正交试验优选龙胆炮制工艺的研究

[目的]比较龙胆生品、酒炙、姜炙、甘草炙、炒炭等不同炮制品中龙胆苦苷的含量,并利用正交试验进一步优化其炮制工艺,探讨提高龙胆苦苷含量的最佳炮制工艺。[方法]分别对龙胆药材进行不同的炮制处理,采用超声法进行提取,利用高效液相色谱法(HPLC)分别测定其含量,选择龙胆苦苷含量最高的样品进行正交试验,进一步优化炮制工艺。[结果]龙胆不同炮制品中酒炙龙胆的含量高于其他炮制品。当炮制温度为100℃,闷润时间为1 h,龙胆与黄酒用量比例为5∶1时,龙胆苦苷含量最高。[结论]酒炙法是适用于龙胆的炮制方法,且最适宜的炮制条件为炮制温度100℃、闷润时间1 h、龙胆与黄酒用量比例5∶1。     

比较麦冬·去心麦冬及炮制品中多糖和总黄酮的含量

[目的]通过测定麦冬、去心麦冬及其炮制品中多糖和总黄酮的含量,比较麦冬去心前后及炮制前后有效成分的变化。[方法]苯酚-硫酸比色法测定多糖含量;以芦丁为对照,采用NaNO_2-AlCl_3-NaOH法测定总黄酮含量。[结果]多糖含量分别为麦冬生品10.88%、酒炙品6.92%、清炒制品10.48%、米炒制品6.81%,去心麦冬生品11.73%、酒炙品8.46%、清炒制品11.01%、米炒制品8.54%。总黄酮含量分别为麦冬生品0.83%、酒炙品0.76%、清炒制品1.03%、米炒制品0.95%,去心麦冬生品0.78%、酒炙品0.70%、清炒制品0.99%、米炒制品0.84%。[结论]麦冬去心后,多糖含量增加,麦冬生品及去心麦冬经炮制后,多糖的含量均有减少;麦冬总黄酮含量在去心后减少,麦冬生品及去心麦冬炮制后,除酒炙品以外,总黄酮的含量均有增加。     

枇杷叶及其炮制品中总黄酮和多糖的含量分析

采用NaNO2-AlCl3-NaOH法测定枇杷叶不同炮制品中总黄酮含量,以精制枇杷叶多糖测得枇杷叶多糖对葡萄糖的换算因子,苯酚-硫酸法测定枇杷叶不同炮制品中多糖的含量,比较枇杷叶生品与不同炮制品中总黄酮和多糖的含量差异。结果表明,枇杷叶生品总黄酮含量3.40%,蜜炙品、姜汁炒制品、姜汤煮制品、清炒制品总黄酮含量分别为3.77%、4.02%、2.88%、3.98%;枇杷叶生品多糖含量9.16%,蜜炙品、姜汁炒制品、姜汤煮制品、清炒制品多糖含量分别为9.51%、7.95%、10.09%、9.19%。枇杷叶经过炮制后多糖和总黄酮的含量均有变化,其中总黄酮含量以姜汁炒枇杷叶中的为最高,多糖含量以姜汤煮枇杷叶中的为最高。     

不同工艺炮制山茱萸多糖含量比较

[目的]对山茱萸不同炮制品(醋制、酒制、盐制、蜜制、蒸制)中多糖含量进行提取分析。[方法]采用恒温水浴法对山茱萸不同炮制品的多糖进行提取,测定多糖含量,考察炮制温度、炮制时间、炮制辅料用量对山茱萸不同炮制工艺(醋制、酒制、盐制、蜜制、蒸制)的影响。[结果]得出山茱萸在不同炮制条件下多糖溶出的变化规律,酒制和蒸制可使山茱萸中多糖含量明显增加。[结论]研究可为合理制定炮制方法提供依据。     

不同炮制方法对栀子中栀子苷含量的影响

[目的]比较栀子不同炮制品中栀子苷的含量。[方法]采用HPLC法测定栀子中栀子苷的含量。色谱条件为：色谱柱为InertsilODS-2C18（250 mm×4.6 mm,5μm）,流动相为乙腈-水（15∶85,V/V）,流速为1.0 ml/min,检测波长为238 nm,柱温为40℃,进样量为20μl。[结果]栀子不同炮制品中栀子苷的含量不同,其排序为生栀子（3.60%）〉炒炭品（3.36%）〉炒焦品（3.22%）〉炒焦品（轻,3.02%）〉炒黄品（2.77%）。[结论]不同炮制方法对栀子中栀子苷含量有一定的影响。     

