜汁和生鲜奶中筛选出一株高产胞外多糖的乳酸菌L3,应用苯酚一硫酸法测定其胞外多糖的产量.分别改变基础培养基的碳源、氮源、发酵温度、时间、pH等条件,探索其对乳酸菌L3胞外多糖生物合成能力的影响.结果表明:葡萄糖和蛋白胨分别是乳酸菌产生多糖的良好碳源和氮源.该菌株胞外多糖的最佳生物合成条件为:初始pH值6.5,发酵温度37℃,发酵时间24h,此条件下胞外多糖的生物合成量为108.49mg·L-1.     

基于液体发酵灵芝草乌相互作用的影响研究

[目的]研究在液体发酵过程中草乌与灵芝相互作用的影响。[方法]研究在灵芝液体发酵过程中初始pH、草乌粉及草乌提取物对灵芝菌体生长、胞内外多糖的影响,以及灵芝发酵对草乌粉及草乌提取物中酯型生物碱质量分数的影响。[结果]当初始pH为6时,灵芝菌体生物量及胞内外多糖产量均达最大值,分别为7．50、0．25、0．42 g／L;草乌粉添加量为20 g／L时,生物量和胞内多糖达最大,分别为10．60和0．54 g／L,分别为对照的1．96和2．57倍;草乌粉添加量为15 g／L时,胞外多糖产量达最大,为0．76 g／L,是对照的2．11倍;草乌提取物添加量为0．87 g／L时,生物量和胞外多糖产量达最大,分别为11．30和0．72 g／L,分别是对照的2．13和2．06倍,添加量为1．16 g／L时,胞内多糖产量最高,达0．57 g／L,是对照的2．38倍。[结论]灵芝均能降低发酵液中草乌粉、草乌提取物中的双酯型生物碱含量及增加发酵液中单酯型生物碱含量。     

金顶侧耳液体培养基的优化筛选

采用正交设计的方法,以金顶侧耳菌丝体的生物量及其多糖含量为测量指标,对金顶侧耳液体发酵培养基进行了优化研究。结果表明：当发酵培养基的配方为：马铃薯20％,蛋白胨0．3％,葡萄糖2．5％,KH_2PO_4和MgSO_4·7H_2O各为0．15％时,其菌丝体的生物量最高：而当培养基的配方为：马铃薯20％,蛋白胨0．1％,葡萄糖3．0％,H_2PO_4和MgSO_4·7H_2O各为0．15％时,其菌丝体胞内多糖含量最高。结果表明生物量最高的培养基中其菌丝体的胞内多糖的产量并非最高。     

金针菇深层发酵的研究──Ⅱ．影响金针菇胞外多糖产量的因素

研究了金针菇不同菌株、ｐＨ值、淀粉原料、微量元素、多糖的组成单糖、表面活性剂等几个重要因素对金针菇胞外多糖生产的影响．结果表明，供试菌株中以Ｆ－１９产胞外多糖的能力最强；产多糖培养基的最适ｐＨ值为６．５左右；以马铃薯淀粉和甘薯淀粉作碳源，胞外多糖的产量比其他淀粉的高；在培养基中添加质量分数为１００×１０－６－１６０×１０－６的Ｍｎ２＋能显著提高胞外多糖的产量，而添加同等浓度的Ｃｕ２＋反而降低胞外多糖产量．发酵过程中添加胞外多糖的组成单糖中的Ｄ－木糖、Ｄ－甘露糖和Ｄ－阿拉伯糖能显著提高胞外多糖的产量，并以Ｄ－木糖的效果最佳．此外，发酵过程中添加质量比值为５００×１０－６的表面活性剂吐温８０能显著提高胞外多糖的产量．     

磷限制培养中霍山石斛类原球茎增殖和多糖合成的动力学研究

[目的]研究在不同起始磷浓度中,霍山石斛类原球茎增殖、主要营养物质消耗和多糖积累的动力学特性。[方法]以霍山石斛类原球茎为试材,将类原球茎分别接种于含有不同磷浓度的改良MS液体培养基中进行悬浮培养,30d后收获称重,测定类原球茎的多糖含量和培养基中总糖和磷酸根离子含量,并建立原球茎增殖和多糖合成模型。[结果]类原球茎在不合磷的培养基中生长受抑制,生物量、细胞生长速率随磷酸盐浓度的增大而增大;不同磷浓度下,多糖产率随类原球茎的生长而增加;随着磷浓度的增大,胞外各种营养成分的吸收利用速率提高。细胞的比生长速率与磷浓度的关系符合Monod方程,最大比生长速率为0．032d^-1。[结论]磷是霍山石斛原球茎增殖的限制性元素,类原球茎的生长与多糖的合成呈正相关。     

