植物病毒的简易鉴定

植物病毒病的鉴定,通常采用汁接液种试验,用病毒抗血清进行血清试验,在电镜下观察病毒粒子的形态等。但汁液接种只限于少数测试植物,而且需除虫和消毒土壤、育苗管理等等,很费功夫;血清试验可同时处理多种样品,具有能在短时间内检出病毒及含量的优点,但也能利用有共同抗原的病毒;电镜观察需要熟练有关技术,其适合观察棒状、线条状、杆状等较大型病毒颗粒;然而,对小球形病毒的鉴定中,由于不易识     

胶体金免疫电镜技术用于烟草花叶病毒的检测

 本文报道了以改良的鞣酸法制备颗粒大小适于植物病毒标记的胶体金方法,以及以胶体金免疫电镜技术检测、鉴定植物病毒的方法,并以此法检测了烟草花叶病毒TMV。     

引起掌叶半夏花叶病的芋花叶病毒

 在表现花叶症状的天南星科药用植物掌叶半夏(Pinellia cordata)上检测到一种线状病毒,病毒粒子的最大分布范围为725~776nm,平均长度为745nm。提纯病毒A₂₆₀/A₂₈₀为1.28,电镜下观察为均一的线状病毒粒子。经免疫电镜测定该线状病毒与芋花叶病毒(DMV)抗血清有强的阳性反应。在病叶横切面的细胞质里观察到具风轮状、卷筒状和片层状聚集结构,在纵切面上为束状的细胞质内含体以及分散的和紧密聚集的线状病毒粒子。寄主反应测定结果表明,该病毒侵染天南星科植物,不侵染其它11科35种非天南星科供试植物。据上述试验结果,该病毒分离物认为属芋花叶病毒。本文是有关该属植物上病毒的首次报道。     

油茶炭疽菌携带病毒种类鉴定及多样性分析

 炭疽菌是重要的植物病原真菌,能够引起多种植物炭疽病。真菌病毒广泛存在于植物病原菌中,侵染炭疽菌属真菌的病毒资源有待挖掘。本文利用宏病毒组测序技术,对分离自我国南部6个省份不同油茶园的40株油茶炭疽菌中的病毒进行了鉴定。经过同源比对分析,发现10种基因组类型均为正义单琏RNA的新病毒。它们分属于减毒病毒科(Hypoviridae)、裸露病毒科(Narnaviridae)、线粒体病毒科(Mitoviridae)和葡萄孢欧尔密病毒科(Botourmiaviridae)。本研究是我国南方油茶炭疽病菌携带病毒的首次报道。研究结果丰富了炭疽菌属所携带的病毒基因组信息,可为深入分析炭疽菌真菌病毒的多样性和分子特性奠定基础。     

侵染番红花的芜菁花叶病毒

 从表现花叶症状的德国进口番红花上获得一线状病毒分离物SA,线状病毒粒子长度为700~800nm。其在人工接种的11科39种植物中能侵染6科14种植物,在克里芙兰烟上产生系统坏死,在小白菜、花椰菜等十字花科植物上产生系统花叶或为隐症,在昆诺藜等藜科植物上为局部侵染。在番红花病叶、球茎及克里芙兰烟病叶组织中观察到卷轴状和片层状聚集的风轮状内含体。免疫吸附和免疫修饰电镜观察结果显示,SA与芜菁花叶病毒((TuMV)具有紧密的血清学关系。根据这些特征将SA鉴定为TuMV的一个分离物。这是TuMV侵染番红花的首次报道。     

口岸截获和生产田送检的植物病毒检验和疫情评述

自1983年至1990年的7年中,我们对有关口岸所、植保植检站、科研和生产等38个单位,从截获和生产田病株送检的91批次各种植物的繁殖材料(包括组培试管苗)进行了病毒检验鉴定。我们采用生物学鉴定、电镜观察和血清学检测的2～3     

进一步研究A蛋白在检测病毒粒体的免疫电镜技术中的应用

在前一篇(Shukla 和 Gough,1979)我们报道了检测二种线状植物病毒甘蔗花叶病毒(SCMV)和烟草花叶病毒(TMV)改良的流行免疫电镜技术(Derrick,1973;Milne 和 Luisoni,1977)。它包括在用特异抗血清包被铜网前,预先用 A 蛋白(一种金黄葡萄球菌细胞壁蛋白)包被铜网。虽然这条件对严格比较来说还不是最理想的,但此方法比起单用抗血清处理诱捕的 SCMV和 TMV 病毒粒体的数量多。此技术特别适合在植物抽提液中含病毒浓度低的病毒。     

