15株柔嫩艾美耳球虫Eimeria tenella对五种抗球虫药的抗…

应用ＡＡ肉鸡，检测了采自我国１２个省区的１５株Ｅｉｍｅｒｉａ ｔｅｎｅｌｌａ对５种抗球虫药的敏感性。根据最适抗球虫活性百分率、相对卵囊产量和病变记分减少率３项指标综合判定，对莫能霉素、氨丙啉、克球粉、氯苯胍和杀球灵具有不同程度抗药性的虫株分别占８０％，６６．６％，５３．３％，５３．３％和０％。不同地区虫株的抗药谱和抗药程度存在差异。多数虫株对２种或２种以上的抗球虫药具有复合抗药性。此外，研究制订了     

麦杜拉霉素等7种药物对柔嫩艾美耳球虫效力的初步比较试验

对麦杜拉霉素(Maduramycin)、杀球灵(Diclazuril)和拉沙洛菌素(Lasalocid)等7种药物抗鸡柔嫩艾美耳球虫(E.tenella)进行效力比较试验.每只肉用雏鸡人工感染1×10~5个卵囊,在感染前两天按常用量将药物混入饲料中给予.与对照组相比,7种药物均表现出一定的抗球虫效力.抗球虫指数(ACI)以Maduramycin和Diclazuril最高,分别达到199.8和198.7,显示出极强的抗球虫效力.那拉菌素(Narasin)(186.2)、莫能菌素(Monensin)(184.4)、拉沙洛菌素(Lasalocid)(183)和尼卡巴嗪(Nicarbazin)(180),ACI达到180～186显示具有较高的抗球虫效力.与上述抗球虫药相比,腐霉素(Carriomycin)的效力较差,ACI为169,属中效抗球虫药.     

柔嫩艾美耳球虫长春分离株对7种抗球虫药的抗药性研究

以AA肉仔鸡为试验材料,以最适抗球虫活性百分率(POAA)、病变记分减少率(RLS)、相对卵囊产量减少率(ROP)和抗球虫指数(ACI)为判定指标,检测了长春市柔嫩艾美耳球虫分离株对7种抗球虫药物的抗药性。结果表明:长春市柔嫩艾美耳球虫分离株对莫能菌素、妥曲珠利无抗药性,对尼卡巴嗪有轻度抗药性,对马杜霉素和地克珠利有中度抗药性,对氯羟吡啶和盐霉素有完全抗药性。     

柔嫩艾美耳球虫对四种抗球虫药的交叉抗药性试验

作者检测了 Eimeria tenella 对4种抗球虫药的交叉抗药性情况。4种抗球虫药(拉沙里菌素、盐霉素、克球粉和地克珠利)对4株 E.tenella 抗药性虫株(拉沙里菌素抗性株、盐霉素抗性株克球粉抗性株和地克利抗性株)的药效结果显示,E.tenella 对以下三组药物不存在交抗药性:地克珠利与拉沙里菌素、地克珠利与盐霉素、地克珠利与克球粉.另外,盐霉素抗性株对拉沙里菌素表现敏感,而拉沙里菌素抗性株对盐霉素则缺乏敏感性.拉沙里菌素抗性株和盐霉素抗性株对克球粉表现为部分抗药,克球粉抗性珠对拉沙里菌素和盐霉素则表现敏感.     

不同柔嫩艾美耳球虫鸡场分离株的药物敏感性实验

以从发生球虫病的鸡场分离的3个柔嫩艾美耳球虫不同地理株为实验虫株,选择常用的3种预防性球虫药物:地克珠利、妥曲珠利、氨丙啉,以ACI作为敏感性判定标准,进行的药物敏感实验.实验分为13组,包括每个虫株3个药物组和一个感染不用药组,最后设1个不感染不用药组,实验结果表明,河北株和北京昌平株分别对地克珠利和妥曲珠利中度敏感,河北株和北京延庆株对氨丙啉低度敏感,北京昌平株、北京延庆株对氨丙啉敏感,北京延庆株对妥曲珠利不敏感.根据实验结果分别指导畜主换用敏感药物,控制了鸡场球虫病的发生.     

10株柔嫩艾美耳球虫对四种药物的抗药性检测

从4省市10个鸡场分离到10株柔嫩艾养耳球虫，使用AA肉鸡按每只鸡接种10万卵囊，对马杜霉素、百球清、盐霉素和拉沙里菌素的敏感性进行了测试。依照最适抗球虫活性百分率、相对卵囊产量和病变记分减少率3项指标，检测结果显示：30％虫株对马杜霉素和百球清有抗药性，40％虫株对拉沙里菌素有抗药性，70％虫株对盐霉素有抗药性，80％虫株对两种或两种以上的药物有抗药性。虫株的抗药谱带有明显的地方性。此外，对抗药虫株的鉴定标准进行了讨论。     

