谷氨酸转运体基因多态性与犬行为性状的关联性分析

<正>兴奋性氨基酸是广泛存在于哺乳类动物中枢神经系统的正常兴奋性神经递质,参与突触兴奋传递,学习记忆形成以及与多种神经变性疾病有关。EAA包括谷氨酸(Glu)、天冬氨酸(Asp)、N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)、亮氨酸等等。其中谷氨酸是中枢神经系统内含量最高的     

兴奋性氨基酸的生物学功能

兴奋性氨基酸不仅对动物的学习、记忆和生长性能有重要的作用,而且在调节下丘脑、垂体内分泌机能中也起重要作用,它们能够促进动物腺垂体中生长激素、黄体生成素、促性腺激素释放激素及促肾上腺皮质激素的分泌。谷氨酸对断奶仔猪的生产性能有明显的促进作用,并在肺损伤的发生中具有病理生理学作用。兴奋性氨基酸通过其受体发挥作用,受体分为离子型和代谢型两种。文章综述了兴奋性氨基酸受体及其生物学功能。     

花粉抗脑衰老实验动物研究

使用西安舒仲“花粉精”制剂，进行了抗脑衰老实验动物研究，结果：（１）以三月龄衰老组与三月龄正常组比较，衰老组某些脑区的抗氧化酶（过氧化氢酶Ｃａｔａｌａｓｅ，ＣＡＴ），超氧化物歧化酶（Ｓｕｐｅｒｏｈｉｄｅｄｉｓｍｕｔａｓｅｒ，ＳＯＤ）活力明显降低，兴奋性氨基酸神经递质（谷氨酸，Ｇｌｕ）浓度显著降低，抑制性氨基酸神经递质（ｒ－氨基丁酸，ＧＡＢＡ）浓度明显升高；（２）服用花粉的三月龄衰老组与不服花粉的三月龄衰老组比较，服花粉的衰老组某些脑区的抗氧化酶活力及兴奋性氨基酸神经递质浓度显著升高，抑制性氨基酸神经递质浓度明显降低。这些结果说明“花粉精”能提高衰老动物抗氧化酶活力及兴奋性氨基酸神经递质浓度及降低抑制性氨基酸神经递质浓度，因此初步证明“花粉精”对脑组织具有抗氧化，提高脑活动及防治脑衰老等作用。     

模式识别受体及其相关分子佐剂研究进展

综述了模式识别受体（Pattern recognition receptors,PRRs）及其相关分子佐剂的研究进展。PRRs是一类表达于固有免疫细胞并可识别病原体相关分子模式的识别分子。PRRs主要包括Toll样受体、NOD样受体、RIG—I样受体、清道夫受体、甘露糖受体和髓系细胞触发受体等。与PRRs直接相关的分子佐剂主要包括TLR激动剂、NLR激动剂、RIG—I和MDA5激动剂及CD40和肿瘤坏死因子受体超家族（TNFRSF）激动剂等。     

黄花碱对小白鼠中枢神经系统中毒机理的研究

测定了小花棘豆主要有毒成分之一黄花碱半数致死量,采用紫外可见分光光度法分别测定了对照组和黄花碱组小白鼠血浆、肝脏和脑组织中兴奋性氨基酸(EAA)谷氨酸(Glu)以及中枢神经系统中一个新的重要信使物质一氧化氮(NO)的含量。结果表明,该黄花碱极显著增加脑中Glu的含量,使中毒动物产生中枢兴奋;NO含量显著增加,与脑中Glu的增加相关联,NO不仅能引起强烈的神经毒性,甚至使神经元损伤,还介导着兴奋性氨基酸Glu的神经毒性,从而导致中枢神经系统损伤。     

三种神经递质类氨基酸对乳鸽生长性能的影响

本研究旨在研究三种氨基酸制剂对白羽王鸽乳鸽增重的影响,从而提高乳鸽的生产效率。实验取4 000对12~24月龄生产性能相近的亲鸽作为实验对象,随机分为4组,每组4个重复,每个重复约250对。饲喂的全价日粮添加保健砂,试验组分别在保健砂中添加4.8 mg/kg的γ-氨基丁酸(GABA)、4.2 mg/kg的N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)和2.4 mg/kg谷氨酸(Glu),对照组保健砂中不添加,实验为期60 d。结果表明:1三种氨基酸添加均能显著提高雏鸽体重(P0.05)。2 21日龄,GABA组、NMDA组、Glu组平均体重分别比对照组重36.27 g、27.85 g和18.61 g。3各氨基酸添加剂在雏鸽生长中的效应阶段不同,GABA作用在第二周和第三周,NMDA和Glu则在第一周作用最强。综上所述,上述三种氨基酸类添加剂均能有效提高乳鸽生长性能,其中GABA效果最佳。     

