科研成果信息

1999年11月以来,黑龙江省科委、中国农业科学院等单位有一批科研成果通过成果鉴定,现将其中部分成果题目介绍如下。中国农业科学院哈尔滨兽医研究所:1.我国新城疫病毒流行株的遗传变异研究;2.马传染性贫血病驴白细胞弱毒疫苗株及其亲本驴强毒株分子特性的研究;3.猪生殖与呼吸综合征病毒重组核衣壳蛋白的表达及应用;4.伪狂犬病强弱毒重组ｇＥ-ＥＬＩＳＡ鉴别诊断方法的建立及应用;5.鸡传染性法氏囊超强毒灭活疫苗;6.鸡传染性法氏囊超强毒致弱株活疫苗;7.鸡枝原体病鸡传染性鼻炎双价二联油乳剂灭活疫苗。8.禽流感油乳剂灭活疫苗的研究及应用;9…     

28日龄鸡暴发IBD的诊断

传染性法氏囊病 (infectious bursal disease,IBD)是由鸡传染性法氏囊病病毒引起的一种急性、高度接触性传染病 ,本病对 4～ 6周龄的鸡易感。本文将对广州市郊某养鸡饲养场饲养的一批 2 8日龄海兰鸡暴发 IBD的发病情况及一系列诊断报告如下。1　发病情况2 0 0 1年 4月初 ,广州市郊某养鸡场的一批刚出壳的海兰鸡 4 0 0只 ,饲养于经福尔马林熏蒸消毒过的鸡舍 ,笼养 ,并由专人饲养管理。于 7日龄时进行口服免疫传染性支气管炎疫苗 ,养至 2 8日龄时突然发病 ,第 1天死亡 5 0多只 ,第 2天死亡 30多只 ,第 3天死亡 2 0多只。2　临床症状鸡群大…     

广西鸡传染性贫血流行病学的研究

应用PCR检测技术 ,对采自广西五个主要养鸡地区 5 0多个鸡群 3 2 1羽病鸡的组织样品 ,进行了鸡传染性贫血病毒核酸的检测。结果检测的病例平均阳性率为 2 8 3 4%;三黄鸡的阳性检出率最高 ( 3 9 2 8%) ;各种日龄的鸡均可检出 ,其中最小的为 7日龄、最大的为 3 5 0日龄 ;对 5个免疫器官的检测结果显示 ,骨髓的检出率最高( 84 3 8%) ;CIAV阳性病例中与MDV、REV和ALV的混合感染率共计 48 40 %。     

鸡传染性喉气管炎病毒核酸探针的制备及特异性鉴定

从鸡传染性喉气管炎病毒王岗株感染的鸡胚绒毛尿囊膜细胞中提取病毒,并抽提其核酸,经限制性核酸内切酶Pst Ⅰ完全消化后,在0.7%琼脂糖凝胶中电泳分离,然后用DE—81滤纸回收2～6kb区域的片段与质粒pBluescrip~+SK重组.有3个重组质粒(pLT—1,pLT—2和pLT—4)所含外源DNA片段的大小,分别与4.3kb,4.8kb和1.6kb的鸡传染性喉气管炎病毒DNA Pst Ⅰ片段一致,经过Southern杂交试验证明,这3个片段都是病毒DNA的特异性片段.用光生物素标记重组质粒pLT—1和pLT—2后混合作为探针,再与鸡喉气管炎病毒及其他8种鸡传染性病原进行杂交,证明此探针只与喉气管炎病毒反应,而与其他8种病原无任何交叉反应.     

规模化商品肉鸡主要疫病流行动态

1 禽流感 禽流感在很长时间仍然是养禽业重大传染病,是禽病防控的重点.H5亚型家禽禽流感:H5N1、H5N2、H5N6、H5N8;H9亚型家禽禽流感:H9N2;H7亚型家禽禽流感:H7N7、H7N9. 1.1 病毒理化性质 禽流感病毒是囊膜病毒,对去污剂等脂溶剂比较敏感.对碘蒸气和碘溶液特别敏感.常用消毒剂能迅速破坏其传染性.病毒可在加热、极端的pH、非等渗和干燥的条件下失活.禽流感病毒可以在自然环境中,特别是凉爽和潮湿的条件存活很长时间.粪便中病毒的传染性在4℃条件下可以保持长达30～50天,20℃时为7天,60℃、20分钟可以灭活病毒.     

