高铜对雏鸡肾脏组织结构及生化指标影响的研究

本研究旨在探讨高铜对雏鸡肾脏组织结构及生化指标的影响.360只1日龄艾维菌肉鸡随机分为6组,分别喂以对照日粮(Cu 10.89 mg·kg~(-1))和高铜日粮(Cu 100 mg·kg~(-1),高铜Ⅰ组;Cu 200 mg·kg~(-1)高铜Ⅱ组;Cu400 mg·kg~(-1),高铜Ⅲ组;Cu 600 mg·kg~(-1),高铜Ⅳ组,Cu 800 mg·kg~(-1),高铜Ⅴ组)6周.与对照组比较,高铜Ⅲ组、高铜Ⅳ组、高铜Ⅴ组雏鸡肾脏出现不同程度的病理损害,肾小管上皮细胞颗粒变性、空泡变性;超微结构观察,肾小管上皮细胞线粒体肿胀,嵴断裂,甚至溶解消失呈空泡状.同时,高铜Ⅲ组、高铜Ⅳ组、高铜Ⅴ组雏鸡肾脏及血清铜含量显著升高(P<0.01),肾脏铜锌超氧化物歧化酶(CuZn-SOD)活性显著降低(P<0.01),丙二醛(MDA)含量和羟自由基(·OH)含量显著升高(P<0.01).结果表明,日粮铜含量400 mg·kg~(-1)及其以上可引起雏鸡肾脏组织的病理损伤以及肾脏抗氧化功能的降低,导致肾脏功能降低.     

高铜诱导肉鸡心肌氧化损伤和内质网应激

探讨高铜对肉鸡心肌氧化损伤和内质网应激的影响,将48羽1日龄白羽肉鸡随机平均分为4组,分别饲喂对照日粮(Cu 11 mg/kg,对照组)和高铜日粮(Cu 110 mg/kg,高铜I组;Cu 220 mg/kg,高铜Ⅱ组;Cu 330 mg/kg,高铜Ⅲ组)。49日龄时进行心脏采集,制备切片观察心脏组织病理学变化,检测心肌总抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶(SOD)活性、过氧化氢酶(CAT)活性、谷胱甘肽还原酶(GR)活性及丙二醛(MDA)含量的变化,实时荧光定量PCR检测内质网应激相关基因GRP78、GRP94、eIF2α、ATF6、XBP1、CHOP的mRNA转录水平,Western blot检测GRP78蛋白表达水平。结果显示,与对照组相比,高铜组心肌纤维间隙增宽;随着日粮中铜含量的增加,心脏组织中T-AOC、SOD、CAT和GR活力下降,MDA含量显著升高(P0.05),GRP78、GRP94、eIF2α、ATF6、XBP1和CHOP mRNA表达量升高,GRP78蛋白表达显著上调(P0.05)。结果表明,高铜可以诱导心肌氧化损伤和内质网应激。     

不同来源日粮铜水平对肉鸡肝线粒体H_2O_2 生成变化的研究

本研究旨在探讨不同来源日粮铜水平对肉鸡肝线粒体H_2O_2生成变化的影响.选用硫酸铜、蛋氨酸铜作为源铜,每种源铜均设4个浓度梯度.288只1日龄科宝商品代肉鸡随机分为8组,每组36只,分别喂以对照日粮(Cu 11 mg·kg~(-1),Ⅰ组)和高铜日粮(Cu 110 mg·kg~(-1),Ⅱ组;Cu 220 mg·kg~(-1),Ⅲ组;Cu 330 mg·kg~(-1),Ⅳ组)60 d,并于12、36和60日龄取样,观察肉鸡肝线粒体H_2O_2生成速率变化.结果:与对照组相比,2种来源的高铜Ⅱ组、Ⅲ组和Ⅳ组肉鸡肝线粒体H_2O_2生成速率显著加快(P＜0.05或P＜0.01);试验第36和60天时,蛋氨酸铜各组肉鸡肝线粒体过氧化氢生成速率均高于相应的硫酸铜各组(P＜0.05或P＜0.01),并且,高铜日粮饲喂的肉鸡肝线粒体H_2O_2生成部位主要集中在线粒体呼吸链复合体Ⅳ.结果表明:高铜日粮可诱导肝脏的氧化应激损伤;同剂量的有机铜螯合物比无机铜更易加快肝脏线粒体H_2O_2生成速率,并可推测,线粒体呼吸链复合体Ⅳ是机体在高铜刺激下攻击的靶部位之一.     

