红花高效再生体系的建立

目的筛选红花不定芽高效诱导条件,结合红花茎尖微嫁接技术,解决转基因红花再生效率低的问题。方法以新疆塔城裕民无刺红花的子叶作为外植体,子叶--愈伤组织--不定芽分化--伸长--生根/嫁接,分别对红花不定芽高效诱导培养基、伸长培养基和生根培养基进行筛选。结果确定了不定芽分化培养基:MS+1.0mg/L TDZ+0.5mg/L NAA,不定芽伸长培养基:MS+1%蔗糖,生根培养基:White+3mg/L IBA+Ag NO3 10mg/L+2%蔗糖+0.2g/L活性炭,生根率为12.5%;以14d红花实生苗做砧木,劈接法嫁接再生植株的成活率为53.3%。结论本研究采用不定芽高效诱导与茎尖微嫁接技术相结合的方法,成功的获得了再生植株。     

黄精多倍体诱导初报

通过人工诱变,使多花黄精染色体加倍,提高生物产量与品质,为大面积人工种植提供优良品种。种子经过人工打破休眠后,在MS＋6-BA1.0mg/L＋2,4-D0.5mg/L离体培养形成愈伤组织,再转入MS＋TDZ1.5mg/L＋2,4-D1.0mg/L培养15～20d,用脱脂棉球浸泡于添加2%二甲基亚砜的0.05%～0.15%秋水仙素溶液中,在无菌条件下覆盖在愈伤组织上,进行染色体加倍诱导处理,再转移到MS＋6-BA1.0mg/L＋NAA2.0mg/L的分化培养基上,将分化出叶片的小苗转移到1/2MS＋NAA1.0mg/L生根培养基上。结果表明：0.05%质量浓度的秋水仙素处理48h变异株诱导率最高达18.7%,0.1%和0.15%浓度处理24h的诱导率次之,为16.7%,0.1%浓度处理48h变异率虽然只有16.2%,但其变异株倍性稳定性较好,整倍率较高。     

野生黄精离体快繁技术体系的优化

以野生黄精不定芽为材料,以MS为基本培养基,添加不同浓度的植物生长调节剂6-BA、2,4-D、NAA、KT进行3因素4水平的正交设计试验,筛选黄精增殖的最佳培养条件;探讨不同培养温度对黄精组培苗继代增殖的影响;以1/2 MS为基本培养基,探讨不同生长素及其浓度和不同培养容器对组培苗生根的影响.结果表明,黄精组培苗最佳继...     

凌云白毫茶组培无菌体系的建立与抗褐化研究

以凌云白毫茶嫩芽为外植体,建立凌云白毫茶无菌体系,探讨抗褐化措施,建立白毫茶组织培养体系,为白毫茶优良品种产业化种植提供种苗技术基础。结果表明:以白毫茶树带腋芽茎段和顶芽为外植体,浓度为0.1%HgCl2溶液对外植体进行灭菌10 min,污染率最低;在此基础上,预处理采用0.1%高锰酸钾溶液浸泡10 min,抗褐化效果和降低污染率都较明显,褐化率低至30%;选用腋芽茎段的褐化率和污染率均比顶芽低,在培养基中添加活性炭1.5 mg/L,能降低褐化率至16.7%。凌云白毫茶初代培养使用6-BA诱导腋芽效果好,浓度为2.0 mg/L的诱导率达到100%;对无菌芽增殖来说较适宜的培养基为MS+2.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA+7g/L琼脂+30 g/L蔗糖,增殖倍数为3.3,长势最好。     

金线莲组织培养与人工栽植研究：Ⅰ、无菌外植体建立技术和配方

试验结果表明，金线莲以顶芽为外植体，用0．1％升汞浸泡3分钟，再经12％漂白粉液10分钟的双重消毒，其材料污染率为零，芽萌动率为85％；顶芽培养在含zt0.1ppm，BA5ppm，NAA1ppm的1／2MS（大量元素减半，其成成分不变）培养基中，芽诱导效应最佳，可诱导出芽娄达4．88个，徨长良好。     

