浓缩型兽用双黄连口服液的急性毒性及亚慢性毒性试验

[目的]评价浓缩型兽用双黄连口服液的用药安全性,为其临床用药提供参考依据.[方法]以昆明系小鼠为试验对象,通过开展浓缩型兽用双黄连口服液的急性毒性及亚慢性毒性试验,确定其临床应用的主要毒性作用及毒性作用靶器官.其中,急性毒性试验设20.00、10.00、5.00、2.50和1.25 g/kg 5个剂量组,试验开始当天在24 h内分2~3次对小鼠进行灌胃给药;最大耐受量试验用药剂量为240.00 g/kg,试验开始当天在24 h内分2次对小鼠进行灌胃给药,每次0.80 mL/只;亚慢性毒性试验设每天灌服0.16、0.08和0.04 mL/只3个剂量组,连续灌胃给药28 d.[结果]急性毒性试验小鼠灌胃给药后30 min内精神萎靡,安静,呼吸变慢,但30 min后恢复正常,未出现中毒症状和死亡现象,未能测出半数致死量(LD50).小鼠对浓缩型兽用双黄连口服液的最大耐受量大于240.00 g/kg.亚慢性毒性试验期间,各用药组小鼠的体重、脏器(肝脏、脾脏和肾脏)指数和血清学指标(谷丙转氨酶、谷草转氨酶、尿素氮和肌酐含量)与空白对照组相比均无显著差异(P>0.05);病理组织切片观察发现,仅高剂量组小鼠的肝脏有损伤,肝细胞有点状坏死灶,肝细胞索凌乱,细胞界限模糊不清,细胞核着色减弱,其他脏器组织切片均无异常变化.[结论]浓缩型兽用双黄连口服液对小鼠无急性毒性作用,长期连续用药也无亚慢性毒性作用,安全性较高.     

小鼠实验性小花棘豆中毒的病理学观察

将40只小鼠随机分为4组,即对照组、试验Ⅰ组、试验Ⅱ组和试验Ⅲ组,3个试验组分别按照每千克体重1、5、10 g的剂量饲喂小花棘豆,63 d后采集小鼠心、肾、肝、脾、肺、脑等组织器官进行病理组织学检查,并计算脏器系数。结果显示,小花棘豆中毒可导致小鼠肝脏系数、肾脏系数和肺脏系数增大,脑系数、心脏系数和脾脏系数降低,部分组间差异显著或极显著(P0.05或P0.01);镜检发现小花棘豆中毒小鼠大脑、小脑、肾脏、肝脏、脾脏等组织细胞空泡变性,部分神经细胞肿胀,胞浆空泡化,且HE染色变淡。结果表明,小花棘豆中毒对小鼠组织器官有显著影响,并呈现出一定的时间和剂量效应关系,小花棘豆中毒可引起机体组织器官广泛性的病理损伤。     

内毒素对妊娠小鼠子宫内巨噬细胞的影响

研究了内毒素对妊娠小鼠子宫内巨噬细胞的数量和分布的影响,以探讨巨噬细胞对胚胎的着床和维持的作用。采用昆明系妊娠小鼠分为对照组和试验组,在小鼠妊娠6 d(D_6)对照组腹腔注射生理盐水,试验组分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组,分别注射1、2、4μg剂量的内毒素,用酶组织化学染色的方法显示出子宫内巨噬细胞的数量和分布。结果显示,与对照组相比较,试验Ⅰ、Ⅲ组子宫内巨噬细胞的数量明显增多,差异极显著,而试验Ⅱ组与对照组没有显著差异。巨噬细胞在子宫环肌外层、环肌内层和内膜上的分布与对照组相比较,环肌外层巨噬细胞数量减少,而环肌内层和内膜的巨噬细胞数量明显增多,差异显著。提示内毒素使妊娠小鼠子宫内巨噬细胞数量增多,细胞向子宫内膜迁移,而不利于胚胎着床和维持,可能对母胎免疫耐受产生影响。     