高铜对雏鸡脑组织一氧化氦含量和一氧化氮合酶活性的影响

1日龄艾维菌肉鸡健雏360羽,随机分为6组,分别喂以对照组日粮(10.89 mg/kg Cu)和高铜日粮(100 mg/kg Cu,高铜Ⅰ组;200 mg/kg Cu,高铜Ⅱ组;400 mg/kg Cu,高铜Ⅲ组;600 mg/kg Cu,高铜Ⅳ组;800 mg/kg Cu,高铜Ⅴ组)6周,观察高铜对雏鸡脑组织和血清一氧化氮(N0)含量及一氧化氮合酶(NOS)活性变化的影响,探讨高铜对雏鸡脑组织的损伤机理.高铜Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ组脑组织和血清NO的含量较对照组显著或极显著升高(P<0.05或P<0.01).NOS的活性随日粮铜含量的升高而升高,各高铜组脑组织NOS的活性较对照组极显著升高(P<0.01);高铜Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ组血清NOS的活性较对照组显著或极显著升高(P<0.05或P<0.01).日粮铜水平在200 mg/kg及以上时,脑组织和血清NO的含量和NOS的活性随日粮铜的含量升高而升高,脑组织因氧化而受损.     

高铜诱导肉鸡肝脏差异表达的microRNA分析

为了研究高铜(Cu)对肉鸡肝脏microRNA(miRNA)表达的影响,试验选用1日龄健康白羽肉鸡96羽,随机分为2组,每组48羽,并分别饲喂对照日粮(Cu 11 mg/kg,对照组)和高铜日粮(Cu 330 mg/kg,高铜组),于49日龄采集肝脏,利用高通量测序技术观察高铜日粮对肉鸡肝脏miRNA表达量的影响,利用生物信息学方法对36个miRNA的靶基因进行功能分析和信号通路分析。结果表明:与对照组相比,高铜组肝脏有36个miRNA发生差异表达,其中18个miRNA为上调表达,18个miRNA为下调表达;靶基因主要行使细胞代谢、基因表达等功能,参与RNA转运、DNA复制及MAPK、胰岛素和钙等信号通路。说明高铜可影响肉鸡肝脏miRNA的表达。     

日粮高铜对雏鸡血清免疫球蛋白含量的影响

选用1日龄艾维茵肉鸡健雏420只,随机分为7组,分别喂以对照日粮(Cu11mg/kg)和高铜日粮(Cu100mg/kg,高铜Ⅰ组;Cu200mg/kg,高铜Ⅱ组;Cu300mg/kg,高铜Ⅲ组;Cu400mg/kg,高铜Ⅳ组;Cu500mg/kg,高铜Ⅴ组;Cu600mg/kg,高铜Ⅵ组)6周。结果显示,高铜Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组雏鸡血清免疫球蛋白含量与对照组比较差异不显著(P>0.05);高铜Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ组雏鸡血清免疫球蛋白含量显著降低(P<0.05或P<0.01),并与日粮含铜量呈负相关。结果表明,日粮铜含量在400mg/kg及其以上可抑制免疫球蛋白的合成,导致雏鸡体液免疫功能受损。     

