上海地区苜蓿附生乳酸菌中优良菌株的筛选和鉴定

研究旨在筛选和鉴定适用于低可溶性糖含量的牧草青贮中的优良乳酸菌。将上海地区35个苜蓿样品中分离得到的67株乳酸菌进行抑菌活性检测和产酸性能的测定,分离菌株在葡萄糖浓度为0.5%的MRS液体培养基中进行发酵试验,并对发酵苜蓿粉的性能进行检测,从中筛选出优良乳酸菌。通过生理生化试验和16S r RNA序列分析对筛选优良乳酸菌进行鉴定。发现其中ZZU A95、ZZU A101、ZZU A104和ZZU A105菌株的抑菌活性较强、产酸速率较快,能于24 h内将培养基p H值降至4.0以下。筛选出的优良乳酸菌ZZU A95在低可溶性糖条件下发酵产酸性能较好,被鉴定为戊糖片球菌(Pediococcus pentosaceus)。研究表明,菌株ZZU A95在低可溶性糖含量的牧草青贮中具有潜在的应用价值。     

苜蓿粉发酵用乳酸菌的筛选及特性研究

为筛选调制优质动物苜蓿青贮饲料的优良乳酸菌,本试验以从郑州地区9个苜蓿样品中分离得到的乳酸菌为试验材料,经抗菌活性、生长特性及产酸特性筛选菌株,根据16S r DNA序列,结合生理生化特征进行菌种鉴定,并通过发酵苜蓿粉考察菌株的发酵特性。结果表明,从分离的19株乳酸菌中筛选到4株具有高抗菌活性的菌株,其中菌株ZZU 457和ZZU 466在MRS液体培养基中生长及产酸性能较好,均能够耐受6.5%的盐浓度环境;菌株ZZU 457耐受10~45℃,以及p H为3.5的环境,而菌株ZZU 466能够耐受5~50℃,以及p H为4.0的环境;苜蓿粉发酵结果表明接种ZZU 457或ZZU 466在发酵18 h内均能快速产酸,其中接种ZZU 466的苜蓿粉发酵36 h时p H值达到4.2;结合理化特征及16S r RNA序列分析结果,ZZU 466被鉴定为融合魏斯氏菌。优良菌株ZZU 466在苜蓿青贮饲料调制加工中具有潜在的应用价值。     

Lactobacillus plantarum A491的筛选及其在苜蓿青贮中的应用研究

为筛选适合苜蓿青贮用乳酸菌,本研究对64株苜蓿附生乳酸菌进行多糖利用能力的考察,结果显示有5株乳酸菌能较好利用葡聚糖和木聚糖产酸,进一步的抑菌活性试验筛选出对李斯特氏菌、大肠杆菌和沙门氏菌都有较好抑菌活性的菌株A491。通过生理生化试验、16S r RNA基因序列分析及rec A基因扩增试验将筛选菌株A491鉴定为植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)。将菌株A491进行苜蓿青贮应用研究,青贮95 d后,与自然青贮和添加商业添加剂的处理组相比,添加菌株A491处理组的乳酸含量较高(P0.05),而p H较低(4.62)(P0.05),有害菌较少,发酵品质较好。表明菌株A491在苜蓿青贮中具有潜在的应用价值。     

苜蓿青贮乳酸菌的筛选及其对苜蓿青贮发酵的影响

为获得苜蓿青贮用乳酸菌,本研究从苜蓿附生乳酸菌中通过抑菌活性、酸化苜蓿粉及结构性糖代谢中间产物的性能指标筛选优良菌株,并研究其对苜蓿(Medicago sativa)青贮发酵的影响。结果表明,1)筛选到抑菌活性较高、酸化苜蓿粉及结构性糖代谢中间产物综合性能较好的菌株ZZU A341,被鉴定为植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum);2)青贮90 d,添加该菌株的处理组pH、氨态氮含量低于添加商业菌株(YX)的处理组,显著低于自然青贮(P <0.05)。综上所述,使用该筛选方法获得的优良乳酸菌可有效改善苜蓿发酵品质。     