苦马豆素对小鼠肝脏抗氧化功能的影响

[目的]探讨苦马豆素对小鼠肝脏抗氧化功能的影响,进一步揭示苦马豆素的毒性作用机理.[方法]将64只昆明种小鼠随机分为对照组、试验Ⅰ组、试验Ⅱ组和试验Ⅲ组,将小花棘豆全草粉碎后,按Ⅰ组添加15;(含苦马豆素30 mg/kg)、Ⅱ组添加30;(含苦马豆素60 mg/kg)、Ⅲ组添加45;(含苦马豆素90 mg/kg)的比例制作颗粒饲料,饲喂至典型中毒症状出现.攻毒第14、28、42、63 d每次每组随机采集4只小鼠的肝脏,检测SOD、GSH-Px、CAT、NOS活性及MDA、NEFA、·OH、NO和Glu含量的变化.[结果]与正常对照相比,试验组小鼠肝脏SOD、GSH-Px、CAT等抗氧化物酶的活性极显著下降(P＜0.01),MDA、NEFA、·OH、NO含量极显著上升(P＜0.01),Glu含量极显著下降(P＜0.01).[结论]苦马豆素对小鼠肝脏抗氧化功能有显著影响,而且具有一定的时间和剂量效应关系,长期低剂量摄入苦马豆素可引起小鼠不同程度的肝损伤.     

复方党参口服液对小鼠免疫功能的影响

为探讨复方党参口服液对小鼠免疫功能的影响,将40只健康昆明系小鼠随机分成对照组、低剂量组、中剂量组和高剂量组,每组10只,分别灌服生理盐水,口服液浓度为0.5,1.0,1.5 g/ml,各0.1 ml/只.d。试验10 d后,测定小鼠脾脏系数、胸腺系数和体增重(试验第11 d时与0 d时小鼠体重的差值),并进行脾脏的组织形态学观察;测定各组小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬功能以及红细胞免疫功能。结果表明,复方党参口服液可显著增加小鼠脾脏系数,升高小鼠腹腔巨噬细胞吞噬百分率和吞噬指数。初步证明复方党参口服液对正常小鼠的免疫功能有较强的促进和调节作用。     

复方桑黄口服液粗多糖对小鼠免疫功能的影响（英文）

研究复方桑黄口服液粗多糖对小鼠免疫功能的影响。从小鼠碳廓清实验、小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验(半体内法)、脏器与体重比值、小鼠自然杀伤(NK)细胞活性测定(乳酸脱氢酶测定法)等四个方面进行研究。结果表明:复方桑黄口服液的高剂量组(40 ml/kg)能明显增强小鼠碳廓清能力,中(20 ml/kg)、高剂量组能明显增强小鼠巨噬细胞吞噬鸡红细胞的吞噬百分率和吞噬指数,低(10 ml/kg)、中、高剂量组能明显增强小鼠NK细胞活力功能。这表明复方桑黄口服液具有增强单核-巨噬细胞功能、增强NK细胞活力功能,复方桑黄口服液具有增强免疫功能的作用,可显著提高机体特异性和非特异性免疫功能。     

豆类丝核菌次级代谢产物对化疗骨髓抑制小鼠的保护作用

【目的】探讨豆类丝核菌次级代谢产物对环磷酰胺所致小鼠骨髓抑制的保护作用及其作用机制。【方法】将昆明种小白鼠60只均分为6组:Ⅰ组(正常对照组)、Ⅱ组(CTX模型对照组)、Ⅲ组(苦马豆素(SW)低剂量组)、Ⅳ组(SW中剂量组)、Ⅴ组(SW高剂量组)、Ⅵ组(SW16 mg/kg)。Ⅰ、Ⅱ组灌胃生理盐水,Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ组分别灌胃浓度为8,16,32,16 mg/kg的SW液,剂量皆为0.4 mL/d,共10次;末次灌胃6 h后,Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组腹腔注射环磷酰胺(CTX)80 mg/kg,每天1次,连续3 d,末次注射后24 h,眼眶采血并处死小鼠,测定血常规、脾脏指数、脾集落形成单位(CFU-S)、骨髓有核细胞(BMC)数及骨髓细胞增殖试验,研究豆类丝核菌次级代谢产物对小鼠骨髓造血功能的影响。【结果】腹腔注射CTX80 mg/kg连续3次,可致小鼠骨髓抑制。豆类丝核菌次级代谢产物(SW剂量为16mg/kg)可较好抑制CTX引起的白细胞数(WBC)、红细胞数(RBC)、血红蛋白含量(HgB)、骨髓有核细胞数(BMC)减少;各剂量的SW能明显增加CFU-S数,其中以SW16 mg/kg效果最佳。当SW为8 mg/kg时,能很好地刺激骨髓细胞增殖。【结论】豆类丝核菌次级代谢产物对环磷酰胺所致小鼠骨髓抑制有较好的保护作用,其机制可能是通过刺激骨髓细胞增殖,增加BMC数和髓外造血来实现。     

