猪副黏病毒病家族

猪副黏病毒病（porcine paramyxovirus disease）是由副黏病毒引起的一系列猪病，包括蓝眼病（blue eye disease）、尼帕病毒病（nipah virus disease）、梅那哥病毒病（menangle virus disease）及我国出现的猪副黏病毒病（本研究室称之为猪源禽1型副黏病毒病，即猪源新城疫），给养猪业带来了重大损失。本文简单介绍猪副黏病毒病家族各成员的病原学，流行病学及临床症状。     

上海及周边地区散养猪主要病毒病的流行状况调查

采用PCR方法对上海及周边地区散养临床发病猪进行主要病毒病的病原学检测,主要包括猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪伪狂犬病病毒和猪圆环病毒2型。2005年检测病死猪病料97份,4种病的阳性率分别为33.33%、23.81%、35.90%、40.00%;2006年检测357份,4种病的阳性率分别为15.91%、33.33%、10.53%、23.61%;2007年检测1050份,4种病的阳性率分别为13.92%、35.20%、7.78%、20.57%。2005年-2007年的病例中均有不同程度的混合感染,混合感染率分别为3.09%、4.48%、3.62%,表明这些病原在上海及周边地区的散养猪中普遍存在,成为猪病防疫中不可忽视的一个环节。     

"猪高热病"后续报道

上期我们向读者介绍了南方“猪高热病”的发病情况及专家提出的控制措施,但当时并没有找到具体的病原,近日,农业部种猪质检中心基因检测室公布根据所收集的流行病学资料、实验室检测结果和相关动物实验,初步认为造成本次猪疫情发生的主要病原为多杀性巴氏杆菌（Pasteurella multocida）、猪繁殖与呼吸综合征病毒（Porcinere productive and respiratory syndrome virus）以及猪2型圆环病毒（Porcine circovirus -2）感染,     

火龙果主要病毒RT-PCR检测方法的建立及应用

建立快速而稳定的火龙果病毒病分子检测体系,为火龙果病毒病的分子生物学鉴定提供技术支持。本文以感病的火龙果茎为研究材料,根据火龙果主要病毒病Pitaya virus X（PiVX）、Schlubergera virus X（SchVX）、Cactus virus X（CVX）及Zygocactus virus X（ZyVX）的保守序列设计特异性引物,运用RT-PCR技术进行扩增,将目的片段回收、克隆和测序。结果表明四种病毒序列与NCBI数据库里相应病毒核苷酸序列均具有较高的一致性。利用梯度稀释法依次将cDNA稀释为2、22、23、24、25、26、27倍,对各病毒灵敏度进行分析,结果显示,能检测出大部分病毒的火龙果cDNA最低浓度是45.75 ng·μL-1。应用该方法对贵州省罗甸县部分火龙果生产园内植株进行病原检测,结果显示该检测体系能特异、灵敏、稳定地检测出PiVX、SchVX、ZyVX及CVX这四种病毒。     

云南省猪病毒病病原学检测及结果分析

为了解云南省猪主要病毒病的流行趋势,采用PCR和RT-PCR方法对2013—2015年云南省规模猪场和养猪散户送检的临床病例样本进行主要病毒病的病原学检测,主要包括猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪圆环病毒2型(PCV-2)、猪瘟病毒(CSFV)、猪伪狂犬病病毒(PRV)、猪细小病毒(PPV)、日本脑炎病毒(JEV)等。结果表明:PRRSV、PCV-2、CSFV、PRV、PPV在云南省内普遍存在,给猪病防控带来了重大隐患。     

猪副黏病毒病家族

猪副黏病毒病(porcine paramyxovirus disease)是由副黏病毒引起的一系列猪病,包括蓝眼病(blue eye disease)、尼帕病毒病(nipah virus disease)、梅那哥病毒病(menangle virus disease)及我国出现的猪副黏病毒病(本研究室称之为猪源禽1型副黏病毒病,即猪源新城疫),给养猪业带来了重大损失.本文简单介绍猪副黏病毒病家族各成员的病原学、流行病学及临床症状.     

