不结球白菜品种资源的模糊聚类分析

本文用模糊聚类分析方法依据７个数量性状对１４个不结球白菜品种进行了数量分类。分类结果与实际情况相符。用该方法可以帮助选择杂交亲本。     

不结球白菜RAPD反应体系的优化

对影响RAPD扩增的各个因子,如TaqE,dNTP和Mg2+的浓度,模板DNA的浓度与纯度等进行研究,建立并优化了适于不结球白菜的RAPD反应体系:dNTP(0.19mmol/L)+Mg2+(1.95mmol/L)+TaqE(1U)+DNA(25ng/μL)+TM(50μmol/L)+甘油(φ=50%)+Primer(0.24μmol/L)+10×Buffer+H2O,总反应体系为25μL。     

南通市郊不结球白菜地方品种调查

不结球白菜(Brassica chinensis L.)俗称青菜,是我国南方地区主要蔬菜之一。南通的青菜有以下两个特点:一是品种类型独特,有叶形似马耳的“马耳朵”多头菜,有叶形象鸡冠而带芥菜味的鸡冠莱,还有带叶翼的绿叶镶边矮白菜等等;二是品种非常丰富,南通市郊共有青菜品种11个,除四月慢、五月慢是35年前从上海引进外,其它品种均有较悠久的栽培历史。对南通市郊青菜品种资源进行整理,使其得到更好的应用,在蔬菜周年供应中发挥更大作用,将具有重要意义。     

不结球白菜SRAP标记体系的建立与作图亲本筛选

SRAP标记是遗传作图和分子辅助育种的重要技术之一,为了建立具有通用性的不结球白菜SRAP标记体系,选用国家种质资源重点实验室的不结球白菜作为试材,利用正交设计方法对、模板DNA、引物、Taq酶和缓冲液6个因素进行了优化,获得了不结球白菜SRAP标记反应体系的最佳组合:10 μL反应体积中包含40 ng的DNA模板、75 ng引物、0.2 mmol·L-1的的、0.15 U的Taq酶和1倍体积的缓冲液.筛选不结球白菜的作图杂交亲本是构建遗传连锁图谱的基础,以12份不结球白菜亲本为试材,利用70对SRAP引物组合共扩增出了382条多态性带,平均每个引物组合扩增出5.46条,由聚类分析图确定了杂交亲本为相似系数最小的2个组合,Q06-2和Q06--4或Q06-2和Q06-6,同时验证了SRAP标记体系的通用性.     

不结球白菜耐盐品种筛选

研究了我国目前广泛栽培的30个不结球白菜品种种子萌发期的抗盐性,以期筛选出适合盐碱地种植的不结球白菜品种。采用水培的方法,测定了各品种在盐胁迫下的相对发芽率、相对胚芽长、相对胚鲜质量、相对胚根长和相对根毛区宽度等指标(各指标的相对值为盐处理与去离子水培养的比值),在此基础上分析各指标的隶属函数值,计算耐盐指数。结果表明,30个不结球白菜耐盐性差异较大,耐盐指数位于前3位的品种分别为四倍体矮脚黄(0.93)、秦白二号(0.68)和北京小杂56(0.61),改良605耐盐指数最低(0.05)。从耐盐等级分析结果可以看出,四倍体矮脚黄为高耐品种,秦白二号、北京小杂56两个品种为耐盐品种,郑研小包23、上海鸡毛菜、丰抗90等10个品种为中等耐盐品种,美味四季小白菜、郑白小包头、新优抗70、精品四月白等14个品种为盐敏感品种,而日本绿宝、改良605和矮抗青等3个品种为高感品种。     

不结球白菜子叶离培养再生植株

用矮脚黄的子叶建立了不结球白菜高频率再生体系。在ＭＳ＋６－ＢＡ１０ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ０．３ｍｇ／Ｌ培养基上，外植体分化率达７０％，每一外植体可产生９．６个不定芽，研究了各种因素对子叶离体再生植株的影响，发现１１－１５ｄ苗龄的子叶分化效果最佳。ＭＳ＋ＮＡＡ０．２ｍｇ／Ｌ对根的诱导最好。     

不结球白菜雌蕊蛋白质双向电泳技术体系的建立

以不结球白菜品种‘矮脚黄’的雌蕊为材料,从蛋白质提取、IEF程序、IPG胶条pH范围和染色方法等方面进行比较,利用Tris-HCl提取方法,使用pH 4～7 IPG胶条和改进的等电聚焦程序,改良银染方法,建立了适用于不结球白菜雌蕊蛋白质的双向电泳技术体系,并使用该体系对开花前2 d的花蕾雌蕊和开花2 d后的雌蕊蛋白质进行比较分析,获得187个差异蛋白点。     

