黄单胞菌引致红掌疫病的症状和病原菌鉴定

描述了近年来海南省儋州市一些红掌栽培地发生的另一种细菌性疫病的危害症状,测定了病原菌的形态、染色反应、培养性状、生理生化特性和寄主范围,将病原菌鉴定为地毯草黄单胞菌万年青致病变种[Xanthomonasaxonopodispv.dieffenbachiae(McClloch&Pirone1939)Vauterin,Hoste,Kersters&Swings1995]。     

地毯草对铝胁迫响应及临界浓度的研究

以地毯草为研究对象,利用水培法进行耐铝鉴定,初步研究不同铝浓度处理对地毯草坪用质量、叶色和枯黄率的影响。结果表明,不同处理浓度之间存在显著或极显著性差异,中等浓度(0.72、0.96、1.20 mmol/L)铝处理下,地毯草坪用价值明显优于低浓度(0、0.24、0.48 mmol/L)和高浓度的铝处理(1.68、1.92、2.16 mmol/L),呈抛物线形状;0.72 mmol/L铝处理最适宜地毯草的生长。其它高浓度或低浓度都抑制了地毯草的正常生长,从而导致地毯草草坪使用价值下降。通过建立回归方程,以枯黄率下降50%作为地毯草存活临界铝离子浓度,可得地毯草具有50%存活的临界铝离子浓度为2.04 mmol/L。     

地毯草AcMATE1基因的克隆与表达分析

铝毒被认为是酸性土壤上抑制植物根系生长的重要胁迫因素之一.多药及毒性化合物外排转运蛋白(multidrug and toxic compound extrusion,MATE)在根系柠檬酸转运耐铝毒中起重要作用.以地毯草(Axonopus compressus)为材料,对AcMATE1基因进行克隆、生物信息学和基因表达...     

黄单胞菌III型分泌系统效应蛋白的研究进展

黄单胞菌借助保守的III型分泌系统,将多个效应蛋白注入植物细胞,克服宿主的防卫,利于黄单胞菌在植物体内发挥毒性功能。最近对III型效应蛋白致病机理开展了大量研究,结果发现具有酶功能的效应蛋白在黄单胞菌及其宿主间的相互作用中发挥非常重要的作用。此外,黄单胞菌存在一类独特的III型效应蛋白(AvrBs3家族)。迄今为止,仅在黄单胞菌和雷尔氏菌(Ralstonia solanacearum)中发现AvrBs3家族效应蛋白,AvrBs3家族通过模拟转录激活子来操纵寄主植物易感基因的表达。     

Bioadhesive Controlled Metronidazole Release Matrix Based on Chitosan and Xanthan Gum

Metronidazole, a common antibacterial drug, was incorporated into a hydrophilic polymer matrix composed of chitosan xanthan gum mixture. Hydrogel formation of this binary chitosan-xanthan gum combination was tested for its ability to control the release of metronidazole as a drug model. This preparation (MZ-CR) was characterized by in vitro, ex vivo bioadhesion and in vivo bioavailability study. For comparison purposes a commercial extended release formulation of metronidazole (CMZ) was used as a reference. The in vitro drug-release profiles of metronidazole preparation and CMZ were similar in 0.1 M HCl and phosphate buffer pH 6.8. Moreover, metronidazole preparation and CMZ showed a similar detachment force to sheep stomach mucosa, while the bioadhesion of the metronidazole preparation was higher three times than CMZ to sheep duodenum. The results of in vivo study indicated that the absorption of metronidazole from the preparation was faster than that of CMZ. Also, MZ-CR leads to higher metronidazole C_max and AUC relative to that of the CMZ. This increase in bioavailability might be explained by the bioadhesion of the preparation at the upper part of the small intestine that could result in an increase in the overall intestinal transit time. As a conclusion, formulating chitosan-xanthan gum mixture as a hydrophilic polymer matrix resulted in a superior pharmacokinetic parameters translated by better rate and extent of absorption of metronidazole.     