七种猪常见病毒核酸磁-纳米微粒可视化快速检测技术的建立与应用

随着集约化养殖业的发展，规模化养猪场对于病原的早期快速检测需求逐步增高，本研究旨在建立针对猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus, PRRSV)、猪瘟病毒(classical swine fever virus, CSFV)、猪圆环病毒2型(porcine circovirus type 2,PCV2)、猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus, PEDV)、猪伪狂犬病病毒(porcine pseudorabies virus, PRV)、猪传染性胃肠炎病毒(transmissible gastroenteritis virus, TGEV)和猪细小病病毒(porcine parvovirus, PPV)等7种常见病毒病病原感染的广谱磁纳米微粒可视化(ultrasensitive nanoparticle visualization detection, UNVs)现场检测技术。根据不同病毒的复制酶区域的高度保守区域，设计探针和引物，通过探针的筛选和条件的优化...     

猪圆环病毒病的诊治

对湖北省某猪场发生的以皮肤发红、体温升高等为主要症状的疾病,采集淋巴结样品,应用PCR方法进行实验室检测,猪圆环病毒2型阳性率为100%（4/4）,猪蓝耳病阳性率为0（0/4）。根据实验室检验结果,结合临床症状分析,确诊为猪圆环病毒病,经采取隔离消毒、对症治疗及紧急免疫等综合防治措施后,疫情得到了有效控制,降低了猪场经济损失。     

猪圆环病毒病研究进展

猪圆环病毒（PCV）病是近几年新发现的一种猪的传染病,由猪圆环病毒（PCV）引起猪的一种多系统功能障碍性疾病。猪圆环病毒病临床上以断奶仔猪多系统衰竭综合征（PMWS）等为主要特征,该病原体已被确认为猪圆环病毒Ⅱ型（PCV2）。研究表明,猪圆环病毒Ⅱ型不仅是断奶仔猪多系统衰竭综合征（PMWS）的病原而且能够引起多种猪病,主要有新生仔猪先天性脑震颤、猪皮炎及肾衰综合征、     

猪感染尼帕病毒的流行特点及防控

尼帕病毒病是一种新发人兽共患传染病,1998年在马来西亚首次出现。引起该病的病原为尼帕病毒（Nipah virus,NiV）,其在猪群中具有高度传染性,人感染后死亡率达40%～75%。NiV主要通过猪只间的直接接触传播,也可通过设备、车辆、衣服、靴子以及犬、猫等机械携带传播;猪是NiV传播的放大器,主要通过呼吸道飞沫或被感染组织将病毒传播给人。果蝠是NiV的天然宿主,因此养猪场选址要远离果树种植区。目前还没有批准的人用或兽用尼帕病毒病疫苗或药物,但多种疫苗候选株在动物模型中显示出良好的保护效果,包括病毒活载体疫苗株、病毒糖蛋白亚单位疫苗株、颗粒样病毒疫苗株等;成功防控NiV感染的关键是做到早发现,在NiV传入高风险地区,对猪群持续进行血清学监测,并对猪场进行严格生物安全管理。本文结合已暴发的猪群尼帕病毒病疫情及人间疫情,探讨猪感染NiV的流行特点,并通过分析暴发原因提出防控措施,以期为猪群中防止该病发生及突发疫情时的应急处置提供参考。     

2008-2018年我国猪流行性腹泻病毒混合感染分析

为了解我国猪流行性腹泻病毒混合感染的地区分布情况、季节性特征和混合感染病原类型,基于中国知网、NCBI等数据库,对2008-2018年间我国猪流行性腹泻病毒混合感染病例进行统计.结果显示,全国18个省市地区统计样本数量共计6951份,其中猪流行性腹泻病毒阳性样本数3345(48.12%)份,混合感染阳性样本数1325(19.06%)份;我国中部地区猪流行性腹泻病毒混合感染率高于其他省市;冬季(12~2月)为猪流行性腹泻病毒混合感染多发季节;细菌和病毒是猪流行性腹泻病毒混合感染的主要病原,在与细菌的混合感染中,主要混合感染病原类型为大肠杆菌,在与病毒的混合感染中,可以与猪圆环病毒2型、猪轮状病毒、猪瘟病毒、猪传染性胃肠炎病毒、猪伪狂犬病毒、猪嵴病毒、猪Delta冠状病毒和猪繁殖与呼吸综合征病毒进行混合感染,混合感染主要以二重混合感染(15.41%)为主,三重混合感染和四重混合感染分别占总样本数的3.25%和0.40%.本文归纳了近10年我国猪流行性腹泻病毒混合感染的基本特征,为了解猪流行性腹泻病毒混合感染及提高疫病综合防控水平提供了一定的参考.     