马杜霉素铵与地克珠利可溶性粉剂对鸡球虫病的疗效比较试验

将18日龄雏鸡口服接种柔嫩艾美球虫卵囊5万个/羽,接种后即开始给药马杜霉素铵与地克珠利,连续7 d,结果表明:马杜霉素铵与地克珠利的抗球虫指数分别为176.60、165.59分,属中效抗球虫药;马杜霉素铵组增重差异显著,两者的抗球虫效果均较好,且马杜霉素铵对雏鸡具有良好的促生长作用。     

柔嫩艾美耳球虫甘肃株抗药性的试验研究

用柔嫩艾美耳球虫甘肃株(E.tenella G S,E t G S)对15日龄雏鸡进行感染,以最适抗球虫活性百分率、抗球虫指数、相对卵囊产量和病变记分减少率为指标,进行综合评定,研究了该虫株对三九球痢灵、地克珠利、氯苯胍和地克珠利氯苯胍合剂等几种常用抗球虫药的敏感性。结果表明,该虫株对三九球痢灵有中度抗药性,对地克珠利和地克珠利氯苯胍合剂有轻度抗药性,对氯苯胍无抗药性。     

柔嫩艾美耳球虫杨凌株对几种抗球虫药的抗药性研究

用柔嫩艾美耳球虫杨凌株(YLt)对14日龄雏鸡进行感染,检测了该虫株对几种常用抗球虫药(三九球痢灵、地克珠利、氯苯胍和地克珠利氯苯胍合剂)的敏感性.以最适抗球虫活性百分率、抗球虫指数、相对卵囊产量和病变记分减少率为指标,进行综合评定,其抗药程度分为无抗药性、轻度抗药性、中度抗药性和完全抗药性4个等级.结果表明,该虫株对地克珠利氯苯胍合剂有轻度抗药性,对三九球痢灵和地克珠利有完全抗药性,对氯苯胍无抗药性.     

柔嫩艾美耳球虫长春株的抗药性试验研究

对柔嫩艾美耳球虫长春株的抗药性进行试验研究。用最适抗球虫活性百分率、病变记分减少率、相对卵囊产量和抗球虫指数4项指标进行综合判定,观察柔嫩艾美耳球虫长春分离株对氯苯胍、克球粉、地克珠利、马杜拉霉素、氨丙啉、盐霉素、莫能菌素和常山酮的抗药性。表明:柔嫩艾美耳球虫长春分离株对地克珠利和马杜拉霉素敏感,对莫能菌素轻度耐药,对克球粉和常山酮中度耐药,对氯苯胍、氨丙啉和盐霉素重度耐药。本地区防治柔嫩艾美耳球虫可合理使用地克珠利、马杜拉霉素和莫能菌素,对克球粉、常山酮慎用,氯苯胍、氨丙啉和盐霉素暂停使用。     

抑制差减杂交法克隆小麦抗病基因相关片段研究

以YW642/中8601的F2代纯合的抗病和感病单株各10株提取DNA构建成近等基因池,以抗病池为试验方,以感病池为驱动方,进行抑制差减杂交(SSH),构建差减文库。结果表明,用差异筛选排除假阳性,得到8个阳性克隆;Southern杂交表明,克隆TSH-1具有抗病池特异性,且为寡拷贝或单拷贝序列;经测序,TSH-1长388bp,提交GenBank进行Blast比对,没有找到与之同源的序列。     

抑制性消减杂交技术及其应用研究进展

抑制性消减杂交(SSH)技术是结合抑制性PCR和消减杂交技术发展起来的一种高效分离差异表达基因的方法,具有特异性高、假阳性率低、操作简便、速度快、效率高等优点。利用SSH技术进行不同状态下基因的表达变化分析、差异基因的克隆和鉴定对了解基因表达调控有着重要意义。为此,综述了SSH技术的原理及其在发育调控基因、疾病发生机制、药物研发、性状筛选及环境生物修复等方面的应用研究进展。     

植物基因分离的抑制消减杂交PCR

在植物的不同生长阶段,不同生理状态和不同类型的细胞中,表达的基因各不相同.因此,比较两种不同类型细胞中基因表达的差异是非常必要的.近几年发展起来了一些克隆表达基因的方法(SH,DD,RDA,SSH等).SSH报道于1996年,该法是以抑制PCR为基础将检测子cDNA标准化与消减杂交相结合所形成的.本文详细阐明了SSH的原理以及操作规则,相对于以上其他方法SSH有一些优点,例如假阳性低,重复性强,灵敏度低和操作繁琐,并对其在植物中的应用进行了展望.     

小金海棠抑制性消减cDNA文库的构建及文库质量分析

构建小金海棠抑制性消减文库,为进一步大量筛选、克隆苹果铁高效基因、果树转基因工程奠定基础.试验是在提取水培条件下小金海棠缺铁(ETA-Fe2 ,4μmol/L)和正常供铁(EDTA-Fe2 ,40μmol/L)的根的总RNA,经过LD-pCR扩增双链cDNA后,利用抑制性消减杂交(SSH)方法,通过两轮杂交和两次抑制性PCR,构建了小金海棠缺铁条件下包含1200个独立克隆的消减cDNA文库.用菌落PCR检测,结果显示插入片段大小范围在300～800bp之间,提取质粒进行PCR和质粒RsaⅠ酶切同样也得到一致性的结果.     