高铜对雏鸭法氏囊的影响

选用1日龄天府肉鸭360只,随机分为6组,分别喂以对照日粮(Cu 8 mg/kg)和高铜日粮(Cu 100 mg/kg为高铜Ⅰ组,Cu 200 mg/kg为高铜Ⅱ组.Cu 400 mg/kg为高铜Ⅲ组.Cu 600 mg/kg为高铜Ⅳ组,Cu 800 mg/kg为高铜Ⅴ组)6周.与对照组比较,高铜Ⅲ组、高铜Ⅳ组、高铜Ⅴ组雏鸭法氏囊出现不同程度的病变,生长指数显著降低(P<0.05或P<0.01),淋巴细胞的静止期增长及增殖指数明显下降(P<0.05或P<0.01),淋巴细胞的调亡率显著升高(P<0.05或P<0.01);高铜Ⅰ组和高铜Ⅱ组雏鸭法氏囊上述指标变化不明显.结果表明,日粮铜含量高于400 mg/kg时,程度不同地抑制了雏鸭法氏囊的发育,可能导致雏鸭体液免疫功能受损.     

高铜对雏鸡肾脏细胞凋亡和周期的影响

360只1日龄艾维茵肉鸡随机分为6组,分别喂以对照日粮(Cu 10.89 mg/kg)和高铜日粮(Cu 100 mg/kg,高铜Ⅰ组;Cu 200 mg/kg,高铜Ⅱ组,Cu 400 mg/kg,高铜Ⅲ组;Cu 600 mg/kg,高铜Ⅳ组;Cu 800 mg/kg,高铜Ⅴ组)6周,用流式细胞术研究高铜对雏鸡肾脏细胞凋亡和周期的影响.结果表明,肾脏细胞的调亡比例随日粮铜水平的升高而升高,当日粮铜水平达到400 mg/kg以上时,肾脏细胞凋亡百分率与对照组比较差异极显著(P<0.01).日粮铜水平达到400 mg/kg以上时,肾脏静止期(G0/G1)细胞显著增加,增殖期(S,G2+M)细胞显著减少.     

高铜对雏鸭法氏囊形态影响的研究

本文旨在研究高铜对雏鸭法氏囊形态的影响。选用1日龄天府肉鸭360只,随机分为6组,分别喂以对照日粮(Cu8mg/kg)和高铜日粮(Cu100mg/kg,高铜Ⅰ组;Cu200mg/kg,高铜Ⅱ组;Cu400mg/kg,高铜Ⅲ组;Cu600mg/kg,高铜Ⅳ组;Cu800mg/kg,高铜Ⅴ组)6周。结果:与对照组相比,高铜Ⅲ组、高铜Ⅳ组、高铜Ⅴ组雏鸭法氏囊均出现了不同程度的病理损伤。     

高铜对雏鸭肾脏影响的病理学观察

360只1日龄天府肉鸭随机分为6组,分别喂以对照日粮(Cu 8 mg/kg)和高铜日粮(Cu 100 mg/kg,高铜Ⅰ组;Cu 200 mg/kg,高铜Ⅱ组;Cu 400 mg/kg,高铜Ⅲ组;Cu 600 mg/kg,高铜Ⅳ组;Cu 800 mg/kg,高铜V组),试验期6周.与对照组比较,高铜Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组雏鸭肾脏出现不同程度的病理损害,肾小管上皮细胞颗粒变性、空泡变性;超微结构观察,肾小管上皮细胞线粒体肿胀,嵴断裂甚至溶解消失呈空泡状.同时,高铜Ⅳ、Ⅴ组肾脏铜含量、血清铜含量和血清肌酐含量,均显著高于对照组(P<0.05或P<0.01).结果表明,日粮铜含量400～800 mg/kg即可引起雏鸭肾脏的病理损伤,功能降低.     

