禽流感病毒一步法RT-PCR检测方法的建立

为了能快速准确地对禽流感进行病原学诊断，根据流感病毒的M基因序列，在保守区内用Olig04．0软件设计了1对引物，建立了一步法RT—PCR诊断方法，其目的片段大小为229bp。通过对不同稀释倍数的H5亚型禽流感病毒尿囊液和棉拭子浸出液进行检测，结果显示，病毒尿囊液的最低检出稀释度为1：10^4；阳性棉拭子的最低检出稀释度为1：2^3。用病毒分离法和一步法RT—PCR同时检测人工感染鸡不同脏器、口咽及泄殖腔棉拭子样品，二者符合率为100％，但前者的检测灵敏度比后者高10～100倍。用该方法检测H1～H15亚型禽流感病毒和鸡新城疫病毒等其他14种禽病病原，所有禽流感病毒均有229bp的目的条带出现，而其他14种禽病病原均无目的条带出现，表明该方法的特异性好。     

禽流感通用型RT—PCR快速检测试剂盒

为建立一种简单、快速、灵敏、准确的禽流感检测方法．根据禽流感病毒高度保守的M1基因序列．设计一套通用型引物．建立了快速检测禽流感的PCR一步法．并对反应条件进行优化．组装成快速检测试剂盒．并对临床收集的15份疑似禽流感病料进行了检测。结果显示．疑似禽流感病料检出率在100％以上。检测灵敏度达10^15 ELD50,稳定性良好,冷冻至少能保存12个月。通过对临床样品的检测,证实该试剂盒具有操作简便、快速、灵敏度高、特异性强、重复性好、稳定性高等优点．值得推广应用。     

禽流感病毒分子生物学研究进展

禽流感的爆发,给全世界养禽业造成了巨大的经济损失,禽流感病毒(AIV)更是危害人类和养禽业的重要病原。目前,禽流感病毒的研究主要集中在分子生物学方面,本文就禽流感病毒的形态结构、基因组结构、血凝素和神经氨酸酶的结构和功能及遗传变异等分子生物学方面进行了综述,对今后防治高致病性禽流感提供一定的参考。     

禽流感分子生物学诊断技术研究进展

禽流感不但造成养禽业的巨大经济损失,而且也严重威胁着人类公共卫生安全。检测禽流感病毒是诊断的关键。分子生物学检测技术较常规检测方法快速、准确、灵敏。通过对核酸杂交技术、常规RT-PCR技术、实时RT-PCR技术、PCR-ELISA技术、核酸依赖的扩增技术(NASBA)、环介导的等温扩增技术(LAMP)以及基因芯片等诊断技术的基本原理、检测优点以及应用现状进行综述,为禽流感的诊断提供参考。     

禽流感与新城疫二联RT—PCR诊断方法的建立及其应用

根据禽流感病毒(AIV)、新城疫病毒(NDV)基因组序列高度保守区，设计合成了2对引物，以AIV、NDV培养物提取RNA并反转录，进行RT-PCR特异性片段扩增，扩增的片段大小分别为470和320bp。结果，扩增产物与设计的2对引物之间的序列大小一致。通过特异性与敏感性试验，AIV、NDV培养物均可扩增至10^-4，表明本方法对2种病毒具有快速、特异和高度敏感的特点。     

伪狂犬病分子生物学诊断方法研究进展

伪狂犬病是多种家畜和野生动物的一种重要传染病,猪为病毒的贮存宿主。该病一毒一旦感染动物则终生带毒呈潜伏感染状态,遇到外界应激则重新激活而向外界排毒,引起易感动物发病。为了加强进口检疫和优良种畜的推广,防止该病的传入,各国科技工作者根据常规的抗原抗体检测方法不能检测该病毒的潜伏感染情况,研制出各种检测伪狂犬病病毒核酸的分子生物学方法。本文就核酸探针杂交技术,常规ＰＣＲ、鉴别ＰＣＲ、鉴别与定量ＰＣＲ等     

禽流感检测方法研究进展

随着血清学实验技术和生物工程技术的飞速发展,禽流感诊断技术的研究也不断取得新进展,本文对有关该病的诊断方法进行了阐述,并提出了认为比较可行的改进方法。     

禽流感诊断技术研究进展

禽流感是严重危害畜牧业和人类健康的一种传染性疾病,多年来在世界上许多国家和地区都发生过此病,危害巨大.世界各国对其进行了大量研究.文章就目前国内外对禽流感病毒血清学和分子生物学诊断技术的研究进展做一综述.     