几个提高抑制消减杂交(SSH)文库质量的技术改进

抑制消减杂交( SSH)高灵敏、易操作、高效富集低表达丰度基因和均一化目的基因片断,广泛用于差异表达基因的分离和cDNA文库构建.在实验操作中常出现低表达mRNA和cDNA丢失、大片断连接效率低等问题,构建的文库质量差,文章通过改进萃取操作提高目的产物(mRNA和cDNA)回收率,回收率增加30％以上;通过采用PVPP、高浓度KAc专一性结合和LiC1沉淀等措施除去RNA中的多酚和多糖、进而增加可分离mRNA种类和含量,对应的Uni-EST种类增加近3倍,通过采用胶回收并分段连接保护大片断cDNA等措施使文库中转录本丰富度增加,大片段(500 bp以上)比例增大,cDNA平均长度增大,文库质量明显提高.     

抑制性消减杂交技术在水产无脊椎动物中的应用

抑制性消减杂交技术(SSH)是近年来兴起的一种分离、克隆差异基因的新技术。系统阐述了该技术的原理和优缺点,综述了该技术在水产无脊椎动物差异表达基因筛选方面应用的研究进展,并对该领域面临的问题进行剖析。     

不同地理株及其杂交株柔嫩艾美耳球虫免疫保护性研究

将不同地理株及其杂交株的柔嫩艾美耳球虫的孢子化卵囊饲喂肉鸡,选择12日龄的AA肉鸡进行免疫,首免的剂量为1×104。免疫10d后攻虫,剂量为1×103。攻虫后以排卵数、增重、粪便记分、盲肠病变记分等指标测定其免疫功能,并计算各株的保护率。结果表明:杂交株的柔嫩艾美耳球虫的免疫保护率明显高于亲本株。     

叶锈菌诱导的小麦叶片抑制差减杂交文库构建及其分析

 【目的】研究叶锈菌诱导小麦叶片的基因表达情况,从分子水平阐明小麦的抗病机制。【方法】以小麦抗叶锈病近等基因系TcLr41为材料,利用抑制差减杂交技术,构建叶锈菌诱导的小麦叶片cDNA文库,随机挑取文库中的阳性克隆测序,并对测序结果进行功能注释和分类。【结果】成功构建了叶锈菌诱导的小麦叶片抑制差减杂交文库,共获得3 456个阳性克隆。挑取165个阳性克隆进行测序,获得160条高质量EST。对EST序列进行聚类后,共获得107条非重复序列（Unigene）,与GenBank进行BLASTx和BLASTn同源比对,其中70条非重复序列与已知基因同源性很高,占全部非重复序列的65.4%。已知功能的EST涉及植物的能量代谢、信号转导、转录调控及抗病防卫等多方面。【结论】通过对功能已知的基因分析,推测促分裂原活化蛋白激酶（mitogen activated protein kinase）、丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶（serine/threonine protein kinase）、GTP结合蛋白（GTP-binding protein）、钙网蛋白（calreticulin）、过氧化氢酶（catalase）、谷胱甘肽-S-转移酶（glutathione-S-transferase）、多聚泛素基因（polyubiquitin）、锌指蛋白（zinc-finger protein）、肉桂醇脱氢酶（cinnamyl alcohol dehydrogenase）、转脂蛋白（lipid transfer protein）、类甜蛋白（thaumatin-like）、几丁质酶（chitinase）等可能参与了小麦与叶锈菌的非亲和互作过程。     

柔嫩艾美耳球虫杂交株MIC2基因克隆及序列分析

根据柔嫩艾美耳球虫子孢子微线蛋白2的cDNA序列,利用计算机设计l对引物,以柔嫩艾美耳球虫杂交株子孢子总RNA为模板,利用RT-PCR方法扩增出1个片段。把这个片段克隆到pMD18-T载体,经酶切鉴定得到1个阳性克隆,测序及序列分析结果表明该片段为MIC2基因,开发阅读框（0RF）与E．tenella豪顿株MIC2核苷酸同源性为99.51％,推导的氨基酸序列同源性为99.12％,说明MIC2基因高度保守。     

15株柔嫩艾美耳球虫Eimeria tenella对五种抗球虫药的抗药性调查研究

应用 AA 肉鸡,检测了采自我国12个省区的15株 Eimeria tenella 对5种抗球虫药的敏感性。根据最适抗球虫活性百分率、相对卵囊产量和病变记分减少率3项指标综合判定,对莫能霉素、氨丙啉、克球粉、氯苯胍和杀球灵具有不同程度抗药性的虫株分别占80%,66.6%,53.3%,53.3%和0%。不同地区虫株的抗药谱和抗药程度存在差异。多数虫株对2种或2种以上的抗球虫药具有复合抗药性。此外,研究制订了比较适用的检测球虫抗药性的判定方法和判定标准。