乳酸菌对苜蓿青贮发酵品质和细菌菌群的影响

为探究乳酸菌作为青贮添加剂对苜蓿青贮发酵品质和细菌菌群的影响,试验选取萎焉苜蓿为原料分为三个处理组,分别为无添加剂对照组(CK组)和分别添加1×106cfu/g乳酸菌YX(LPI组)、乳酸菌ZZU A341(LPA组)。结果表明:LPI或LPA组乳酸积累量显著高于CK组(P<0.05),pH和氨态氮含量显著低于CK组(P<0.05),且pH均降至5.00以下;CK组或LPI组的优势菌属为Pediococcus属(56.40%、98.63%),LPA组为Lactobacillus属(98.88%)。综上所述,乳酸菌作为青贮添加剂可通过调控青贮环境中细菌菌群的组成或相对丰度,从而提高青贮苜蓿的发酵品质。     

苜蓿与玉米秸秆混贮研究

以二茬苜蓿和玉米秸秆为原料,研究乳酸菌制剂、纤维素分解酶制剂、绿汁发酵液、乳酸菌制剂和纤维素分解酶及绿汁发酵液和纤维素分解酶的复合添加对苜蓿与玉米秸秆混合青贮品质的影响。结果表明,苜蓿与玉米秸混贮可以提高青贮保存性能;苜蓿与玉米秸各混贮比例处理均获得良好效果;在苜蓿、玉米秸混贮中使用添加剂可以进一步提高青贮品质;各处理均显著降低了丁酸含量(P＜0.05),同时pH值均小于或接近于4.2,与对照组相比差异显著(P＜0.05); 乳酸菌制剂+纤维素分解酶处理组效果最好,在3个混贮组中,该处理的V-Score青贮质量评价均得到了良好的等级;添加纤维素分解酶使NDF含量显著下降,平均下降了3.77%(P＜0.05);7∶3混贮组中添加纤维素酶制剂显著提高了青贮饲料的CP含量(P＜0.05),提高了6.0%。     

添加剂对籽粒苋与豆粕混合青贮品质的影响

为了评价不同添加剂对籽粒苋与豆粕混合青贮品质的影响,在72%籽粒苋与28%豆粕混合青贮中分别添加糖蜜、乳酸菌、纤维素复合酶、糖蜜+乳酸菌、糖蜜+纤维素复合酶、乳酸菌+纤维素复合酶、糖蜜+乳酸菌+纤维素复合酶;以等量水为空白对照组,青贮30 d后进行开包取样并分析各项指标。结果表明,添加糖蜜、糖蜜+乳酸菌、糖蜜+纤维素复合酶或糖蜜+乳酸菌+纤维素复合酶处理组均较对照改善了籽粒苋与豆粕混合青贮的发酵品质和营养品质,显著降低了pH值、干物质损失率、洗涤纤维和酸性洗涤木质素含量,显著提高了可溶性碳水化合物含量和相对饲用价值(P0.05)。乳酸菌、纤维素复合酶及乳酸菌+纤维素复合酶处理组pH值、洗涤纤维和酸性洗涤木质素含量均显著高于对照(P0.05)。综合评价,建议籽粒苋与豆粕混合青贮时添加糖蜜或复合添加糖蜜与乳酸菌或纤维素复合酶。     