高铜对雏鸡外周血T-淋巴细胞ANAE阳性率的影响

选用1日龄艾维菌健康肉鸡420只,随机分为7组,分别喂以对照日粮(Cu 11 mg/kg)和高铜日粮(Cu 100mg/kg),高铜Ⅰ组,Cu 200 mg/kg,高铜Ⅱ组;Cu 300 mg/kg,高铜Ⅲ组;Cu 400 mg/kg,高铜Ⅳ组,Cu 500 mg/kg,高铜Ⅴ组;Cu 600 mg/kg,高铜Ⅵ组)6周,观察日粮铜添加水平对雏鸡外周血T-淋巴细胞ANAE阳性率的影响.与对照组比较,高铜Ⅰ、Ⅱ组雏鸡外周血T-淋巴细胞ANAE阳性率增加,但差异不显著;高铜Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ组雏鸡外周血T-淋巴细胞ANAE阳性率降低,且与日粮含铜量呈负相关,同时胸腺淋巴细胞减少,凋亡细胞比例增高.结果表明,与对照组比较,日粮铜含量100～200 mg/kg对雏鸡外周血中T-淋巴细胞ANAE阳性率有促进作用,但差异不显著;日粮铜含量300～600 mg/kg程度不同地降低了T-淋巴细胞ANAE阳性率,细胞免疫功能受损.     

高铜对雏鸡脑组织抗氧化酶活性的影响

本研究旨在探讨高铜对雏鸡脑组织抗氧化酶活性的影响。将360羽1日龄艾维茵肉鸡健雏随机分为6组,分别喂以对照日粮(10.89 mg.kg-1)和高铜日粮(Cu 100 mg.kg-1,高铜I组;Cu 200 mg.kg-1,高铜Ⅱ组;Cu 400 mg.kg-1,高铜Ⅲ组;Cu 600 mg.kg-1,高铜Ⅳ组;Cu 800 mg.kg-1,高铜V组)6周。试验第14、28、42天每组随机抽取5羽鸡剖杀后,测定脑组织胆碱酯酶(CHE)、单胺氧化酶(MAO)、过氧化氢酶(CAT)、铜锌超氧化物歧化酶(Cu-Zn-SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性。脑组织CHE和CAT活性随日粮铜含量的升高而降低,高铜Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ和V组与对照组比较差异极显著(P0.01);脑组织MAO活性随日粮铜含量的升高而升高,高铜Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ和V组与对照组比较差异显著或极显著(P0.05或P0.01);脑组织Cu-Zn-SOD和GSH-Px活性,高铜I、Ⅱ组显著或极显著高于对照组(P0.05或P0.01),高铜Ⅲ、Ⅳ和V组极显著降低(P0.01)。日粮铜水平在400~800 mg.kg-1时,脑组织的抗氧化酶活性降低,脑组织的抗氧化功能下降。     

高铜对雏鸡脑组织氧化状态的影响

1日龄艾维茵肉鸡健雏360羽,随机均分为6组,分别喂以对照日粮(10.89 mg/kg)和高铜日粮(Cu 100 mg/kg,高铜Ⅰ组;Cu 200 mg/kg,高铜Ⅱ组;Cu 400 mg/kg,高铜Ⅲ组;Cu 600 mg/kg,高铜Ⅳ组;Cu 800 mg/kg,高铜Ⅴ组)6周,观察高铜对脑组织氧化状态的影响.高铜Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ组脑组织MDA含量升高,与对照组比较差异显著或极显著(P<0.05或P<0.01);脑组织铜-锌-超氧化物歧化酶(Cu-Zn-SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性,高铜Ⅰ、Ⅱ组显著或极显著高于对照组(P<0.05或P<0.01),高铜Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ组较对照组极显著降低(P<0.01);高铜Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ组脑组织羟自由基活性升高,与对照组比较差异显著或极显著(P<0.05或P<0.01).同时,血清的MDA含量及Cu-Zn-SOD和GSH-Px的活性变化与脑组织一致.结果表明,日粮铜水平在400 mg/kg及以上时,脑组织的抗氧化功能受损.     

