冻干曲线制定的探讨

笔者通过冻干过程中产品的温度、压力随时间变化的关系,论述了制定冻干曲线时主要确定的参数,探讨了在制定曲线时需要注意一些问题。     

解析"犬四联"弱毒疫苗质量与最佳冷冻干燥曲线的关系

依据4种病毒生化指标设计了3种不同冻干曲线，配制10批“犬四联”弱毒疫苗分别进行冷冻干燥比较试验。结果表明：采用16h和22h冻干曲线冻干后的疫苗效价比冻干前下降1～2个滴度，抗原损失较大；采用20h冻干曲线冻干后的疫苗效价仅降低0．5个滴度，而且CPV和CPIV的血清抗体滴度(SN)也略高于用前两种冻干曲线冻干的制品，其冻干产品外观优于应用前两种冻干曲线的产品。因此选择总冻干时间20h的冻干曲线为“犬四联疫苗”较理想的冻干曲线。     

耐热保护剂冻干活疫苗冷冻干燥工艺研究

以鸡新城疫、传染性支气管炎二联耐热保护剂冻干活疫苗的冷冻干燥试验为例,描述了冻干耐热保护剂冻干活疫苗时的工艺改进过程,获得了较佳冻干工艺曲线.     

D型肉毒毒素冻干剂的试验

通过保护剂的选择及冻干试验研制了D型肉毒毒素新剂型-D型肉毒冻干剂。试验确定30%蔗糖+10%明胶作为冻干剂的保护剂;室温(13℃~18℃)的保存期为10个月,37℃的保存期为6个月;水分含量为≤5%。同时制定了D型肉毒毒素冻干剂冻干曲线。     

羊传染性脓疱皮炎耐热性活疫苗冻干曲线的筛选试验报告

为了进一步筛选羊传染性脓疱皮炎耐热性活疫苗,本次试验共设置了3条不同的冻干曲线,通过培养羊传染性脓疱皮炎弱毒为对象,通过对疫苗的冻型、色泽、质地、水分含量、真空度、冻干时间长短,冻干前后病毒损失量为主要试验内容,筛选羊传染性脓疱皮炎耐热性活疫苗的最佳冻干曲线。结果证明,选择不同的冻干曲线所制备的活疫苗均表现出很好的耐热保护性能,虽然在冻干前后损失适量,存在一定差异,但差异性不明显。最终结合冻型好、冻干时间短,冻干前后病毒损失量小,选择曲线1为本次试验的最佳冻干曲线。     

羊传染性脓疱皮炎耐热性活疫苗冻干曲线的筛选试验研究

采用冷冻干燥技术,设置了三条不同的冻干曲线,以培养的羊传染性脓疱皮炎(Orf)弱毒为对象,通过冻型、色泽、质地、水分含量、真空度、冻干时间长短、冻干前后病毒损失量为参数,筛选适合羊Orf耐热性活疫苗的最佳冻干曲线,生产出符合质量要求的冻干疫苗。试验结果显示:利用不同曲线冻干的羊Orf耐热性活疫苗,体积几乎没有发生变化,颜色一致,疏松多孔,呈海绵状,加水后溶解迅速而完全,且立即恢复原来的状态;在耐老化试验中疫苗均表现出了很好的耐热保护性能,虽然在冻干前后病毒损失量略有不同,但差异不明显。因此,通过冻型好、冻干前后病毒损失量较小、冻干时间短,最终确定冻干曲线1为羊Orf耐热性活疫苗的最佳冻干曲线。     

猫泛白细胞减少症弱毒冻干疫苗研制与探索最佳冻干曲线的研究

生物制品进行冷冻干燥过程中，或多或少会损失一定的效价，可直接影响产品效力和免疫原性。本文为研制出高效价和保持期长的猪泛白细胞减少症弱毒冻干疫苗，为降低效价损失，选择出最佳冷冻干燥曲线，使冻干后的产品效价损失减少到最低水平。试验结果选用全程为17h的冻干曲线是科学的、可行的。     

