甜菜花叶病毒病研究之二——感病细胞超微结构观察

 对不同时期感染甜菜花叶病毒(BtMV)的叶片,进行病理变化系列观察。早期侵染(7天前)的细胞质、细胞器均无变化,随着症状发展,风轮状内含体、束状内含体、细胞核卫星体,细胞质泡囊化旁类似病毒的束状结构,20天达到了高峰,风轮状及束状内含体一直持续两个月还存在。田间样品也观察到了典型的风轮状及束状内含体。细胞核卫星体出现很少。侵染后期,细胞质减少,叶绿体比相应健株提前出现淀粉粒,噬锇颗粒等,基粒片层也提前消解,表现细胞提前衰老的特征。此外细胞内还有许多健株没有的泡状结构。一种为旁壁体,可能与细胞壁加厚有关;一种为多重泡体的叠加,可能是液泡的吞噬作用加强与外源物质(BtMV)侵入有关;另外还有一种可能是过氧化物酶体或线粒体在病毒诱导下泡囊化,其作用不清楚。     

黄瓜绿斑驳花叶病毒病的鉴定与防治

黄瓜绿斑驳花叶病毒病是1种检疫性有害生物,主要为害葫芦科瓜类作物,在引种和调运种子、种苗时应加强对种苗进行检测,最好实行产地检疫。通常采用生物学、电镜观察、血清学和分子生物学进行鉴定。控制黄瓜绿斑驳花叶病毒病的有效方法是调运无病的种苗和瓜果,其次是合理轮作减少毒源。     

“83增抗剂”防治烟草花叶病毒病的研究初报

近年烟叶生产因烟草花叶病越来越严重,引起烟叶减产、绝收,国内外有关专家、学者也对该病毒进行防治研究,但迄今没有筛选出较理想的制剂。北京农大病毒研究室研制的NS-83耐病毒诱导剂(83增抗剂),在防治番茄病毒病方面首试成功。平顶山烟草专卖局在中国烟草总公司、北京农业大学的主持下,自1987年以来,开展了“83增抗剂”防治烟草花叶病的应用研究,已取得显著效果。 材料与方法     

甜菜花叶病毒病的研究Ⅰ.病毒的分离鉴定

 1986-1987年对黑龙江、内蒙古部分甜菜原料产区与采种区进行了初步调查,采种区甜菜花叶病毒病发病率达100%,与其邻近的原料产区有零星发病,远离采种区则没有发病的迹象。田间采集的病叶,用磨擦、蚜传接种方法均能在甜菜上再现症状。经昆诺藜(Chenopodium quinoa)分离,普通电镜及乳胶电镜负染均能看到典型的马铃薯Y组病毒的粒体。通过鉴别寄主、甜菜上的症状表现,分离物的物理特性及血清学试验,证明此分离物为甜菜花叶病毒。在提纯方面,摸索了不同方法,认为匀浆前液氮或冷冻处理,二次PEG沉淀后过Sepharose4B柱,分离病毒效果较好,还可省去超速离心步骤。以内蒙五号甜菜品种作为毒源的繁殖寄主,能使提纯病毒产量达0.6mg/100g叶片,耳静脉与多点皮下注射相结合免疫兔子,微量沉淀测定效价为1:1024。     

宁南霉素防治烟草花叶病毒病应用技术研究及示范推广

针对制约大理州烟草产量和品质提高的主要因素——烟草花叶病毒病,１９９３～１９９６年筛选菌毒清、８３增抗剂、病毒Ａ、植病灵等多种抗病毒剂及宁南霉素等药剂。试验结果表明,２％宁南霉素７５ｍｇ／ｋｇ对烟草花叶病毒病大田防效在７０％以上,优于其他抗病毒剂,且对烟草具有明显的刺激生长作用,明显提高烟叶质量和产量。１９９５～１９９８年累计应用宁南毒素４０多ｔ,面积约１．７３万ｈｍ２,取得较好经济、社会和生态效益。     

两种不同类型农药防治烟草花叶病毒病药效的比较研究

用生物农药0.5%香菇多糖水剂(抗毒丰)和化学农药20%吗胍.乙酸铜可湿性粉剂(小叶灵)两种药剂对烟草花叶病进行控制,小区试验表明:0.5%香菇多糖水剂(抗毒丰)的防治效果在80%以上且有较好的持效作用;20%吗胍.乙酸铜可湿性粉剂(小叶灵)的防治效果在70%左右,并且两种药剂对烟草均表现出不同程度的促进生长作用。     

几种药剂对罗汉果花叶病毒病的田间防效

采用田间试验探索5％氨基酸寡糖素AS、0.5％几丁聚糖AS、0.136％赤·吲哚·芸苔WP、20％盐酸吗啉胍WP和8％宁南霉素AS等药剂对罗汉果花叶病毒病的防治效果.结果表明,末次药后21 d,5％氨基酸寡糖素AS、0.5％几丁聚糖AS、0.136％赤·吲哚·芸苔WP防效分别为74.36％、65.26％和70.04％;...     