双黄连纳米乳口服液对枫叶鸭免疫功能的影响

将120羽1日龄枫叶鸭分成3组(Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组),Ⅰ组、Ⅱ组分别在日常饮水中加入双黄连纳米乳口服液1.0、0.5 mL/L,Ⅲ组为对照组。结果显示,Ⅰ组、Ⅱ组与Ⅲ组相比,胸腺指数分别提高13.89%(P0.05)、10.19%(P0.05),脾指数分别提高10.43%(P0.05)、3.48%(P0.05),法氏囊指数分别提高19.84%(P0.05)、12.70%(P0.05);DVH中和抗体分别提高19.51%(P0.05)、14.63%(P0.05);H_5亚型禽流感Re-6血凝抑制抗体分别提高23.90%(P0.05)、16.98%(P0.05),H_5亚型禽流感Re-8血凝抑制抗体分别提高23.39%(P0.05)、13.51%(P0.05)。结果表明,双黄连纳米乳口服液能够显著提高枫叶鸭免疫功能。     

玉米幼芽提取物对小鼠皮肤成纤维细胞体外抗氧化能力的影响

分离培养小鼠皮肤成纤维细胞,将传代细胞均匀分成4组:Ⅰ组为空白对照组;Ⅱ组在培养体系中加入终浓度为200μm o l/L的H2O2作用2 h,复制氧化损伤模型;Ⅲ组和Ⅳ组分别用含20 m g/L的0501和0502号玉米幼芽提取物培养液培养24 h,然后再用Ⅱ组的处理方法对细胞进行氧化损伤,研究玉米幼芽提取物对皮肤成纤维细胞体外抗氧化效应的影响。结果表明,Ⅲ组和Ⅳ组细胞凋亡率极显著低于Ⅱ组(P<0.01);扫描电镜下Ⅱ组细胞的细胞膜出现皱缩穿孔等现象,Ⅲ组和Ⅳ组细胞完整性较好,细胞联系紧密;透射电镜观察,Ⅱ组细胞粗面内质网扩张,染色质边集,细胞内出现大量空泡,Ⅲ组和Ⅳ组细胞结构清晰,出现轻度的粗面内质网扩张。表明富含腺嘌呤类衍生物的玉米幼芽提取物对体外培养的小鼠皮肤成纤维细胞具有抗凋亡保护作用,在细胞氧化损伤过程中,对细胞膜蛋白和结构性蛋白有保护作用。     

慢性饮酒对小鼠卵巢功能及其对eCG反应性的影响

为研究酒精对哺乳动物卵巢的生殖毒性作用,利用未成熟雌性小鼠进行了酒精的生殖毒性研究。试验选用24只21日龄断奶未成熟小鼠,随机均分为3组,试验组Ⅰ自由饮用啤酒,试验组Ⅱ饮用稀释的白酒（含体积分数为5％的乙醇）,对照组饮用自来水。试验期间检查阴道开张日龄;试验5周后每组分别取4只小鼠用乙醚麻醉后测定体重、卵巢、子宫等指标;同时观察卵巢和肝脏的组织学形态;剩余12只小鼠用孕马血清促性腺激素（eCG）处理,48h后进行麻醉、称重和组织学观察。结果表明：试验组Ⅰ和Ⅱ小鼠阴道开张日龄显著推迟;eCG处理前试验组Ⅰ和Ⅱ小鼠卵巢和子宫质量与对照组相比显著增加;eCG处理后试验组Ⅰ卵巢质量与对照组相似,但试验组Ⅱ卵巢质量显著低于对照组和试验组Ⅰ,子宫与卵巢呈相似的变化;在肝脏组织形态学上也体现出了酒精的毒性作用。由此可见,慢性饮酒抑制了小鼠卵巢功能,并且对eCG反应性显著降低,表明慢性饮酒对卵巢和肝脏均有直接的毒害作用。     