早期断奶对仔猪空肠和回肠兴奋性氨基酸载体1表达的影响

本试验旨在研究仔猪出生后10~20 d,早期断奶仔猪小肠谷氨酸转运载体基因表达情况与哺乳仔猪的差异。试验分别从40头不同母猪的仔猪中各选出体重相近,10日龄的"杜×长×大"三元杂交仔猪1头,共40头仔猪,随机不配对分为2组,每组20头仔猪,对照组(哺乳组)为哺乳仔猪,随母猪喂养;试验组(断奶组)为断奶仔猪,隔离断奶饲养;试验期10 d。饲养结束,每组随机取12只仔猪,宰杀取空肠和回肠,测定谷氨酸转运载体兴奋性氨基酸转运载体1(EAAC1)蛋白质表达情况和游离氨基酸含量。结果显示,断奶显著降低了仔猪空肠和回肠EAAC1(57和73 ku)及其相关蛋白谷氨酸转运联合蛋白(GTRAP3-18)(50 ku)的蛋白质和mRNA表达量(P0.05)。断奶提高了仔猪空肠游离谷氨酸和总氨基酸含量,却降低了仔猪回肠游离谷氨酸和总氨基酸含量,差异显著(P0.05)。结果提示,早期断奶降低EAAC1和GTRAP3-18的蛋白质含量,这可能与早期断奶仔猪遭受营养谷氨酸缺乏导致的肠道氨基酸吸收转运障碍有关。     

β-受体激动剂药物残留检测方法研究进展

β-受体激动剂可提高动物的瘦肉率并降低动物养殖成本，但β-受体激动剂通过食物链进入人体后会严重危害人体健康，因此世界多国都禁止在养殖业中非法添加β-受体激动剂，而一些非法分子为了利益在养殖环节使用β-受体激动剂，因此，有必要建立快速、准确、灵敏的分析方法用于检测β-受体激动剂。目前常见的检测方法有液相色谱串联质谱法、气相色谱串联质谱法、电化学法、表面增强拉曼散射光谱法、化学发光法、免疫分析法等，文章对上述方法在检测β-受体激动剂中的应用进行了简要介绍，同时分析了这些方法的优缺点，并对今后β-受体激动剂残留检测的新技术进行了展望。可以预见，未来的发展方向可能会是可用于现场检测的可靠性更高、特异性更强的免疫试纸条分析与具有前处理方法简单、高度自动化等优点的液相色谱串联质谱法。     

α7-nAChR介导的小花棘豆臭豆碱对小鼠海马组织谷氨酸代谢的调控机制

臭豆碱是小花棘豆的主要有毒成分之一,本试验目的是证明臭豆碱通过作用α7烟碱乙酰胆碱受体(α7-nAChR)调控谷氨酸代谢的毒理作用。结果显示,9 mg/kg和18 mg/kg臭豆碱口服剂量可激动小鼠海马组织α7-nAChR,促进谷氨酸释放及上调谷氨酸/天冬氨酸转运体(GLAST)表达,该效应可被α7-nAChR抗激动剂MLA抑制。但是,36 mg/kg臭豆碱口服剂量却增加小鼠海马谷氨酸浓度及下调GLAST表达。结果表明,超过36 mg/kg臭豆碱剂量则通过抑制α7-nAChR降低GLAST表达,导致谷氨酸代谢障碍从而具有潜在的谷氨酸神经毒性。     

普氏野马血液氨基酸测定与分析

野马血清氨基酸含量，以谷氨酸最高，异亮氨酸最低。野马与家马比较，蛋氨酸含量差异极显著，谷氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、组氨酸及脯氨酸差异显著，其他氨基酸差异均不显著。     

肝X受体激动剂抑制NLRP3炎性体活化

为探讨肝X受体激动剂对NLRP3配体ATP诱导小鼠巨噬细胞炎性复合体活化的影响,应用荧光定量PCR方法测定肝x受体激动荆对LPS诱导的Pro-IL-1β、NLRP3等基因表达的影响,并用免疫蛋白印迹的方法检测Caspase—l的活化片段。结果证明,肝X受体（LXRs）激动剂能抑制NLRP3炎性体的活化。LXRs激动剂F0901317和GW3965显著抑制LPS联合ATP诱导的Caspase-1剪切成熟和IL-lβ分泌,并且LXRs激动剂对NLRP3炎性体的抑制作用,部分源于其抑制NLRP3和IL-1β的基因转录。     