我国49种线状植物病毒分子鉴定及其基因组研究

本研究建立了马铃薯Y病毒属、马铃薯X病毒属、麝香石竹潜隐病毒属和葱X病毒属成员RT-PCR检测和全基因组扩增技术体系,并成功用于60多种供试植物病毒的检测诊断。利用所建立的技术体系,从全国18个省市42种作物上采集的病样中鉴定了49种植物病毒,其中10种为新种,11种为国内新记录,更正了7种病毒的鉴定和命名。测定了这49种病毒217个分离物基因组序列,并全部在国际基因数据库登录,占全球登录的植物病毒基因组序列总数的3.8%,其中27种植物病毒为基因组全序列,20种为国际首次报道,15种病毒全序列被美国国家生物技术信息中心(NCBI)确定为相关病毒的标准序列。     

山东崂山地区小麦花叶病的病原鉴定——我国的土传小麦花叶病毒(SBWMV)

 近几年来我国山东沿海地区小麦花叶病发病严重,大面积地威胁小麦生产。作者曾对病叶做超薄切片的电镜观察并初步鉴定该病之病原为土传小麦花叶病毒(SBWMV)。本文报道了进一步从生物学、病毒的形态、理化性质、血清学以及分子杂交等方面鉴定的结果。     

话说辣椒病毒病

辣椒病毒病已成为辣椒上普遍而严重的病害之一,广东早在1932年就有报道,但一直未鉴定出病毒的种类,直至60年代,我国才开始报道辣椒上的病毒主要是黄瓜花叶病毒(简称CMV)和烟草花叶病毒(简称TMV),病毒病与其他病害不一样,如真、细菌病害的病原物与症状基本上是稳定的,而病毒病不然,一种病毒可产生多种症状,或一种症状,可能由多种病毒混合侵染引起的。鉴定毒原有指示植物、血清反应、稳定性测定、以及电镜检查等多种方     

’99世博会日本菊花检测出番茄环斑病毒、南芥菜花叶病毒和烟草环斑病毒

菊花为常见栽培园艺花卉植物。从世博园采集的来自日本的菊花病株表现轻花叶 ,具有病毒病症状。日本为番茄环斑病毒 (ＴｏＲＳＶ)、南芥菜花叶病毒 (Ａｒ ＭＶ)、烟草环斑病毒 (ＴＲＳＶ)的疫区。这几种病毒的寄主范围广泛 ,易侵染草本花卉植物[1] ,因此用酶联、电镜和生物接种的方法对菊花病标样进行了诊断和鉴定。1　材料和方法1 .1　样品的采集和症状观察　样品采自世博园国际馆 ,并于检疫温室内隔离种植。以健康植物为对照 ,对样品进行症状观察和记录。1 .2　生物侵染实验　采用 0 .0 1ＭＰＢＳ(ｐＨ7.0 ) ,选用相关寄主 ,常规摩擦接种…     

胶体金免疫电镜技术检测和鉴定病汁液中不同形态的植物病毒

 本文报道胶体金免疫电镜技术的建立:铜网捕获病毒后,用其稀释约200倍的同源抗血清修饰处理3~5分钟,羊抗兔IgG-金复合物标记3~5分钟,经磷钨酸负染,电镜下可见病毒粒子周围金颗粒特异性吸附,而背景上非特异性吸附很少。用此技术成功地快速检测和鉴定了病汁液中线状病毒(大麦黄花叶病毒,大麦温和花叶病毒,小麦梭条斑花叶病毒,芜菁花叶病连和马铃薯Y病毒)、棒状病毒(烟草花叶病毒、长叶车前草花叶病毒和土传小麦花叶病毒)以及球状病毒(水稻矮缩病毒、黄瓜花叶病毒和大麦黄矮病毒)。用0.5M PBSpH7.0制备病汁液,可大幅度提高同源抗血清对黄瓜花叶病毒的捕获能力。     

我国植物病毒病介体昆虫研究的进展

自1939年我国开始报道蚜虫传播蚕豆病毒病以来,至今已知虫传植物病毒和类菌原体有68个,引起100多种病害,其中属禾本科作物的近30种;十字花科、葫芦科、豆科和茄科等果菜类作物的病害60多种;果树及木本植物等病害20种。经接种证实的介体昆虫有52种,其中蚜虫22种,飞虱、叶蝉20种,其它10种。 近年来有关植物病毒介体昆虫的文献报道数量显著增加,从全国省级以上农业及生物科技刊物上发表的,与植物病毒和介体昆虫两者均有关的论文,在四十年代以前仅4篇,五十年代为17篇,六十年代74篇,七十年代42篇,1980—1984年增到130多篇。有     

免疫电镜技术在植物病毒研究中的应用和进展

早在1941年 Anderson 和 Stanley 曾在电镜下,观察到烟草花叶病毒(TMV)抗血清与抗原结合的络合物,然而免疫电镜技术直接应用于植物病毒诊断和研究,还是从本世纪六十年代开始,七十年代以来才发展较快。由于免疫电镜取样很省,     