玉米幼芽提取物对小鼠皮肤成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型前胶原mRNA表达的影响

分离培养小鼠皮肤成纤维细胞,用2种富含腺嘌呤类衍生物的玉米幼芽提取物(20 mg/L)提前保护细胞后,体外构建H2O2急性氧化损伤细胞模型,应用RT-PCR对小鼠皮肤成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型前胶原mRNA的表达进行半定量检测。结果表明,损伤对照组(Ⅱ组)小鼠皮肤成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型前胶原mRNA的表达量分别为空白对照组(I组)的24%(P<0.01)和20%(P<0.01),而药物保护组(Ⅲ组、Ⅳ组)小鼠皮肤成纤维细胞Ⅰ型前胶原mRNA的表达量均高于损伤对照组,分别是损伤对照组的3.5倍(P<0.01)和1.8倍,Ⅲ型前胶原mRNA的表达量也均高于损伤对照组,分别是损伤对照组的4.6倍(P<0.01)和3倍(P<0.01)。说明在H2O2致小鼠皮肤成纤维细胞急性氧化损伤过程中,这2种玉米幼芽提取物能够保护Ⅰ、Ⅲ型前胶原mRNA的表达,且0501提取物对小鼠皮肤成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型前胶原表达的保护作用优于0502提取物。     

三种中药复方制剂对雏鸡免疫器官发育及免疫功能的影响

为了探究中药复方对雏鸡免疫功能及免疫器官发育的影响.试验以黄芪、白术、防风、黄芩和五倍子等单味中药组成3种中药复方制剂,将120只1日龄健康雏鸡分为4组(Ⅰ组,"扶正止泄散",未加玉屏风散基础复方组;Ⅱ组,"扶正止泄散"复方组;Ⅲ组,"芪术扶正汤"复方组;Ⅳ组,对照,不加喂药),分别于42、52和62日龄对试验组和对照组鸡进行检测,测定T淋巴细胞、鸡γ-干扰素、抗体效价和免疫器官指数等免疫指标,同时制作组织切片、HE染色,观察其对雏鸡内脏器官发育的影响.结果表明:试验组T淋巴细胞ANAE阳性率、抗体效价和γ-IFN水平显著升高(P0.01),Ⅰ、Ⅱ组优于Ⅲ组;免疫器官指数和血细胞数量显著高于对照组(P0.01或P0.05),Ⅱ组优于Ⅰ组;镜下观察组织切片,各器官结构良好无明显病变.3种中药复方对雏鸡免疫功能具有正向促进作用,增强机体细胞及体液免疫功能,其中Ⅱ组具有明显优势.     

内毒素对肝脏Caspase-3蛋白表达的影响及阳离子A的保护效应

为研究内毒素(ET)致大鼠肝细胞凋亡变化、对肝脏Caspase-3蛋白表达的影响及阳离子A(CA)的保护效应.将试验动物随机分为3组:对照组(Ⅰ组)、ET组(Ⅱ组)和CA保护组(Ⅲ组).3组动物经相应处理后分别在3、4、8、12 h采集肝脏检测肝细胞凋亡情况和Caspase-3蛋白的表达情况.结果表明,肝细胞凋亡与Caspase-3蛋白的表达成正相关的关系.ET可上调Caspase-3蛋白在肝脏的表达,诱导肝细胞凋亡,最终导致肝脏受损;而CA则能明显下调Caspase-3在肝脏的表达,抑制肝细胞凋亡,对由ET诱导的肝损伤具有显著的保护效应.     

