浅谈3D打印对制造业的影响

本文讨论了3D打印技术的内在优势,并对当前对制造业产业发展过程中面临的挑战进行归纳和梳理,促进该行业取得健康长远的发展。     

不同培养液及不同培养时间对犬卵母细胞体外成熟的影响

试验采集犬卵巢,用切割法回收卵泡中的卵母细胞,选取胞质均匀、2层或2层以上颗粒细胞、直径≥110μm的卵母细胞移入不同的培养液中:(A)M199+10%FBS+0.5μg/mL FSH+10 IU/mL hCG,(B)M199+0.1%PVA进行体外成熟培养。在培养不同时间(0,48,72 h)用1%醋酸地衣红染色,在显微镜下观察卵母细胞核成熟情况,探索适宜犬卵母细胞体外成熟的培养体系。结果表明:卵母细胞在A液中培养48 h MII期比例(7.84%)高于B液中的比例(P<0.01);在培养72 h MII期比例也是A液中(8.00%)高于B液,虽然二者差异不显著(P>0.05),但72 h卵母细胞退化比例高于48 h(P<0.01)。因此培养液中添加FBS,FSH和hCG有利于犬卵母细胞体外成熟,且在此培养液中培养48 h为最佳成熟时间。     

不同外植体对马蹄金愈伤组织诱导及分化的影响

从不同外植体的生长时间、切取方式和光照条件诸因素探讨了对草坪地被植物马蹄金Dichondra repens愈伤组织诱导及分化的影响作用。结果表明：下胚轴和子叶的生长时间只对愈伤组织诱导的始愈时间和生长势有影响,生长期越短,则始愈时间缩短,愈伤组织生长势强,而对出愈率、愈伤组织状态和愈伤组织分化率无明显作用;光照和黑暗培养只对下胚轴诱导愈伤组织的生长状态有影响而对子叶诱导愈伤组织无作用;外植体的不同切取方式对愈伤组织诱导的始愈时间有影响,经切取后可缩短始愈时间;仅从完整子叶离体培养诱导愈伤组织获得了再生植株,其分化频率为13．9％～18．6％。     

崂山奶山羊胎儿骨髓间充质干细胞（BMSCs）的分离培养及成神经诱导分化

旨在建立崂山奶山羊胎儿骨髓间充质干细胞（BMSCs）体外分离培养方法,并研究其生物学特性和成神经分化的能力。取怀孕3个月的崂山奶山羊胎儿股骨,分离培养骨髓间充质干细胞,并进行传代培养,测定其细胞倍增时间,利用RT-PCR技术检测Oct4、Nanog、Sox2基因的表达;取P3 BMSCs分别向成神经细胞进行诱导分化,并从组织学水平和基因水平进行鉴定。结果表明,分离得到的胎儿骨髓间充质干细胞大小较为均匀,呈梭形的成纤维细胞样,可表达Oct4、Nanog、Sox2基因;传代接种后第4天进入指数生长期,第8天进入平台期,前10代BMSCs的平均倍增时间为29.7 h;P3 BMSCs成神经诱导后,尼氏体经甲苯胺蓝染色后可见紫蓝色,其特异性表达基因ENO2和GFAP表达呈阳性。获得的崂山奶山羊BMSCs具有成神经分化潜能。     

外源激素对紫穗狼尾草愈伤组织诱导及分化的影响

以紫穗狼尾草(Pennisetum alopecuroides)幼芽基部为外植体,研究了外源激素对其愈伤组织诱导及分化的影响,筛选适宜的激素种类及浓度配比,为狼尾草无性系抗性育种奠定基础。结果表明,2,4 D对愈伤组织诱导的作用最显著,生长素NAA和KT的作用相近,均以0.5~1.0 mg·L-1为宜;NAA对愈伤组织分化的作用较明显,以0.5~1.0 mg·L-1与3.0 mg·L-16 BA配合效果最佳,KT的作用不明显。最佳诱导培养基为MS+2,4 D 3.0 mg·L-1+NAA 1.0 mg·L-1 +KT 1.0 mg·L-1;最佳分化培养基为MS+NAA 0.5 mg·L-1 +6 BA 3.0 mg·L-1。     