仔猪副伤寒耐热保护剂活疫苗C500株生产工艺的优化

为优化仔猪副伤寒耐热保护剂活疫苗生产工艺,对细菌生长曲线、耐热保护剂和冻干曲线进行了研究,建立了发酵体积1%、2%和3%的二级种子接种量下分别发酵12 h~20 h的细菌生长曲线,检测3个配苗比例、4种耐热保护剂和3条冻干曲线下成品疫苗的冻干菌存率、活菌存活率和安全性,确定了接种3%二级种子液发酵培养17 h为最佳发酵培养条件,发酵菌数达到428×108CFU/m L;最佳配苗比例为菌液︰耐热保护剂1∶1(V∶V),优化保护剂B作为最佳耐热保护剂,设定冻干程序3#作为最佳冻干曲线。基于此,仔猪副伤寒耐热保护剂活疫苗抗原含量达到40头份/瓶,冻干菌存率和活菌存活率均达到95%以上,大幅度降低了猪体免疫副反应,极大提升了疫苗的产品品质。     

制订生物制品冻干曲线的探讨

探讨了生物制品冻干过程中,不同阶段油温、板温、苗温、箱温的变化规律,并将其同冻干时间有机结合起来,用于制订冻干曲线。     

桑果真空冷冻干燥技术研究

以大十桑果为原料,测得桑果真空冷冻干燥的共晶点和共溶点分别为－23℃和－20℃,冻结的最终温度为－33～－28℃。分析干燥过程中冻干曲线变化趋势;并对影响冻干品质量和产量因素进行测试研究。结果表明：桑果成熟度为八九成熟,装盘时单层平放,以速冻方法冻结,在升华干燥阶段采用二段温控曲线,在解析干燥阶段将加热板最高温度控制在35℃,加工出来的冻干品质量最好,保质期长。     

猪瘟兔化弱毒犊牛睾丸细胞苗保护剂的研究

自１９８８年我厂对干疫苗保护剂和冻干产品生产工艺进行了研究，以猪瘟兔化弱毒犊牛睾丸细胞苗为主进行了保护剂的筛选试验，找出一种保护剂配制方法，冻干曲线和时间及营养血清的配制新工艺。用这种方法生产的猪瘟细胞的毒冻干苗在３７℃环境中可保存１０天，在２２－２５℃条伯下可保存３５天，０－４℃条件下可保护２２个月，达到了国外同类苗的水平。     

冻干技术在兽用生物制品生产中的质量控制

冷冻真空干燥技术(简称冻干技术)是生物制品生产中最为广泛应用的技术。冻于过程对兽用生物制品质量影响，主要体现在产品物理性状、生物活性和残余水分含量等方面。由于工艺技术参数复杂，设备的操作在一定范围内有灵活性，因而在具体的冻干生产中，得到的产品质量不能尽如人意。经过多年冻于生产实践表明，从保护剂的选择、冻干曲线的设定以及对生产过     

猪瘟活疫苗耐热保护剂冷冻干燥技术研究

摘　要：随着猪瘟活疫苗耐热保护剂的不断应用,冻干技术的要求也越来越高。通过对冻干工艺的不断研究,采取预冻阶段快速和慢速降温,一期升华阶段选取不同温度等方法,筛选一条合适的冻干曲线,不仅缩短冻干时间,降低生产能耗,而且有利产品质量稳定,为今后耐热保护剂的冷冻干燥提供了研究方向。     

鸡痘耐热保护剂活疫苗的研究

选择不同基质组成保护剂与鸡痘抗原进行冻干试验，试制一种适宜鸡痘弱毒株的耐热冻干保护剂。应用耐热冻干保护剂和专用的冻干曲线，制成鸡痘耐热保护剂活疫苗，经37℃保存10d的耐老化试验，每羽份病毒含量下降0．2—0．4个滴度；疫苗在2—8℃保存24个月后，每羽份病毒含量下降0．2-0．4个滴度，且均≥10^3.0EID50／羽，具有良好的热稳定性。19万羽的田间试验证明，鸡痘耐热保护剂活疫苗安全、有效。     

羊传染性脓疱病毒耐热冻干保护剂筛选及冻干曲线优化

采用冻干试验筛选出保护剂基础配方,再通过Plackett-Burman设计法筛选主要保护剂基质,然后通过Box-Behnken响应面分析法对羊传染性脓疱病毒(ORFV)耐热保护剂配方进一步优化,用冻干试验进一步验证筛选出1种针对ORFV保护效果最好的耐热冻干保护剂作为疫苗用候选配方。同时,依据前期试验获得的活疫苗冻干曲线,通过进一步优化,获得疫苗最佳冻干曲线。利用该冻干工艺冻干的疫苗,保护剂的保护率可达95.3%,且疫苗各项指标均达到《中华人民共和国兽用生物制品规程》要求。经37℃保存7,15,30d病毒滴度分别下降0.46,0.70,1.00;2~8℃保存3,6,12,24个月病毒滴度分别下降0.10,0.10,0.40,0.60,证明此配方制备的疫苗具有良好的热稳定性。本试验解决了ORFV细胞弱毒疫苗仅能在低温条件下保存和运输的瓶颈技术问题,使疫苗的储存、运输更为方便。     