饮水硼对固始鸡中枢免疫器官发育的影响

【目的】研究饮水硼对固始鸡胸腺和法式囊质量、器官指数及组织结构发育的影响,为硼在畜禽养殖业中的正确使用提供理论论据。【方法】将240羽1 d固始鸡随机分为对照组和试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组,饮水中硼质量浓度分别为0,100,200和400 mg/L,试验期6周。每周末每组取鸡10羽解剖,取胸腺和法氏囊,称质量,常规石蜡切片制作,HE染色、显微观察与摄影。【结果】(1)试验Ⅰ组4~6周固始鸡胸腺器官指数显著高于对照组(P<0.05);试验Ⅲ组胸腺和法氏囊质量及器官指数显著或极显著低于同周龄对照组(P<0.05或P<0.01)。(2)试验Ⅰ组1~2周胸腺和法氏囊组织结构轻微退化,3~6周逐渐恢复并表现较明显的促进作用。试验Ⅱ组器官组织结构变化与试验Ⅰ组相似,但早期退化更为明显,且后期恢复较为缓慢。试验Ⅲ组1~2周胸腺和法氏囊组织结构退化严重,实质因淋巴细胞急剧减少而明显萎缩或急剧退化。【结论】100 mg/L硼对固始鸡中枢免疫器官早期发育有轻微抑制作用,但可明显促进其后期发育;高剂量硼(硼质量浓度≥200 mg/L)对固始鸡中枢免疫器官的发育(尤其是早期发育)有明显抑制甚至毒性作用。     

赶黄草总黄酮对小鼠肝损伤的保护作用

为研究赶黄草总黄酮对脂多糖(LPS)诱发的肝损伤的保护作用,将50只昆明种小鼠随机分为空白组、模型组、联苯双酯阳性对照组及赶黄草总黄酮高、低剂量组,每组10只。赶黄草总黄酮高、低剂量组分别按照10 mg/kg、2 mg/kg的剂量灌服;联苯双酯阳性对照组按照5 mg/kg的剂量灌服;空白组和模型组分别灌胃等容积的生理盐水。连续给药14 d,观察小鼠生长状况,末次给药之后2 h,空白组尾静脉注射生理盐水2 m L/kg,其余各组尾静脉注射5 mg/kg LPS,12 h后眼球取血处死小鼠,测定小鼠血清中谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)活性以及肝匀浆中的超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量。同时将肝脏进行HE染色,观察小鼠肝脏组织病理学变化。结果显示,赶黄草总黄酮对小鼠生长有抑制作用。与模型组比较,赶黄草总黄酮高、低剂量组血清中ALT活性分别降低26.53%(P0.01)、16.74%(P0.05),AST活性分别降低12.50%(P0.05)、9.88%(P0.05),SOD活性分别升高26.46%(P0.05)、21.77%(P0.05),MDA含量分别降低48.73%(P0.05)、59.80%(P0.01);小鼠肝脏指数分别降低10.36%(P0.05)、3.80%(P0.05);赶黄草总黄酮各剂量组肝组织病变程度明显减轻。以上结果表明,赶黄草总黄酮对LPS诱导的小鼠肝损伤有保护作用。     

普洱茶多糖增强免疫功能研究

将健康昆明种小鼠30只[重量(23±1 g)],随机分成3组(10只/组,雌雄各半):对照组(Ⅰ组)、普洱茶多糖水溶液处理组(Ⅱ组)、普洱茶水浸液处理组(Ⅲ组),连续饲喂14 d,检测其淋巴细胞转化率、E玫瑰花环形成率和脾脏重量.试验结果:淋巴细胞转化率,Ⅰ组(75.69 ±0.48)％,Ⅱ组(90.31 ±0.90)％,Ⅲ组(82.51 ±0.92)％；E玫瑰花环形成率,Ⅰ组(14.4±0.3)％,Ⅱ组(47.7±0.9)％,Ⅲ组(29.5±0.4)％；脾脏重量,Ⅰ组(0.0789±0.0025)g,Ⅱ组(0.142 1 ±0.008 9)g,Ⅲ组(0.097 7 ±0.005 0)g.表明普洱茶多糖能提高小鼠淋巴细胞转化率和E花环形成率,说明茶叶多糖具有一定的增强免疫功能作用.     

