鱼腥草注射液中非法添加甲氧氯普胺的HPLC-PDA检测方法的建立

为检测鱼腥草注射液中非法添加的甲氧氯普胺,以十八烷基键合硅胶为填充剂,0.02 mol/L磷酸溶液(用三乙胺调剂p H值至4.0)-乙腈(81:19)为流动相,流速为1.0 m L/min,波长扫描范围为200~400 nm,柱温25℃,建立了HPLC-PAD检测方法,并采用峰纯度检查和光谱相似度检查辅助对照品比对方法,对非法添加药物进行确证。结果显示,甲氧氯普胺回收率为98.8%,RSD为0.3%;线性方程为y=43542070x+36695,R2=1;检测限为6μg/m L;定量限为9μg/m L。本方法快速、灵敏、可靠,可对鱼腥草注射液中非法添加的甲氧氯普胺违禁药物进行定性和定量检测。     

注射液中非法添加地塞米松磷酸钠UPLC-PDA检查方法的建立

本试验建立了鱼腥草、柴胡、维生素C、盐酸林可霉素、黄芪多糖等注射液中非法添加地塞米松磷酸钠的超高效液相色谱检查方法。采用Waters ACQUITY UPLC^® BEH C18色谱柱（2.1 mm×50 mm,1.7 μm）,以0.75%三乙胺溶液（磷酸调节pH 3.0）-甲醇-乙腈（50：45：5）为流动相,流速0.3 mL/min,二极管阵列检测器,波长采集范围为190~400 nm,记录色谱图波长242 nm,柱温25℃,进样量10 μL。地塞米松磷酸钠质量浓度在10.0~200.0 mg/L内峰面积呈良好线性关系（R²=0.9999）,在鱼腥草、柴胡、维生素C、盐酸林可霉素、黄芪多糖等注射液中地塞米松磷酸钠的平均回收率和相对标准偏差（RSD）分别为97.54%和1.14%、101.59%和0.19%、100.92%和0.92%、99.82%和0.73%、100.08%和0.62%。本方法简单、快速、灵敏、可靠,适用于鱼腥草等5种注射液中非法添加地塞米松磷钠的检查。     

HPLC-PDA法测定氟苯尼考注射液、柴胡注射液中非法添加培氟沙星、洛美沙星

建立了氟苯尼考注射液、柴胡注射液中非法添加培氟沙星、洛美沙星的HPLC-PDA检查方法。采用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以磷酸溶液-乙腈-甲醇(85.5∶7.0∶7.5)为流动相;二极管阵列检测器,提取波长为277 nm。通过液相色谱保留时间、峰纯度检查和光谱相似度检查对非法添加物进行确证。结果表明,该色谱条件下培氟沙星、洛美沙星与其他物质分离良好。培氟沙星在氟苯尼考注射液、柴胡注射液中的平均回收率分别为101.4%(RSD=0.2%)、100.0%(RSD=0.4%),洛美沙星在氟苯尼考注射液、柴胡注射液中的平均回收率分别为101.2%(RSD=0.1%)、99.8%(RSD=0.5%)。本方法简便、准确、可靠,可用于检查氟苯尼考注射液、柴胡注射液中非法添加的培氟沙星、洛美沙星。     

HPLC-PDA法测定恩诺沙星注射液中非法添加乙酰甲喹和水杨酸

建立了高效液相色谱法测定恩诺沙星注射液中非法添加乙酰甲喹、水杨酸含量的方法。试验采用十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱,以0.025 moL/L磷酸溶液-乙腈(85∶15,V/V)为流动相,流速为1.0 m L/min,二极管阵列检测器进行全扫描和232 nm波长测定。结果表明乙酰甲喹在0.5～20μg/m L范围内线性良好,R~2=1.000,平均回收率为99.62%;水杨酸在1.0～50μg/m L范围内线性良好,R~2=1.000,平均回收率为99.51%;RSD在0.07%～3.44%之间。本方法准确、可靠、重现性好,可用于恩诺沙星注射液中非法添加乙酰甲喹、水杨酸的定性和定量检测。     

