热激因子AtHsfA1a突变对热胁迫中拟南芥抗坏血酸过氧化物酶的影响

【目的】探讨热激因子AtHsfA1a突变对热胁迫中拟南芥抗坏血酸过氧化物酶的影响。【方法】以T-DNA插入AtHsfA1a基因突变拟南芥及野生型植株为材料,采用分光光度法比较热胁迫下不同基因型植株的抗坏血酸过氧化物酶(APX,EC1.11.1.7)活性的变化,RT-PCR法研究AtHsfA1a对APX表达的影响,染色质免疫沉淀技术和凝胶阻滞电泳分析体内外研究AtHsfA1a与APX基因启动子区的结合情况。【结果】在热胁迫下AtHsfA1a基因突变拟南芥植株中的APX的活性低于野生型,且AtHsfA1a基因突变拟南芥植株中的APX的mRNA的相对量低于野生型;体内研究发现在热胁迫下AtHsfA1a基因突变拟南芥植株中未筛选出APX基因启动子区片段,而野生型筛选出APX基因启动子区片段,体外研究发现AtHsfA1a与APX基因启动子区的结合是直接的。【结论】热激因子AtHsfA1a突变对热胁迫中拟南芥APX的影响是从转录调控水平直接影响APX的表达。     

拟南芥热激因子AtHsfA1a对热胁迫中抗坏血酸过氧化物酶的调控

[目的]为了研究拟南芥热激因子AtHsfA1a对热胁迫中抗坏血酸过氧化物酶(APX,EC1.11.1.7)的调控.[方法]以内源A tHsfA1a基因沉默的转基因拟南芥及野生型植株为材料,热胁迫后,采用分光光度法分析APX酶活性的变化,采用实时荧光定量PCR研究APX基因的表达水平,采用染色质免疫沉淀技术研究AtHsfA1a与APX基因启动子区的体内结合情况.[结果]在热胁迫下内源AtHsfA1a基因沉默植株中的APX的活性和mRNA的表达量均低于野生型,内源AtHsfA1a基因沉默的植株中未筛选出APX基因启动子区片断,而野生型则筛选出APX基因启动子区片断.[结论]AtHsA1a对APX调控是直接的.该研究为进一步认识AtHsfA1a对植物耐逆境的作用及其应用提供理论依据,对揭示植物耐递境机理有重要意义.     

拟南芥热激因子AtHsfA1a对热胁迫中抗坏血酸过氧化物酶的调控（英文）

[目的]为了研究拟南芥热激因子AtHsfA1a对热胁迫中抗坏血酸过氧化物酶(APX,EC1.11.1.7)的调控。[方法]以内源AtHsfA1a基因沉默的转基因拟南芥及野生型植株为材料,热胁迫后,采用分光光度法分析APX酶活性的变化,采用实时荧光定量PCR研究APX基因的表达水平,采用染色质免疫沉淀技术研究AtHsfA1a与APX基因启动子区的体内结合情况。[结果]在热胁迫下内源AtHsfA1a基因沉默植株中的APX的活性和mRNA的表达量均低于野生型,内源AtHsfA1a基因沉默的植株中未筛选出APX基因启动子区片断,而野生型则筛选出APX基因启动子区片断。[结论]AtHsfA1a对APX调控是直接的。该研究为进一步认识AtHsfA1a对植物耐逆境的作用及其应用提供理论依据,对揭示植物耐递境机理有重要意义。     

拟南芥热激因子HSF1的表达与纯化

[目的]表达和纯化拟南芥热激因子HSF1。[方法]以构建的能表达热激因子HSF1的大肠杆菌Escherichia coli M15（pQE32／His6-HSF1,pREP4）为材料,用异丙基硫代-β—D-半乳糖苷（IPTG）诱导表达HSF1,再通过镍亲和层析纯化表达的HSF1,通过变性的聚丙酰胺（SDS．PAGE）电泳分析表达蛋白和纯化蛋白。[结果]试验获得了表达的HSF1,并且进一步获得了纯化的HSF1。[结论]该研究为探讨拟南芥HSF1在基因组的结合位点提供了试验材料,为全面认识HSF1作用机理和生理功能奠定了基础。     

拟南芥热激因子HSF1的表达与纯化

1材料与方法 1．1材料大肠杆菌Escherichia coli M15（pQE32／His6-HSF1,pREP4）和大肠杆菌E．coli TG1（PQE30空载体）。     