不同炮制方法对牡丹皮多糖和总黄酮含量的影响

为了比较不同炮制方法对牡丹皮多糖和总黄酮含量的影响,本研究以牡丹皮生品、酒制品、炒黄制品、炒焦制品和炒炭制品为材料,分别测定了它们多糖和总黄酮的含量。结果发现,牡丹皮生品多糖含量为9.31%,酒制品为10.86%,炒黄制品为10.62%,炒焦制品为9.96%,炒炭制品为8.78%;牡丹皮生品总黄酮含量为1.86%,酒制品为2.07%,炒黄制品为1.98%,炒焦制品为1.93%,炒炭制品为1.77%。牡丹皮经过炮制后多糖和总黄酮的含量均发生变化,以酒制品中的含量为最高。     

正交试验优化栀子的不同炮制工艺

[目的]优选炮制栀子的工艺.[方法]采用L9（34）正交试验设计,以浸出物、栀子苷含量测定结果为基础,经加权平均计算所得的综合评分作为评价指标,考察炒制温度、炒制时间对炒栀子的炮制工艺的影响;以浸出物、栀子苷含量和炮制品色泽评判为基础,经加权平均计算所得的综合评分作为评价指标,考察炒制温度、炒制时间对焦栀子炮制工艺的影响;以浸出物、栀子苷含量测定结果为基础,经加权平均计算所得的综合评分作为评价指标,考察炒制温度、炒制时间和姜汁浓度对姜栀子的炮制工艺的影响.[结果]炒制温度和炒制时间对于炒栀子的质量均有显著性影响;炒制温度对于焦栀子的质量有极显著性影响,炒制时间对其有显著性影响;炒制温度对姜栀子的质量有显著性影响,姜汁浓度对其有极显著性影响.炒栀子的最佳炮制工艺为炒制温度150℃、炒制时间15 min;焦栀子的最佳炮制工艺为炒制温度200℃、炒制时间10 min;姜栀子的最佳炮制工艺为姜汁浓度0.24 g/m1、炒制温度150℃、炒制时间10 min.[结论]该研究为栀子炮制的标准化操作提供了科学的参考依据.     

柴胡炮制前后总皂苷及5种微量元素含量比较研究

[目的]比较柴胡不同炮制品中总皂苷及微量元素的含量,为柴胡及其不同炮制品在临床上的合理使用提供参考。[方法]选取柴胡不同炮制品,采用可见分光光度法在535 nm波长下测定总皂苷的含量,并采用原子吸收分光光度法测定其5种微量元素的含量。[结果]在3种炮制品中,柴胡醋炙品中总皂苷和5种微量元素的含量最低,酒炙品中总皂苷和Fe、Mg、Zn含量最高。[结论]柴胡炮制前后总皂苷和微量元素含量均发生了显著变化。     

广藿香不同软化方法比较及炮制工艺优化

[目的]优选广藿香的最佳炮制工艺,并应用于实际生产中。[方法]采用汽相置换式润药机,分别考察广藿香茎和叶的炮制工艺。以炮制品的性状、醇溶性浸出物得率、百秋李醇含量为指标,采用单因素试验优选出茎的最佳软化方法,然后采用正交设计试验L_9(3~4),考察切段长度、干燥温度和干燥时间等因素对茎炮制工艺的影响。以水分、百秋李醇和挥发油含量为指标,优选叶的最佳炮制工艺。[结果]广藿香茎的最佳炮制工艺:茎抢水清洗1次,置真空汽相置换润药中50℃润制2.0 h,取出后,切制成段(4 mm左右),再于50℃干燥1.5 h。叶的最佳炮制工艺:叶抢水清洗1次,置50℃干燥135 min。[结论]经过工艺验证可知,该工艺稳定可靠,确定的广藿香炮制工艺可用于实际生产。     