猪食欲肽2受体突变体真核表达载体的构建及其对cAMP信号通路的影响

试验旨在构建猪食欲肽2受体(porcine orexin 2receptor,pOX2R)突变体的真核表达载体,探究其野生型与突变体的基础药理学活性差异。以pcDNA3.1(+)-myc/pOX2R野生型质粒为模板,设计特异性引物单点突变构建4种突变体:pcDNA3.1(+)-myc/pOX2R-P10S、pcDNA3.1(+)-myc/pOX2R-P11T、pcDNA3.1(+)-myc/pOX2R-V308I和pcDNA3.1(+)-myc/pOX2R-T401I,将pcDNA3.1(+)-myc/pOX2R野生型和4种突变体分别瞬时转染HEK293T细胞,利用双荧光素酶报告基因检测法测定pOX2R野生型及突变体的基础活性,并检测不同浓度激动剂作用下细胞内cAMP水平,随后用内源性激动剂食欲肽A(OXA)及食欲肽B(OXB)分别对野生型及突变体进行刺激。结果显示,4个突变体构建成功,pOX2R的第10、11、308和401位氨基酸分别突变为丝氨酸、苏氨酸、异亮氨酸和缬氨酸。将pOX2R的野生型及4个突变体瞬时转染HEK293T细胞后,野生型与突变体的基础活性值无显著差异(P0.05),表明这4个位点的氨基酸突变对其受体的基础表达信号无显著影响。与野生型受体相比,突变型受体对激动剂OXB的响应无显著差异(P0.05),而突变体P10S、P11T和T401I对激动剂OXA的响应EC50显著降低(P0.05),其Rmax无显著差异(P0.05)。推测第10、11和401位点的氨基酸突变可能影响了激动剂OXA与受体的结合,降低了激动剂的激动效应。本研究结果为进一步体外研究pOX2R的功能奠定了基础。     

烟台市肉品中β-受体激动剂残留及其健康风险评估

采用高效液相色谱串联质谱法对2016-2018年烟台市肉类样品中4种β-受体激动剂的残留水平进行了检测,并在此基础上对烟台市肉品中的β-受体激动剂的残留风险进行了评估。结果显示,2016年的肉类样品中β-受体激动剂残留的检出率为3.33%,检出的2种β-受体激动剂是沙丁胺醇和特布他林,检出率均为1.67%,最高残留浓度分别为0.82μg/kg和3.63μg/kg;2017年和2018年的肉类样品中未有β-受体激动剂残留检出,烟台人民每天通过食用肉类而摄入的β-受体激动剂兽药的安全限值的平均值小于1。总体表明,烟台市肉品中β-受体激动剂残留损害人体健康的风险较低,但存在违规使用β-受体激动剂的现象,相关部门应加强对牲畜养殖使用β-受体激动剂类药物的监管力度。     

超高效液相色谱-串联质谱法同时测定牛乳中19种β-受体激动剂残留

建立同时检测牛乳基质样品中19 种β-受体激动剂类兽药残留的方法。样品经酸化乙腈溶液提取，利用Oasis PRiME HLB固相萃取小柱通过式净化处理除去磷脂，使用超高效液相色谱-串联质谱仪进行检测。结果表明：经过前处理方法与仪器条件优化后，19 种β-受体激动剂质量浓度在0～10 ng/mL呈良好线性关系（R2≥0.995）；牛乳中19 种β-受体激动剂添加量为0.2～1.0 μg/kg时，加标回收率均为70%～110%，相对标准偏差＜15%。本检测方法前处理简单快捷，具有较高灵敏度和稳定性，可以满足牛乳中β-受体激动剂类兽药残留的快速检测。     

几种促生长剂对反刍动物的研究与开发前景

本文简要介绍了近年来我们对三种促生长剂(CS87、β—受体激动剂、苯二氮卓类F89)在反刍动物的实验研究情况。CS87主要通过耗竭体内生长抑素 ,提高生长激素、IGF—I和其他代谢激素水平 ;同时加强消化代谢机能 ,从而促进动物生长和提高饲料转化率。β—受体激动剂对反刍动物的效果比单胃动物更为显著 ,可能是由于瘤胃微生物存在 β—受体 ,改善了蛋白质代谢。但应使用规范化 ,防止残留量超标 ,以利保证肉品卫生。初步研究表明 ,F89可提高动物采食量和养分消化量。上述三种生理调节剂都有良好的开发前景     

