大量资源种子加热超干燥的效应研究

以笋玉米、豇豆、萝卜、油菜等4种蔬菜的大量种子(10kg)为材料,经50℃加热超干燥后,先后都可以达到适宜的超干燥含水量。超干处理后种子活力指数等的比较测定显示：除豇豆种子超干应控制在2~4d外,其余种子对高温和低水分都有较强的承受力。适度超干后种子活力与对照相似甚至比对照高,未出现受伤害的症状。结果表明,50℃加热超干燥方法对供试种子安全、有效。     

超干燥保存的烟草种子活力变化规律研究

本文是在烟草种子超干燥保存技术研究取得初步成功的基础上，对1993－1994年采收并经过超干燥处理的4份烟草种子分别在原干燥器内继续保存2年和4年后进行的种子活力跟踪试验。并对种子发芽势、发芽率和发芽指数等指标作方差分析和多重比较。结果为：2年后不同干燥剂间种子的发芽势、发芽率和发芽指数差异显著，其中，各处理的种子活力排列为：硅胶＞硅胶＞生石灰＞生石灰；2：1＞1：1＞3：1＞4：1；牛津3号＞其它品种。4年后，烟草种子的发芽指数硅胶＞硅胶＋生石灰＞生石灰。万良烟＞其它品种，比例间无显著差异。对种子的含水量、发芽势、发芽率、发芽指数和活力指数相关矩阵进行分析，结果为含水量与发芽指数和活力指数之间，发芽势与发芽指数之间，发芽指数与活力指数之间差异显著，种子含水量对种子活力贡献最大，其次为发芽率，发芽势、发芽指数。几项指标间的相互关系可用多元方程表示：Y＝0．496507＋0．136777X1＋0．000567X2－0．007197X3－0．000201X4。方程可信度达93．12％。该试验为长期，安全保存烟草种子和延长超干燥烟草种子保存寿命提供理论依据及配套措施。     

甘肃金鳟AFLP体系建立及应用

甘肃金鳟是我国自主培育的虹鳟新品种,为进行其种质资源研究和遗传管理,以其尾鳍为试验材料,提取基因组DNA,对影响甘肃金鳟扩增片断长度多态性(AFLP)反应体系进行优化,包括模板DNA浓度、基因组酶切时间、选择性扩增中Mg2+、预扩增产物稀释倍数及选扩性引物M+3/E+3配比等进行比较分析,建立了适于甘肃金鳟的AFLP反应体系。即：100 ng 基因组DNA,3 U EcoR I 37℃酶切3 h,再 Mse I 65℃酶切5 h;然后用1 U的T4连接酶连接12 h, 选扩25 μl PCR反应体系中Mg2+2.0 mmol/L,预扩产物稀释30倍,选扩引物M+3/E+3配比为8∶1,所得产物经电泳和银染后可获得清晰条带,效果良好;筛选出了适宜甘肃金鳟品种分析的13对选择性引物。     

超干燥烟草种子活力丧失规律研究

本项试验研究1979～2000年采收并经过超干燥处理的37份烟草种子在4种贮藏条件下保存,定期进行发芽试验.一年后在温室种子柜和室内种子柜保存的种子失去发芽率,而在低温冷藏库和干燥器内的种子仍保持原有的发芽率、发芽势、发芽指数.为长期、安全保存烟草种子和延长超干燥烟草种子保存寿命提供理论依据及配套措施.     

烟草种子超干燥保存技术研究初报

利用不同的干燥剂以及干燥剂与种子的不同比例对烟草种子进行超干燥保存研究,试图找到最有效、最安全的烟草种子超干贮存方法,并探索水分的降低规律,超干燥后对种子活力的影响等等。通过试验研究,寻找出超干燥条件下最低水分的临界值及配套完善种子超干技术,致使在常温下烟草种子保存寿命达到中期库的水平。     

黄瓜AFLP反应体系的建立

以24个不同类型的黄瓜高代自交系为试材,通过对扩增长度多态性(AFLP)反应体系中的几个关键参数进行优化,建立了适合于黄瓜的AFLP反应体系。结果表明,用于酶切的基因组DNA以300ng为宜,预扩增产物的稀释倍数以30倍为宜,选择性扩增引物的选择性碱基的数目以“2 3”组合为宜。采用优化好的体系,引物组合P12M12在供试材料中共扩增出稳定清晰的带纹35条,其中多态性带4条。     