木薯细菌性萎蔫病菌抗铜性评价及抗铜相关基因簇分子分析

细菌性萎蔫病是世界范围内木薯种植中的重要病害,也是中国木薯种植中为害最严重的病害。前期研究发现铜基杀菌剂对国内木薯细菌性萎蔫病防效欠佳,随即开展了病菌抗铜性评价及抗铜相关基因簇的分子分析工作。评价了42个不同来源病原菌菌株对硫酸铜的抗性,发现其抑菌最低有效浓度均在1.35~1.75 mmol/L之间。通过和已报道黄单胞菌类抗铜相关基因的比对分析,发现来自广西的菌株GX11携带有cop TAB和Xme RSA2个抗铜基因簇。对来自南美州、非洲和亚洲67个菌株的基因组序列分析发现绝大多数菌株均带有这2个基因簇,聚类分析发现相关基因在菌株之间具高度的同源性。     

柑橘溃疡病菌LAMP实时浊度检测方法的建立及应用

以柑橘溃疡病菌特异性高的假定蛋白基因（登录号：AE008923.1）为靶标,设计并筛选4条引物来特异性识别靶标序列中的6个独立区域,建立柑橘溃疡病菌LAMP实时浊度检测方法。该方法利用实时浊度仪检测反应过程中产生的焦磷酸镁白色沉淀,实现对LAMP整个反应过程的实时监控。从镁离子浓度、甜菜碱浓度、dNTPs浓度、引物浓度和反应温度5个变量参数对 LAMP检测体系进行优化,并对方法的特异性、灵敏度、稳定性及实际样品检测效果进行评价。结果显示,该体系经优化后稳定性良好,可在66 ℃ 恒温条件下,60 min内完成检测;DNA检测下限可达0.02 ng/μL,灵敏度与荧光定量PCR方法相同,比常规PCR方法高1个数量级;能快速、准确地对田间疑似样品进行检测,与荧光定量PCR方法的检出情况一致,没有漏检。结果说明柑橘溃疡病菌实时浊度LAMP检测方法操作简便、所需时间短,特异性与灵敏度高,为柑橘溃疡病菌的快速筛查提供较好的途径。     

3种常用杀菌剂对不同来源木薯细菌性萎蔫病菌的毒力测定

细菌性萎蔫病是世界范围内木薯种植中的重要病害,但防控技术研究较少。采用含毒介质法评价了3种常用杀菌剂对不同来源的29个病菌菌株的抑菌作用。结果表明,供试菌株对净刹(80%乙蒜素EC)和农用硫酸链霉素(72%硫酸链霉素SP)敏感性较高,而对可杀得贰仟(53.8%氢氧化铜WG)表现出不同程度的抗性。建议生产中使用乙蒜素和硫酸链霉素对该病进行防治。     

木薯细菌性枯萎病菌转座子库的构建及其质量评价

为了研究木薯细菌性枯萎病菌的致病分子机理,本研究开展了病原菌的转化子库构建工作.采用电击法,将EZ::TN转座体转化野生型菌株.获得了总数为20 382个转化子并进行了质量评价,采用剪叶法从9 872个转化子中筛选出94个致病性变异的转化子.采用Tail-PCR获得了致病力丧失突变体Xtn62-36的侧翼序列,分析结果表明可能是外源片段插入预测基因AspCxam的编码区而造成致病力丧失.病原菌转化子库的构建及Tail-PCR技术的应用为进一步开展致病相关基因功能的研究提供了基础.     

红掌细菌性疫病病原菌遗传多样性的 RAPD 和 Rep-PCR分析

由地毯草黄单胞菌花叶万年青致病变种引起的细菌性疫病是红掌生产中最具破坏性的病害。本研究对来自全国 8 个省市主产区的 93 个红掌细菌性疫病菌株,采用 RAPD 和 Rep-PCR（ERIC、BOX、REP）分子标记进行了遗传多样性分析。筛选出的 13 个 RAPD 引物共扩增出 131 个清晰、重复性好的条带,而 Rep-PCR 共扩增出65 个条带,所有位点多态性比率为 100%。基于 RAPD 和 Rep-PCR 结果计算的群体遗传距离显著相关,综合 2 种标记类型的分型结果进行 UPGMA 聚类分析,表明我国红掌细菌性疫病具有高度的遗传多样性,在遗传相似性系数范围 0.519 1~0.984 7,在 0.63 水平时可以将所有菌株划分为 3 个组群,分别包括 58、28、7 个个体,病菌群体的遗传多样性与其寄主品种、地理来源没有明显相关性。本研究为红掌细菌性疫病监测和抗病育种提供了科学依据。     