禽流感病毒的分子生物学研究进展

禽流感(Avian Influenza,AI)是由A型流感病毒所引起的禽类的一种烈性传染病。本文从病毒的结构蛋白、病毒毒力、病毒致病性、毒力变异等方面系统论述了禽流感病毒分子生物学方面的研究进展,为进一步研究禽流感病毒提供理论基础。     

禽流感诊断方法概述

禽流行性感冒 (AI)简称禽流感，是由正粘病毒科、流感病毒属 A型流感病毒 (AIV)引起的一种禽类疾病综合征。禽类感染 AIV后，表现从亚临 床到轻度上呼吸道症状、精神萎顿、食欲减退、种鸡产蛋量和种蛋孵化率严重下降，到急性全身致死性疾病综合症。 AIV广泛存在于多种家禽和野生禽类中，而且其临床症状和病理剖检易与 ND、 IB、 EDS－ 76相混淆。虽然禽流感分离株大部分都不是高致病力毒株，但由于禽流感病毒抗原性及致病力的易变性，对养禽业已构成潜在的威胁。 1 AIV的遗传变异性 　　AIV的遗传变异包括抗原性变异和致病性变异…     

禽流感病毒的分子生物学研究进展

禽病毒性流行性感冒(Avain in-fluenza,AI,禽流感)是由正粘病毒科A型流感病毒引起禽类的一种从呼吸系统到严重全身败血病症等多种症状的传染病。该病最早于1878年,在意大利的鸡群中首次发生,成为鸡流感,以后为区别于鸡的新城役,又称AI为真性鸡瘟或欧洲鸡瘟。     

禽流感病毒分子生物学的研究进展

禽流行性感冒(av ian in fluenza,A I,简称禽流感)是由A型禽流感病毒(av ian in fluenza v irus,A IV)引起的禽类烈性传染病。作为被世界动物卫生组织(O IE)定为A类的传染病,A I不仅给世界养禽业造成了巨大的经济损失,而且对人类健康和生命安全构成了严重威胁。因此,A I已经成为人们关注的焦点,国内外学者也对其进行了大量研究。作者从病原基因组及其编码的蛋白质、致病力、变异性以及对人类感染A IV的分子机制等角度就A IV的分子生物学研究作一综述,为防制A I提供理论基础,并在此基础上探讨了人类禽流感的防治措施,加深人们对A I的认识。     

禽流感病毒分子生物学研究进展

禽流感 ( Avian Influenza,AI)是严重危害畜牧业和人类健康的一种传染性疾病 ,该病以引起禽类的呼吸系统以及全身性败血症为特征。多年来在世界上许多国家和地区都发生过此病 ,危害严重 ,经济损失巨大。世界各国都非常重视 ,对其进行了大量研究工作。现在从基因组、毒力及其变异、病毒蛋白、基因疫苗等角度对禽流感病毒的分子生物学研究进行综述。     

禽流感的诊断

禽流感是由Ａ型流感病毒引起的呼吸道或全身性传染病，极为猛烈，一旦传入，便造成巨大损失。现就该病流行病学、临床症状、剖解变化，实验诊断报告如下：１ 流行病学 本病的发生于天气突变的晚秋、早春及寒冷的冬季。阴雨、潮湿、贼风、寒冷、拥挤、营养不良、寄生虫可促进本病发生。禽流感主要是水平传播；一般为接触传播。候鸟、散禽、水禽等携带病毒迁徙可能是禽流感世界性流行的主要原因。各种家禽，不分日龄、大小均极易感，通过呼吸道、消化道、破损皮肤和眼结膜均易传染。来势快，防不胜防。２ 临床症状 从病鸡症状来看，有神经型。…     

