地塞米松与肝素对HL—60细胞增殖和生物大分子合成的影响

用地塞米松和肝素ＩＣ６０及ＩＣ５０低一个剂量，对ＨＬ－６０细胞增殖、生长曲线和分裂指数均有明显的抑制作用，联合应用时抑制作用显著增强；对ＤＮＡ和蛋白质合成抑制作用大于ＲＮＡ，联合应抑制作用均显著增强，提示两药抑制ＨＬ－６０细胞增殖、分裂和生长可能与它们抑制ＤＮＡ和蛋白质成有关，亦与抑制ＲＮＡ合成有一定关系。     

亚硒酸钠和维甲酸联合对HL-60细胞DNA与蛋白质合成和细胞周期的影响

目的：观察亚硒酸钠和维甲酸联合作用对ＨＬ－６０细胞ＤＮＡ与蛋白质合成和细胞周期的影响,探讨两者的联合效应和作用机制。方法：以人早幼粒白血病细胞（ＨＬ－６０）为实验对象,设立对照、５．８μｍｏｌ／Ｌ亚硒酸钠和０．１μｍｏｌ／Ｌ维甲酸（ＲＡ）以及两者联合四个实验组,分别在加药处理后１～４ｄ收获细胞。利用３Ｈ－脱氧胸苷（３Ｈ－ＴｄＲ）和３Ｈ－亮氨酸（３Ｈ－Ｌｅｕ）参入实验以及流式细胞仪式进行分析。结果：５．８μｍｏｌ／Ｌ亚硒酸钠和０．１μｍｏｌ／ＬＲＡ联合可显著抑制ＨＬ－６０细胞的ＤＮＡ和蛋白质等生物大分子的合成,联合作用强于两者单独作用。流式细胞仪分析的细胞周期结果表明：单独硒组的ＨＬ－６０细胞在Ｇ２＋Ｍ期和Ｓ期有一定的阻滞;维甲酸的作用主要是阻滞Ｇ１期向Ｓ期移行,使Ｇ１期细胞蓄积,但该剂量单独作用较小;联合组主要表现在Ｇ１阻滞作用要大于单独ＲＡ组的作用,而对细胞的毒性作用并未增加。结论：生物大分子的合成和细胞周期分析方面的实验初步阐明了亚硒酸钠和维甲酸抑制ＨＬ－６０细胞增殖和诱导分化以及联合效应强于各自的单独应用机制。硒与维甲酸的联合具有潜在的临床应用价值。     

欧洲油菜花粉cDNA文库的构建

从欧洲油菜（Ｂｒａｓｓｉｃａｎａｐｕｓ）成熟花粉中提纯出ｍＲＮＡ．ｐｏｌｙ（Ａ）＋ｍＲＮＡ在ｏｌｉｇｏ（ｄＴ）引导下，用反转录酶合成ｃＤ－ＮＡ第一链，用大肠杆菌ＲＮＡ酶Ｈ和大肠杆菌ＤＮＡ聚合酶Ｉ置换合成ＣＤＮＡ第二链．加上ＥｃｏＲＩ／ＮｏｔＩ接头。最后将双链ＤＮＡ克隆子λｇｔｌｌ载体中。用Ｂｃｐｌ作探针，杂交筛选构建的ｃＤＮＡ文库。     

亚硒酸钠和维甲酸联合对HL-60细胞生长、分化的影响

目的：观察亚硒酸钠和维甲酸联合作用对ＨＬ－６０细胞生长、分化的影响,探讨两者的联合效应和作用机制。方法：以人早幼粒白血病细胞（ＨＬ－６０）为实验对象,设立对照、５．８μｍｏｌ／Ｌ亚硒酸钠、０．０１μｍｏｌ／Ｌ、０．１μｍｏｌ／Ｌ和１μｍｏｌ／Ｌ维甲酸（ＲＡ）以及５．８μｍｏｌ／Ｌ亚硒酸钠和０．１μｍｏｌ／ＬＲＡ两者联合６个实验组,分别在加药处理后１～５ｄ,每日收获细胞,利用台盼蓝排除法确定活细胞数并进行统计学处理,以观察加药后对ＨＬ－６０细胞生长的影响;收获的细胞做细胞涂片,用Ｗｒｉｇｈｔ－Ｇｉｅｍｓａ染色液染色,观察硒和ＲＡ对细胞形态分化的作用。与此同时,利用硝基四唑蓝（ＮＢＴ）还原实验,观察药物对ＨＬ－６０细胞功能分化的影响。结果：５．８μｍｏｌ／Ｌ亚硒酸钠和０．１μｍｏｌ／ＬＲＡ联合可显著抑制ＨＬ－６０细胞生长,且对细胞的毒性并无增加,强于两者的单独作用。两者联合可明显诱导该细胞向粒系细胞分化,处理５ｄ后有７２％的细胞分化成熟,联合对细胞的分化作用与１μｍｏｌ／ＬＲＡ（１０倍）的效果基本相同。而单用０．１μｍｏｌ／Ｌ维甲酸只有３９％的细胞分化成熟。ＮＢＴ还原实验表现出类似结果。文中讨论了硒与ＲＡ联合作     