1株鹦鹉热衣原体的冻干、鉴定和分子分型研究

从国家兽医微生物菌(毒)种保藏中心领取1支鹦鹉热衣原体CVCC2410进行冻干和鉴定。将衣原体经卵黄囊接种SPF鸡胚进行复壮和传代，收获卵黄囊膜研磨后分装、冻干，并对冻干衣原体进行了无菌检验、真空度测定、染色特性和形态观察、特异性检验、16S rRNA鉴定、分子分型、衣原体含量测定。结果表明冻干衣原体CVCC2410 2203为C型鹦鹉热衣原体，含量为10^5.50ELD₅₀/0.2mL。本研究完善了该株衣原体的信息，为制定鹦鹉热衣原体的入库标准奠定基础。     

耐热冻干保护剂在疫苗生产中的应用研究

冻干保护剂可影响生物制品的质量、效价和稳定性，改变生物制品的生产工艺，提高产品预测能力并增大产品批次间的稳定性。耐热冻干保护剂有免疫活性但无药理活性，可在冻干和保存时维持疫苗的稳定性，初次干燥时在适宜的温度下疫苗不倒塌，企业低成本即可获取。     

鸡马立克氏病火鸡疱疹病毒(耐热保护剂)活疫苗的研究

通过对不同保护剂基质与鸡马立克氏病火鸡疱疹病毒(HVT)相溶性的研究及冻干曲线的优化,成功研制出一种适宜HVT的耐热冻干保护剂。用其与相匹配的48h自然回温冻干曲线冻干的HVT耐热活疫苗,其病毒冻干损失比SPGA常规疫苗减少约50%,在2~8℃条件下可保存24个月,37℃保存10d病毒存活率达50.5%,而SPGA规程苗仅为31.6%。经约50万羽份的田间试验,证明安全有效并显示出良好的耐热性能,达到国外同类产品水平。     

猪瘟高免血清冻干粉的初步研究

为获得高效价的猪瘟高免血清冻干粉,以设计的3种冻干保护剂及两种冻干曲线对制备的猪瘟高免血清液冻干并比较冻干前后猪瘟抗体效价与色泽、干燥度、吸水性等,筛选最佳冻干保护剂及最佳冻干曲线;对制备的血清冻干粉作稳定性试验、生物安全性试验及无菌检验。结果表明,于屠宰前40 d按每周免疫1次,屠宰前2~3 d 3倍剂量免疫,制备的高免血清按1.2∶1、1.5∶1的添加比例添加含有明胶、果糖、海藻糖及聚乙烯吡咯烷酮(PVP)冻干保护剂并经二级预冻的制备工艺能获得抗体效价为1∶512且无毒副作用的猪瘟高免血清冻干粉;-20℃保存1年血清冻干粉猪瘟抗体效价及品质均无改变,为猪瘟高免血清冻干粉较理想的贮藏温度。     

冻干益生菌微胶囊保护剂及抗性研究

本试验对嗜热链球菌微胶囊的冻干保护剂进行了筛选，对冻干工艺进行了优化，并对冻干嗜热链球菌微胶囊对胃液、肠液和贮存等胁迫作用的抵抗力进行了研究。结果显示：（1）最优的复合冻干保护剂为甘油2%，脱脂乳6%，抗坏血酸0.6%，海藻糖9%|存活率为80%|（2）添加冻干保护剂的微胶囊经模拟胃液处理150 min后,存活率为61%|未添加保护剂的微胶囊存活率为51%|（3）在模拟肠液中，添加冻干保护剂的微胶囊完全释放仅需60 min，而菌液对照组需要120 min才能释放完全|（4）4 ℃条件下贮存60 d后，嗜热链球菌冻干微胶囊存活率为77%，未冻干微胶囊存活率为62%|（5）冻干微胶囊分别在-20、4、20、37 ℃贮存60 d后，活菌数仍能达到108 cfu/g以上。试验结果表明，添加适宜的冻干保护剂可以提高嗜热链球菌微胶囊的性能，增强嗜热链球菌对胃液、肠液和贮存等体内外不良环境的抗性。 [关键词] 冻干|益生菌|微胶囊