禽细小病毒分子生物学研究进展

鹅细小病毒 (GPV)和鸭细小病毒 (MD-PV)是两种感染禽类的自主性细小病毒 ,由它们引起的鹅细小病毒病和雏番鸭细小病毒病是目前严重危害养鹅业和养鸭业的主要疫病。 GPV和 MDPV在形态结构、理化特性、免疫学特性甚至基因组结构等方面十分接近 ,但是二者在致病性上却有较大差异。对于这种差异 ,国内外学者从分子生物学角度进行了大量研究。文章主要从这两类病毒的基因组核苷酸序列、非结构蛋白基因、核衣壳蛋白基因、非结构蛋白和核衣壳蛋白的分子生物学上的同源性和差异性进行了综述 ,同时 ,对于禽细小病毒有待研究的方面也进行了探讨     

禽流感病毒分子生物学检测技术研究进展

禽流感(avian influenza,AI)是A型流感病毒引起的一种禽类传染病,同时也是一种人和动物之间的高度传染性疾病。近年来,禽流感病毒的分子生物学检测技术发展迅速,文章就此进行了综述。     

沙门氏菌分子生物学诊断技术的研究进展

本文主要介绍了沙门氏菌分子生物学方面的研究进展,将当前国内外的一些研究成果进行了汇总并分门别类。对该菌的分子生物学诊断技术的灵敏度和特异性进行了介绍,对此病原菌的实验室研究提供了多种方法,最后展望了其分子生物学方法应用于实践的前景和存在的问题为进一步开展基础研究提供了思路。     

鸡传染性支气管炎病毒分子生物学研究进展

鸡传染性支气管炎病毒(infectious bronchitis virus,IBV)主要侵害鸡的呼吸系统和泌尿生殖系统,可以引起鸡的呼吸道症状、肾脏损害、产蛋量和蛋的品质下降。该病毒血清型较多,容易产生变异,给疫病防控带来很大困难。主要对近年来在IBV的基因组结构、IBV的复制过程、IBV的结构蛋白及生物学功能、IBV的变异机制、IBV的进化以及IBV的鉴定和检测等方面的研究进展进行综述,以期为更加深入地认识和研究该病毒提供参考。     

RT-PCR快速诊断禽流感

根据禽流感病毒ＮＰ基因的序列分析结果,设计了一对ＮＰ基因特异的引物。采用该对引物,不经病毒分离,直接从禽流感病毒感染鸡的气管、泄殖腔棉拭子和组织样品中提取核酸, ＲＴ～ＰＣＲ可以扩增出 ３２６ｂｐ的 ＮＰ基因片段。采用该技术对１４个亚型禽流感病毒标准参考株,４个亚型１２株国内分离野毒株,ＲＴ－ＰＣＲ检测的结果都呈阳性;对新城疫病毒、传染性法氏囊病毒、传染性支气管炎病毒、传染性喉气管炎病毒以及减蛋综合症病毒,ＲＴ－ＰＣＲ扩增结果都呈阴性。禽流感病毒 Ａ／Ｇｏｏｓｅ／Ｇｕａｎｇｄｏｎｇ（Ｈ５Ｎ１）和 Ａ／Ａｆｒｉｃａｎ　Ｓｔａｒｌｉｎｇ／Ｅｎｇｌａｎｄ（Ｈ７Ｎ１）实验感染鸡样品 ＲＴ－ＰＣＲ检测与鸡胚病毒分离阳性率分别为３４／４２、３２／４２; ２４／５５、２４／５５, 二者符合率大于９５％。 ＲＴ－ＰＣＲ最少可检测到１０ｐｇ的病毒核酸。对山东某地发病鸡场样品进行ＲＴ－ＰＣＲ检测,只用６个小时就可得出准确的诊断结果,证明ＲＴ－ＰＣＲ检测方法敏感特异,可用于禽流感的快速诊断。