添加剂对籽粒苋与豆粕混合青贮品质的影响

为了评价不同添加剂对籽粒苋与豆粕混合青贮品质的影响,在72%籽粒苋与28%豆粕混合青贮中分别添加糖蜜、乳酸菌、纤维素复合酶、糖蜜+乳酸菌、糖蜜+纤维素复合酶、乳酸菌+纤维素复合酶、糖蜜+乳酸菌+纤维素复合酶;以等量水为空白对照组,青贮30 d后进行开包取样并分析各项指标。结果表明,添加糖蜜、糖蜜+乳酸菌、糖蜜+纤维素复合酶或糖蜜+乳酸菌+纤维素复合酶处理组均较对照改善了籽粒苋与豆粕混合青贮的发酵品质和营养品质,显著降低了pH值、干物质损失率、洗涤纤维和酸性洗涤木质素含量,显著提高了可溶性碳水化合物含量和相对饲用价值(P<0.05)。乳酸菌、纤维素复合酶及乳酸菌+纤维素复合酶处理组pH值、洗涤纤维和酸性洗涤木质素含量均显著高于对照(P<0.05)。综合评价,建议籽粒苋与豆粕混合青贮时添加糖蜜或复合添加糖蜜与乳酸菌或纤维素复合酶。     

利用葡聚糖或木聚糖乳酸菌的筛选及特性研究

筛选分解利用葡聚糖或木聚糖的乳酸菌作为饲料作物青贮添加剂。从30株供试乳酸菌中筛选能够利用葡聚糖或木聚糖产酸的菌株。通过抑菌活性、生长情况、碳源发酵及利用饲料作物粉产酸试验研究菌株的特性,结合形态学特征和16S rRNA序列分析鉴定菌种。筛选得到1株利用葡聚糖及木聚糖产酸效果较好的乳酸菌ZZU 360;该菌株对G+及G-细菌均具有较好的抑菌活性,在45和50℃及pH 3.5、4.0和4.5环境条件下生长较好,能够耐受6.5%盐溶液,利用碳源种类比较广泛,对40%干物质的苜蓿粉、饲料桑粉及饲料槐粉均具有较好的酸化作用,菌株ZZU 360被鉴定为戊糖片球菌。该菌株在可溶性糖短缺的饲料作物青贮中具有潜在的应用价值。     

不同处理方式的苜蓿青贮饲料对放养蛋鸡生产性能和蛋品质的影响

本试验旨在研究不同处理方式的苜蓿青贮饲料对放养蛋鸡生产性能和蛋品质的影响。试验选用360只海兰褐壳蛋鸡,随机分为6个处理。对照组日粮为不添加青贮苜蓿的基础日粮,试验组在基础日粮中再添加3%的青贮苜蓿,各试验组的青贮苜蓿分别是用添加乳酸菌(试验1组)、纤维素酶(试验2组)、蔗糖(试验3组)、"乳酸菌+纤维素酶"(试验4组)和"乳酸菌+蔗糖"(试验5组)青贮发酵而成。结果表明,与对照组相比,试验4组显著降低了料蛋比(P0.05),试验4组和试验5组显著增加了蛋黄指数;日粮添加5种方式处理的青贮苜蓿均显著提高了蛋壳强度、哈夫单位和蛋黄比色度(P0.05),显著降低了蛋黄胆固醇含量(P0.05),且试验4组的蛋壳强度较其他试验组有显著提升。以上结果表明,"乳酸菌+纤维素酶"青贮的苜蓿能降低料蛋比,5种青贮苜蓿均能改善鸡蛋品质。     