白魔芋快繁体系研究

以优良白魔芋新品种——大青秆不同组织为外植体,进行愈伤组织的诱导和植株再生,试验结果表明：以叶柄为外植体,污染率低,愈伤诱导率达85.71%,继代培养中以MS+BA2mg/L+NAA0.01mg/L作为芽分化增殖的最佳培养基,将芽转接到MS+NAA0.5mg/L生根培养基上诱导生根,生根率达100%。     

超干燥保存烟草种子的寿命预测

用1978～1993年采收并贮于干燥器中的烟草种子进行种子的含水量测定和发芽试验。这些种子的含水量在1．7729％～3．8943％之间,平均为2．3076％,均达5％以下的超干燥水平。同时,我们还测出这批种子的平均发芽率为83．3％,并采用三处方法对超干燥烟草种子的寿命进行预测．从而得出烟草种子在超干燥条件下可以保存20～25年以上。     

花生壳生物炭对铵态氮的吸附性能研究

为揭示生物炭对铵态氮的吸附性能,以花生壳为原料,低氧热解(300℃)制备生物炭,采用批量平衡吸附法,研究花生壳生物炭对铵态氮(NH4+-N)的吸附机制及影响因素。研究结果表明：生物炭吸附NH4+-N的量随溶液NH4+-N初始浓度增加而增加,当初始浓度接近100 mg/L 时,吸附趋于饱和,最大吸附量达5.79 mg/g。Langmuir 能较好地拟合花生壳生物炭对NH4+-N等温吸附数据,表明吸附是以单层吸附为主导。生物炭对NH4+-N的吸附约30 min 达到平衡,伪二级动力学方程能较好地描述其吸附动态;随生物炭添加量的增加,其对NH4+-N的吸附量下降,而吸附率逐渐增加,100 mg/L吸附体系中,生物炭适宜添加量为0.6 g/50 mL,最大吸附率达40%。生物炭吸附NH4+-N的量随溶液pH升高而增加,当体系pH 9.0 时,吸附量高达8.8 mg/g。可见,溶液NH4+-N初始浓度、生物炭添加量及pH是影响生物炭吸附性能的重要因素。     

抑制山女鳟源水霉菌菌丝及游动孢子生长的药物筛选

研究了药物对山女鳟水霉病病原的抑制及杀灭效果,即中草药抑制水霉菌丝生长和抗水霉制剂抑制孢子的生长。实验选用过氧化氢、甲醛等6种常用抗水霉制剂及地肤子、蛇床子等16种中草药单方和2种复方(T1、T2)分别采用孢子计数法和琼脂平板扩散法对水霉游动孢子及菌丝的体外抑菌效果进行研究。研究结果显示,过氧化氢和甲醛抑孢子的效果优于孔雀石绿,而检科Ⅰ号、亚硝酸钠和过氧乙酸的抑制效果不及孔雀石绿。石榴皮和复方T1能有效抑制菌株SN的菌丝生长;地肤子、肉桂、柠檬、苦参、大蒜、黄精、茴香和菖蒲对菌株几乎无抑菌作用;黄芩、虎杖、金银花、苦楝皮、复方T2、蛇床子、土槿皮和大黄均有较好的抑制作用。实验为合理的筛选有效抑山女鳟水霉菌药物及制定科学有效地抗霉剂使用方法提供理论依据。     

芝麻SRAP反应体系的建立与优化

以芝麻幼叶提取的DNA为试验材料,通过对影响SRAP扩增结果的重要反应因素dNTPs、Mg2 + 、Taq酶、随机引物及模板DNA进行优化,建立了芝麻扩增多态性高、稳定性强、带型清晰的SRAP最佳反应体系：dNTPs（10mmol／L）0.30μl,Mg2 +（25mmol／L）1.20μl,Taq酶1.00U,正反引物各50ng,DNA模板80ng,10×Buffer 1.5μl,总体积15μl,为SRAP标记技术在芝麻分子生物学研究方面的应用奠定了基础。     

花生DNA分子标记的研究 III 不同限制酶组合AFLP分析效果比较

采用了28对EcoR I/Mse I AFLP选择性扩增引物、64对Pst I /Taq I AFLP选择性扩增引物，对作图亲本24-3、B4及其杂种F1进行了分析，统计了两种限制酶组合的扩增总带数、多态性带数及多态性率。秩和检验结果说明，两种限制酶组合AFLP每对引物扩增出的总带数无显著差异，而多态性条带数目以及多态性率均有极显著的差异。证明尝试不同的限制酶组合可望揭示出花生品系材料间更为丰富的遗传变异性。     