黄芪多糖注射液中非法添加林可霉素检查方法的研究

为建立黄芪多糖注射液中非法添加林可霉素的检查方法,采用薄层色谱法初筛出黄芪多糖注射液中非法添加林可霉素的样品,而后用HPLC-PDAD法检测,液相色谱条件:采用Atlantis~#174;T 3(十八烷基硅烷键合硅胶,4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为0.02 mol/L的磷酸氢二铵-乙腈(70∶30),流速为1.0 m L/min,检测波长为194 nm,最后用LC-MS法进行确证。结合薄层色谱、高效液相色谱光谱图以及质谱的分子离子峰等方面信息,证明该样品中确实非法添加了林可霉素,其中HPLC-PDAD法平均回收率为97.8%,RSD为1.4%,检出限为6μg/m L。该检测方法准确可靠,可用于黄芪多糖注射液中非法添加林可霉素的检测。     

硫酸安普霉素可溶性粉中非法添加乙酰甲喹的HPLC-PDA检测方法的建立

为检测硫酸安普霉素可溶性粉中非法添加的乙酰甲喹,以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,磷酸盐缓冲液(取磷酸二氢钠3.0 g,加水1000 m L使溶解,加三乙胺0.5 m L,用饱和氢氧化钠溶液调节p H值至7.0)-甲醇为流动相,二极管阵列检测器(PDA),建立了HPLC-PDA检测方法,并采用峰纯度检查和光谱相似度检查辅助对照品比对方法,对非法添加药物进行确证。在此液相色谱条件下,乙酰甲喹与其他物质峰分离良好。按外标法以峰面积计算,乙酰甲喹的平均回收率为98.1%,RSD为0.3%。该检测方法简便、准确、可靠,可用于测定硫酸安普霉素可溶性粉中非法添加的乙酰甲喹。     

HPLC法检查黄芪多糖注射液中非法添加喹诺酮类药物

本试验建立了黄芪多糖注射液中非法添加喹诺酮类药的检查方法。对阳性样品进行HPLC法检查,结果显示,氧氟沙星、诺氟沙星、盐酸环丙沙星、恩诺沙星平均加标回收率在96.68%～97.72%、93.32%～97.66%、98.80%～100.01%、93.02%～96.67%之间;RSD在0.1%～0.6%、0.1%～0.8%、0.3%～1.4%,0.5%～1.5%。检测限为0.4μg/mL。该方法快速、准确,可用于黄芪多糖注射液中非法添加喹诺酮类药物的检查。     

HPLC法检查黄芪多糖注射液中非法添加喹诺酮类药应用

建立了黄芪多糖注射液中非法添加喹诺酮类药检查方法。经过对阳性样品进行HPLC法检查,结果显示,氧氟沙星、诺氟沙星、盐酸环丙沙星、恩诺沙星平均加标回收率在96.68%～97.72%、93.32%～97.66%、98.80%～100.01%、93.02%～96.67%之间;RSD在0.1%～0.6%、0.1%～0.8%、0.3%～1.4%,0.5%～1.5%。检测限为0.4μg/ml。该方法快速、准确,可用于黄芪多糖注射液中非法添加喹诺酮类药检查。     

4种兽用注射液中非法添加倍他米松UPLC-PDA检查方法的建立

为了建立柴胡注射液、维生素C注射液、盐酸林可霉素注射液、黄芪多糖注射液中非法添加倍他米松的超高效液相色谱检查方法,采用Waters ACQUITY UPLCBEH C18色谱柱(2.1 mm×50 mm,1.7μm),以0.75%三乙胺溶液(用磷酸调节p H为3.0)-甲醇-乙腈(50∶45∶5)为流动相;流速为0.3 m L·min-1;二极管阵列检测器,波长采集范围为190~400 nm,记录色谱图波长242 nm。柱温25℃,进样量10μL。倍他米松质量浓度在20.0~180.0 mg·L-1内峰面积呈良好线性关系(R2=0.9997,n=7),在柴胡注射液、盐酸林可霉素注射液、维生素C注射液、黄芪多糖注射液中倍他米松的平均回收率分别为103.5%(RSD=0.2%)、101.2%(RSD=0.8%)、100.4%(RSD=1.7%)、99.2%(RSD=1.7%)。本方法简便、快速、准确,可用于柴胡注射液等四种兽用注射液中非法添加倍他米松的检测。     