不同添加剂对青贮苜蓿发酵品质的影响

本试验研究添加乳酸菌制剂(FS)、绿汁发酵液(PFJ)、蔗糖(S)和乳酸菌制剂+蔗糖(FS+S)对青贮苜蓿发酵品质及其发酵动态的影响.试验设计分为对照组、FS(0.000 5%)、PFJ(0.2%)、S(1%)、FS+S(0.000 5%+1%)5个组,分别在贮藏后的第2天、第5天、第10天、第15天、第30天和第45天开封,分析青贮饲料的发酵品质.结果表明:添加剂对青贮苜蓿发酵品质有改善作用,改善效果的顺序为:FS+S>S>PFJ>FS;添加乳酸菌组青贮初期乳酸菌数目多,青贮45 d后所有添加剂组的乳酸菌数目高于对照组;对照组的pH仅在青贮前5 d短暂降低,此后不断上升,各添加剂组青贮初期pH下降幅度较对照组大,并稳定保持了低pH趋势;有机酸含量及组成的变化良好的契合了pH动态;所有组的氨态氮在青贮过程中均逐渐卜升,对照组尤为明显,所有添加剂组第10天后增加极其缓慢.由此可见,添加剂有助于提高青贮品质,且同时添加乳酸菌和蔗糖的效果最好.[动物营养学报,2009,21(5):755-762][中文全文见<动物营养学报>网站(www.ChinaJAN.com)中文版2009年21卷5期] 后所有添加剂组的乳酸菌 目高于对照组;对照组的pH仅在青贮前5 d短暂降低,此后不断上升,各添加剂组青贮初期pH下降幅度较对照组大,并稳定保持了低pH趋势;有机酸含量及组成的变化良好的契合了pH动态;所有组的氨态氮在青贮过程中均逐渐卜升,对照组尤为明显,所有添加剂组第10天后增加极其缓慢.由此可见,添加剂有助于提高青贮品质,且同时添加乳酸菌和蔗糖的效果最好.     

添加剂对苜蓿青贮料品质和乳酸菌群的影响

以紫花苜蓿（Medicago sativa）为原料,分别添加植物乳杆菌WN5（Lactobacillus plantarum WN5,保藏号为CGMCC NO.7469）和干酪乳杆菌SN3（L.casei SN3,CGMCC NO.7470）的菌液,以及菌液与蔗糖、纤维素酶的混合液后青贮,探讨添加剂对苜蓿青贮料品质和乳酸菌群的影响。结果表明：苜蓿直接青贮发酵品质差;添加剂可改善苜蓿青贮料的发酵品质;添加乳酸菌和蔗糖对于苜蓿青贮饲料的营养价值和乳酸菌群有更明显的改善,青贮饲料中乳酸菌群占绝对优势,植物乳杆菌WN5和其他乳酸菌存活,但乳酸菌种类因蔗糖浓度不同而有差异;添加10 mL乳酸菌和2.0 g蔗糖的效果最好,其苜蓿青贮饲料的pH最低,粗蛋白、甲酸、乙酸和丙酸的含量最高,乳酸菌群的遗传差异大。乳酸菌和蔗糖作为优质添加剂,在苜蓿青贮发酵过程中可以保留大量不同种类的乳酸菌群,从而有利于形成品质良好的青贮苜蓿。     

添加剂对西藏青饲玉米和青稞秸秆混合青贮发酵品质的影响

为探讨酶和乳酸菌制剂对西藏地区青稞(Hordeum vulgare)秸秆与青饲玉米(Zea mays)混合青贮(35%:65%)发酵品质的影响,试验分别设对照组(C)、酶制剂(E)、乳酸菌制剂(LAB)和酶+乳酸菌制剂(E+LAB)4个处理组.青贮后第15,30和45 d开窖取样,测定青贮饲料发酵品质.结果表明:添加酶或乳酸菌制剂在一定程度上改善了青贮饲料的发酵品质,与对照组相比,添加剂处理组青贮饲料的pH和氨态氮/总氮值降低,乳酸和水溶性碳水化合物含量提高;对照组和E处理组中乙酸含量和总挥发性脂肪酸含量显著高于LAB和E+LAB处理组,而酶和乳酸菌组合添加进一步提高乳酸和水溶性碳水化合物含量,表明酶和乳酸菌组合添加比二者单独添加效果更显著.     