上海市猪博卡病毒感染情况调查

根据GenBank公布的猪博卡病毒(Porcine Bocavirus,PBoV)序列,在VP1/2基因区域设计引物和TaqMan探针建立实时荧光定量PCR检测方法,对上海市10个区(县)规模场2006～2011年间采集的1800份猪血清、2010年种猪场不同月份采集的45份猪粪便、2010年9个规模场采集的27份猪鼻棉拭以及门诊采集的9份高热病死猪内脏进行检测,阳性率依次为24％、30％、0％、67％.6份PBoV阳性病料进行猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRSV)、猪圆环病毒2型(Porcine circovirus type 2,PCV2)、猪伪狂犬病毒(Pseudorabies virus,PRV)、猪细小病毒(Porcine parvovirus,PPV)检测,阳性率依次为83％、100％、0％、0％.检测结果表明,PBoV感染在上海市普遍存在,猪内脏中检出率较高,且春秋两季高发,仔猪比较易感,并与PRRSV、PCV2存在混合感染.     

猪精液中五种病毒的初步检测

为探明猪精液在疫病传播中的作用,应用PCR和RT-PCR技术分别从发病猪场和未发病猪场采集种公猪精液进行猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪伪狂犬病病毒(PRV)、猪圆环病毒2型(PCV-2)和牛病毒性腹泻病毒(BVDV)的检测。结果发现,发病猪场的种公猪精液中CSFV、PRRSV、PRV、PCV-2的感染率分别为30.0%、50.0%、4.0%和30.0%,而未发病猪场的感染率分别为4.0%、20.0%、0.0%和8.0%,这表明精液是多种猪病原传播的良好媒介,提示种公猪对于疫病的发生和传播起着重要作用。     

基于多重PCR的寡核苷酸基因芯片检测猪瘟病毒,猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒及猪圆环病毒1型和2型

为了建立一种可同时检测区分猪瘟病毒(CSFV),猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(PRRSV)和猪圆环病毒2型(PCV-2)的寡核苷酸基因芯片方法,本研究针对每种病毒设计了4条～6条寡核苷酸探针,检测低限为1.6×104PCV-2拷贝数/μL,1.6×104CSFV拷贝数/μL,1.6×105PRRSV拷贝数/μL,比琼脂糖凝胶灵敏约10倍。利用建立的寡核苷酸基因芯片方法对76个仔猪样本进行了检测,检出了3种病毒的存在,其中25个样本(32.9%)同时感染了2种以上病毒。结果表明寡核苷酸基因芯片检测是一种快速、灵敏和高效的猪只混合感染病毒的病原学诊断方法。     

Porcine circovirus-2 and concurrent infections in the field

Porcine circovirus-2 (PCV-2) is the necessary cause of post-weaning multisystemic wasting syndrome (PMWS) in swine; however, a variety of co-factors, including other infectious agents, are thought to be necessary in the full expression of disease. Porcine parvovirus (PPV) was found in the inoculum used in the first experiments to reproduce PMWS in gnotobiotic swine. Retrospective and prospective studies in the field and laboratory have demonstrated PCV-2 can act synergistically with PPV to enhance the severity of PMWS. PCV-2 has been shown to play a role in the porcine infectious disease complex (PRDC). Other co-infecting agents with PCV-2 in the lung include, porcine reproductive and respiratory syndrome virus (PRRSV), swine influenza virus (SIV) and Mycoplasma hyopneumoniae. Exposure of pregnant sows to PPV, PRRSV, or encephalomyocarditis virus may interact with PCV-2 infected foetuses. The severity of hepatic lesions in PCV-2 infected pigs may be enhanced by co-infection with agents such as swine hepatitis E virus and Aujezsky's disease virus. Additional studies are required to determine the mechanistic basis for the interaction of PCV-2 with other agents in the pathogenesis of the various clinical syndromes that have been associated with PCV-2 infection.     