滁州白头翁组织培养及再生体系的建立

为建立白头翁再生体系,以白头翁主根的切段和试管苗叶片为外植体,比较2种外植体离体培养差异,探讨不同植物生长调节剂对不定芽和愈伤组织诱导、愈伤增殖和再分化及芽苗生根的影响。结果表明:叶片可以通过愈伤组织再分化和直接产生不定芽2种途径建立再生体系,而根只诱导出了愈伤组织,增殖培养中逐渐褐化死亡;在含6-BA培养基上,叶块死亡,而根只诱导出少量愈伤组织;叶片诱导不定芽的培养基为MS+TDZ 0.3 mg/L+NAA 0.1 mg/L;愈伤组织增殖的培养基为MS+TDZ 0.2 mg/L+2,4-D 0.2 mg/L;再分化时,需要转接到TDZ和NAA组合的培养基上,其中处理组合TDZ 0.3 mg/L+NAA0.1 mg/L的再分化率达100%;生根培养基为1/2MS+NAA 0.2 mg/L+IBA 0.2 mg/L+蔗糖20 g/L。不同外植体离体培养存在差异,叶片较根易培养;TDZ对白头翁叶片培养效果较好,2,4-D对愈伤组织的诱导能力较强,而NAA适合于不定芽分化,NAA与IBA组合使用生根效果较好。     

长叶猕猴桃初始无菌组培体系建立

[目的]建立长叶猕猴桃初始无菌培养体系。[方法]以长叶猕猴桃的带芽茎段、叶柄和叶片为外植体,以MS为基本培养基,展开三次双因子重复试验。[结果]长叶猕猴桃带芽茎段在MS+6-BA 1.00 mg/L+NAA 0.10 mg/L培养基中初始培养效果好;离体叶片小块在MS+6-BA 0.50 mg/L+NAA 0.10 mg/L培养基中初始培养效果好。[结论]为长叶猕猴桃组培苗的生产和工厂化快速繁育种苗奠定了基础。     

猫须草无菌短枝组织培养与快速繁殖体系的建立

猫须草又称作“肾茶”,是一种生长在热带和亚热带地区的多年生草本植物,有一定的药用价值和观赏价值。在东南亚,猫须草作为一种传统的茶饮而深受人们喜爱,在我国则更多是作为一种中草药用于治疗肾脏疾病。然而猫须草野生药材资源日趋枯竭,传统生产繁殖方式难以满足市场需求,因此采用植物组织培养快速繁殖技术,为猫须草大规模种植提供种苗已成为急需解决的问题。为了研究适合猫须草的无菌短枝组织培养快速繁殖体系,本研究以带一对腋芽的猫须草幼嫩茎段为外植体,探究不同消毒方法、激素类型与浓度及培养基配方对猫须草无菌短枝组织培养的影响。结果表明,猫须草无菌短枝组织培养的最佳消毒方法为75%酒精浸泡10 s或15 s+0.1%升汞浸泡6 min,当0.1%升汞消毒时间为8 min时,猫须草无菌短枝的萌芽率显著下降,当0.1%升汞消毒时间为4 min时,猫须草无菌短枝的污染率显著提高。最佳初代培养基配方为MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L或MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.2 mg/L;但当6-BA的浓度达2.0 mg/L时,组培苗长势细弱,叶片发黄,并有玻璃化发生。最佳继代培养基配方为MS+TDZ 0.05 mg/L+IBA 0.2 mg/L;与添加6-BA相比,添加TDZ更有利于猫须草无菌短枝继代组培苗的生长。最佳生根培养基配方为1/2MS+NAA 1.0 mg/L+IBA 1.0 mg/L+活性炭3 g/L,组培苗生根率可达95%。培养基配方及不同激素组合均会影响猫须草无菌短枝组培苗的生根,1/2MS培养基明显优于MS培养基,同时添加NAA和IBA比单独添加NAA的效果好。将组培苗移栽至珍珠岩、细河沙、泥炭土的体积比为1:1:1的混合基质中,植株生长良好,成活率高。研究结果可为猫须草大规模工厂化生产提供科学可行的技术支持。     