低温驯化对低温胁迫下茄子幼苗生理活性的影响

【目的】为探明低温驯化与茄子幼苗抗寒性的关系.【方法】利用人工气候箱模拟低温条件,研究了低温驯化的茄子幼苗在低温胁迫、常温恢复和恢复之后再次胁迫时相对电导率、丙二醛(MDA)、渗透调节物质及抗氧化酶活性的变化.试验设置3个处理,25℃常温处理为对照;T_1:未经低温驯化;T_2:3d12℃低温驯化.【结果】3d12℃低温驯化期间,与CK相比各指标均升高,脯氨酸(Pro)含量与对照差异显著;5d5℃低温胁迫期间,与CK相比各指标均显著升高,T_2处理Pro、可溶性糖、可溶性蛋白含量、SOD、POD、CAT活性的升高幅度显著高于T_1处理,MDA含量和相对电导率的升高幅度显著低于T_1处理;25℃恢复3d,T_2处理各指标恢复速度显著高于T_1处理;恢复3d转移到低温胁迫处理1d,茄子幼苗相对电导率、MDA、Pro、可溶性糖、可溶性蛋白及抗氧化酶活性进一步升高,T_2处理升高幅度显著高于T_1处理,而MDA含量和相对电导率的升高幅度显著低于T_1处理.     

Zn2+对高盐和紫外线胁迫条件下水稻根尖细胞程序性死亡的影响

前期研究表明:500mmol.L-1NaCl处理能诱导水稻武运粳8号根尖细胞发生细胞程序性死亡(programmed celldeath,PCD)。为了研究Zn2+对盐胁迫诱导的水稻根尖细胞PCD的影响,采用不同浓度Zn2+进行试验,结果表明:10μmol.L-1Zn2+能够在一定程度上缓解PCD现象。对这一过程中抗氧化酶(CAT、APX、POD和SOD)活性进行检测,发现抗氧化酶活性短期迅速升高,随后降低,10μmol.L-1Zn2+试验组的抗氧化酶活性高于对照组与单独NaCl处理组。而对H2O2在根尖细胞积累的观测结果显示Zn2+的添加能减少H2O2的积累,证明低水平Zn2+(10μmol.L-1)能够诱导抗氧化酶活性上升,并抑制活性氧产生。Zn2+同样可以缓解紫外线诱导的水稻根尖细胞原生质体PCD,而添加特异性的锌离子螯合剂TPEN(NNN′,N′-tetrakis-(2-pyridylmethyl)ethylenediamine)则会促进PCD的发生。据此推测:一定水平Zn2+对不同胁迫模式下发生的PCD进程的缓解作用具有普遍性。     

活性氧在环境胁迫诱导的植物细胞程序性死亡中的作用

细胞程序性死亡（PCD）发生在许多植物生长发育过程中和非生物的逆境条件下,是由细胞自身基因编码的、主动的、有序的细胞死亡形式。活性氧（ROS）在植物的生长、发育和对外界生物和非生物环境刺激的反应及细胞程序性死亡等调控过程中是一个重要的信号分子。本文综述了ROS的产生、对植物在环境胁迫下防御反应的作用以及与其他一些信号分子在植物PCD中的相互作用。     

盐胁迫对拟南芥叶片和下表皮细胞大小的影响

[目的]探讨盐胁迫对拟南芥叶片发育的影响。[方法]用浓度分别为0、100和150 mmol/L的NaC l溶液处理拟南芥幼苗7和14d后,用改进的指甲油印迹法并借助计算机软件,测量了不同处理的叶片面积和下表皮细胞面积。并对不同处理的叶片和细胞面积进行了差异性检验和比较。[结果]盐胁迫下,拟南芥叶片的生长受到显著抑制。叶片大小、叶片下表皮细胞的大小都相应减小。[结论]叶片及表皮细胞的减小是植物盐胁迫条件下的重要生理反映。     

低温胁迫下水杨酸对油菜根系生理活性的影响

以油菜根系为实验材料,在低温和低温条件下水杨酸处理下,对油菜根系的超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量、脯氨酸(Pro)变化进行测定。结果表明,水杨酸可使低温条件下SOD活性升高,MDA含量下降,脯氨酸含量升高,从而提高油菜根系的抗冷性。     

热胁迫对葡萄叶片中蛋白激酶活性的影响

 以葡萄品种京秀（Vitis vinifera L. cv. Jingxiu）一年生扦插苗为试材，40℃高温处理30 min，并以25℃为对照，采用体外底物磷酸化方法对叶片中蛋白激酶的活性进行了测定。结果表明，热胁迫处理后，叶片中蛋白激酶在底物髓鞘碱性蛋白(myelin basic protein，MBP)浓度为0.5 mg·ml-1时，其活性达到最大(7 678.7 cpm)，而后随底物浓度的进一步增加，其活性下降。Mg2+浓度为5 mmol·L-1时，蛋白激酶活性达到最大(8 165.8 cpm)。Ca2+对蛋白激酶活性的影响极弱，Mn2+对蛋白激酶活性的激活没有影响。ATP浓度为50 μmol·L-1时，蛋白激酶的活性最大（7 900.9 cpm），比对照高4.7倍。在以组蛋白-Ⅲ（histone-Ⅲ）为底物时，蛋白激酶的活性很微弱，且Mg2+和Ca2+对蛋白激酶有极弱的激活作用。     