与油梨成熟有关的mRNA的分离及cDNA文库的构建

油梨果实在７℃下贮藏一定时期，取果实样品抽提总ＲＮＡ，通过ｏｌｉｇｏ ｄＴ纤维素柱纯化，获得ｐｏｌｙ（Ａ）＾＋ｍＲＮＡ，利用λＺａｐ－ｃＤＮＡ合成试剂盒合成双链ｃＤＮＡ，再将ｃＤＮＡ连接到克隆载体Ｕｎｉ－ＺａｐＸＲ上，构成与油梨果实成熟有关的ｃＤＮＡ文库，同时，利用纤维素酶和乙烯形成酶克隆探针，对文库作了筛选。     

白首乌（Cynanchum bungi Decne）脱分化诱导与内源IAA和核酸 …

外源生长素对白首乌脱分化是必要的,效果最好的２,４－Ｄ浓度范围０．１～０．３ｍｇ／Ｌ;白首乌脱分化的起动和细胞旺盛分裂伴随着内源ＩＡＡ含量的迅速提高,Ｔｒｐ含量的变化与ＩＡＡ相似,但其峰值比ＩＡＡ提前,这为旺盛分裂期ＩＡＡ的大量形成奠定基础;ＤＮＡ和ＲＮＡ含量的峰值出现在旺盛分裂期,这与此时期ＩＡＡ的大量及时形成和旺盛的代谢活动有关,从形成期直至衰老,内源ＩＡＡ,Ｔｒｐ和ＤＮＡ,ＲＮＡ含量下降并保     

亚硒酸钠对人早幼粒白血病细胞（HL－60）的影响

以人早幼粒白血病细胞（ＨＬ－６０）为实验对象，研究了亚硒酸钠对细胞的影响。结果发现５．８μｍｏｌ／Ｌ亚硒酸钠可以抑制ＨＬ－６０细胞生长，但１１．６μｍｏｌ／Ｌ以上浓度时对细胞的毒性加重。未发现亚硒酸钠能诱导ＨＬ－６０细胞进行形态和功能分化。     

玉米叶片cDNA文库构建及Cah墓因克隆

从玉米叶片中提取总ＲＮＡ后，再利用ｏｌｉｇｏ（ｄ７）－纤维素亲合层析往，从中分离出ｍＲＮＡ，然后以ｏｌｉｇｏ（ｄ７）－ＸｂａＩａｄａｐｔｏｒ作为引物，ｍＲＮＡ作为模板，合成相应的ｃＤＮＡ．并定向克隆进λＧＥＭ－４载体，构建出滴度为２×１０５ｐｆｕ的玉米叶片ＣＤＮＡ文库、最后，利用寡核苷酸探针，从ｃＤＮＡ文库中筛选到８个阳性克隆。     

新城疫病毒F_（48）E_8株cDNA文库的构建

以ＳＰＦ鸡胚繁殖我国标准新城疫病毒Ｆ＿（４８）Ｅ＿８强毒株，经蔗糖密度梯度超速离心纯化病毒。再以酚－ＳＤＳ法提取病毒基因组ＲＮＡ，作为反应模板、采用Ｐｒｏｍｅｇａ公司商品试剂盒合成双股ｃＤＮＡ。以同聚物加尾的方法将ｃＤＮＡ克隆到质粒ｐＧＥＭ３Ｚｆ（一）中，经ＡＩＸ平板筛选，限制性内切酶分析和Ｄｉｇｏｘｉｇｅｎｉｎ标记的核酸探针检测，共获得插入外源片段大小在０．６～４．８ｋｂ的阳性克隆７５个，初步构建了Ｆ＿（４８）Ｅ＿８株的ｃＤＮＡ文库     