成骨生长肽对体外培养奶牛成骨细胞增殖分化的影响

体外培养奶牛成骨细胞,用10-12,10-11,10-10,10-9和10-8mol/L成骨生长肽干预5 d后,噻唑蓝比色法(MTT)检测细胞增殖,紫外分光光度法检测细胞上清液中碱性磷酸酶(ALP)。结果显示:10-12~10-8mol/L的成骨生长肽均能促进成骨细胞的增殖,并且呈现剂量依赖方式,10-12mol/L试验组即可促进成骨细胞增殖,与对照组比较差异不显著(P>0.05),10-11~10-8mol/L试验组与对照组比较均有极显著差异(P<0.01),以10-10mol/L试验组差异最为显著;成骨生长肽对细胞上清液中ALP活性起抑制作用,其中在10-10mol/L时抑制作用最为显著(P<0.01)。结果表明成骨生长肽对体外培养奶牛成骨细胞增殖作用明显,对碱性磷酸酶起轻微抑制作用而且呈双向性。     

激素对调养是茅愈伤组织诱导及其分化的影响

用不同种类培养基及不同浓度2，4-D、BA对高羊茅种子进行愈伤诱导，结果表明：培养基种种类对愈伤诱导无明显效果；MS培养基下不同浓度2,4-D对高羊茅愈伤诱导时间及出愈率差别很大，以9mg/l效果最佳，愈伤诱导率达66.7%左右；过高浓度的2,4-D、BA对萌芽和愈伤的形成均有负作用；愈伤组织分化以MS BA2.0mg/l NAA0.5mg/l为佳。     

激素对高羊茅愈伤组织诱导及其分化的影响

用不同种类培养基及不同浓度2,4-D、BA对高羊茅种子进行愈伤诱导,结果表明培养基种类对愈伤诱导无明显效果;MS培养基下不同浓度2,4-D对高羊茅愈伤诱导时间及出愈率差别很大,以9mg/l效果最佳,愈伤诱导率达66.7%左右;过高浓度的2,4-D、BA对萌芽和愈伤的形成均有负作用;愈伤组织分化以MS+BA2.0mg/l+NAA0.5mg/l为佳.     

STAT3基因对广西黄牛肌肉干细胞成肌诱导分化的调控研究

研究旨在检测信号转导与转录激活因子3（STAT3）的表达规律,克隆STAT3基因,构建真核表达载体,并探索STAT3基因对广西黄牛肌肉干细胞（MuSCs）分化的调控作用。采集6、12、18月龄广西黄牛肌肉组织以及生长期（GM）和分化期（DM）肌肉干细胞,分别提取RNA并反转录为cDNA,通过实时荧光定量PCR检测STAT3基因和成肌相关基因的表达规律;克隆黄牛STAT3基因完整编码区序列,构建过表达载体pCD-STAT3并检测其对黄牛肌肉干细胞分化的影响。实时荧光定量PCR结果表明,STAT3基因在6、12、18月龄黄牛肌肉组织中均有表达,且在18月龄中表达量最高,12月龄中表达量最低;STAT3和成肌调节因子6（MYF6）基因在分化期肌肉干细胞中表达量均极显著高于生长期（P<0.01）。广西黄牛STAT3基因编码区全长2 313 bp,与空载体pCDNA3.1相连成功构建过表达载体pCD-STAT3,将pCD-STAT3转入体外培养广西黄牛肌肉干细胞,肌肉干细胞中STAT3基因及成肌决定蛋白（MyoD1）、骨骼肌肌球蛋白重链（MyHC）基因表达量极显著升高（P<0.01）,肌细胞生成素（MyoG）基因表达量显著升高（P<0.05）,且肌管数量、大小均显著高于pCDNA3.1组（P<0.05）。本研究检测了转录因子STAT3在广西黄牛背最长肌中的表达规律;且过表达STAT3基因显著促进了广西黄牛肌肉干细胞的成肌分化,为深入研究STAT3基因在肌肉生长发育中的作用及其分子调控机制奠定基础。     