枯草芽孢杆菌OKB105产生的surfactin防治烟草花叶病毒病及其机理研究

本文研究枯草芽孢杆菌产生的脂肽化合物表面活性素surfactin对烟草花叶病毒病的防治效果,并检测烟草防卫相关基因的表达情况以解析抗病机理。利用6 mol/LHCl沉淀枯草芽孢杆菌OKB105的去细胞培养液,通过甲醇抽提,Sephadex LH20层析柱获得脂肽纯化物。经MALDI-TOF-MS和血平板溶血试验检测表明,纯化物中仅含有表面活性素surfactin。将表面活性素配成0.01 g/L溶液,处理烟草并接种TMV。结果表明, surfactin对烟草花叶病毒病有显著的防治效果,病斑抑制率为70.9%。通过Real-time PCR检测烟草的防卫相关基因的表达情况结果发现,烟草SA信号通路的PR1、PR3和PR5,以及ET通路的ETR1表达量显著提高,说明surfactin诱导了烟草依赖于SA和ET信号通路的诱导系统抗性（induced systemic resistance, ISR）反应。     

菜用大豆品种资源对大豆花叶病毒病的抗性评价

对40个供试菜用大豆品种进行了抗2个SMV流行株系的鉴定。结果表明,有4个品种抗SC-3株系,分别是‘苏鲜4号’、‘浙鲜豆5号’、‘奎丰4号’和‘KVS124’;‘浙农8号’和‘苏鲜4号’抗SC-7株系,‘苏鲜4号’兼抗SC-3和SC-7株系。这些品种可作为抗源用于抗病品种选育和与抗性遗传相关的研究。此外,还鉴定筛选出‘通豆6号’、‘青酥2号’、‘青酥4号’、‘青酥5号’和‘青酥6号’等5个品种对SMV的主要流行株系SC-3表现耐病,这些品种可直接用于菜用大豆的生产。研究还显示,来自江苏地区的育成品种抗性相对较好,而来自上海崇明的地方大豆品种资源抗性普遍较差,这可能与该地区流行的SMV株系的类型相关。     

不同播期防治秋萝卜花叶病毒病试验研究

花叶病毒病造成青萝卜叶片皱缩、丛生,叶色退绿、斑驳(花叶)等症状,萝卜块根生长后期或经贮藏后,木质部部分组织变红褐色,萝卜品质严重下降。随着播种期的推迟,萝卜花叶病毒病病株率、褐心率依次降低。潍坊市棉花研究所试验田8月20日、8月25日播种的病株率分别为16.0%和9.0%,褐心率分别为1.67%和0.00%;寒亭区东夏庄试验田8月20日、8月25日播种的病株率分别为10.67%和8.0%,褐心率分别为4.58%和0.42%。潍坊市秋萝卜最适播种期为8月15-20日。     

黄瓜花叶病毒甜菜分离物的分离鉴定

 从新疆石河子地区春季采种甜菜和夏播母根用甜菜上分离到3个病毒分离物,代号为石-B-2、石-B-5和石-B-D,自然感染甜菜引起叶片黄色花叶、扭曲、皱缩和植株严重矮化。病毒粒体球状、直径28~30 nm、均含有分子量约为2 9k D外壳蛋白、3种相同的较大片段的双链RNA (即3400 bp的RNA1、3100 bp的RNA₂、2300 bp的RNA₃)和片段大小约400 bp的小RNA,石-B-2和石-B-D具有1100 bp的RNA4,在ELISA和琼脂双扩散试验中,3个分离物均与CMV-83抗血清有特异反应,初步认为这3个球状病毒分离物属于CMV,但它们具有狭窄的寄主范围,不感染心叶烟、蔓陀罗、番茄,在寄主反应、双链RNA4和卫星RNA的大小上明显不同于国内外报道的CMV株系或分离物,同时说明侵染甜菜的CMV可能存在着株系分化。     

核盘菌侵入油菜超微结构及侵染机制的研究

 通过电子显微镜观察核盘菌在油菜叶片上侵染过程,发现该菌首先在叶片上形成复合附着器。每个分枝末端一般生出一个侵染钉。侵染钉侵入叶表面腊质、角质层和表皮细胞壁时.不仅靠附着器产生的压力,而且供助于酶对寄主表面的软化、消解作用。该菌通过角质层和表皮细胞壁侵入油菜叶片,尚未发现通过气孔侵入的现象。侵入叶片后,该菌的继续生长,导致了油菜组织的溃烂。然后菌丝在腐烂的叶片上集结形成菌核。     

侵染花椰菜的芜菁花叶病毒及RT-PCR扩增外壳蛋白基因研究

 从杭州市郊区及本校附近菜园地表现严重花叶症状的花椰菜上分离到一种线状病毒,接种6科31种鉴别寄主,能侵染5科22种植物。病组织超薄切片可见风轮状内含体和片层聚集状内含体。感病的芥菜叶片,用0.5mol/L磷酸钾缓冲液(pH7.5)匀浆后汁液加4% PEG-8000沉淀3h,5%~40%甘油梯度离心纯化病毒,可获得较高的产量。提纯的病毒均为一弯曲的线状颗粒,长度740nm左右。病毒提纯液于264nm处有一吸收峰,为典型的核蛋白紫外吸收。TuMV-H分离株抗血清包被的铜网能大量吸附病毒颗粒。用特异的PCR引物扩增其外壳蛋白基因,可得-0.9Kb的片段。     