食品动物禁用的兽药及其它化合物清单

1．苯乙醇胺A（Phenylethan01amine A）：β-肾上腺素受体激动剂。 2．班布特罗（Bambuterol）：β-肾上腺素受体激动剂。 3．盐酸齐帕特罗（Zilpaterol Hydrochloride）：β-肾上腺素受体激动剂。     

猪食欲肽2受体突变体真核表达载体的构建及其对cAMP信号通路的影响

试验旨在构建猪食欲肽2受体（porcine orexin 2 receptor,pOX2R）突变体的真核表达载体,探究其野生型与突变体的基础药理学活性差异。以pcDNA3.1（+）-myc/pOX2R野生型质粒为模板,设计特异性引物单点突变构建4种突变体：pcDNA3.1（+）-myc/pOX2R-P10S、pcDNA3.1（+）-myc/pOX2R-P11T、pcDNA3.1（+）-myc/pOX2R-V308I和pcDNA3.1（+）-myc/pOX2R-T401I,将pcDNA3.1（+）-myc/pOX2R野生型和4种突变体分别瞬时转染HEK293T细胞,利用双荧光素酶报告基因检测法测定pOX2R野生型及突变体的基础活性,并检测不同浓度激动剂作用下细胞内cAMP水平,随后用内源性激动剂食欲肽A （OXA）及食欲肽B （OXB）分别对野生型及突变体进行刺激。结果显示,4个突变体构建成功,pOX2R的第10、11、308和401位氨基酸分别突变为丝氨酸、苏氨酸、异亮氨酸和缬氨酸。将pOX2R的野生型及4个突变体瞬时转染HEK293T细胞后,野生型与突变体的基础活性值无显著差异（P>0.05）,表明这4个位点的氨基酸突变对其受体的基础表达信号无显著影响。与野生型受体相比,突变型受体对激动剂OXB的响应无显著差异（P>0.05）,而突变体P10S、P11T和T401I对激动剂OXA的响应EC₅₀显著降低（P<0.05）,其R_max无显著差异（P>0.05）。推测第10、11和401位点的氨基酸突变可能影响了激动剂OXA与受体的结合,降低了激动剂的激动效应。本研究结果为进一步体外研究pOX2R的功能奠定了基础。     

β-受体激动剂药物残留检测方法研究进展

β-受体激动剂可提高动物的瘦肉率并降低动物养殖成本,但β-受体激动剂通过食物链进入人体后会严重危害人体健康,因此世界多国都禁止在养殖业中非法添加β-受体激动剂,而一些非法分子为了利益在养殖环节使用β-受体激动剂,因此,有必要建立快速、准确、灵敏的分析方法用于检测β-受体激动剂。目前常见的检测方法有液相色谱串联质谱法、气相色谱串联质谱法、电化学法、表面增强拉曼散射光谱法、化学发光法、免疫分析法等,文章对上述方法在检测β-受体激动剂中的应用进行了简要介绍,同时分析了这些方法的优缺点,并对今后β-受体激动剂残留检测的新技术进行了展望。可以预见,未来的发展方向可能会是可用于现场检测的可靠性更高、特异性更强的免疫试纸条分析与具有前处理方法简单、高度自动化等优点的液相色谱串联质谱法。     

α_2肾上腺素受体在中枢神经系统的药理学

α_2~-肾上腺素受体介导中枢神经和外周组织的各种生理机能。用激动或阻断这些受体的药物,引起各种器官和组织的复杂反应。α_2—肾上腺素受体激动剂在兽医上已广泛用于镇静和镇痛,也能加强麻醉药的作用和减少用量。还能在麻醉和手术中减轻交感神经—肾上腺对有害剌激的反应。最近的研究证明有不同的α_2—肾上腺素受体亚型,出现对受体亚型有选择作用的药物和更特异的治疗作用。     

意蜂蜂毒中游离氨基酸的分析

用薄层层析的方法对蜂毒中游离氨基酸进行定性和定量测定，发现有８种氨基酸（不含４种未知氨基酸），其中亮氨酸和谷氨酸的含量达０．３％左右，其余几种氨基酸的各自含量不超过０．１％。