抗生素对农杆菌的抑菌效果及对黄花苜蓿愈伤组织诱导和分化的影响

研究了不同浓度抗生素对农杆菌抑菌效果及对野生黄花苜蓿愈伤组织诱导和分化的影响。结果表明:氨苄青霉素(Amp)的抑菌效果优于头孢霉素(Cef);各个浓度下的Amp和Cef对愈伤组织的诱导与对照相比基本无显著差异;Amp浓度为100～300mg/L,Cef浓度为200～500mg/L时对不定芽的形成具有较好的促进作用。因此,在进行农杆菌介导黄花苜蓿遗传转化研究时,可选择Amp作为抑菌剂,最佳浓度为300mg/L;Kan和Hyg作为抗性愈伤选择剂,适宜的浓度分别为40～50mg/L和15～20mg/L。     

维生素D3对笼养育成蛋鸭生长性能及机体免疫的影响

试验选用体重相近的5周龄金定鸭150只,随机分为5个处理,每个处理6个重复,每个重复5只鸭,饲粮中添加的VD3水平分别为0、400、1 500、3000、5000IU/kg,研究不同水平VD3对笼养育成蛋鸭生长性能、血液指标及免疫功能的影响.结果表明:饲粮中添加VD3能显著提高育成期蛋鸭的日增重和饲料转化率(P<0.05);对钙磷、总蛋白、白蛋白影响均差异显著(P<0.05),对球蛋白含量影响不显著(JP0.05),但有升高的趋势;T4值显著降低(P<0.05),而T3/T4的值呈显著上升趋势(P<0.05);对脾脏指数、法氏囊指数影响差异不显著(P0.05),但均有所改善;对骨重指数影响差异显著(P<0.05),3000IU/kg组显著高于其它各组(P<0.05).综合试验结果表明,蛋鸭在笼养条件下育成阶段VD3的适宜添加量为1 500～3000 IU/kg.     

microRNA-124-3p对Th17细胞体外分化的影响分析

为探讨microRNA-124-3p(miR-124-3P)对Th17细胞体外分化的影响,本研究通过密度梯度离心获取小鼠脾脏单淋巴细胞悬液,运用免疫磁珠法分选幼稚T细胞,然后用腺病毒表达载体转染幼稚T细胞,介导miR-124-3P过表达和抑制表达,并设空白对照组,加入Th17细胞分化相关细胞因子,诱导幼稚T细胞向Th1...     

铜对体外仔猪软骨细胞增殖和自分泌IGF-、IGFBP_3的影响

体外分离、培养仔猪关节软骨细胞 ,然后在细胞培养液中分别添加 0、7.8、15 .6、31.2、6 2 .5 μm ol/ L 铜。结果表明 ,软骨细胞在 4种浓度的铜中可存活并增殖 ,而且能增加胰岛素样生长因子 (IGF- )、胰岛素样生长因子结合蛋白(IGFBP3 )的分泌量。但随铜浓度的增加 ,其存活率、增殖率、3 H- Td R掺入率及 IGF- 、IGFBP3 的分泌量有明显的差异。且以培养液中添加 31.2μmol/ L铜对软骨细胞的增殖作用最强 ,增殖率、3 H- Td R掺入数、IGF- 、IGFBP3 的分泌量显著高于对照组 (P <0 .0 1)。表明 31.2 μmol/ L 铜浓度是促进体外软骨细胞增殖和自分泌 IGF- 、IGFBP3 的最适浓度。     