不结球白菜主要营养成分与品种低温耐受性的关系

对5个不结球白菜品种(暑绿、寒笑、亮白叶、苏州青和乌塌菜)进行低温(日温为(7±2)℃,夜温为(2±2)℃)处理,分析了低温对不同品种叶片叶绿素、维生素C、蔗糖、葡萄糖、果糖和可溶性糖等有机物质积累的影响.结果表明:低温条件下,不结球白菜叶片中叶绿素含量和类胡萝卜素比例显著提高,不同品种叶绿素含量的变化与不同品种耐低温特性的相关性不显著.低温处理使叶片蔗糖、葡萄糖和可溶性糖总量增加,而果糖含量降低.叶片中维生素C含量也有不同程度降低,低温耐性较强的品种乌塌菜和寒笑经低温处理后,维生素C含量仍然保持较高水平,而其他品种显著低于对照,苏州青的维生素C含量最低.分析表明:乌塌菜和寒笑由于光合产物在向糖积累或维生素C合成方向的转化中维持较好的平衡,提高叶片的修护功能,同时发挥了较强的渗调作用,从而有助于增强其耐冷性.     

夏季自然高温条件下不结球白菜品种评价及相关性状的研究

在自然高温下栽培22个不同类型不结球白菜,依据数量遗传学原理,利用逐步回归分析和通径分析,建立了各相关性状对产量和综合评价的最优回归方程。试验结果表明,供试材料中以佛山乌叶、矮抗3号和矮杂1号表现最佳,具有高产、抗病和质优的特点。相关分析也表明,产量是综合评价中的主要因素。产量分别与株高、开展度、叶长、叶宽及叶厚呈极显著正相关。综合评价与叶厚呈极显著正相关,与开展度、叶宽分别呈显著正相关。产量和综合评价的最优回归方程分别是:Y=-5.237+0.216x_3(叶长)+0.016x_5(叶厚);Y=0.799+0.022x_5(叶厚)。两方程均达极显著水平,在对越夏栽培不结球白菜品种综合评价中,可用叶厚及叶长作为主要简易性状指标。     

不结球白菜接种霜霉病菌后防御酶活性的变化

霜霉病(Peronospora parasitica)是不结球白菜(Brassicacampestrisssp.chinensisM ak ino)三大病害之一,尤其是在春秋季节会造成白菜大幅度减产,连续使用杀菌剂又会降低其品质,因而选育和合理利用抗病品种是综合防治不结球白菜霜霉病的最佳途径,而快速准确的抗病性鉴定技术是抗源材料筛选、抗病品种选育的基础[1]。植物受到病原菌侵染时,体内一系列防御酶活性会发生变化。多酚氧化酶(PPO)、苯丙氨酸解氨酶(PAL)和过氧化物酶(POD)与抗病反应的关系已有较多的报道[2~5]。-β1,3-葡聚糖酶是植物病程相关蛋白中的一个重要类群,它能破坏真菌…     

大白菜SRAP反应体系的建立与优化

以大白菜基因组DNA为模板,通过正交试验设计,从Mgz^2＋、Taq酶、dNTPs、引物、模板5种因素4个水平对大白菜SRAP（Sequence-related amplified polymorphism,序列相关扩增多态性）反应体系进行优化,建立了适合于大白菜的SRAP-PCR优化反应体系,该体系为25 μL：Mg^2＋浓度为3.0 mmol/L,dNTPs为0.2 mmol/L,Taq酶1.5 U,引物为0.2 μmol/L,模板DNA73.2 ng.PCR反应程序为：94 ℃预变性5 min;94 ℃变性1 min,35 ℃复性1 min,72 ℃延伸1 min,5个循环;94 ℃变性1 min,50 ℃复性1 min,72 ℃延伸1 min,35个循环,72 ℃延伸10 min.     

菜薹抽薹性状的ISSR和SRAP分析

以早抽薹品种CT07和晚抽薹品种T0601为亲本构建F2分离群体,采用分离集团混合分析法 (Bulked segregant analysis,BSA)筛选与菜薹抽薹基因连锁的分子标记.用45条ISSR(Inter-simple sequence repeat,简单重复序列间扩增)引物和20对SRAP(Sequence related amplified polymorphism,序列相关扩增多态性)引物组合进行PCR扩增筛选,其中UBC834、UBC876、E13M4和E5M7对亲本和DNA池的扩增图谱表明,4个引物的差异条带均出现在早抽薹品种CT07和早现蕾(抽薹)池中.经F2代群体单株验证,4个标记均与早抽薹基因相连锁,且标记E13M4最近,距离为16.8 cM,这为菜薹抽薹基因的定位和分子标记辅助育种奠定了基础.     

利用SRAP分子标记技术鉴定大白菜种子纯度

以大白菜品种多抗3及其父母本为研究材料,利用SRAP（相关序列扩增多态性）分子标记方法,通过对54对SRAP标准引物的筛选,获得了能区分大白菜多抗3及其亲本的引物Me4F/Em3R。采Me4F/Em3R引物对对5份多抗3系列商品种子纯度进行检验,种子的纯度分别为75.5%、72%、80.5%、68%和73%,与田间种植...     