柴蕉茎尖培养无菌株系建立与芽苗增殖

以柴蕉吸芽茎尖为外植体,进行无菌株系建立与芽苗增殖研究。试验结果表明,先将柴蕉吸芽接种于液体诱导培养基1/2 MS＋4 mg·L^-1BA＋0.5 mg·L^-1NAA＋30 g·L^-1蔗糖,7 d后转到1/2MS＋4 mg·L^-1BA＋0.5 mg·L^-1NAA＋30 g·L^-1蔗糖＋1 mg·L^-1AC中,可以有效减少外植体的褐变;在MS＋4 mg·L^-1BA＋0.3 mg·L^-1NAA＋30 g·L^-1蔗糖＋6 g·L^-1琼脂＋80 g·L^-1腺嘌呤培养基上采用薄切片进行继代增殖,出芽率高且芽苗粗壮。     

花生不同外植体芽诱导制约因素研究

以花生品种远杂9102成熟种胚发芽12d、4d的幼叶为外植体,对花生幼叶不定芽诱导制约因素进行了研究,结果表明,采用较高浓度的6-BA（8mg/L）、较低浓度的NAA（1mg/L）,不定芽诱导率可达70%以上。最佳诱导培养基为MS＋6-BA8mg/L＋NAA0.5mg/L＋AgNO32mg/L 最佳继代培养基为MS＋6-BA5mg/L＋NAA2mg/L＋AgNO32mg/L。同时试验发现种子预培养4d的幼叶不定芽诱导率较预培养12d的高 花生幼叶近叶柄基部切口处不定芽诱导率较高,是较理想的不定芽诱导部位。以远杂9102预培养2d的子叶作外植体,对愈伤组织诱导及分化进行试验,确定MS＋6-BA4.5mg/L＋2,4-D2.2mg/L为诱导愈伤的最佳培养基,愈伤组织诱导率达79.8%,最佳分化培养基为MS＋KT（0.15mg/L）。     

大根唇柱苣苔的组培快繁技术

以大根唇柱苣苔叶片为外植体,以MS为基本培养基,附加不同种类和浓度的激素进行组培快繁技术研究。结果表明:适宜叶片不定芽诱导的培养基是MS+6-BA 1.00 mg/L+NAA 0.05 mg/L,继代增殖培养的适宜培养基为MS+6-BA 1.50~3.00 mg/L+NAA 0.10 mg/L,适宜的生根培养基为1/2MS+IBA 0.20~0.30 mg/L,适宜的基质是泥炭∶珍珠岩=2∶1、泥炭∶细河沙=2∶1、泥炭∶园土=2∶1。     