冬春季节引起鸡群呼吸道症状的几种疾病的鉴别诊治

正近几年来,每到冬春季节鸡群就会发病,其主要症状都是呼吸道症状。通过这几年的临床诊治发现引起鸡群呼吸道症状的疾病主要有这么几种:(1)低致病性禽流感;(2)新城疫;(3)鸡传染性喉气管炎;(4)鸡传染性支气管炎;(5)鸡传染性鼻炎;(6)鸡毒支原体;(7)曲霉菌病。由于这几种病都有呼吸道症状,为了对症施治,必须对这几种病进行鉴别诊断。1从病原学及流行特点上区别(1)低致病性禽流感的病原是低致病性禽流感病毒。不同品种、日龄     

鸡传染性法氏囊病的防控措施

鸡传染性法氏囊病是由传染性法氏囊病毒引起幼鸡的一种急性、高度接触性传染病.发病率高达80%以上,病程短,通常在感染后的第3d开始死亡,4~7d死亡率达到高峰,死亡率一般在13~50%,多发于3~6周龄鸡.     

鸡传染性支气管炎病毒S1基因和鸡II型干扰素基因在重组鸡痘病毒中的共表达

将鸡II型干扰素(ChIFNγ)基因和鸡传染性支气管炎病毒S1基因同时插入到鸡痘病毒转移载体中,构建含有这2个基因的鸡痘病毒转移载体pSY-ChIFNγS1。采用脂质体法将该质粒转染鸡痘病毒感染的鸡胚成纤维细胞(CEF),经过8轮蓝斑筛选,得到纯化的能够同时表达鸡II型干扰素和鸡传染性支气管炎病毒S1基因的重组鸡痘病毒rFPV-ChIFNγS1。rFPV-ChIFNγS1接种28日龄的SPF鸡1周后,可以检测到针对传染性支气管炎病毒S1基因的ELISA抗体,重组病毒接种鸡的CD4+、CD8+和γδTCR阳性T淋巴细胞的百分比含量显著高于非免疫对照鸡(P<0.05);免疫4周后用传染性支气管炎LX4强毒株攻击,rFPV-ChIFNγS1免疫组仅有1只出现轻微的呼吸道症状(1/16),而非免疫对照组则有16只发病(16/16),并有2只出现死亡(2/16),表明rFPV-ChIFNγS1对接种鸡可以产生良好的保护效果。     

鸡传染性法氏囊病防治的对策

鸡传染性法氏囊病是由鸡传染性法氏病病毒引起的一种急性、接触性、免疫抑制性疾病.该病发病突然（潜伏期2～3d）、病程短（7～8d）、呈双尖峰死亡曲线.此病对养鸡业危害巨大,该病毒诱发免疫抑制,使鸡体对多种疫苗的免疫应答能力下降,容易引起并发或继发其他多种疾病.     

IBDV超强毒GX8/99株的细胞适应毒和鸡体传代毒的致病性和VP5基因的比较

传染性法氏囊病病毒(Infectious Bursal Diseas Virus,IBDV)的超强毒株GX8/99经在鸡胚成纤维细胞(CEF)上连续盲传23代后,细胞适应毒株GXC23时鸡的致病性显著减弱,对4～6周龄SPF鸡的致死率从85%～90%减为0～5%.GXC23在96孔细胞培养板上经2次无限稀释法后得到3个克隆病毒.经SPF鸡回传20代后,相应的毒株GX-2820、GX-4820、GX-5820对SPF鸡的致死率仍维持在0～5%.序列比较表明,GX8/99在传代过程中,其细胞适应毒GXC23有8个碱基突变,其中5个碱基突变导致了氨基酸改变.bp#2 T→C突变,导致传代毒ORF中的起始编码子后移了4个氨基酸.而3个克隆化病毒回鸡20代后致病性不变,这几个位点也保持不变,且与3个疫苗株完全一致.进一步分析表明,有4个超强毒株和4个强毒株的VP5基因的5个位点与GX8/99原始毒相同,而另3个超强毒及6个强毒株与细胞适应毒GXC23一致.这些结果表明,超强毒GX8/99在细胞传代过程中VP5基因上5个氨基酸的变异主要与适应细胞培养相关而与致病性无关.     

