不同地区鸡毒支原体的分离鉴定及药物敏感性研究

【目的】了解中国不同地区鸡毒支原体（Mycoplasma gallisepticum,MG）的流行和耐药情况,为禽支原体病的监测与防控提供科学依据。【方法】在广东、福建和安徽3个省份疑似MG感染的养殖场采集的43份气囊样品中分离培养和纯化MG流行菌株,并对其进行培养特性观察、生化及染色鉴定、血清学特异性鉴定、PCR测序分析、致病性试验和对常见抗菌药物敏感性试验。【结果】分离到3株疑似MG,均可使培养基颜色变黄,在固体培养基上呈典型煎蛋样菌落,可发酵葡萄糖,不水解精氨酸,不能利用尿素,符合MG培养特性。姬姆萨染色观察菌体形态、血清学特异性鉴定结果进一步证实分离株为MG。mgc2基因测序结果显示,3株分离株与强毒代表株亲缘关系更近。致病性试验结果显示,3株分离株与MG感染临床症状一致,发病率为70%~90%,致病力较强。药物敏感性试验结果显示,3株分离株均对恩诺沙星、替米考星、土霉素、氟苯尼考耐药,对泰万菌素和沃尼妙林均敏感,对大观霉素、金霉素、泰乐菌素和泰妙菌素的敏感性具有地域差异：福建株对大观霉素表现明显耐药,安徽株对泰妙菌素表现耐药,而广东株对大观霉素、金霉素和泰妙菌素均较敏感。【结论】本试验成功分离到3株MG,致病力较强,且均存在一定程度耐药,对药物的敏感程度有地区性差异,今后仍需加强各地区MG的药物敏感性监测,减少耐药性的产生与扩散。     

鸡毒支原体的分离与鉴定

从广东、四川及北京地区患有慢性呼吸道疾病的不同鸡场采集194份样本,接种FM-4培养基进行分离培养。对符合鸡毒支原体培养特性培养物采用PCR加以鉴定,结果培养鉴定出69株鸡毒支原体,其分离率为35.57%(69株/194株)。     

鸡胚致病性大肠杆菌的分离与鉴定

对胶州某种鸡场孵化19d出现的死亡鸡胚无菌采取尿囊液和肝脏,集中进行了常规菌的分离与培养。对分离的病原菌进行细菌培养、染色镜检、生化试验、溶血试验和药敏试验,分离鉴定结果表明,该批鸡胚感染了致病性大肠杆菌,并产生溶血现象。药敏试验结果表明,分离到的致病性大肠杆菌对美福仙高度敏感,对庆大霉素、先锋V中度敏感,而对其他几种药物产生了耐药性,为该种鸡场对大肠杆菌病的预防和治疗提供了理论依据     

鸡毒支原体的分离鉴定及药敏试验

从云南地区某疑似慢性呼吸道病(CRD)的鸡场分离到1株支原体菌株,经菌落形态观察、血清学鉴定,证明该分离株为鸡毒支原体(MG)。     

鸡源致病性沙门氏菌的分离鉴定及血清型和药物敏感性分析

为了解当前广西鸡源致病性沙门氏菌的优势流行菌株及耐药情况,掌握其最新流行特点,本试验采集疑似病鸡的组织病料,对沙门氏菌进行增菌和分离培养,运用VITEK System ATB Expression法ID 32E肠杆菌鉴定试剂条对分离菌株进行生化试验鉴定,应用玻片凝集试验进行血清型鉴定,采用ATB VET药敏试剂条对30种肠杆菌抗菌药物进行药物敏感性试验。结果显示,从310份疑似鸡病料中分离鉴定出34株致病性沙门氏菌;这些分离菌株中有A群1株、C2群1株、B群15株和D群14株,另有3株未定型,其中以B群鼠伤寒沙门氏菌和D群鸡白痢沙门氏菌为优势菌株;34株分离株均对美洛培南、亚胺培南、大观霉素和安普霉素敏感,对氯霉素、卡那霉素、庆大霉素的耐药率小于10%,对阿莫西林、链霉素、氟甲喹、噁喹酸、磺胺甲噁唑、四环素和呋喃妥因耐药率介于50%和90%之间,而对青霉素、苯唑西林、夫西地酸、利福平和甲硝唑的耐药率达到100%,并且存在多重耐药现象。结果表明,鸡源致病性沙门氏菌的流行菌株具有一定的地域性,当前广西以鼠伤寒沙门氏菌和鸡白痢沙门氏菌为主,流行菌株耐药性严重,应高度关注。     