添加绿汁发酵液、乳酸菌制剂和葡萄糖对象草青贮发酵品质的影响

为评价添加绿汁发酵液、乳酸菌制剂和葡萄糖对象草青贮发酵品质的影响,试验设6个处理组:即对照组(无添加剂),绿汁发酵液组(FJLB),乳酸菌制剂组(LAB),葡萄糖组(G),绿汁发酵液＋葡萄糖组(FJLB+G),乳酸菌制剂＋葡萄糖组(LAB+G);在青贮第3,7,14,30天开窖,取样分析发酵品质。结果表明,与对照组相比,LAB处理对发酵品质影响不大,FJLB处理显著(P<0.05)降低了乳酸和水溶性碳水化合物含量,显著(P<0.05)提高了pH值、乙酸、丁酸和氨态氮含量,使发酵品质变差,而G、LAB+G和FJLB+G处理均显著(P<0.05)提高了青贮早期的乳酸含量,在整个青贮过程中保持较高的乳酸/乙酸值,并显著(P<0.05)降低了最终青贮饲料的pH和氨态氮含量,但与G处理相比,LAB+G和FJLB+G处理没有显示出更优的效果。综上所述,添加葡萄糖可促进同型乳酸发酵,对象草青贮发酵品质的改善效果优于接种乳酸菌。     

旋扭山绿豆的营养成分及青贮发酵品质

旋扭山绿豆(Desmodium intortum)是一种优良的多年生热带豆科牧草,本研究分析了其营养成分和乳酸菌、葡萄糖添加对其青贮发酵品质的改善效果。青贮试验设有6个处理,即对照(无添加),添加乳酸菌(LAB)、1%葡萄糖(1%G)、2%葡萄糖(2%G)、乳酸菌+1%葡萄糖(LAB+1%G)和乳酸菌+2%葡萄糖(LAB+2%G)。结果显示:旋扭山绿豆的粗蛋白含量(20.75%)和水溶性碳水化合物含量(7.19%)较高;青贮60 d后,对照处理发酵品质较差,pH在4.7以上;单独添加乳酸菌显著降低了pH和氨态氮含量,增加了乳酸含量(P <0.05);而单独添加葡萄糖的两个处理pH与对照差异均不显著(P> 0.05),但均显著降低了氨态氮含量(P <0.05);乳酸菌和葡萄糖混合添加处理均使pH降至4.1以下,乳酸含量超过6%,显著优于其他处理(P <0.05),但两混合添加处理间无显著差异(P> 0.05),因此添加乳酸菌和1%葡萄糖是改善旋扭山绿豆青贮发酵品质的有效措施。     

玉米粉和乳酸菌对甘薯蔓、酒糟及稻草混合青贮品质的影响

为评价玉米粉和乳酸菌对甘薯蔓、酒糟及稻草(4∶4∶2)混合青贮品质的影响,试验设对照组(CK)、玉米粉添加组(CF)、乳酸菌添加组(LAB)、玉米粉和乳酸菌组合添加组(CF+LAB),每个处理6个重复,室温下贮藏60 d开封,取样分析青贮品质。结果表明,添加玉米粉和乳酸菌制剂均明显提高了青贮料的感官品质,与CK相比,CF处理、LAB处理及CF+LAB处理中 CP含量极显著提高(P<0.01), NH₃-N/TN、AA、PA、Ash含量极显著降低(P<0.01),CF处理极显著地提高了DM、CP、LA含量(P<0.01),而LAB处理则极显著地降低了NDF、ADF含量(P<0.01),CF+LAB中NH₃-N/TN、AA含量及pH值极显著低于LAB(P<0.01),显著低于CF(P<0.05)。综上所述,添加玉米粉和乳酸菌制剂均提高了青贮品质,单独添加乳酸菌制剂青贮品质要次于单独添加玉米粉,两者组合添加青贮品质更好。     