不同炮制方法对北柴胡中柴胡皂苷a、d的含量影响

目的 研究北柴胡不同炮制方法（净制、醋炙、酒炙、麸炒、鳖血炙）与有效成分柴胡皂苷a、d的相关性,为阐明炮制机理和炮制品的不同功效奠定基础。方法 采用高效液相色谱法进行测定,Hypersil ODS C₁₈色谱柱（4.6 mm×200 mm,5 μm）,乙腈-水为流动相梯度洗脱,流速1.0 mL/min,柱温30℃,测定波长210 nm,进样量20 μL。结果 不同柴胡炮制品之间柴胡皂苷a和d的含量差异较大,柴胡皂苷a的含量依次为:麸炒柴胡>生柴胡>醋柴胡>酒柴胡>鳖血柴胡,柴胡皂苷d的含量依次为:生柴胡>麸炒柴胡>醋柴胡>酒柴胡>鳖血柴胡。结论 不同炮制方法对柴胡有效成分柴胡皂苷a、d有一定影响。     

王不留行对家兔哺乳期的催乳作用研究

[目的]研究王不留行对家免哺乳期的催乳作用.[方法]将24只母兔随机分成空白组、高剂量组、中剂量组和低剂量组,研究王不留行对哺乳期家兔泌乳量的影响,并王不留行的临床通乳作用进行评估.[结果]王不留行各剂量组从第1天开始泌乳量增加,与空白组存在极显著差异（P＜0.01）,其中中剂量组第4天开始提高仔兔体重,与空白组差异极显著（P＜0.01）.王不留行对哺乳期母兔具有明显的催乳作用.[结论]该研究可为王不留行作为动物临床用药的可行性提供依据.     

NaCl对王不留行种子萌发的影响

[目的]探究NaC1溶液对王不留行种子萌发的影响.[方法]采用培养皿发芽法研究不同浓度的NaCl对王不留行种子萌发主要生理指标的影响.[结果]王不留行种子的发芽率、发芽势、发芽指数均表现出随着NaCl浓度的升高而降低的趋势,相对盐害率则表现出与NaCl浓度的正相关.[结论]王不留行种子具有一定的耐盐性;浓度为0.7％的NaCl是胁迫王不留行种子萌发的极限浓度.     

麦蓝菜离体再生体系的建立

以麦蓝菜的干燥成熟种子为材料建立麦蓝菜的离体再生体系.结果表明:种子发芽培养基为MS,麦蓝菜继代增殖最适培养基为:MS 6-BA2.0mg/L NAA0.2mg/L,平均增殖系数达到3.0,平均苗高达3.2cm;生根最适培养基为:1/2MS NAA0.10mg/L,生根数为4-6条,生根率达到100%.     

Proteomic Identification of Differentially Expressed Proteins in Vaccaria segetalis-treated Dairy Cow Mammary Epithelial Cells

To investigate the potential effects of Vaccaria segetalis, we employed the proteomic approach on the dairy cow mammary gland epithelial cells (DCMECs). A total of 35 differentially expressed nuclear proteins were visualized by 2-DE and silver nitrate staining. Of these, five proteins also displayed significant expression changes upon treatment of the water decoction from Vaccaria segetalis, and such alterations were further confirmed by RT-PCR. Together, at both the mRNA and protein levels, the water decoction from Vaccaria segetalis increased the expression of proteins ethylmalonic encephalopathy 1 (ETHE1), vesicle amine transport protein 1 homolog (VAT1), parkinson disease protein 7 homolog (Protein DJ-1), proteasome subunit alpha type-2 (PSMA2) and SUMO-activating enzyme subunit 1 (SAE1). This study would enable a better understanding of the molecular mechanisms underlying this water decoction effects at the protein level.     

野生半夏不同生长期内γ- 氨基丁酸含量的测定

[目的]建立半夏[Pinellia ternate（Thunb.） Breit.]中γ-氨基丁酸含量的测定方法。[方法]采用薄层扫描法测定不同生长期半夏中γ-氨基丁酸含量。[结果]γ-氨基丁酸含量在0～1.0mg/ml范围内与峰面积积分值呈良好的线性关系（r=0.9981）,平均加样回收率为95.6%,RSD为4.12%。5月上旬生长的半夏中γ-氨基丁酸的含量最高达0.143%。[结论]提取γ-氨基丁酸的野生半夏原料以5月上旬采收最佳。     