高铜对雏鸭外周血T-淋巴细胞及血清IL-2含量的影响

将1日龄天府肉鸭健雏360只随机分为6组,分别喂以对照日粮(Cu 8 mg/kg)和高铜日粮(Cu 100 mg/kg,高铜Ⅰ组;Cu 200 mg/kg,高铜Ⅱ组;Cu 400 mg/kg,高铜Ⅲ组;Cu 600 mg/kg,高铜Ⅳ组;Cu 800 mg/kg,高铜Ⅴ组)6周.与对照组比较,高铜Ⅱ组雏鸭外周血T淋巴细胞非特异性酯酶(Nonspecific acid esterase,ANAE)阳性率及血清IL-2含量不同程度的升高(P＜0.05或P＜0.01),高铜Ⅲ,Ⅳ和Ⅴ组外周血T淋巴细胞ANAE阳性率及血清IL-2含量降低(P＜0.05或P＜0.01).结果表明,日粮中铜含量400 mg/kg及其以上时,显著降低外周血T淋巴细胞ANAE阳性率及血清IL-2含量,雏鸭细胞免疫功能受损.     

高铜对大鼠脾脏NFκB信号通路及相关炎性因子表达的影响

24只大鼠随机分为对照组(Cu 15 mg/kg)、高铜Ⅰ组(Cu 30 mg/kg)和高铜Ⅱ组(Cu 60 mg/kg)并饲喂不同含量的碱式氯化铜日粮。饲喂24周后采集脾脏组织,制作组织切片观察其病理变化,实时荧光定量PCR方法检测NFκB及其相关炎性因子(TNF-α、IL-6、IL-1β、IL-2和IL-10)mRNA转录水平,免疫印迹检测NFκB、phos-NFκB和IL-1β的蛋白表达水平。结果显示,与对照组相比,高铜Ⅱ组中NFκB、TNF-α、IL-6、IL-2、IL-1βmRNA相对表达量和NFκB、phos-NFκB、IL-1β蛋白相对表达量显著升高(P0.05),而IL-10 mRNA相对表达量则显著下降(P0.05)。结果表明,高铜可诱导大鼠脾脏NFκB信号通路及其相关炎性因子的表达。     

高铜对肉鸡肾脏线粒体抗氧化功能的影响

本文旨在了解高铜对肉鸡肾脏线粒体抗氧化功能的影响.选用1日龄科宝肉仔鸡120只,随机分成4组,分别喂以对照日粮(Cu 11 mg/kg,对照组)和高铜日粮(Cu 110 mg/kg,高铜Ⅰ组;Cu 220 mg/kg,高铜Ⅱ组;Cu 330 mg/kg,高铜Ⅲ组),检测梯度剂量硫酸铜在不同的饲喂时间(12日龄、24日龄、36日龄、48日龄、60日龄)肉鸡肾脏线粒体超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、丙二醛(MDA)的指标.结果显示:高铜Ⅱ组与高铜Ⅲ组SOD、GSH-PX、MDA都呈现代偿性升高,然后有降低的趋势.提示日粮中铜浓度达到220 mg/kg时,肾脏线粒体功能紊乱.     

高铜对雏鸭胸腺形态的影响研究

为探索高铜对雏鸭胸腺形态的影响,选用1日龄天府肉鸭360只,随机分为6组,分别喂以对照日粮（Cu8mg／kg）和高铜日粮（Cu100mg／kg,高铜Ⅰ组;Cu200mg／kg,高铜Ⅱ组;Cu400mg／kg,高铜Ⅲ组;Cu600mg／kg,高铜Ⅳ组;Cu800mg／kg,高铜V组）6周。结果表明：与对照组比较,高铜Ⅲ组...     