一例猪圆环病毒2型和大肠杆菌、溶血葡萄球菌混合感染的诊断

山东德州某猪场发生猪高热、呼吸系统疾病甚至死亡的疫情。采集病料提取病变组织总DNA或RNA进行猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪圆环病毒2型、猪细小病毒、猪伪狂犬病病毒、猪瘟病毒的PCR或RT-PCR检测。PCR扩增出353 bp的猪圆环病毒2型特异性条带。同时进行细菌分离培养、生化鉴定等试验,诊断为猪圆环病毒2型和大肠杆菌、溶血葡萄球菌混合感染。     

SIV与PRRSV、CSFV、PCV-2和PRV交叉感染的检测

采用RT-PCR方法对37份疑似猪流感病毒(SIV)感染病料进行了病原学检测。同时,还运用PCR和RT-PCR方法对SIV阳性病料进行了猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪瘟病毒(CSFV)、猪圆环病毒2型(PCV-2)和猪伪狂犬病毒(PRV)目的基因片段的扩增。结果,扩增出了SIV特异目的基因片段,且4份病料都为混合感染,感染状况分别为SIV/PRRSV/PRV,SIV/CSFV/PRRSV三重感染,SIV/PCV-2和SIV/PRRSV二重感染。     

Porcine circovirus 2-associated disease in Eurasian wild boar.

Porcine circovirus 2 (PCV2) was first identified in high-health herds of domestic swine and was associated with a debilitating disease called postweaning multisystemic wasting syndrome (PMWS). Most subsequent studies have indicated that PCV2 infects only swine but there is little information on porcids other than improved breeds of domestic swine. Multisystemic disease was reported in a group of Eurasian wild boars raised under free-range conditions. Affected young pigs had pneumonia and enteritis and were cachectic. Porcine circovirus 2 was identified in affected tissue by immunohistochemistry and in situ hybridization, and a PCV2-like virus was isolated from pooled organs. The open reading frame (ORF2) of the isolated PCV2 had a 98.7% homology with the ORF2 of a reference PCV2 isolate. These diagnostic data indicate that PCV2 can infect and cause disease in Sus scrofa subspecies other than domestic swine.     

猪繁殖与呼吸综合征疫苗研究现状

猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)是一种对养猪业危害严重的传染病,猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)为有囊膜的单股正链RNA病毒,且具有高度的变异性,有美洲型和欧洲型两个血清型。猪肺泡巨噬细胞(PAM)、恒河猴胎肾细胞系MA-104及源于MA-104的传代细胞系(如Marc-145、CL-2621、HS.2H和CRL-1171)对PRRSV敏感。预防该病的常规疫苗有灭活疫苗和弱毒疫苗两种。通常以特定种毒在适当细胞系中培养增殖,经灭活或致弱,加入佐剂制得相应疫苗。灭活疫苗交叉保护性差,但使用安全;弱毒疫苗抗体产生快、持续时间长、保护力强,但源毒能在猪群中持续存在而有安全隐患。     

猪瘟、猪圆环病毒病和猪繁殖与呼吸综合征寡核苷酸芯片诊断方法的建立与初步应用

猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）、猪瘟病毒（CSFV）和猪圆环病毒Ⅱ型（PCV-2）是引发猪繁殖障碍的主要病原,建立其基因芯片快速检测体系,对开发猪繁殖障碍快速检测试剂盒具有重要意义。根据GenBank中已发表的PRRSV、CSFV和PCV-2的病毒基因组序列,设计合成特异性引物和特异性较强的60mer的寡核苷酸探针,并将探针按所设计阵列固定于表面经氨基化修饰的玻片上,制备出寡核苷酸芯片。通过引物标记及特异性验证,建立了带标记引物的多重PCR检测体系,从而产生大量可与寡核苷酸探针特异性互补的带标记的DNA片段。将标有荧光染料的扩增产物与芯片上寡核苷酸探针杂交,扫描、分析芯片上荧光信号。结果表明,芯片上各样本对应探针位点呈现阳性荧光信号,而阴性对照和空白对照则基本不能检测到荧光信号。分别用基因芯片检测方法和PCR/RT-PCR检测60份临床病料,两者符合率高达92%,表明该检测技术能够用于临床病料的检测及快速诊断PRRSV、CSFV和PCV-2。