大白菜亲缘关系研究

 为更有效地利用现有资源、挖掘优异基因为育种和生产服务,对大白菜种质资源进行亲缘关系研究在理论和应用上都具有重要意义。本研究利用6对AFLP引物对89份来源和特性不同的大白菜（Brassica campestris L. ssp. pekinensis）种质进行系统评价和分类研究。6对AFLP引物共扩增出286条带,123条为多态性带,占总数的43.01%。不同引物组合扩增出的总带数和多态性带数差异较大,其中,引物组合E-ACT/M-CAC的扩增效果最好,多态性条带最多,占总带数的54.35%。聚类分析显示：中国大白菜种质资源遗传多样性丰富,参试种质间最大遗传距离为0.359,遗传背景广泛。以0.73的相似系数为阈值,所有材料被分为四大组群,其中浙江黄芽菜单独构成一个组群,明显地区分于其他大多数大白菜品种（“主体”组群）。在“主体”组群中,参试的台湾种质和大陆种质分为两个亚组,日本和韩国种质均被聚到了大陆种质亚组,表明供试的日本和韩国材料与中国大陆种质遗传亲缘关系密切。     

大白菜InDel-PCR反应体系的优化

采用CTAB法提取大白菜基因组DNA,利用单因素试验对InDel-PCR反应体系中的dNTPs浓度、Mg2+浓度、Taq DNA聚合酶用量、模板DNA用量、引物浓度、退火温度、三温循环时间等7个因素进行筛选和优化。结果表明,适用于大白菜InDel-PCR分析的最佳扩增条件为(20μL):dNTPs 0.1mmol/L、Mg2+1.5mmol/L、Taq DNA聚合酶0.4U、模板DNA 105ng、引物浓度0.4μmol/L、退火温度50℃、三温循环时间30s-30s-45s。该体系可用于大白菜遗传多样性分析及遗传图谱构建。     

Identification of Heat Tolerance Linked Molecular Markers of Chinese Cabbage (Brassica campestris L.ssp. pekinensis)

Genetically stable population of recombination inbred line (RIL) was derived from a cross between a heat tolerant line 177 and a heat sensitive line 276 of Chinese cabbage (Brassica campestris L. ssp.pekinensis ) by single seed descent. The RILs were analyzed using isozyme, RAPD and AFLP techniques in order to find molecular markers that are linked to heat tolerance quantitative trait loci (QTL). The results of variance analysis of single factor indicated that there were 9 molecular markers closely linked with heat tolerance QTL, including 5 AFLP markers, 3 RAPD markers and 1 PGM isozyme marker. Total genetic contribution of these makers to heat tolerance was 46.7%. Five of the nine markers distributed in one linkage group,the remaining 4 markers were located in separate groups. Thus the 9 heat tolerance linked markers distributed in 5 independent locations in the genome of Chinese cabbage.     

脱落酸和烯效唑对菜心品质特性的影响

[目的]以菜心品种油青四九(Brassica campestris L.ssp.chinensis var.utilis Tsen et Lee cv.Youqing 49)为材料,研究不同浓度脱落酸和烯效唑,分别在2～3、4～5、6～8叶期3个时期,单一和混合施用对菜心菜薹品质特性的影响。[方法]对菜薹VC、可溶性蛋白、硝酸盐、可溶性糖、还原糖及游离氨基酸总量进行定量分析。[结果]所有处理中,以6～8叶期脱落酸15 mg/L+烯效唑300 mg/L处理菜薹VC含量最高,以4～5叶期烯效唑400 mg/L处理菜薹可溶性蛋白含量最高。除3个时期的脱落酸20 mg/L处理、6～8叶期烯效唑400mg/L以及脱落酸20 mg/L+烯效唑400 mg/L外,其余处理均不同程度地降低了菜薹的硝酸盐含量。脱落酸和烯效唑处理对菜薹游离氨基酸含量的增加作用在2～3叶期效果较好。菜薹可溶性糖和还原性糖含量以2～3叶期的脱落酸20 mg/L+烯效唑300 mg/L处理和4～5叶期脱落酸15 mg/L+烯效唑300 mg/L处理较高。[结论]综合而言,以2～3叶期脱落酸20 mg/L+烯效唑300 mg/L处理菜薹品质较好。     

不结球白菜BcGAPDH的生物信息学分析

采用生物信息学方法对克隆测序的不结球白菜(Brassica campestris ssp.chinensis)Bc GAPDH(3-磷酸甘油醛脱氢酶)蛋白质的理化性质、跨膜区、亲水性、亚细胞定位、所含模体及蛋白质结构进行了预测。理化性质分析表明,该酶含有328个氨基酸,相对分子量为35 161.2,p I值为9.03。TMpred跨膜分析表明,该酶没有跨膜螺旋区,这与Prot Scale预测的该酶为亲水性蛋白质相吻合。用Target P server程序预测该酶定位于线粒体上,结构域分析表明该酶含有多种磷酸化位点,二级结构以α-螺旋和随机卷曲为主。借助SWISS-MODEL软件对该酶进行了三维同源建模。