日粮高铜对雏鸡法氏囊影响的研究

本试验旨在研究高铜对雏鸡法氏囊的影响。选用1日龄艾维茵肉鸡健雏420只,随机分为7组,分别喂以对照日粮（Cu 11 mg/kg）和高铜日粮（Cu 100 mg/kg,高铜Ⅰ组;Cu 200 mg/kg,高铜Ⅱ组;Cu 300 mg/kg,高铜Ⅲ组;Cu 400 mg/kg,高铜Ⅳ组;Cu 500 mg/kg,高铜Ⅴ组;Cu 600 mg/kg,高铜Ⅵ组）6周。结果表明：（1）高铜Ⅰ、Ⅱ组雏鸡法氏囊组织学变化与对照组比较不明显,高铜Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ组雏鸡法氏囊组织结构呈不同程度的病变;（2）高铜Ⅰ、Ⅱ组雏鸡法氏囊质量、生长指数与对照组比较均增高（P〉0.05）,高铜Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ组雏鸡法氏囊质量、生长指数均不同程度地降低;（3）高铜Ⅰ、Ⅱ组雏鸡法氏囊细胞周期中增殖指数（PI）在试验期间均高于对照组（P〉0.05）,高铜Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ组雏鸡法氏囊细胞周期中增殖指数（PI）不同程度地降低;（4）各高铜组雏鸡法氏囊细胞凋亡率在试验期间与对照组比较均增高,与日粮含铜量呈正相关,其中高铜Ⅰ、Ⅱ组与对照组比较差异均不显著（P〉0.05）。由本试验可见,日粮铜含量在11-200 mg/kg能够促进雏鸡法氏囊的发育,而高于300 mg/kg时不同程度地抑制了雏鸡法氏囊的发育,导致雏鸡体液免疫功能受损。     

高铜对雏鸭抗氧化酶活性的影响

360只1日龄天府肉鸭随机分为6组,分别喂以对照日粮(Cu 8 mg/kg)和高铜日粮(Ⅰ组Cu 100 mg/kg;Ⅱ组Cu 200 mg/kg;Ⅲ组Cu 400 mg/kg;Ⅳ组Cu 600 mg/kg;Ⅴ组Cu 800 mg/kg),试验期6周.与对照组比较,高铜Ⅳ组和Ⅴ组血清铜锌SOD、CP活性、肝脏铜锌SOD、GSH-Px活性降低(P<0.01);高铜Ⅲ组、Ⅳ、Ⅴ组肝脏黄嘌呤氧化酶、单胺氧化酶含量显著升高(P<0.01);高铜Ⅰ、Ⅱ组血清铜锌SOD、CP活性、肝脏铜锌SOD、GSH-Px活性升高(P<0.01).结果表明,日粮铜水平达400 mg/kg及以上时可引起血清和肝脏抗氧化酶活性降低,使机体抗氧化功能受损.     

高铜对雏鸡肝细胞周期和凋亡影响的研究

420只1日龄艾维菌肉鸡随机分为7组，分别喂以对照日粮（Cu 11mg／kg）和高铜日粮（Cu 100mg／kg，高铜Ⅰ组；Cu 200mg／kg，高铜Ⅱ组；Cu 300mg／kg，高铜Ⅲ组；Cu 400mg／kg，高铜Ⅳ组；Cu 500mg／kg，高铜Ⅴ组；Cu 600mg／kg，高铜Ⅵ组）6周，以流式细胞术和原位末端标记法（TUNEL）研究了高铜对雏鸡肝细胞周期和凋亡的影响。结果表明，日粮铜水平达到300mg／kg以上时，肝细胞DNA直方图出现位于G1峰之前的亚G1峰（又叫AP峰），凋亡细胞比例与对照组比较差异显著（P〈0．05）。TUNEL法检测，肝脏组织切片中出现被染成黄褐色的凋亡细胞，且检出率随日粮铜水平的升高而升高。日粮铜水平达到400mg／kg以上时，肝细胞增殖分化受阻。