马流产沙门氏菌的分离鉴定及其微量凝集抗体检测方法的建立与应用

【目的】对流产马驹组织进行马流产沙门氏菌的分离和鉴定,以分离株制备凝集抗原,旨在建立一种敏感、特异、操作简便和高通量的微量凝集方法,实现对马流产沙门氏菌抗体进行快速检测。【方法】利用沙门氏菌显色培养基对流产的马驹脏器进行细菌分离,对紫色菌落进行革兰氏染色鉴定;提取细菌全基因组,利用16S rRNA进行PCR扩增和测序鉴定,并对菌株进行生化鉴定和血清型鉴定,对病因进行综合诊断。利用分离获得的阳性菌株进行灭活后作为凝集抗原,以马流产沙门氏菌标准阳性血清作为阳性对照,通过反应条件优化,建立微量凝集试验方法,并对该方法的特异性、敏感性、重复性进行了验证。与国家行业标准中的试管凝集试验方法进行对比,同时利用微量凝集对华北和西北各3个地方的共151份血清样品进行检测,并随机选取30份样品,利用微量凝集和试管凝集进行检测,并对两种方法检测的敏感性进行比较分析。【结果】各流产马驹组织在沙门氏菌显色培养基上划线结果,均可以获得大量紫色目标菌落;革兰氏染色结果表明,分离的菌株为革兰氏阴性短杆菌,16S rRNA测序证实分离株为沙门氏菌属,生化鉴定结果表明,分离的17株菌均符合马流产沙门氏菌的生化特性,但相比上世纪强毒株马流产沙门氏菌C77-1,均不能发酵鼠李糖;血清型鉴定证实分离株均为马流产沙门氏菌,将分离的17株马流产沙门氏菌分别命名为E.S-1—17。因此证实马匹流产均为马流产沙门氏菌感染所致。利用甲醛对E.S-1菌株进行了灭活处理,成功制备了马流产沙门氏菌凝集抗原,并建立了一种快速敏感的微量凝集检测方法,其中优化了最佳反应凝集抗原浓度为4亿/mL。其敏感性比试管凝集高1个滴度,其特异性与其他常见马传染病病原阳性血清无交叉反应,并且具有良好的重复性。利用微量凝集方法,对华北3个疫情区进行检测,阳性率分别为28.6%、42.9%和27.3%,西北3个无疫情区阳性率均为0%。此外,利用两种方法对相同的30份临床血清进行检测,微量凝集和试管凝集方法阳性份数分别为10份和3份,阳性率分别为33.3%和10%。与试管凝集相比,微量凝集诊断敏感性为100%,诊断特异性为74.1%,总体符合率为76.7%。【结论】分离鉴定获得了17株马流产沙门氏菌,建立了马流产沙门氏菌微量凝集抗体检测方法,该方法敏感性高、特异性强、重复性好,简便、快速、高通量,可以广泛应用于马属动物中马流产沙门氏菌抗体的检测,是该病诊断及疫苗评估的重要依据之一。     

马流产沙门氏菌的分离鉴定及其微量凝集抗体检测方法的建立与应用

【目的】 对流产马驹组织进行马流产沙门氏菌的分离和鉴定,以分离株制备凝集抗原,旨在建立一种敏感、特异、操作简便和高通量的微量凝集方法,实现对马流产沙门氏菌抗体进行快速检测。【方法】 利用沙门氏菌显色培养基对流产的马驹脏器进行细菌分离,对紫色菌落进行革兰氏染色鉴定;提取细菌全基因组,利用16S rRNA 进行 PCR扩增和测序鉴定,并对菌株进行生化鉴定和血清型鉴定,对病因进行综合诊断。利用分离获得的阳性菌株进行灭活后作为凝集抗原,以马流产沙门氏菌标准阳性血清作为阳性对照,通过反应条件优化,建立微量凝集试验方法,并对该方法的特异性、敏感性、重复性进行了验证。与国家行业标准中的试管凝集试验方法进行对比,同时利用微量凝集对华北和西北各3个地方的共151份血清样品进行检测,并随机选取30份样品,利用微量凝集和试管凝集进行检测,并对两种方法检测的敏感性进行比较分析。【结果】 各流产马驹组织在沙门氏菌显色培养基上划线结果,均可以获得大量紫色目标菌落;革兰氏染色结果表明,分离的菌株为革兰氏阴性短杆菌,16S rRNA测序证实分离株为沙门氏菌属,生化鉴定结果表明,分离的17株菌均符合马流产沙门氏菌的生化特性,但相比上世纪强毒株马流产沙门氏菌C77-1,均不能发酵鼠李糖;血清型鉴定证实分离株均为马流产沙门氏菌,将分离的17株马流产沙门氏菌分别命名为E.S-1—17。因此证实马匹流产均为马流产沙门氏菌感染所致。利用甲醛对E.S-1菌株进行了灭活处理,成功制备了马流产沙门氏菌凝集抗原,并建立了一种快速敏感的微量凝集检测方法,其中优化了最佳反应凝集抗原浓度为4亿/mL。其敏感性比试管凝集高1个滴度,其特异性与其他常见马传染病病原阳性血清无交叉反应,并且具有良好的重复性。利用微量凝集方法,对华北3个疫情区进行检测,阳性率分别为28.6%、42.9%和27.3%,西北3个无疫情区阳性率均为0%。此外,利用两种方法对相同的30份临床血清进行检测,微量凝集和试管凝集方法阳性份数分别为10份和3份,阳性率分别为33.3%和10%。与试管凝集相比,微量凝集诊断敏感性为100%,诊断特异性为74.1%,总体符合率为76.7%。【结论】 分离鉴定获得了17株马流产沙门氏菌,建立了马流产沙门氏菌微量凝集抗体检测方法,该方法敏感性高、特异性强、重复性好,简便、快速、高通量,可以广泛应用于马属动物中马流产沙门氏菌抗体的检测,是该病诊断及疫苗评估的重要依据之一。     