番木瓜优质组培苗生产体系的建立

用含有100mg/LVc＋1mg/LAgNO;+20mg/LPVP液体处理成龄番木瓜（CricappayaL）侧芽,再用70%酒精浸泡50s、0.15%升汞消毒5min,经消毒的外植体接种于MS+KT0.5mg/L+NAA0.2mg/L+GA31.0mg/L＋30g/L蔗糖+7g/L琼脂（pH=5.7）,26~28℃,每日光照培养12h,光照强度为15001x,连续培养20d;外植体经初始培养后,继代接种于MS＋BA0.5mg/L+NAA0.1 mg/L+GA,1.0mg/L+蔗糖30gL＋琼脂7g/L（pH=5.7）,26~28℃,每日光照培养16h,光照强度为2000Ix,连续培养40d,繁殖系数达3~5倍;继代芽接种MS+BA0.2mg/L+KT0.3mg/L+NAA0.Img/L+NAA0.1 mg/L+GA;1.0 mg/L+ADS40mg/L＋蔗糖30g/L＋琼脂7g/L（pH=5.7）,26~28℃,每日光照培养16h,光照强度为20001x,连续培养20d进行壮苗培养,经壮苗培养芽接种于MS+KT0.1~0.2mg/L+ NAA0.05~0.1mg/L+ IBA0.2-0.3mg/L+蔗糖20~30gL+琼脂6.5g/L（pH=5.6）,26~28℃,每日光照培养12h,光照强度为1500kx,连续培养 15~20d 进行催根培养,生根率达85%以上。生根苗经2~3d的自然光炼苗后,移栽于沙土∶椰糠∶菜园土质量比为1∶1∶1 混和的基质中,移苗后1周内,每天喷施浓度为200～400mg/L的IBA,移栽成活率达80%以上。笔者就目前番木瓜组培快繁中的问题作了系统的研究,建立了一套适合番木瓜优质种苗生产的技术体系。     

野生亚麻无性扩繁及保存技术的研究

野生亚麻(Linum stelleroides Planch)是二年生植物,要通过有性繁殖留取种子的方式进行保存颇有难度。本项研究采用组织培养的方法对野生亚麻的茎段进行无性扩繁获得成功,一年内从2株无菌苗入手培养最终获得再生植株600多株,繁殖倍数达300倍,而且移栽成活的再生植株已开花结实。同时进行了低温保存不定芽的研究,结果显示,4℃条件下保存3个月对野生亚麻茎段分化率有一定的促进作用,初步确定MS(附加6-BA0.5mg/l,NAA0.05mg/l)培养基为茎段分化的适宜培养基,1/2MS(附加一定量的激素)培养基为不定芽保存培养基。     

柱花草花药离体培养研究

以热研2号柱花草花药为外植体,研究不同植物生长调节剂 、培养基以及低温预处理等对柱花草花药培养的影响,以期建立柱花草花药培养体系,获得再生植株,为柱花草倍性、基因组学及分子生物学研究提供材料。结果表明：花药4 ℃低温预处理24 h诱导效果较好;N6培养基对愈伤组织的诱导效果比MS培养基好;最佳愈伤组织诱导培养基组合为N6＋2,4-D 0.5 mg/L＋KT1.0 mg/L;分化培养的最佳组合为MS＋NAA 0.2 mg/L＋6-BA 3.0 mg/L。     

弄岗马兜铃组培苗的生根培养

对弄岗马兜铃组培苗进行生根诱导研究,以达到可移栽的目的。在1/2改良MS固体培养基(KH2PO4 170 mg/L、蔗糖30 g/L,pH 5.8)中添加不同浓度的6-苄胺基腺嘌呤(6-BA)和吲哚丁酸(IBA)筛选最佳生根培养基配方。结果表明：在1/2改良MS固体培养基(蔗糖30 g/L,pH 5.8)加入1 mg/L的IBA具有较好的生根诱导作用,而6-BA对弄岗马兜铃组培苗不具有生根作用。     

阿希蕉合生花组培快繁技术研究

阿希蕉为野生香蕉资源,可作为重要的遗传育种资源并具有观赏价值。本研究以阿希蕉合生花为植物材料,进行组培快繁技术研究。结果表明,阿希蕉在巴西蕉愈伤诱导培养基上可诱导出愈伤组织,最佳芽分化培养基配方为MS+6-BA（3.0 mg/L）+NAA（0.1~0.2 mg/L）,最佳芽增殖培养基配方为MS+6-BA（2.0 mg/L）+NAA（0.1 mg/L）,最佳生根培养基配方为MS+IBA（3.0 mg/L）+NAA（0.3 mg/L）。从取材到获得根系完整的组培苗约需100 d,繁殖效率100株/花苞以上,增殖效率高,可达到快速繁育的目的。     