假蜜环菌液体发酵培养基优化研究

通过单N素试验确定了假蜜环菌液体发酵培养基的较好碳源为淀粉和玉米粉、氮源为豆粕和麸皮，正交设计试验确定了获得胞内多糖的最佳培养基配方为：土豆汁20％，淀粉150％，玉米粉150％，盖粕10％，麸皮6％，-H-4C10 25％，MgS-4 0.01％，KH2P-4 0.09％。获得胞外多糖的最佳培养基配方为土豆汁15％，淀粉150％，玉米粉200％，豆粕10％，麸皮6％，-H-4C10 20％，MgS-4 0.015，KH2P-4 0.06％。     

以米糠为主要原料的灵芝菌丝体液体深层发酵技术

以米糠液为培养基的主要原料,分别添加糙米浆、麦芽汁或豆芽汁,进行灵芝菌丝体液体深层发酵培养,分析灵芝菌丝体利用培养基的情况,筛选培养基组分.结果表明:米糠液与豆芽汁(可溶性固形物为2°Brix)以4∶1的体积比混合进行灵芝菌丝体液体深层发酵时,其菌丝体干重及胞外多糖含量最高,可达11.45 g·L-1和10.20 g·L-1;发酵过程中发酵液中总糖、还原糖含量显著下降(P<0.05),可溶性蛋白含量略有上升,游离氨基态氮含量先下降后上升,菌丝体干重、胞外多糖含量均显著增加.     

香菇生理活性物质的研究

通过对香菇液体发酵培养配方的优化处理，提取胞内和胞外物质成份－多糖、蛋白质、核酸等，并做了定量分析。结果表明：优化配方胞内和胞外多糖总含量为４．５ｇ／Ｌ发酵液。紫外吸收分析证明５０％沉淀物中除多糖外，还有多不饱和化合物，初步认为是水溶性木质素。     

响应面法优化黑木耳菌液体发酵胞外多糖条件

[目的]优化液体发酵黑木耳菌胞外多糖的工艺条件.[方法]以黑木耳菌为试验材料,在单因素试验的基础上,采用苯酚-硫酸法对黑木耳菌液体发酵的胞外多糖含量进行测定,并采用响应面法优化黑木耳菌液体发酵胞外多糖的条件.[结果]试验表明,黑木耳菌液体发酵胞外多糖的最优条件为碳源可溶性淀粉3％、氮源胰蛋白胨0.15％、水果皮莎白瓜皮4％、中药材红景天10％,在此条件下的黑木耳菌液体发酵胞外多糖含量为0.024 51 g/ml.[结论]此工艺合理可行,可为开发利用黑木耳多糖提供基础数据和理论依据.     

荷叶离褶伞液体发酵及生物酶法提取菌丝体多糖的研究

首次利用10 L发酵罐研究了荷叶离褶伞菌丝生长、胞内和胞外多糖产量,以及6种酶对发酵菌丝体多糖的提取效果。结果表明,在25℃、120 r/min,空气流量为200 L/h的条件下发酵,8 d时胞内多糖含量（63.1 mg/g干菌丝体）和胞外多糖产量（3.54 g/L）达最高,9 d时菌丝体产量（17.86 g/L）及胞内多糖产量（1.11 g/L）达最高,与摇瓶发酵相比,其产量均显著提高。参试的6种酶中,溶壁酶酶解处理菌丝体获得的多糖产量最高,而中性蛋白酶是最经济适宜的酶类,与不加酶的水提法相比,多糖提取率分别提高了459.29%和376.11%,中性蛋白酶酶解制备菌丝体多糖的适宜条件为:在1%酶用量下,30℃酶解2 h后,95℃提取2次,每次2 h。     

云芝糖肽发酵条件的响应面法优化试验

云芝糖肽对烟草花叶病毒TMV有显著的抑制作用,是一种重要的抗病毒物质。为提高杂色云芝菌液态发酵多糖产量,通过响应面法优化杂色云芝菌液体发酵条件,得到最佳发酵条件:初始pH6.5、装液量100 mL·250 mL~(-1)、接种量10%、温度27℃、7 d、200 r·min~(-1)。优化后杂色云芝菌液体发酵的生物量为10.82 g·L~(-1),胞外多糖为1.98 g·L~(-1),较优化前生物量提升2.06倍,胞外多糖提升2.33倍。优化后多糖产量有大幅提高,可为进一步工业化应用提供技术参数。