山东地区发生呼吸道性疾病的肉鸡场鸡毒支原体的分离鉴定

为了解山东省发生呼吸道疾病的肉鸡场鸡毒支原体的感染情况,2013年至2014年从山东地区发生呼吸道疾病的商品肉鸡场采集发病鸡,记录其临床表现(发病特点、临床症状和病理变化),并进行鸡毒支原体分离鉴定。对符合鸡毒支原体培养特性的分离株通过PCR扩增和测序加以鉴定,共分离鉴定出36株鸡毒支原体。3~20日龄肉鸡采集23场,分离出3株鸡毒支原体,分离阳性的样品疑来自鸡毒支原体单纯感染的病例;21~40日龄肉鸡采集78场,分离出33株鸡毒支原体,分离阳性的样品均来自混合感染病例。     

鸡毒支原体的分离培养和初步鉴定

从济南地区某疑似慢性呼吸道病（CRD）的鸡场分离到1株支原体菌株，经菌落形态观察、生化试验、血清学鉴定，证明该分离株为鸡毒支原体（MG）。     

混合感染中鸡毒支原体和副鸡嗜血杆菌的分离鉴定

从冀南地区某养鸡场患呼吸道疾病的病鸡群采集5份样品（气管和眶下窦分泌物）中，同时分离到鸡毒支原体和副鸡嗜血杆菌两种病原体。通过病原的分离培养、细菌L型检验、生化试验、血清学试验等鉴定，证明分离的鸡毒支原体与国际标准株S6的血清型一致，副鸡嗜血杆菌的血清型为A型，动物试验表明，分离的鸡毒支原体和副鸡嗜血杆菌均具有明显的致病性，说明该病鸡群同时混合感染了鸡毒支原体和副鸡嗜血杆菌。     

鸡毒支原体的分离鉴定和最低抑菌浓度测定

从山东、河北、北京和天津等不同地区分离、鉴定了4株鸡毒支原体，通过体外最低抑菌浓度测定发现泰妙菌素、泰乐菌素、百里霉索、罗红霉素、林可霉素／壮观霉素合剂、氧氟杀星、乳酸红霉素和盐酸林可霉素对该4个菌株的最低抑菌浓度(MIC)平均值分别是0．0062μg/ml、0．0171μg/ml、0．0682μg/ml、8．5248μg/ml、8．5248μg/ml、0．1024μg/ml、0．4550μg/ml和15．4944μg/ml，同时发现不同菌株之间的最低抑菌浓度有明显的差异。该试验结果表明鸡毒支原体容易对抗菌药物产生抗药性，目前临床预防或治疗鸡毒支原体感染可选用泰妙菌素、泰乐菌素、百里霉素和氧氟杀星等药物，而常规使用的红霉素和罗红霉素效果不佳。     

鸡毒支原体的分离鉴定

鸡毒支原体（Mycoplasma gallisepticum,MG）会引发鸡的慢性呼吸道疾病（chronic respiratory disease,CRD）。本研究从吉林经济技术开发区鸡场采集的疑似支原体感染病料中分离、培养获得一菌株,经菌落形态观察、菌落红细胞吸附试验、生化特性测定及血清学鉴定等试验,证明该分离株为鸡毒支原体（MG）,并命名为JL株。     

鸡胚病原菌的分离与鉴定

鸡胚病原菌的分离与鉴定图布丹扎布，宝力德，禹旺盛，郭景芳（内蒙古农牧学院动物医学系，呼和浩特０１００１８）１９９４年３～４月，呼和浩特市某鸡场自产种蛋孵化过程中陆续出现死胚，共死５９０６只，死亡率达２７．６％。剖检不同日龄死胚１５只，呈现浆液性纤维素...     

鸡毒支原体的分离培养和初步鉴定

从济南地区某疑似慢性呼吸道病(CRD)的鸡场分离到1株支原体菌株,经菌落形态观察、生化试验、血清学鉴定,证明该分离株为鸡毒支原体(MG)。     

鸡毒支原体不同地区分离株对常用抗菌药物的敏感性试验

从广东、四川和北京等地疑似鸡毒支原体感染鸡中分离并利用种特异性基因（fMG-2）PCR方法鉴定了51株鸡毒支原体,并测定了这些分离株对常用抗菌药物的敏感性。结果表明,三个地区临床分离鸡毒支原体对泰乐菌素仍然保持较好的敏感性,可作为鸡毒支原体感染的首选药物。三个地区的鸡毒支原体对林可霉素和庆大霉素敏感性显著下降,广东、四川两地分离株对强力霉素也有明显耐受性,部分广东分离株对氟喹诺酮类药物敏感性显著下降。     

