东北矮紫杉细胞悬浮培养的研究

对东北矮紫杉进行了愈伤组织的诱导,并建立了细胞悬浮培养系.研究表明,茎、叶均可诱导出愈伤组织,愈伤组织诱导培养基以MS＋2,4-D 1.0 mg/L＋NAA 1.0 mg/L＋KT 0.1 mg/L为佳,愈伤组织继代培养基以B5＋2,4-D 2.0 mg/L＋KT 0.1 mg/L为佳.以嫩枝为外植体,愈伤组织的诱导率较高、状态较好,且较适于悬浮培养.悬浮培养的接种量2.0 g/瓶为最佳密度,细胞生长周期为20 d,对数生长期为10~16 d,细胞收获期为16 d.试验中还发现,聚乙烯吡咯烷酮是东北矮紫杉组培中解除培养物褐化的较好抗氧化剂,使用浓度为1mg/L.     

激素对东北矮紫杉愈伤组织中紫杉醇积累的影响

为了利用植物生长调节剂组合促进东北矮紫杉愈伤组织生长和紫杉醇的积累,以东北矮紫杉幼茎为材料诱导愈伤组织,分析不同种类和水平植物生长调节剂条件下愈伤组织的增殖速度和紫杉醇含量.结果表明,东北矮紫杉愈伤组织在24 d的培养过程中基本呈"S"型;细胞生长对数期,紫杉醇积累下降或上升缓慢,进入生长稳定期,紫杉醇的含量达到最高值.适宜浓度的2,4-D和NAA均能促进东北矮紫杉细胞的生长,以1.5 mg/L 2,4-D组合最有利于东北矮紫杉愈伤组织的增值;6-BA组合有利于紫杉醇积累,其平均含量在100 μg·g-1之上.因此,利用植物生长调节剂促进东北矮紫杉愈伤组织生长及紫杉醇的积累是可行的.     

东北矮紫杉细胞悬浮培养中褐化问题的研究(英文)

[目的]研究东北矮紫杉悬浮培养细胞褐化现象,为紫衫细胞悬浮培养提供指导方法。[方法]以东北矮紫杉愈伤组织为试验材料,探讨不同培养基、N/P 比、pH、培养转速、光照及强度等因素对矮紫杉细胞悬浮培养褐化的影响。[结果]将无褐化的愈伤组织转接到pH7.0的2MB5培养基中,于22℃、1500lx光强、90r/min 转速的条件下光照培养24h,细胞褐化现象能得到明显抑制。[结论]该研究结果为紫衫细胞悬浮培养奠定了基础,对于大规模工业化生产紫杉醇具有重要意义。     

东北矮紫杉细胞悬浮培养中褐化问题的研究

[目的]研究东北矮紫杉悬浮培养细胞褐化现象,为紫衫细胞悬浮培养提供指导方法。[方法]以东北矮紫杉愈伤组织为试验材料,探讨不同培养基、N/P比、pH、培养转速、光照及强度等因素对矮紫杉细胞悬浮培养褐化的影响。[结果]将无褐化的愈伤组织转接到pH 7.0的2mB5培养基中,于22℃、1 500 lx光强、90 r/min转速的条件下光照培养24 h,细胞褐化现象能得到明显抑制。[结论]该研究结果为紫衫细胞悬浮培养奠定了基础,对于大规模工业化生产紫杉醇具有重要意义。     

东北红豆杉（Taxus cuspidata）细胞悬浮培养研究

用东北红豆杉的愈伤组织建立细胞悬浮系。培养研究发现，最适宜细胞生产的培养基仍为Ｂ５，最佳接种量应控制在２ｇ鲜重／瓶左右。在培养基中添加酷蛋白水解物经水解乳蛋白更利于悬浮细胞生物量的增加。培养基的ｐＨ值随细胞的培养周期而有相应的变化。     

曼地亚红豆杉细胞悬浮培养体系的建立

【目的】建立曼地亚红豆杉的愈伤组织细胞悬浮培养体系,为紫杉醇生产提供参考。【方法】以曼地亚红豆杉幼茎诱导的愈伤组织为材料,以B5培养基为基本培养基,利用单因素试验或正交试验,研究愈伤组织接种量、蔗糖质量浓度、激素类型及配比和防褐化试剂对曼地亚红豆杉细胞生长的影响。【结果】曼地亚红豆杉细胞悬浮培养的最佳培养基和培养条件为:B5+2,4-D 0.6mg/L+NAA 0.8mg/L+KT 1.0mg/L+柠檬酸220mg/L+PVP350mg/L+水解乳蛋白450mg/L+蔗糖30g/L(pH=5.8),接种量0.1g/mL,在培养箱中110r/min、25℃暗培养。【结论】曼地亚红豆杉愈伤组织细胞在所建立的培养体系中经过多次继代后,生长状况良好,表明该细胞悬浮体系比较稳定,可以用于大规模培养红豆杉细胞。     