生物及非生物诱导因子对水稻白叶枯病的诱导抗性及其与活性氧代谢的关系

 以对白叶枯病高抗的水稻品种余水糯和高感的水稻品种浙辐802为材料,于2叶期用Tiron、Paraquat(PQ)和稻白叶枯病菌弱毒株75-1进行诱导处理,测定诱导处理后3、24、48、72 h叶中超氧化物歧化酶(SOD)活性、O2-产生速率及丙二醛(MDA)含量的动态变化,并于3叶期用白叶枯病菌强毒株76-25进行挑战接种,结果表明：75-1和PQ均诱导两品种产生了系统抗性,并使诱导叶中O2-产生速率和MDA含量增加。75-1使O2-产生速率在24 h达峰值,比对照升高30.6%(余水糯)和25.3％(浙辐802);而PQ使O2-产生速率在24～72 h维持较高水平,比对照升高49.4％(余水糯) 和39.7％(浙辐802)。MDA含量的变化晚于O2-产生速率的改变,在72 h达最高值。75-1使SOD活性降低,并在24 h达最大降幅;而PQ使SOD活性升高,并在48 h达峰值。Tiron使PQ和75-1的诱导效果减弱,并使75-1对余水糯和浙辐802的互作由非亲和性互作转变为类似亲和性互作,导致侵染斑的形成。     

生物及非生物诱导因子对水稻白叶枯病的诱导抗性及其与 活性氧代谢的关系

以对白叶枯病高抗的水稻品种余水糯和高感的水稻品种浙辐802为材料,于2叶期用Tiron、Paraquat（PQ）和稻白叶枯病菌弱毒每株75－l进行诱导处理,测定诱导处理后3、24、48、72h叶中超氧化物歧化酶（SoD）活性、o2产生速率及丙二醛（MDA）含量的动态变化,并于3叶期用白叶枯病菌强毒株76－25进行挑战接种,结果表明：75－1和PQ均诱导两品种产生了系统抗性,并使诱导叶中o2产生速率和MDA含量增加。75－1使o2产生速率在24h达峰值,比对照升高3o．6％（余水糯）和25.3％（浙辐8o2）;而PQ使o2产生速率在24～72h维持较高水平,比对照升高49.4％（余水糯）和39．7％（浙辐8o2）。MDA含量的变化晚于o2产生速率的改变,在72h达最高值。75-1使SoD活性降低,并在24h达最大降幅;而PQ使SoD活性升高,并在48h达峰值。Tiron使PQ和75－l的诱导效果减弱,并使75－l对余水糯和浙辐8o2的互作由非亲和性互作转变为类似亲和性互作,导致侵染斑的形成。     

Effect of microwave radiation on dry bean seed infected with Xanthomonas axonopodis pv. phaseoli with and without the use of chemical seed treatment

Common bacterial blight (Xanthomonas axonopodis pv. phaseoli) is a seed-borne disease that is difficult to control in dry bean (Phaseolus vulgaris L.). Laboratory and field studies were conducted over a two-year period to determine the effect of microwave radiation on navy (cv. Navigator and Envoy) and pinto (cv. AC Ole) bean. Laboratory tests resulted in a 12 to 25% decrease in germination following 50–60 s of radiation, while less than a 10% loss was observed between 0 and 40 s. Pathogen viability was also tested, however the incidence of pathogen infection was low and no correlation was observed between exposure time and the incidence of colonization. In field studies conducted at Morden, MB (2012) and Ridgetown and Exeter, ON (2012–2013) microwave radiation and two chemical seed treatments (copper hydroxide 53.8% and pyraclostrobin + fluxapyroxad + metalaxyl) were evaluated for their effect on emergence, disease infection, seed pick, yield and return on investment. The application of microwave treatment decreased emergence by up to 7%, but did not impact the other parameters measured. Chemical treatment alone or in combination with microwave treatment also did not affect emergence, disease incidence, yield, seed pick, or return on investment.