应用PCR-RFLP分析鉴定鸡毒支原体

本试验合成１对引物,对鸡毒支原体（Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａｇａｌｌｉｓｅｐｔｉｃｕｍ,ＭＧ）、滑液支原体（Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａｓｙｎｏｖｉａｅ,ＭＳ）１６ＳｒＲＮＡ和２３ＳｒＲＮＡ基因的间隔区序列进行ＰＣＲ扩增,然后分别用ＲｓａⅠ、ＤｒａⅠ对上述扩增产物限制性酶,所获得的片段进行琼脂糖凝胶电泳。     

一株鸡毒支原体致病性研究与药敏试验

为进一步掌握鸡毒支原体的致病性,从某养殖场分离一种鸡毒支原体的毒株,开展致病性试验和药敏试验。选择使用20枚孵化5日龄的SPF鸡胚,使用2种不同浓度的菌液进行攻毒试验,观察鸡胚的死亡情况和解剖情况,并按照支原体培养方法分离得到病原后进行常规药敏试验,确定哪种抗生素对支原体敏感。研究结果表明,不同浓度均会造成鸡胚死亡,低浓度鸡胚死亡率70%左右,高浓度造成鸡胚全部死亡。分离得到的毒支原体对盐酸沃尼妙林、盐湖索酸泰妙菌素、强力霉素敏感性最强,其次是盐酸大观霉素、水溶性氟苯尼考、酒石酸泰乐菌素。研究结果可知,分离得到的一株鸡毒支原体的致病性较强,同时分离出的高敏药物对支原体具有很强的抑制作用。     

1株猪鼻支原体的分离鉴定及致病性

猪鼻支原体是猪场感染率极高的一种支原体,可引起多发性浆膜炎、关节炎等症状。目前尚未建立标准的猪鼻支原体发病模型,也缺乏标准强毒株。本研究从某猪场发病猪的关节液中分离得到一株支原体,通过PCR检测、菌落形态观察、菌体形态电镜分析、菌株MLST分型等方法对其进行了鉴定,确认其为猪鼻支原体。为评价菌株致病性,将该分离株接种1月龄自然分娩不吃初乳猪（SF-pCD猪）,试验猪在感染后出现关节肿胀、跛行等临床症状,日增重显著低于对照组,并出现部分死亡。剖检结果显示感染组出现胸膜炎、腹膜炎、心包炎及关节炎,肺部组织病理分析显示为间质增宽,无虾肉样病变。从发病猪的扁桃体、肺、心及关节积液中可再次分离到攻毒株。综上,本研究分离获得一株猪鼻支原体,人工感染猪后可出现典型的发病症状,猪鼻支原体发病模型的建立为致病机制及疫苗研究奠定了重要的基础。     

鸡致病性大肠杆菌的分离与血清型鉴定

鸡大肠杆菌病是由致病性大肠埃希氏杆菌 (E.coli)所致鸡的一种传染病 ,有原发性的 ,也有并发或继发性的 ,目前已成为危害我县养鸡业的重要的细菌性传染病之一。目前国外已发现的 E.coli血清型有 1 6 0多种 ,但对禽致病的约占 1 5 %左右 ,禽类最常见的致病血清型为 O1、O2 、O78和 O3 5等几种[2 ] 。国内目前已报道的鸡致病性 E.coli血清型多达 5 0余种 ,不同地区差别较大[1、2、3、4 ] 。在对我县鸡 E.coli病开展防制研究的过程中 ,为进一步查清我县鸡 E.coli的流行特点 ,从 1 997～ 2 0 0 0年 4年间 ,对分离自我县鸡群和鸡胚的菌株进行…     

市场鸡沙门氏菌分离鉴定及致病性研究

为了研究不同沙门氏菌对雏鸡致病性的强弱以及不同药物敏感性情况,本试验对送检的病料进行病原分离鉴定,同时进行1日龄雏鸡致病性试验和药物敏感性试验。结果表明,分离菌为3种不同沙门氏菌,3种菌株在同时间内导致雏鸡不同程度的死亡,其中鸡白痢标准菌株致病力强,死亡速度快;同时3种菌株均对丁胺卡那、林可霉素类抗生素药物敏感,对氧氟沙星耐药。本研究为临床诊断沙门氏菌导致的雏鸡症状提供了理论依据,同时为筛选沙门氏菌病有效药物提供参考。     

规模化猪场猪源沙门氏菌的分离鉴定及药物敏感性分析

为了解贵阳地区某规模化猪场致腹泻猪源沙门氏菌的流行状况和耐药情况,采集腹泻仔猪肠内容物进行细菌分离培养、生化试验、PCR检测、动物致病性试验和药敏试验.结果表明,从腹泻仔猪肠道内容物中分离到两株沙门氏菌,分别为鼠伤寒沙门氏菌和猪霍乱沙门氏菌;生化试验显示均有沙门氏菌特异性特征;按照4.1×109 cfu/mL剂量给小鼠...