山奈组织培养

以山奈的带芽块茎为试验材料,研究其表面消毒的方法和不同配比培养基对山奈块茎诱导、增殖以及生根的影响.结果表明:外植体表面消毒采用体积分数75%酒精消毒1 min,无菌水漂洗1次,然后用质量分数0.1%升汞浸泡10min,无菌水漂洗2次后,再用0.1%升汞浸泡6min,无菌水漂洗4次效果为最佳,污染率可降至6.67%;适宜的诱导培养基为MS+6-BA3.0 mg/L+NAA0.1 mg/L,芽的萌发率达100%,分化率达146.67%;增殖培养基以MS+6-BA3.0 mg/L为最好,增殖倍数可达6.1倍;适宜的生根培养基为MS+NAA0.1 mg/L.生根率可达100%;试管苗移栽到疏松透气的基质中即可,成活率可达93%.     

澳洲鸽子石斛兰花梗芽组织培养技术研究

以澳洲鸽子石斛兰（Dendrobium kingianum Bidwill）的花梗为外植体,研究花梗芽的诱导、增殖和生根情况。结果表明：在1号诱导培养基[MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L+10%椰子汁（CM）]和2号诱导培养基（MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L+AC 1.0 g/L+10% CM）中均能诱导出芽,尽管在诱导过程中70.6%带节间的花梗茎段因不能诱导出侧芽或侧芽弱小而死亡,但为种苗生产和种质资源的保护提供了一种有效途径。在增殖培养过程中,2号增殖培养基（MS+6-BA 3.0 mg/L+AD 3.0 mg/L+10% CM）有利于增殖培养;在生根壮苗过程中,生根培养基（1/2 MS+NAA 0.3~0.5 mg/L+10% CM）适宜澳洲鸽子石斛兰‘金斯卡’的生根培养。     

白木香2种外植体的组织培养

沉香是国际上极负盛名的药用和香料资源之一。在亚洲许多国家,沉香产业既是传统行业也是发展迅猛的新兴产业。沉香优良种质的大规模应用对沉香产业的可持续发展具有重大意义。因此优良沉香种质资源是近年沉香产业关注的重点和热点,但一些优良种质的品质特性无法通过有性繁殖遗传,大规模繁育存在技术障碍。植物组织培养技术在品种优良性状保持、种子资源保存、快速繁殖等方面具有非常突出的优越性,被广泛应用于中药资源保护和中药产业发展。为建立工业化生产的沉香广谱再生体系,本文以白木香无菌苗和成龄植株的枝条为材料从外植体消毒、丛生芽诱导和生根培养三方面进行组织培养研究。结果表明,通过0.1%多菌灵溶液浸泡3 min,流动水冲洗3 h处理,对采摘自大田的白木香枝条有较好的除菌效果。0.1%升汞溶液消毒6~8 min,可有效保持外植体的成活率。在培养基中适当添加灭菌剂也能有效控制材料染菌。无菌苗茎段丛生芽诱导较易,大田枝条的丛生芽诱导较难。WPM + 20 g/L蔗糖+0.5 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA (G₄)有利于无菌苗的丛生芽诱导;1/2 MS+25 g蔗糖+2 mg/L 6-BA+0.01 mg/L NAA (I₃),1/4 MS+20 g/L蔗糖+ 2 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA (J₂)和WPM+20 g蔗糖+1 mg/L 6-BA+0.01 mg/L NAA (K₂)有利于成龄植株枝条外植体的丛生芽诱导,将膨大的丛生芽团切割后转接于不含植物生长调节剂的WPM培养基中可促进丛生芽伸长。WPM培养基中添加10~20 g/L蔗糖,并加入0.1~0.5 mg/L NAA可诱导无菌苗和茎段外植体的新芽生根。本研究以沉香2种外植体进行组织培养,成功获得再生植株,为沉香优良种质的无性繁殖提供技术参考。