甘薯病毒病检测技术研究

湖北省甘薯病毒病主要有皱缩花叶型、卷叶型、叶片斑点型(含黄斑型和紫环斑型)等三种症状类型。对三种类型的病株样本进行了电镜观察,结果表明,卷叶型、黄斑型和紫环斑型的病株叶片中均有长线形病毒粒子,长度为1 050m~1 650m,形态和大小无明显差异,皱缩花叶型病株叶片中有时也可观察到长线形病毒。用三种症状类型病株与巴西牵牛靠接,巴西牵牛和甘薯植株成活率达90%以上,巴西牵牛染病率可达80%以上。嫁接后的巴西牵牛叶片表现皱缩而且褪绿症状者,电镜检测均有病毒,因此,巴西牵牛可以用作甘薯病毒病诊断的指示植物。     

介绍一种极易从国外传入的种传病毒——藜草花叶病毒

藜草花叶病毒(Sowbane mosaic virus)属南方菜豆花叶病毒组(Sobemovirusgroup),是种传率极高、抗逆性强和极易传播蔓延的病毒。至今,在我国未有自然发生的报道,为此应严防随种子和无性繁殖材料以及病毒资源的引入而传入我国。1.首报 1985年 Silva 等报道了藜属植物发生一种花叶病,对病原未作鉴定,Bennett 等(1961)在美国加州从墙生藜Chenopodium murale 表现花叶的病株分离     

云南省烟草病毒病发生状况研究初报

1990年以来,作者应用电镜技术、病毒分离提纯技术对云南的烟草病毒病样品进行鉴定研究,同时,对重病区宾川进行集中采样调查及防治试验,结果报道如下。一、材料与方法 (一)材料烟草病毒样品采自玉溪、澄江等12个县市烤烟生产田。PVX、PVY标准抗原与抗体由中国农业科学院生物技术中心提供。TMV、CMV、PVY标样电镜图谱由北京农业大学电镜室、病毒室提供。 (二)方法按采集地点、栽培品种、症状类型等分类采样,参照陈保善等(1986)、田波等(1987)及Hamilton等(1981)的方法制样。样品置JEM100CX—Ⅲ型透射电子显微镜下放大5万倍观察30个以上有效视野,检测病原种类及其相对含量、带毒率,研究分布特点。用NS—83增抗剂、病毒A及硫酸锌作防治处理,清水作对照,考察对病情的抑制效果。     

进境欧洲水仙种球上病毒的检测与鉴定

为明确2013年福建口岸截获的进境欧洲水仙种球上携带的病毒种类,应用血清学、电镜观察和分子生物学检测方法对其可能携带的病毒进行了检测与鉴定。结果显示,水仙花叶病毒(Narcissus mosaic virus,NMV)、水仙黄条病毒(Narcissus yellow stripe virus,NYSV)、水仙潜隐病毒(Narcissus latent virus,NLV)、水仙迟季黄化病毒(Narcissus late season yellows virus,NLSYV)和南芥菜花叶病毒(Arabis mosaic virus,ArMV)5种病毒为阳性,其中NLSYV、ArMV为强阳性;NMV、NYSV、NLV和NLSYV为阳性的样品中含有大小约500~750 nm×12 nm的线状病毒粒体,ArMV为阳性的样品中含有直径约30 nm的球状病毒粒体;经序列测定和分析,扩增到的目的片段大小与各病毒预期扩增片段大小一致,并与已报道的各病毒序列高度同源;病毒复合侵染检测结果显示,该批水仙种球39.7%的样品存在2种以上病毒复合侵染。研究表明,该批进境欧洲水仙种球上携带有NMV、NYSV、NLV、NLSYV和ArMV,且复合侵染现象明显。     

电印迹免疫分析（EBIA）及其在植物病毒检测和鉴定中的应用

对植物组织中低浓度或极不稳定或很难提取的病毒检测和鉴定,已成为植物病毒学中一个越来越重要的问题。免疫电镜(ISEM)和酶联免疫吸附测定(ELISA)等灵敏的现代血清学技术的发展和应用,虽然缓和了这个问题,但由于容易忽视较弱的交叉反应或不能从病毒一抗体之间真正的特异性反应中区分寄主蛋白和其相应抗体之间的非特异性反应,因此,上述问题总不能令人满意地解决。最近,O＇Donnell等(1982)介绍了一种简便、有效、能很好地解决上述问题的新技术——电印迹免疫分析     

花生矮化病毒(PSV)的研究

 1983年7月,从山东薛城的花生上分离到一个病毒分离物PS-34,以汁液摩擦接种测定了9科48种植物,PS-34可侵染6科15种植物,在苋色藜上表现系统花叶。由桃蚜、豆蚜以非持久性方式传病。体外抗性测定,失毒温度50-55℃,稀释限点10^-3-10^-4,体外存治期3-4天.提纯后经电镜观察,病毒粒体呈球形,直径±29nm.提纯病毒的抗血清和花生矮化病毒日本株系(PSV-J)的抗血清交互测定,都与PS-34有明显的沉淀线反应。故将病毒分离物PS-34鉴定为黄瓜花叶病毒组的花生矮化病毒(PSV)。因苋色藜和昆诺藜上表现为系统花叶,与在寄主反应上明显不同.因此,确定其为一种新的花生矮化病毒PSV-C株系.