沙冬青种子总黄酮对小鼠免疫器官淋巴细胞活性的影响

[目的]探索沙冬青种子总黄酮对小鼠免疫器官淋巴细胞活性的影响.[方法]将50只试验小鼠随机分为空白组、免疫抑制组、黄酮Ⅰ组、黄酮Ⅱ组及黄酮Ⅲ组,每组10只,灌胃给药.试验28 d后,分别测定脏器指数(胸腺、脾脏)并采集样品进一步采用石蜡包埋切片和染色技术、免疫组织化学分析技术等,探讨胸腺、脾脏中淋巴细胞活性的变化.[结...     

坦布苏病毒E蛋白结构域Ⅰ/Ⅱ蛋白免疫保护效果

为了探讨原核表达的坦布苏病毒E蛋白结构域Ⅰ/Ⅱ蛋白对于坦布苏病毒感染的免疫保护作用,利用IPTG诱导重组大肠杆菌表达坦布苏病毒E蛋白结构域Ⅰ/Ⅱ蛋白,Anti-FLAG M2 Affinity Gel纯化后进行SDS-PAGE和Western blot鉴定。经SDS-PAGE和Western blot鉴定,纯化后坦布苏病毒E蛋白结构域Ⅰ/Ⅱ蛋白仅有单一目的条带。免疫组小鼠血清ELISA效价均达4.67±0.11(lg10)。攻毒保护试验结果表明,免疫组小鼠体质量在攻毒9 d后高于对照组,荧光定量RT-PCR检测结果显示,攻毒后免疫组小鼠脑、肝脏、脾脏组织中坦布苏病毒核酸含量均低于对照组。表明使用原核表达的坦布苏病毒E蛋白结构域Ⅰ/Ⅱ蛋白免疫可诱导产生高水平抗体,并提供良好的免疫保护力,为开发有效的坦布苏病毒亚单位疫苗提供依据。     

不同植物蛋白水平的代乳粉对羔羊胸腺和脾脏组织器官的影响

为了研究不同植物蛋白水平的代乳粉对羔羊脾脏和胸腺器官的影响,试验选取体质健壮、体重接近、刚出生的关中奶山羊羔羊45只,将45只羔羊随机分成3组(Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组),每组3个重复,每个重复5只羔羊。Ⅰ组饲喂植物蛋白水平为65%代乳粉、Ⅱ组饲喂植物蛋白水平为75%代乳粉、Ⅲ组饲喂植物蛋白水平为85%代乳粉。试验期为60d。结果表明:Ⅰ组和Ⅱ组胸腺指数、脾脏指数均显著高于Ⅲ组(P0.05);Ⅰ组和Ⅱ组皮质厚度均显著高于Ⅲ组(P0.05),各组间胸腺皮质细胞个数差异不显著(P0.05);脾脏中央小动脉周围淋巴鞘的淋巴细胞数各组间差异不显著(P0.05)。说明用植物蛋白水平为75%的代乳粉替代羊奶对羔羊脾脏和胸腺器官影响较小且饲喂成本较低。     

钼对鸡肝肾组织形态学的影响

为研究钼对鸡肝肾组织形态学的影响,选取80只健康2w龄雏公鸡,随机分为5组,每组16只。通过在饮水中添加不同剂量的钼酸钠(以钼离子计),建立试验动物模型:对照组(钼:0mg.L-1)、钼Ⅰ组(钼:12.5mg.L-1)、钼Ⅱ组(钼:25.0mg.L-1)、钼Ⅲ组(钼:50.0mg.L-1)、钼Ⅳ组(钼:100.0mg.L-1)。分别在试验处理第10w,采集鸡的肝脏和肾脏,固定包埋处理后,制得切片,经HE染色分析,用显微镜观察鸡肝肾组织形态学变化。肾脏和肝脏的组织形态学观测结果显示:加钼的各组与对照组相比,细胞数量增多,且有浓染,出现坏死现象,细胞核皱缩加剧,有少量充血。试验低剂量(钼Ⅰ组、钼Ⅱ组)下的钼导致鸡肝肾组织发生不明显的病理形态学变化,而高剂量组(钼Ⅲ组、钼Ⅳ组)发生明显的病理形态学变化。