栝楼细胞悬浮系的建立

[目的]为了解决栝楼悬浮细胞系在继代培养中容易退化,生长速度减慢的问题。[方法]以栝楼的茎为外植体诱导出愈伤组织,筛选出质地疏松、生长迅速、易于分散、可以长期进行继代培养的淡黄色半透明状愈伤组织系,将该愈伤组织接种在液体培养基中进行振荡悬浮培养,建立起分散程度好的栝楼悬浮细胞系。同时对影响愈伤组织的诱导及细胞悬浮培养的条件进行研究,确定适合愈伤组织生长的条件及影响细胞悬浮培养的主要因素。[结果]看护培养可以使栝楼悬浮培养细胞长势良好,并在低密度下获得由单细胞形成的细胞系。[结论]该悬浮系的建立为栝楼细胞大规模培养,进而实现有效药物成分的工业化生产奠定了理论基础。     

高粱茎尖和幼穗细胞悬浮系的建立

建立有效可靠的细胞悬浮培养方法对进一步开展原生质体培养和转基因研究具有重要意义。本研究以茎尖和幼穗作为外植体,采用愈伤振荡培养法、匀浆收集培养法和直接培养法三种方法进行了细胞悬浮系建立的方法研究。结果表明:与茎尖相比,幼穗是更适宜开展高粱细胞悬浮培养的理性外植体。采用三种培养方法均可建立幼穗细胞悬浮系,其中幼穗愈伤振荡培养法最为稳定可靠,幼穗匀浆收集培养法和直接培养法的稳定性稍差,但获得的细胞悬浮系生长状态较好,有利于进一步开展增殖继代培养。结果还表明,茎尖愈伤振荡培养法也是一种稳定可靠的细胞悬浮系制备方法,但茎尖匀浆收集培养法稳定性稍差,而直接培养法效果最差不宜采用。     

丰花月季愈伤组织的诱导及细胞悬浮培养

分别以丰花月季叶片、叶柄和茎段为外植体诱导出愈伤组织,并建立细胞悬浮系。结果表明,丰花月季叶片和茎段是诱导愈伤组织和进行细胞悬浮培养的理想外植体;诱导松散型愈伤组织的最佳激素浓度配比是NAA 4 mg·L-1+2,4-D 1 mg.L-1+BA 1 mg.L-1;细胞悬浮培养细胞最佳起始密度为1.5×104～3.0×104个.mL-1时;继代培养4～5代时,可得到稳定的悬浮细胞系。     

香蕉胚性愈伤组织的诱导及胚性细胞悬浮系的建立

分别以3个香蕉品种的多芽体茎尖和5个香蕉品种的未成熟雄花为外植体,诱导产生胚性愈伤组织．结果分别从2个基因组类型为AAA的品种的多芽体茎尖和未成熟雄花获得了胚性愈伤组织,而未能从基因组类型为AAB或ABB的香蕉品种中获得胚性愈伤组织．胚性愈伤组织的诱导率受基因组类型、品种和培养条件等因素的影响．以上述4个品种的胚性愈伤组织为起始材料成功建立了胚性细胞悬浮系,不同香蕉品种,从其胚性愈伤组织建立胚性细胞悬浮系的难易程度有所不同．     

三色堇无土栽培技术

采用3种营养液（MS、园试配方、霍格氏配方）对三色堇进行无土栽培试验.在营养生长期,喷施园试营养液三色堇株高生长较快,叶片数量较多,其次是MS营养液,霍格氏缓慢;霍格氏营养液促进三色堇功能叶长度和宽度生长效果好,其次是MS营养液,园试营养液最短;喷施园试配方营养液的三色堇嫩叶和功能叶中叶绿素含量较高,霍格氏配方处理的三色堇老叶中叶绿素含量较高,说明园试配方更适宜三色堇的无土栽培.     

紫叶小檗的栽培与应用

紫叶小檗（F．atropurpurea），小檗科小檗属，园林色相树种，春天开黄花，秋季缀红果，叶色常年多变，花、果、叶观赏性具佳，用于都市绿化和盆景栽培。紫叶小檗种子有较强的后熟作用，须进行低温沉积才能获得较好发芽率；“冬藏春插”的成活率可提高到70％以上；冬、春、秋均可进行分株繁殖。栽培上应加强幼苗期、成苗期管理，修剪应依据小苗生长及成枝特性，注意病虫害的防治。     

变异油麦菜组织培养及无性系建立的研究

以具有有利变异性状的油麦菜嫩茎的腋芽为材料,研究其组织培养及无性系建立.结果证明:诱导变异油麦菜腋芽生长的理想培养基是1/2MS BA0.2 mg·L-1 IAA0.2 mg·L-1;变异油麦菜不定芽分化培养的理想培养基是MS BA0.2 mg·L-1 NAA 0.2 mg·L-1;变异油麦菜不定芽生根培养的理想培养基是1/3MS IAA0.4～0.8 mg·L-1;采用生根继代方法每年可繁殖出3.514.6个后代,所建立的无性系优良变异性状保持不变.     