钙对体外培养大鼠成骨细胞增殖分化及细胞周期的影响

在体外培养大鼠成骨细胞的过程中,添加不同剂量的钙(0、1、2、4 mmol/L),通过检测细胞周期、细胞增殖能力、碱性磷酸酶(ALP)活性及骨桥蛋白表达,探讨了钙对成骨细胞增殖分化及细胞周期的影响.结果表明,2、4 mmol/L钙组在1～8 d均显著或极显著地促进成骨细胞增殖(P<0.05或P<0.01),1 mmol/L钙组则在5、6、8 d有显著或极显著的差异(P<0.05或P<0.01);添加不同浓度的钙除1 mmol/L组第2天外的不同时间均极显著地抑制细胞内ALP活性(P<0.01);1 mmol/L钙能极显著的使成骨细胞滞留在S期(P<0.01);添加不同浓度的钙均能使G2期显著或极显著的增加(P<0.05或P<0.01),G1期极显著的下降(P<0.01),并能极显著地诱导细胞内骨桥蛋白的表达(P<0.01).表明添加不同浓度的钙均能抑制其早期分化,促进成骨细胞的增殖,使细胞滞留在S期或G2期,诱导细胞在基质成熟期分化,有利于细胞的钙化.     

骨碎补总黄酮对缺氧环境中犬骨髓间充质干细胞成骨分化潜能的影响

拟研究骨碎补总黄酮对缺氧环境中犬骨髓间充质干细胞(BMSCs)成骨分化潜能的影响.运用骨碎补总黄酮(TFDR)干预低氧浓度(10％)环境中犬BMSCs 4周后诱导成骨分化,倒置显微镜观察茜素红染色BMSCs钙结节形成,比色法检测碱性磷酸酶(ALP)活性水平,流式细胞术检测细胞线粒体膜电位,激光共聚焦显微镜和RT-PCR...     

荷斯坦奶牛乳腺干细胞的成神经诱导鉴定及催乳素对其增殖活性的影响

本研究旨在探究荷斯坦奶牛乳腺干细胞的多向分化潜能及催乳素对其增殖活性的影响。采用尼氏染色法对乳腺干细胞向神经细胞分化的情况进行鉴定,利用RT-PCR技术对诱导后的乳腺干细胞进行基因水平检测;MTT法检测催乳素对乳腺干细胞增殖活性的影响。结果表明:荷斯坦奶牛乳腺干细胞经成神经诱导后,细胞中有类似神经元的细胞出现,并且细胞周围出现许多微管样的结构,经尼氏染色呈阳性。诱导后神经细胞标记基因NSE和β-Tubulin Ⅲ呈阳性表达。催乳素刺激可促进乳腺干细胞的增殖,低浓度时乳腺干细胞的活力较好,且100ng·mL~(-1)为增殖最适浓度。     

不同浓度激素对狗牙根愈伤组织的诱导与分化的影响

以狗牙根成熟种子为外植体,以N6为基本培养基,研究不同浓度2,4 D和6 BA组合对狗牙根愈伤组织诱导与分化的影响。结果表明:(1)1mg/L的2,4 D对愈伤组织诱导有很大的促进作用;(2)种胚愈伤组织的诱导宜采用N6+1mg/L2,4 D+0.7mg/L6 BA的培养基;(3)愈伤组织的分化缓慢,1mg/L2,4 D+0.7mg/L6 BA培养基所产生的愈伤组织分化情况较好。     

颗粒细胞制备单层细胞时其浓度对牛早期胚胎体外发育的影响

应用颗粒细胞制备单层细胞时，将其浓度分为８组：６４×１０６、３２×１０６、１６×１０６、８×１０６、４×１０６、２×１０６、０．５×１０６、０个／ｍＬ，观察了不同浓度颗粒细胞对体外受精早期胚胎体外发育的影响。试验结果表明，制备单层细胞的适宜颗粒细胞浓度为（０．５～３２）×１０６个／ｍＬ，其中１６×１０６个／ｍＬ浓度组的囊胚率为４２．３±８．０％，明显高于对照组（２２．７±８．３％）及６４×１０６个／ｍＬ浓度组（２５．２±１２．Ｏ％）（Ｐ＜０．０１）。就发育速度和胚胎质量而言，该组胚胎的发育较快且质量较好，而且标准差反映批与批之间结果较为稳定，是理想的做单层浓度。