微波辅助提取木棉花中总黄酮的工艺研究

[目的]确定从木棉花中提取黄酮类化合物的优化条件。[方法]通过单因素试验和正交试验对微波辅助提取木棉花中黄酮类化合物的工艺条件进行了探讨。[结果]木棉花中黄酮类化合物的微波辅助提取的最佳条件为：微波处理时间为100s、微波功率为240W、乙醇的体积分数为60%、料液比为1∶40,在此条件下测得木棉花中黄酮类化合物含量为4.79%,常规提取法黄酮类化合物含量为4.07%。[结论]微波提取效果优于常规提取法,这为更好地开发和利用木棉花资源提供了试验和理论依据。     

奶水牛乳汁体细胞数与抗氧化指标的相关性分析

[目的]了解奶水牛乳汁体细胞计数（SCC）与抗氧化指标之间的相关性,为乳汁质量监控和奶水牛健康养殖提供科学依据.[方法]随机选取南宁某牛场奶水牛139头,同步采集乳样与血样,乳汁SCC采用FOSS体细胞仪测定,血浆和乳清的总抗氧化能力（TAC）采用FRAP法（血浆铁还原力法）测定,丙二醛（MDA）含量采用TBA法（硫酸巴比妥法）测定.[结果]被检的139头奶水牛中,乳汁SCC≥50.00万/mL（隐性乳房炎诊断标准）的样本占被检总数的12.23％,乳汁SCC＜50.00万/mL的样本占被检总数的87.77％;奶水牛血浆和乳清的TAC分别为2.44±1.04和3.78±1.68 U/mL,MDA含量分别为2.07±0.48和1.55±0.52 nmol/mL,其差异均达极显著水平（P＜0.01）.乳清TAC随乳汁SCC的升高而呈下降趋势,二者间呈显著负相关（r=-0.168,P＜0.05）;血浆MDA与乳清MDA间呈显著正相关（r=0.189,P＜0.05）,而血浆MDA与血浆TAC（r=0.391）、乳清MDA与血浆TAC（r=0.315）间呈极显著正相关（P＜0.01）.[结论]乳清TAC可作为检测奶水牛乳房健康及其乳汁质量的备选指标.     

酸枣仁黄酮对糖尿病大鼠肾损伤的保护作用

[目的]为了探讨酸枣仁黄酮对糖尿病大鼠肾损伤的保护作用及机制。[方法]采用腹腔注射链脲佐菌素制备糖尿病大鼠模型,连续灌胃给予酸枣仁黄酮28 d,收集大鼠尿液、血液及组织标本,检测大鼠体重、空腹血糖及肾功能、肾皮质中丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)的活性;采用原位末端标记法(TUNEL),检测肾脏细胞凋亡。[结果]酸枣仁黄酮连续干预28 d后,与糖尿病模型组相比,大鼠体重及空腹血糖无明显变化(P>0.05),但肾功能指标明显改善,肾皮质MDA含量显著下降(P<0.05),SOD活性显著升高(P<0.05);肾脏凋亡细胞数显著减少(P<0.05,P<0.01)。[结论]糖尿病可引起肾脏高水平的氧化应激和过度的细胞凋亡。酸枣仁黄酮可通过抑制肾组织氧化应激及肾细胞凋亡而发挥肾保护作用。     

重组牛分枝杆菌CFP-10蛋白间接ELISA检测方法的建立

[目的]建立检测牛分枝杆菌的间接ELISA方法,快速区分致病性与非致病性牛分枝杆菌,为净化牛结核病提供技术支撑.[方法]以体外扩增表达并纯化的重组牛分枝杆菌CFP-10蛋白为包被抗原,建立检测牛分枝杆菌的间接ELISA,并应用方阵法优化间接ELISA的检测条件.[结果]重组CFP-10蛋白间接ELISA的最佳检测条件为：以8μg/mL重组CFP-10蛋白包为被抗原,37℃下包被1h,再以5％脱脂奶封闭1h,血清（一抗）经1∶200倍稀释后作用1h,然后以1：500倍稀释的辣根过氧化物酶标记羊抗兔IgG（二抗）作用1h.该间接ELISA的阴阳临界值为0.281,仅与牛分枝杆菌呈阳性反应,与牛布鲁氏杆菌、牛口蹄疫病毒无交叉反应;其敏感性能检测1：320倍稀释的血清,批内与批间的变异系数均小于5.0％.[结论]建立的重组牛分枝杆菌CFP-10蛋白间接ELISA具有特异、敏感等优点,临床上可用于致病性牛分枝杆菌的检测.