马怀骡早期胚泡特点的初步探讨

我们对马怀马、怀骡和母马早期(1—2个月)胚泡,通过直肠检查法进行了近十年的研究。81、82两年,又对97匹怀骡母马早期胚泡进行了直肠触诊分析研究,发现了马怀骡胚泡“软”这一特点及和要流产马胚泡的区别。从而对马怀马、怀骡和要流产马能即早做出诊断。对怀马母马可适时制备孕马血清促性腺激素,对怀骡母马不会再盲目地采取保胎措施,对要流产母马做到及早治疗。     

秋季孕畜保胎注意啥

秋季是牛、马、驴等大牲畜使役最繁忙的季节,同时也是孕畜最容易流产的季节.因为一般情况下,春季配种的母畜,经过一夏的孕育,到了秋季胎仔接近成熟,一旦饲养管理不当,很容易造成流产.为此,生产上必须采取保胎措施.     

流产母马血液流变学研究

[目的]研究流产对母马血液流变学的影响。[方法]分别检测正常非孕母马、正常怀孕母马、流产母马、正常分娩母马的血液流变学指标,并作比较。[结果]正常非孕母马与正常怀孕母马的各项血液流变学指标无明显差异（P〉0.05）。正常分娩母马的全血比黏度、全血还原比黏度、血浆比黏度、血细胞压积、红细胞电泳时间均显著高于正常非孕母马（P〈0.001）。而流产母马的各项血液流变学指标均显著高于正常分娩母马（P〈0.001）。[结论]母马流产后血液流变学存在异常。     

马流产弱毒菌苗的研究——1.钴~60照射致弱菌株培育试验初报

马副伤寒性流产是危害养马业的主要传染病之一。它所造成的损失主要是孕马大批流产,生出死胎或无生活力的弱胎,引起死亡率相当高的幼驹副伤寒,甚至造成种马的不育症并偶有死亡。本病存在普遍。长期以来,在我国主要养马地区几乎都有不同程度的发生,有些年份,特别是在干旱缺草、马匹营养不良的情况下,往往形成严重的地方性流行,造成巨大的损失。     

母畜化胎的原因分析及预防措施

在生产实践中经常发生胚胎死亡的现象,而大多是在妊娠早期特别是胚胎附植前后,尤以马、猪多见。导致母畜化胎、死胎和隐形流产的原因很多,情况十分复杂。而且其隐蔽性强、不易发现,很难控制,是养殖业很难解决的棘手问题。     

母畜化胎的防治方法

在生产实践中经常发生母畜胚胎死亡的现象,而大多是在妊娠早期,特别是在胚胎附植前后,尤以马、猪多见。导致母畜化胎、死胎和隐形流产的原因很多,情况十分复杂,而且其隐蔽性强,不易发现,很难控制,是养殖业很难解决的棘手问题。     

马流产沙门氏杆菌C系弱毒菌苗的研究

马流产沙门氏杆菌病是危害马匹的严重传染病之一。根据文献材料,母马由本病引起的流产率一般占马流产总数的30—60%,清净区一旦传入此病,则流产率可高达90%以上。本病常在地区的幼驹有70%左右发生副伤寒病。 在防制本病方面,单纯采取隔离、消毒措施虽能收到一定效果,但达不到清除本病的目的。为获得一个安全有效的弱毒活菌苗,1970年我们开始培育马流产沙门氏杆菌弱毒菌种的研究工作。经过两年多的试验研究,培育出一株C系弱毒菌种。现将该菌种的培育,特性、对本动物的安全性、免疫原性、免疫期以及实际应用等问题报告如下。     

夏季怀孕母畜的固胎防流

夏季（特别是三夏生产中），农活多且繁重．怀孕母畜（牛、马、驴）在使役过程中，常因内挫跌损、受到惊吓或急转弯等原因，引起腹疼和胎动不安．如治疗不及时或不合理，常引起流产，造成经济损失。     