生物添加剂和含水率对紫花苜蓿和猫尾草青贮发酵品质的影响

试验旨在研究紫花苜蓿绿汁发酵液（AFGJ）、猫尾草绿汁发酵液（TFGJ）、乳酸菌制剂（LAB）、纤维素酶（CEL）及LAB＋CEL（MIX）对紫花苜蓿和猫尾草青贮发酵品质的影响。用紫花苜蓿和猫尾草各2种含水率（高、低）的原料制作了青贮。每个处理设2次重复，常温下贮存50d，开封后测定青贮的发酵品质。研究结果表明，添加剂对紫花苜蓿和猫尾草青贮的发酵品质有显著影响（P〈0．05），除AFGJ和TFGJ高含水率紫花苜蓿青贮外，各种添加剂均不同程度地改善了高、低含水率紫花苜蓿和猫尾草青贮的发酵品质；含水率对紫花苜蓿和猫尾草青贮的发酵品质有显著影响（P〈0．05），2种牧草均是低含水率优于高含水率青贮的发酵品质；添加剂和含水率对青贮的发酵品质有显著的交互作用（P〈0．05）。综合各项指标，在高、低含水率紫花苜蓿青贮中均以添加MIX效果最好；在高含水率猫尾草青贮中，添加TFGJ和AFGJ效果相近且优于其他添加剂；在低含水率猫尾草青贮中添加AFGJ、TFGJ、LAB和MIX效果相近，且优于添加CEL。结果表明，适当降低原料含水率并选择适宜的添加剂可调制优质青贮。     

Effects of inoculants and environmental temperature on fermentation quality and bacterial diversity of alfalfa silage

To investigate the effects of inoculants and environmental temperature on fermentation quality and bacterial diversity of alfalfa silage, first‐cut alfalfa was ensiled with or without two screened lactic acid bacteria (LAB) strains, Lactobacillus plantarum, LP, and Lactobacillus casei, LC. Each treatment was divided into three parts and stored at 20°C, 30°C, 40°C, respectively. After 60 days ensiling, fermentation characteristics were measured and bacterial diversity was investigated by 16S ribosomal RNA gene sequencing using Illumina MiSeq platform. LP and LC decreased pH, coliform bacteria counts and increased lactic acid content at 20°C, and the two strains decreased pH, ammonia‐N concentration, coliform bacteria counts at 30°C. When the environmental temperature was 40°C, silage treated with LC showed lower LAB and coliform bacteria counts and higher lactic acid content than the untreated and LP treated silages. Butyric acid mainly appeared in silages stored at 40°C. The relative abundance of Lactobacillus in alfalfa silages stored at 20°C and 30°C was highest and increased after LP and LC were added. Garciella was another dominant genus in silages stored at 40°C. In conclusion, LP and LC improved fermentation quality of alfalfa silage by increasing Lactobacillus proportions at 20°C and 30°C; ensiling alfalfa at 40°C was difficult because of Garciella.     

添加糖蜜和乳酸菌制剂对西藏青稞秸秆和多年生黑麦草混合青贮发酵品质的影响

为探究不同添加剂对青稞秸秆与多年生黑麦草(4∶6)混合青贮发酵品质的影响,试验设对照组(C)、乳酸菌制剂组(LAB)、糖蜜组(M)、乳酸菌制剂+糖蜜组(LAB+M)4个处理,青贮后第7, 24和45天打开,测定青贮发酵品质。结果表明,添加乳酸菌制剂加速了青贮早期乳酸发酵进程,但由于底物不足,青贮后期丁酸含量和氨态氮/总氮值有所升高;添加糖蜜补充了发酵底物,促进了乳酸发酵,显著(P<0.05)提高了乳酸含量,降低了pH值(P<0.05),从而有效地抑制了有害微生物的活性,减少了丙酸和丁酸的生成。乳酸菌制剂+糖蜜组与单独添加乳酸菌制剂组相比显著提高了青贮发酵品质, 但与单独添加糖蜜组相比差异不显著,表明发酵底物不足是限制青稞秸秆与多年生黑麦草混合青贮发酵品质的主要因素。