中国小麦黄花叶病毒(WYMV)分布的RT-PCR鉴定

 镰刀菌产生的单端孢霉烯毒素,包括DON、DAS和T-2毒素,是一类重要的植物病原真菌毒素。这类毒素不仅加强病菌的为害程度,而且人畜食用罹病谷物及其制成品易造成中毒。近年来,单端孢霉烯毒素的生物合成途径、关键酶及其基因克隆,毒素在致病过程中的作用,以及利用毒素作为选择压鉴定小麦抗病性和筛选抗病突变体均取得了明显进展。本文对此作一综述。     

种子处理对玉米矮花叶病的防治效果

运用苗期症状观察和点免疫杂交技术（ＤＩＢＡ）测定了河北承德地区制种用玉米品种掖单１０７种子ＭＤＭＶ的带毒率，并在此基础上于室内和田间采用几种不同方法进行种子处理的防病实验，结果表明，５０倍８３增抗剂、０．５％高锰酸钾、７０％乙醇、０．１％磷酸三钠及６０℃温水浸种均有一定的防治效果，其中以０．５％高锰酸钾１０ｍｉｎ及５０倍８３增抗剂２４ｈ浸种防效较好。由此说明，种子处理对减轻玉米矮花叶病流行为害具有一定的作用     

大豆花叶病毒病研究进展

 大豆花叶病毒病是世界性病害,导致大豆产量降低并产生种粒斑驳。目前国内外对SMV株系的划分不统一。美国报道了G1-G7,G7A,C14九个株系,日本报道了A-E 5个株系,中国东北1、2、3号株系,江苏SA-SH株系,湖北S1,S2株系,黄淮Y 1-Y7株系。各地学者开展了抗源的鉴定和抗病育种工作,筛选和选育出一批抗病品种。美国已命名3个抗性基因,Rsv1,Rsv2,Rsv3。由于抗源不同,对中国东北3个株系SM V抗性遗传研究结果不同,抗性受1对或2对显性或隐性基因控制;对江苏株系抗性遗传研究结果一致,抗性受单显性基因控制。对感染SM V后大豆植株及种粒生理生化性状的变化及抗性机制进行了研究,表明过氧化物酶同工酶等性状与抗性有关。目前已鉴定出与抗性基因连锁的SSR,RFL P和R APD分子标记,成功的克隆了SMV外壳蛋白基因并导入大豆中。     

感染烟草花叶病毒(TMV)的烟叶在显症前的荧光光谱变化

通过测试ＴＭＶ侵染叶片的叶绿素含量与荧光光谱特征的动态变化，分析影响荧光光谱的因素，在以４８０ｎｍ作为激发波长时，叶片６８５ｎｍ与７４０ｎｍ荧光强度之比（Ｆ６８５／Ｆ７４０）随着病毒侵染时间的延长而增加，叶绿素含量则随着病毒侵染时间的延长而降低，因此提出可用Ｆ６８５／Ｆ７４０与叶绿素含量之比作为ＴＭＶ早期诊断的指标。     

黄瓜花叶病毒三个毒株对烟草细胞内防御酶系统及细胞膜通透性的影响

 用黄瓜花叶病毒(CMV)PE、M和Xb3个毒株接种烟草(品种K₃₂₆)后,按时间顺序测定与细胞防御系统有关的酶活性和受侵细胞膜通透性变化:1)苯丙氨酸解氨酶(PAL):Xb毒株侵染初期导致酶活性明显升高、后期下降,M毒株导致酶活性一直保持在较高水平,而PE毒株则导致酶活性下降。2)过氧化物酶(POD):PE和M毒株均导致酶活性升高,Xb毒株影响不大。3)超氧化物歧化酶(SOD):Xb和M毒株导致酶活性前期升高、后期活性下降,PE毒株引起酶活性前期略微升高、后期下降。4)多酚氧化酶(PPO):Xb毒株导致发病前期酶活性急剧升高、后期降低,M毒株导致酶活性初期降低、后期回升,PE毒株导致酶活性升高。5)受侵细胞在发病初期的膜通透性均低于正常水平,不同毒株引起的膜透性变化与症状的严重度均有独特的规律。3个毒株的侵染均可引起细胞内可溶蛋白浓度的改变。     

烟草花叶病的损失测定

对烟草花叶病损失的田间试验和统计分析结果表明:单株烟叶的产量、产值的损失率与病害级别显线性函数关系;田间的产量、产值的损失率与病株率、病情指数的关系为逻辑斯蒂模型。花叶病的发生,使受害株叶片中的蛋白质含量升高,糖含量下降,品质明显降低。