12种兽药中非法添加甲氧苄啶的HPLC-PDA检查方法的建立

采用十八烷基键合硅胶为填充剂,以0.02 mol/L磷酸二氢钾溶液-甲醇（73∶27,V/V）为流动相,建立了测定12种兽药中非法添加甲氧苄啶的HPLC-PDA法,并采用峰纯度检查和光谱相似度检查辅助对照品比对方法,对非法添加药物进行确证。在此液相条件下,对7种兽药粉散剂和5种注射液药物,进行添加回收试验和检测限的测定。结果显示,甲氧苄啶在粉剂中三个浓度（1%、5%、10%）添加回收率为74.6%～115.0%,RSD为0.1%～7.6%,在注射液中三个浓度（0.5%、1%、2%）的添加回收率为87.0%～119.7%,RSD为0.9%～4.1%。甲氧苄啶在各制剂中的检测限为0.5 mg/g(0.25 mg/mL)。改变试验条件后对峰纯度指示、光谱相似度进行考察,仍能满足要求。     

Establishment of Detection Methods for Dexamethasone Sodium Phosphate in Injections by UPLC-PDA

A detection method of dexamethasone sodium phosphate in houttuynia injection,bupleurum injection,vitamin C injection,lincomycin hydrochloride injection,and asragulus polysacharin injection was established by UPLC-PDA.The Waters ACQUITY UPLC^® BEH C18 column(2.1 mm×50 mm,1.7 μm) was used,the mobile phase consisted of 0.75% triethylamine phosphatic liquor/solution (pH 3.0)-methyl alcohol-acetonitrile(50:45:5),the flow rate was 0.3 mL/min,the column temperature had remained 25℃,photodiode array detector wavelength range was 190 to 400 nm,the recorded wavelength was 242 nm,the injection volume was 10 μL.The linear range of dexamethasone sodium phosphatel was 10.0 to 200.0 mg/L (R²=0.9999),the mean recovery and RSD for dexamethasone sodium phosphate in houttuynia injection,bupleurum injection,vitamin C injection,lincomycin hydrochloride injection and asragulus polysacharin injection were 97.54% and 1.14%,101.59% and 0.19%,100.92% and 0.92%,99.82% and 0.73%,100.08% and 0.62%,respectively.This method was accurate,easy and fast,it was suitable for detection of dexamethasone sodium phosphatein houttuynia injection and other four kinds of injections.     

高效液相色谱法测定生乳中双乙酸钠

试验旨在建立高效液相色谱（HPLC）测定生乳中双乙酸钠的方法。生乳样品经磷酸变性沉淀蛋白,并将样品中双乙酸钠酸化转化为乙酸,定容,离心取上清液,过微孔滤膜后,以磷酸二氢铵为流动相进行HPLC检测,外标法定量。在0.05~0.50 mg/mL浓度范围内,标准曲线R²=0.997,样品加标回收率在90%~110%之间,相对标准偏差1.0%~4.1%。此方法检出限为0.05 g/kg。     

HPLC-PDA法测定兽药中非法添加四种解热镇痛抗炎类药物

建立了7种兽药中非法添加对乙酰氨基酚、安乃近、地塞米松和地塞米松磷酸钠药物的HPLC-PDA法。采用十八烷基键合硅胶为填充剂,磷酸二氢钠缓冲液（磷酸二氢钠3．0 g加水至1000 mL,加三乙胺1 mL,用氢氧化钠调pH值至7．0±0．2）-甲醇（80∶20）为流动相,梯度洗脱,二极管阵列检测器进行全扫描和240 nm波长测定,并采用峰纯度检查和光谱相似度检查辅助对照品比对方法,对四种目标分析物进行确证。结果显示,4种解热镇痛抗炎药物与其他物质峰分离良好,在测定范围内线性关系良好,平均回收率为73．5％～119．2％,RSD为0．1％～5．8％。本方法准确、可靠、重现性好,可用于兽药制剂中非法添加四种解热镇痛抗炎药物的定性和定量检测。     