怀孕母畜忌用的药物

母畜（牛、马、驴、猪、羊等）一般都是在春季至初夏发情配种，初冬至新年春节期间（特别是牛、马、驴）怀孕已到了后期。在怀孕期间如果母畜患了疾病．用药物给其治疗的时候，要特别小心和慎重。因为在常用的西药中，有的可伤胎甚至引起流产，造成经济损失。那么，哪些药物容易引起伤胎流产呢？     

马流行性感冒的综合诊治

马流感是马流行性感冒的简称,是由正粘病毒科流感病毒属马A型流感病毒引起的马属动物的一种急性暴发式流行传染病。马流感为高度接触性呼吸道传染病,但污染的饲料、饮水用具也有传播作用。临床上以发热、咳嗽、恶寒、鼻塞、流涕、脉浮、结膜潮红、母马流产等为主要症状,可导致马匹身体虚弱,甚至死亡。     

猪乙型脑炎的新流行与防控

正猪乙型脑炎又称猪日本乙型脑炎,主要是从日本流行脑炎分离到的病毒,为区分与当时春季马流行甲型脑炎,称此病为乙型脑炎。乙型脑炎是一种虫媒病毒的人畜共患疾病。近年,每年7~9月接诊猪场流产病例中,此病发病较多,如肇东存栏500头母猪场在8月份连续流产48窝,宝泉岭600头母猪场9月份流产35窝,巴彦一个体猪场母猪存栏150头9月份流产10窝,通过实验室检测发现都有乙型脑炎病毒感染的病例。     

秋冬预防孕畜流产

每年秋冬有许多怀孕役畜因饲养管理不当而导致流产，给饲养户造成一定的经济损失。减少和防止怀孕役畜流产要注意： 一、应根据怀孕母畜妊娠生理特点改善饲养管理。如马、驴的流产有明显的时间性。妊娠头3个月内，胚胎在子宫内呈游离状态，未完全附植于子宫壁上，加上胚胎本身分化并形成各组织器官，营养欠缺或受到不利因……     

秋季孕畜防流产

秋季是大牲畜使役最繁的季节,同时也是牛、马、驴等大牲畜最容易流产的季节.因为一般情况下,大牲畜都是在春季配种,到秋季已怀孕6～7个月.此时母体中的胎儿开始迅速发育,如果这时对怀孕母畜的饲养管理不当,很容易导致胎儿的生长发育受阻,甚至造成人为的流产和疾病.因此,秋季要特别注意怀孕母畜的管理,具体应注意以下几点:     

马群慢性“乐果”中毒的报导

马的急性有机磷中毒,目前已有不少报导。而慢性有机磷中毒,由于症状不明显,则往往被忽视。1974年黄泛区农场种马场马群由于喂饲了刚施过“乐果”的青割苜蓿引起慢性积累性中毒,造成孕马大量流产,母马受胎率降低等一系列病理现象。现将诊断及防治措施报导于下。     

奶牛流产性疾病研究进展

随着中国奶牛养殖业的规模扩大,奶牛流产病例呈上升趋势.目前,奶牛流产已成为奶牛生产中危害较大的问题之一.流产可影响奶牛的泌乳性能、繁殖性能、牛群健康和使用年限,造成巨大的经济损失.某些引起奶牛流产的病原微生物是重要的人畜共患病原,严重威胁公共卫生安全,对公众和职业人群有巨大危害.因此,有效控制奶牛流产性疾病对奶牛生产和公共卫生安全都极其重要.     

秋天奶牛高产饲养新法

秋季是大牲畜使役最繁忙的季节，同时也是牛、马、驴等大牲畜最容易流产的季节。因为一般情况下，大牲畜都是在春季配种，到秋季已怀孕6—7个月。此时母体中的胎儿开始迅速发育，如果这时对怀孕母畜的饲养管理和使役不当，很容易导致胎儿的生长发育受阻，甚至造成人为的流产和疾病。因此，秋季要特别注意怀孕母畜的管理，具体的应注意以下几点：     

母猪发生流产的因素及其治疗措施

正母猪流产是养猪户经常遇到的问题,给养猪业健康发展带来了一定的影响,给养殖业带来严重的经济损失,为了预防母猪流产,提高养猪业的经济效益,需要养殖者和技术管理人员在生产中做好管理、科学饲养,从各个方面严格预防,现归纳如下,供参考。1规模化养殖母猪易流产的原因母猪的妊娠中断就是俗称的流产,母猪发生流产会使早产的猪仔发育不良甚至夭折,还会对母猪的身体机能造成很大的损伤,本文通过研究母猪的流产案例,分析出了一些造成母猪     

初秋怀孕母畜固胎防流产

秋季特别是初秋季节．农活多且繁重，怀孕母畜（牛、马、驴）在使役过程中，常因内挫跌损、受到惊吓或急转弯等原因引起腹疼和胎动不安．如治疗不及时或不合理。常引起流产。