应用生物素-亲和素法检测实验性传染性法氏囊病病鸡体内的病毒分布与消长

应用生物素—亲和素(BA)法检测实验性传染性法氏囊病(IBD)鸡,在法氏囊、脾脏、盲肠扁桃体、胸腺、肝脏、肺脏、肾脏和心脏均检出了阳性细胞,并证明鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)最早定位于法氏囊滤泡髓质区的淋巴细胞胞浆内并进行复制,法氏囊滤泡的淋巴细胞是IBDV的主要靶细胞.接毒后ld,法氏囊滤泡就见有许多病毒;2～3d.病毒数量激增并达到高峰;4～5d,病毒数量维持较高水平;6～7d,病毒数量显著减少.本实验结果表明,BA法可以作为IBD的特异诊断方法,法氏囊可作为检测本病的首选器官,在法氏囊滤泡的髓质检出阳性淋巴细胞、阳性异染性白细胞和阳性巨噬细胞,或主要检出阳性巨噬细胞,均可作为本病的特异性诊断指标.     

肉鸡传染性法氏囊病的防治

<正>肉鸡传染性法氏囊病是由传染性法氏囊病病毒引起的、以危害幼龄鸡为主的一种急性、接触性及免疫抑制性传染病。1流行情况主要发生于2~11周龄鸡,3~6周龄较易感,肉鸡多发常见。感染率可达100%,死亡率常因发病年龄、有无继发感染而有较大变化,多在5%~40%。因传染性法氏囊病病毒对一般消毒药和外界环境抵抗力较     

雏鸡法氏囊病的综合防制

鸡传染性法氏囊病是由法氏囊病毒引起雏鸡的一种急性高度接触性传染病.鸡法氏囊病毒主要感染雏鸡,12周龄以后法氏囊退化的鸡只发生隐性感染.在自然情况下2～15周龄均可发病,有时可提前到1周龄内,以3～6周龄多发,其中4周龄最易感.     

鸡传染性法氏囊病的诊疗

<正>1发病情况鸡传染性法氏囊病是由传染性法氏囊病病毒引起的主要危害雏鸡的一种急性高度接触性传染病。2011年3月,武威市凉州区某鸡场饲养的8 000只21日龄鸡群突然大批发病,6 d内死亡260只。发病后3～4 d死亡达到高峰,平均每天死亡60多只。发病1周后,病死鸡数明显减少,迅速康复。根据临床经验和症状,怀疑是鸡传染性法氏囊病。     

鸡传染性贫血病毒VP3蛋白的原核表达及其单克隆抗体的研制

本研究首先利用同源重组一步克隆法将鸡传染性贫血病病毒(CIAV)的VP3基因克隆到pGEX-6P-1原核表达载体上,经IPTG诱导及SDS-PAGE分析成功获得了重组蛋白rGST-VP3的表达.随即以纯化的重组蛋白rGST-VP3免疫Balb/c小鼠,通过脾细胞与SP2/0细胞融合以及间接免疫荧光(IFA)筛选,获得2株稳定分泌CIAV-VP3抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为CIAV-VP3-4D7和CIAV-VP3-4G8;亚型鉴定表明,CIAV-VP3-4D7和CIAV-VP3-4G8均为IgG1;效价测定发现,CIAV-VP3-4D7和CIAV-VP3-4G8的腹水间接免疫荧光效价分别为1:102400与1:12800;Western blot进一步证实,CIAV-VP3-4D7和CIAV-VP3-4G8均能识别重组蛋白rGST-VP3.本研究结果为后期研究VP3蛋白在CIAV致病中作用及其诱导凋亡分子机制奠定了坚实的物质基础.     