白花丹参的组织培养和植株再生

[目的]通过植物组织培养技术快速大量繁殖白花丹参优良品系,深度开发利用这一药用植物资源。[方法]以白花丹参的幼嫩叶片和叶柄作为外植体,接种至器官发生分化培养基上诱导丛生芽,然后作壮苗培养,继而生根培养,建立一套快速再生体系。[结果]在Ms＋6-BA2．0mg／L＋NAA1．0mg／L和MS＋6-BA2．0mg／L＋NAA0．5mg／L培养基上均能诱导分化大量丛生芽,然后转接至Ms＋KT1．5mg／L＋NAA0．2mg／L继代培养基上做继代、壮苗培养,消除玻璃化现象。选取健壮芽苗转接至1／2MS4-IBA0．2mg／I~培养基上生根培养．待试管苗上长出数条2cm长的健壮根系时即可炼苗移栽,成活率在90％以上。[结论]建立了一套完整的白花丹参组培再生体系。     

四倍体盾叶薯蓣实生苗的诱导及快速繁殖研究

盾叶薯蓣(D.zingiberensisC.H.Wright)是我国特有的药用植物,根茎所含薯蓣皂苷元为合成甾体激素类药物的主要原料。采用秋水仙碱溶液诱导盾叶薯蓣种子,种子经诱导出芽率明显下降;出芽后所得实生苗采用根尖染色体、花药壁细胞染色体和花粉母细胞染色体计数相结合的方法进行突变体的检测,突破了根尖染色体计数试验的取材限制;经诱导得到了盾叶薯蓣同源四倍体及非整倍实生苗;四倍体单株小孢子母细胞减数分裂行为正常,纺锤丝可见。试验还对四倍体盾叶薯蓣组织培养丛生芽诱导和生根培养基进行了优选。     

冬青苦丁茶树组织培养的研究

以冬青苦丁茶树的幼嫩枝梢为材料进行组织培养,结果表明:外植体在MT+BA 1 mg/L+2,4-D 0.05 mg/L培养基培养,腋芽萌发最快,萌发率最高;随着外植体木质化程度的增加,褐变率降低,腋芽萌动时间缩短,萌动率提高;5、8、10月份取材的外植体,萌动率5月8月10月,腋芽萌动时间则相反;MT+BA 0.5 mg/L+NAA 0.2 mg/L培养基能使试管小苗茎段快速增殖;试管苗在1/2MT+NAA 0.2 mg/L+IBA 0.2 mg/L培养基上短时间培养后,蛭石上扦插发根,较容易移栽成活.     

纯种柔嫩艾美耳球虫的分离培养

用琼脂滴稀释法,对4株柔嫩艾美耳球虫进行单卵囊分离,每株各感染5日龄罗曼公雏5只,结果感染成功率分别为60%,40%,20%,20%,总的成功率为35%,能基本满足后续试验的需要。     

甘蓝型油菜与紫罗兰融合体培养的影响因素研究

对影响甘蓝型油菜与紫罗兰下胚轴原生质体融合后的融合体培养因素进行了研究。结果表明:采用液体浅层培养,以改良的KM8p为培养基附加2,4-D1.5 mg/L,NAA0.5 mg/L,6-BA0.5 ml/L,以蔗糖0.3 mol/L和葡萄糖0.1 mol/L作渗透稳定剂进行培养效果最好;原生质体培养3～6 d,细胞发生第1次分裂,第7天时分裂频率最高为13.8%;35天后形成大量的细胞团和肉眼可见的小愈伤组织,其植板率最高为6.5%。     

孜然芹子叶愈伤组织诱导及继代培养研究

探讨孜然芹种子表面消毒的适宜方法,以孜然芹无菌苗子叶为外植体,研究最适宜愈伤组织诱导及继代培养的激素种类及浓度.结果表明:孜然芹种子经70;酒精10 s+0.1;升汞50 s,20 d萌发率可达97.70;,污染率11.11;;子叶切段在光照时间16 h/d,MS+2,4-D 2 mg/L的愈伤组织诱导启动培养基中,30 d愈伤诱导率达100;, 继代培养在MS+NAA 0.5 mg/L+6-BA 0.2 mg/L培养基中光照16 h/d培养20 d,愈伤组织增殖率达67;,愈伤组织在同种继代培养基中暗培养20 d,增殖率达80;.     

中国水仙的离体培养及植株再生

 将中国水仙鳞茎接种于不同浓度的MS培养基上,实验结果表明MS+6-BA 3.0 mg/L+NAA 0.01 mg/L对小鳞茎的分化效果最好;带鳞茎盘的鳞茎片最容易分化;最佳的生根培养基为1/2 MS+NAA 0.1 mg/L+IBA 0.03 mg/L+AC 0.3%.该实验为中国水仙的繁殖生产提供一定的技术参考。