微量板杂交法和斑点杂交法检测菊花矮化类病毒的比较

利用狄高辛（ＤＩＧ）标记制备菊花矮化类病毒（ＣＳＶ）特异性探针，由反转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）进行ＣＳＶ ＲＮＡ的反转录和ｃＤＮＡ的扩增，然后比较２种核酸杂交方法－微量板杂交和斑点杂交检测ＣＳＶ的灵敏度。本研究结果表明，３０ｍｇ干燥样本抽提的ＣＳＶ ＲＮＡ被稀释４００倍，取４μＬ（约７５０ｐｇ样本抽提的ＲＮＡ）经ＲＴ－ＰＣＲ，其产物再用１０×ＳＳＣ稀释１００倍，采用微量板杂交仍可很容易得到     

中华补血草黄酮抑制白血病细胞增殖的初探

应用MTT法研究中华补血草不同浓度黄酮提取物对体外培养的人类白血病HL-60细胞株的增殖抑制作用。结果显示：不同浓度的中华补血草黄酮提取液作用人白血病细胞HL-60处理48h后,细胞的生长受到不同程度的抑制,并且随着浓度的升高抑制作用逐渐加强,呈现明显的量效关系,其IC50值为11．55μg／mL。     

Quinacrine (atebrin): mode of action

Quinacrine at a concentration of 8 x 10(-4) mole per liter is bactericidal for Escherichia coli, blocks DNA synthesis, and inhibits the syntheses of RNA and protein strongly. At a concentration of 2x 10(-4) mole per liter, the drug is bacteriostatic, the syntheses of protein and DNA (but not that of RNA) are partially inhibited, and the bacteria grow into giant filaments. Impairment of DNA replication is proposed as the mode of action of quinacrine.     

平贝母体细胞胚胎发生早期核酸和蛋白质合成动态的研究

在长期平贝母(Frifiiavia ussuviensis Maxim)组织培养中,建立比较稳定的体细胞胚胎发生体系,应用放射性同位素~3H 的液体闪烁技术测得,体细胞胚 RNA、蛋白质和 DNA 合成分别在诱导培养第5,7,8b 达到高峰。组织细胞学观察表明,体细胞胚胎发生早期的核酸与蛋白质合成的变化与愈伤组织中细胞的胚性化和胚性细胞的增殖相关。     

Actinomycin D: inhibition of respiration and glycolysis

Actinomycin D inhibited respiration and anaerobic glycolysis of human leukemic leukocytes and lowered the adenosine triphosphate content of the cells. Inhibitory effects on respiration and on RNA synthesis could not be dissociated from one another over a wide range of drug concentrations. Actinomycin D also impaired protein synthesis, probably by decreasing the availability of adenosine triphosphate and by inhibiting messenger RNA.     

咖啡因Na_2─EDTA对辐照大豆和油菜幼苗DNA合成的影响

本文研究了咖啡固和Ｎａ２一ＥＤＴＡ后处理对不同辐照敏感性作物幼苗ＤＮＡ、ＲＮＡ含量和修复能力的影响。结果表明，随着辐照剂量的增大，大豆（对辐射敏感）和油菜（抗辐射）７天龄幼苗下胚轴内ＤＮＡ，ＲＮＡ含量随之增大，且大豆的ＤＮＡ含量比油菜高２倍多。咖啡固和Ｎａ２一ＥＤＴＡ后处理，均高于对照。放射性３Ｈ─ＴｄＲ标记６渗入法证实，种子辐照后，７日龄幼苗体内仍存在着非按期的ＤＮＡ合成，且油菜的非按期ＤＮＡ合成能力强于大豆。咖啡固、Ｎａ２─ＥＤＴＡ和二者复合作用的后处理，抑制了ＤＮＡ的非按期修复合成，加重了辐射损伤，其抑制程度，咖啡因＋Ｎ８２－ＥＤＴＡ＞咖啡固＞Ｎ８２─ＥＤＴＡ。     

Existence of high abundance antiproliferative mRNA's in senescent human diploid fibroblasts

Polyadenylated RNA isolated from senescent human diploid fibroblasts (HDF) inhibited DNA synthesis in proliferation-competent cells after microinjection, whereas polyadenylated RNA from young HDF had no inhibitory effect. Polyadenylated RNA from young cells made quiescent by removal of serum growth factors had a slight inhibitory effect on DNA synthesis. The abundance level of inhibitor messenger RNA (mRNA) from senescent cells was estimated at 0.8 and that of quiescent cells at 0.005 percent. These results demonstrate the existence of one or more antiproliferative mRNA's in nonproliferating normal human cells; these RNA's code for factors that either work antagonistically to initiators of DNA synthesis or regulate the expression of the initiators in some way. The abundance level of the inhibitory mRNA in senescent cells indicates the feasibility of developing a complementary DNA probe that will be useful in studying cell cycle control mechanisms.     