肉鸡传染性关节炎的诊治

肉鸡传染性关节炎又称病毒性腱鞘炎 ,是一种由呼肠孤病毒引起的传染病。发生于2～ 7周龄的肉鸡群 ,以损害关节滑膜、腱鞘和心肌为特征。病鸡关节肿大 ,腱束变粗 ,跛行、发病率高 ,残淘率高 ,饲料利用率下降 ,生长停滞 ,常造成很大的经济损失。1　发病情况2 0 0 2年 2月于某饲养ＡＡ肉鸡 2 0 0 0只 ,3 5日龄发现有瘫痪、不能走、吃料少的病鸡 1 6只 ,3 6日龄又发现 2 8只 ,同时鸡群吃料量下降 ,精神差 ,死亡 7只 ,3 7日龄又死亡1 1只。2　临床症状病鸡表现跛行 ,关节肿大 ,步态不稳 ,跗关节着地 ,驱赶时单腿跳 ,不能采食、饮水。个别的体瘦 ,…     

鸡传染性支气管炎病毒重组鸡痘病毒基因工程疫苗对异源LTJ95I株病毒攻击的免疫保护

rFPV-IFNγS1是一株共表达传染性支气管炎病毒S1基因和鸡干扰素-γ基因的重组鸡痘病毒,将其接种SPF鸡3周后,用传染性支气管炎病毒异源毒株LTJ95I攻击.结果显示,疫苗接种后1周,免疫鸡血清抗体很快产生,外周血中CD4 和CD8 T淋巴细胞的百分含量略高于非免疫对照组,但这种差异并不显著.攻毒后保护率结果显示,该疫苗不能对异源病毒提供坚强保护,攻毒后免疫组的发病率为6O%(6/10),病死率为30%(3/10),非免疫对照组的发病率和病死率分别为73%(8/11)和27%(3/11);两组的病理损伤程度差异不明显,在排毒时间上也没有明显变化.     

鸡传染性支气管炎及其防治

<正>近几年,鸡传染性支气管炎对鸡只的危害日益严重,其所造成的经济损失也日趋严重。鸡支气管炎成为鸡新城疫、鸡传染性法氏囊病等传染病之后的危害较为严重的疾病。1病原体鸡传染性支气管炎病毒属于冠状病毒科冠状病毒属。其有较强的变异性,目前研究发现的血清型有20多种。这些毒株中大部分可使气管发生病变,小部分会引起肾脏病变。2临床症状鸡传染性支气管炎病毒主要感染7~28日龄的雏鸡,研究显示,7~28日龄的雏鸡感染鸡支气管炎病毒后,病死率在     

鸡传染性法氏囊病诊疗

鸡传染性法氏囊病(IBD)是由病毒引起的一种主要危害雏鸡的免疫抑制性传染病。1症状(1)患鸡精神萎靡、食欲不振、缩颈,颈部毛竖起、下痢、虚脱而死。(2)发生后第1~2天有鸡死亡,第4~7天死亡率达最高峰,之后鸡慢慢恢复正常。(3)发生率可达100%,死     

猪流感病毒的分离鉴定

用SPF鸡胚从我国东北地区猪群中分离出 3株H3 N2 猪流感病毒 (SIV) ,分别命名为A/Swine/Heilongjiang/ 1/ 2 0 0 0、A/Swine/Heilogjiang/ 2 / 2 0 0 0和A/Swine/Heilogjiang/ 3/ 2 0 0 0。SIV分离株第 8代病毒液对 0 .5 %豚鼠红血球的血凝价分别为2 0 48log2 、2 0 48log2 、40 96log2 ;将其制成琼扩 (AGP)抗原与禽流感标准阳性血清均出现清晰白色沉淀线 ;与流感病毒H3 亚型标准阳性血清的血凝抑制 (HI)价分别为 8log2 、7log2 、7log2 ,但不能被鸡新城疫阳性血清抑制。这 3株SIV都为热不稳定型 ;均能凝集驴、绵羊、鸡、兔、豚鼠、小鼠、大鼠、人O型血红血球 ,对马、牛红血球均不凝集 ;感染一个病毒最小致死量的鸡胚平均死亡时间分别为 86 .4、12 9.6和 91.2小时 ;每 0 .2ml病毒液鸡胚半数感染量分别为 4.75lg、4.5lg、和 6 .0lg ;对鸡的静脉内接种致病指数和脑内接种致病指数各为 0 .5 6、0 .32、0 .5 2和 0 .77、0 .38、0 .5 2 ;对小鼠的半数致死量分别为 2 .6lg、2 .0lg和 2 .5lg ;试验感染小鼠、豚鼠和猪均可发病并出现死亡。存活动物接种后第 6天和第 14天的血清 ,其HI价均在 8log2 以上 ,而AGP均为阴性。