国槐离体培养及高效再生体系的优化

以国槐枝条为材料,研究了国槐离体培养及再生体系,探讨了不同激素组合对国槐无菌芽的产生、愈伤组织的形成、分化、增殖以及生根的影响,筛选出适合国槐枝条无菌芽诱导、无菌芽各部分形成愈伤组织、分化和增殖的培养基为MS+ BA1.0mg/L +NAA 0.1mg/L;有利于生根的培养基为1/2MS+ NAA0.3mg/L。     

天门冬AFLP反应体系的建立及优化

为探讨天门冬种质间遗传多样性奠定基础,采用单因子试验,建立并优化了天门冬AFLP反应体系,研究酶的用量、酶切时间、预扩增体系和选择性扩增等对PCR扩增的影响。酶切反应体系加入5.0 U EcoR I和Mse I于37℃保温3 h;连接反应体系加入1.0 U T4-DNA连接酶、2.0 pmol Mse I接头和2.0 pmol EcoR I接头,16℃保温过夜;选择性扩增反应体系加入1.0 U Taq DNA聚合酶,0.4 μL EcoR I和Mse I选择性引物;并筛选得到了8对清晰、多态性高的AFLP引物。17份天门冬种质对建立的AFLP反应体系检验,证明该体系稳定可靠,可用于天门冬种质多样性的分析。     

葎草DNA的提取及AFLP标记反应体系的建立

本文对CTAB法、改良CTAB法和SDS法提取雌雄异株植物葎草(Humulus scandens L.)基因组的方法进行了比较分析,并在此基础上对影响葎草AFLP扩增的关键因素模板浓度、酶切时间、选择性扩增模板浓度进行了优化.结果表明,改良的CTAB法更适合葎草基因组DNA的提取;同时利用AFLP分子标记技术,采用EcoI-Mse I酶切组合,共筛选27对引物组合,确定了适用于葎草AFLP反应的最佳酶切连接、预扩和选扩体系.同时发现2对引物组合E-ACG M-CTA和E-AAC M-CAC共扩增出5条雌雄性别特异条带.     

羊耳蒜遗传多样性研究中AFLP反应体系的建立与初步应用

为研究羊耳蒜种质资源遗传多样性,建立并初步应用羊耳蒜AFLP反应体系。以羊耳蒜幼嫩叶片为材料,采用常规SDS法提取基因组DNA,通过优化AFLP反应体系中的几个关键因素,建立适合羊耳蒜的AFLP银染反应体系,并利用筛选出的引物组合对羊耳蒜的遗传多样性进行初步研究。经EcoRⅠ和MseⅠ酶组合37℃酶切3 h后可将500 ng基因组DNA完全切开;酶切产物和接头经16℃连接过夜后,用带有1个选择性碱基的预扩引物和带有3个选择性碱基的选扩引物分别进行扩增,扩增产物经变性聚丙烯酰胺凝胶电泳分离,银染,能够得到清晰的扩增图谱。3对引物组合对8个羊耳蒜种群共185个体的扩增共得到221条条带,其中多态性条带195条,多态性条带百分率为88.24%。本研究结果表明建立的AFLP反应体系可用于羊耳蒜种质资源遗传多样性研究。     

茄子及其近缘野生种AFLP分析体系的建立

本文以若干茄子自交系及其近缘野生种为材料,从DNA提取、酶切连接、预扩和选扩等几方面进行选择优化,建立起高效稳定的AFLP分析体系;从64对AFLP引物组合筛选出多态性好的引物组合38对,栽培种茄子和野生种托鲁巴姆间多态性高达68.5%.本实验室正以本AFLP分析体系开展茄子资源遗传多样性、青枯病抗性基因分子标记等遗传分析研究工作.     

禾本科作物基因组AFLP分析体系的建立及优化

以禾本科作物小麦为出发材料,通过优化AFLP选择性扩增步骤的4个限制性因素:Mg2 浓度、dNTP浓度、引物浓度和预扩产物稀释倍数,确立AFLP最佳反应体系为:预扩增产物稀释20倍吸取2μL做为选择性扩增模板,混合1.5 mmol/L MgCl2,0.2 mmol/L dNTPs,0.4μmol/L选扩引物1、U Ex Taq进行选择性扩增。应用该体系分析水稻和玉米两大类禾本科作物基因组DNA样品,同样取得理想结果,扩增出清晰可辨且适量的电泳条带。该技术体系为AFLP分子标记技术在禾本科作物遗传分析中的广泛应用奠定了基础。