止痢散、杨树花口服液中非法添加盐酸小檗碱检测方法的建立

建立止痢散、杨树花口服液中非法添加盐酸小檗碱的HPLC-PDA检测方法,采用十八烷基键合硅胶为填充剂,乙腈-0.05 mol/L磷酸二氢钾溶液(用磷酸调pH值至3.0)(25∶75)为流动相,等度洗脱,流速为1.0 mL/min,二极管阵列检测器,提取波长为345 nm。采用峰纯度检查和光谱相似度检查辅助对照品比对方法,对非法添加药物进行确证。按外标法以峰面积计算,盐酸小檗碱在止痢散和杨树花口服液中的平均回收率分别为99.8%和99.7%,RSD分别为0.3%和0.4%;线性方程为Y=41435X-15904,R²=0.9999;检测限分别为0.2 g/kg, 0.2 g/L。该检测方法专属型强,灵敏度高,操作简便,准确可靠,可用于测定止痢散、杨树花口服液中非法添加的盐酸小檗碱。     

高效液相色谱法检测乳制品中硫氰酸根含量

建立乳制品中硫氰酸根的高效液相色谱分析方法.样品经乙腈沉淀蛋白,以磷酸二氢钠磷酸缓冲液-乙腈溶液为流动相,强阴离子交换(SAX)色谱柱分离,紫外检测器218 nm检测.结果表明:在硫氰酸根0.2～100 mg/kg范围内呈良好的线性关系,回收率为98.5％～113.0％.本方法用于乳制品中硫氰酸根的测定,操作简单、定量准确、稳定性好.     

咪唑苯脲注射液特殊安全性试验研究

通过豚鼠、新西兰大白兔的皮肤致敏、皮肤刺激、肌肉刺激、红细胞溶血试验,考察咪唑苯脲注射液的安全性。试验用新西兰大白兔6只进行皮肤刺激,染毒剂量为咪唑苯脲注射液0.5 mL/只(规格:1211.5 mg/mL);用白化豚鼠进行皮肤致敏试验,按0.5 mL/kg剂量,以豚鼠背部左侧皮肤进行染毒;用新西兰大白兔8只,进行肌肉刺激试验,在右侧股四头肌注入0.1、0.2、0.5 mL/kg bw,左侧股四头肌注入同样体积的灭菌0.9%氯化钠溶液作对照;用新西兰大白兔2只,进行红细胞溶血试验,采用体外试管法进行,采心脏血50 mL,制成红细胞悬液,加入受试药物原液温育3 h。结果显示,皮肤刺激试验:受试物咪唑苯脲注射液各个时间点的刺激反应积分均值为0;皮肤致敏试验:受试药物组和阴性对照组豚鼠的皮肤过敏反应率为0;肌肉刺激试验:给予受试物各个时间点的刺激反应积分均值为0;红细胞溶血试验:受试药物及阴性对照在3 h内红细胞全部下沉,上清液体均为澄明,溶液中未见棕红色或红棕色絮状沉淀。试验表明,咪唑苯脲注射剂无皮肤刺激性、不出现过敏反应、无肌肉刺激性、无溶血和凝聚作用,临床上可以肌肉注射使用。     

基于HPLC法测定五氯柳胺阿苯达唑复方混悬液中的有关物质

试验旨在通过高效液相色谱（high performance liquid chromatography,HPLC）法测定五氯柳胺阿苯达唑复方混悬液的有关物质。采用高效液相色谱法,以自身对照法计算五氯柳胺阿苯达唑复方混悬液有关物质的量。选用Thermo Hypersil BDS C18色谱柱（4.6 mm×150 mm,5 μm）;流动相以0.1%磷酸-10 mmol/L磷酸二氢铵水溶液为A相,以甲醇为B相,31：69（V/V）;流速为1 mL/min;进样量为5 μL;柱温30℃;检测波长295 nm。结果显示,在建立的色谱条件下,五氯柳胺阿苯达唑复方混悬液中的主成分峰与杂质峰均能基线分离。3,5,6-三氯水杨酸、2-氨基-4,6-二氯苯酚盐酸盐、五氯柳胺、阿苯达唑在5~100 μg/mL内与峰面积线性关系良好（R² ≥ 0.999）,定量限分别为5 μg/mL及750、500、225 ng/mL,检测限分别为1 μg/mL及500、250、100 ng/mL,杂质3,5,6-三氯水杨酸、2-氨基-4,6-二氯苯酚盐酸盐总平均回收率分别为101.15%、100.35%,总平均回收率RSD均为0.71%（n=9）。经方法学验证,建立的HPLC方法简单、快速、准确,可用于五氯柳胺阿苯达唑复方混悬液中有关物质的测定。