茶叶提取物EGCG和GCG及ECG对B16细胞内黑色素生成的抑制作用

为研究茶叶提取物表没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocatechin gallate,EGCG)、没食子儿茶素没食子酸酯(gallocatechingallate,GCG)和表儿茶素没食子酸酯(epicatechingallate,ECG)对体外培养B16小鼠黑色素瘤细胞黑色素生成及酪氨酸酶活性的影响,分别用不同浓度的EGCG、GCG、ECG和熊果苷(Arbutin,AR)处理细胞,观察效应物对细胞形态的影响,用溴化二苯四偶氮法(MTT法)测定茶叶提取物对细胞增殖率的影响,以左旋多巴(L–DOPA)为底物,测定细胞内酪氨酸酶的活性,采用氢氧化钠裂解法测定细胞内黑色素的含量。结果显示,EGCG、ECG、GCG能显著抑制B16细胞的黑色素生成和酪氨酸酶的活性,且呈剂量依赖关系;当浓度为60μg/mL时,细胞增殖率均低于50%,酪氨酸酶活性与对照组相比分别降低了26.67%、27.27%和32.71%,黑色素生成抑制率均在30%以上。结果表明,茶叶提取物能通过多种途径抑制黑色素生成,且GCG的作用效果最优,ECG的作用效果次之,三者的作用效果均优于熊果苷的作用效果。     

银杏叶多糖抑制人白血病细胞增殖的试验研究

[目的]明确银杏叶多糖(PGBL)对白血病的治疗价值。[方法]以干燥银杏叶为材料,提取PGBL;向100μl对数增长期的人急性早幼粒白血病HL-60细胞悬液中分别加入100μl含PGBL50、100、200μg/ml的RPMI-1640培养液,以加入100μlRPMI-1640纯培养液为对照,研究不同浓度(50、100、200μg/ml)PGBL对HL-60细胞增殖的抑制率。[结果]50、100、200μg/ml PGBL对人急性早幼粒白血病HL-60细胞增殖均有不同程度的抑制作用,且随着药物浓度和作用时间的增加,抑制作用增强,即PGBL对HL-60细胞增殖的抑制作用存在剂量-时间依赖性;方差分析结果表明,PGBL对HL-60细胞增殖的抑制率显著高于对照(P<0.01)。[结论]PGBL对HL-60细胞增殖具有较好的抑制作用,且该抑制作用具有浓度-时间依赖性。     

ZINC STIMULATION OF RNA AND PROTEIN SYNTHESIS IN RHIZOPUS NIGRICANS

Addition of 1.7 x 10-(5)M zinc sulfate to cultures of Rhizopus nigricans increases growth and substrate utilization. Analysis of cells during the course of growth, after addition of the metal, showed that there was an immediate increase in RNA, followed by a corresponding increase in protein and cell mass. The DNA content was affected to a lesser extent. It is postulated that Zn(++) stimulates growth through a primary effect on RNA synthesis.     

Molecular cloning of the complementary DNA for human tumor necrosis factor

Tumor necrosis factor (TNF) is a soluble protein that causes damage to tumor cells but has no effect on normal cells. Human TNF was purified to apparent homogeneity as a 17.3-kilodalton protein from HL-60 leukemia cells and showed cytotoxic and cytostatic activities against various human tumor cell lines. The amino acid sequence was determined for the amino terminal end of the purified protein, and oligodeoxyribonucleotide probes were synthesized on the basis of this sequence. Complementary DNA (cDNA) encoding human TNF was cloned from induced HL-60 messenger RNA and was confirmed by hybrid-selection assay, direct expression in COS-7 cells, and nucleotide sequence analysis. The human TNF cDNA is 1585 base pairs in length and encodes a protein of 233 amino acids. The mature protein begins at residue 77, leaving a long leader sequence of 76 amino acids. Expression of high levels of human TNF in Escherichia coli was accomplished under control of the bacteriophage lambda PL promoter and gene N ribosome binding site.