SNP对干旱胁迫下拟南芥的生理影响

以拟南芥为材料,研究不同浓度的外源一氧化氮供体硝普纳(SNP)对干旱胁迫下拟南芥种子萌发、幼苗主根长和叶片超氧阴离子的影响。结果表明低浓度SNP(0.01 mmol/L)不影响种子萌发、幼苗主根长和幼苗的生长,显著降低拟南芥叶片中超氧阴离子(O2-.)的含量,从而提高植株的抗旱性。高浓度SNP(0.1mmol/L)不仅抑制种子萌发,还显著抑制幼苗主根长和幼苗的生长。而0.5 mmol/L SNP处理种子的萌发被完全抑制。     

热激因子基因AtHSFa1a提高烟草的耐热性研究

克隆了拟南芥热激因子AtHSFa1a,并由热激启动子AtHSP70b控制,构建了双元表达载体pV-70bAtHSFa1a,并经农杆菌介导转化烟草,获得了转基因植株,并检测了其耐热性指标.结果显示:与对照相比,转基因烟草的电导率较低,丙二醛含量增幅较小,SOD酶活性较高,初步表明其对高温具有更高的耐受性.     

水杨酸对低温胁迫下香水百合叶片生理活性的影响

将分别经0.3、0.5、0.7、1.0 mmol/L水杨酸(SA)于常温预处理的香水百合(Lilium casablanca)幼苗置于5℃下进行低温胁迫试验,以清水处理为对照(CK),处理0、6、12、18、24 h后测定其叶片丙二醛(MDA)、可溶性蛋白质和可溶性糖含量以及超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)活性.结果表明,叶片喷施一定浓度的SA可缓解低温对香水百合幼苗的伤害,与对照相比,喷施SA的幼苗在低温胁迫下叶片中丙二醛含量降低,可溶性蛋白质、可溶性糖含量升高,SOD、CAT和POD活性升高.综合比较,以0.5 mmol/L SA处理后低温胁迫12h的抗低温效果最明显.     

水杨酸预处理对低温胁迫下菊花叶片生理活性的影响

以秋菊早花品种唐宇金秋和晚花品种祥云为试材,研究了外施水杨酸(SA)后不同低温处理下植株叶片脯氨酸含量、净光合速率等生理生化指标的变化。结果表明:各温度处理下,SA处理组的菊花叶片脯氨酸含量、净光合速率、SOD活性和CAT活性均高于喷施蒸馏水的对照组,丙二醛含量则是对照组较高。祥云的各项指标均优于唐宇金秋,如在-4℃与-8℃下,祥云SA处理的脯氨酸含量分别比对照增加了96.8%和54.7%;-8℃时祥云SA处理的净光合速率为4℃的43.1%,唐宇金秋SA处理的净光合速率为4℃时的14.7%。外施1.0 mmol/L的SA能提高叶片脯氨酸含量和抗氧化酶活性,保持其光合作用能力,显著提高菊花的低温胁迫抗性。     

外源水杨酸对低温胁迫下香樟叶片SOD活性的影响

该文研究了外源水杨酸（SA）对低温胁迫下香樟叶片SOD活性的影响,为香樟在我国北方地区的引种提供参考。以多年生香樟叶片为试材,分别在5℃,-5℃,-10℃下进行低温胁迫处理后,叶面再分别喷施0,0.5,1.0,2.0mmol/L浓度的SA,然后测定其SOD活性。结果表明,外源水杨酸浓度在0-2.0mmol/L,随着SA浓度的提高,不同低温胁迫下香樟叶片中超氧化物岐化酶（SOD）活性的提高也越大;适宜浓度的外源SA能够减弱低温对香樟叶片正常生长发育的影响。     

低温胁迫下外源水杨酸对油菜叶片生理活性的影响

研究了外源水杨酸对油菜受到零上低温胁迫的缓解作用,以及不同施用模式对低温伤害的比较。结果表明,适当浓度的水杨酸能显著提高逆境胁迫下的植物体内脯氨酸的含量,能显著降低体内丙二醛的含量和质膜透性,说明水杨酸对低温胁迫有明显的缓解作用。     

拟南芥NADH激酶3对超氧阴离子胁迫下抗氧化酶活性的影响

[目的]研究拟南芥NADH激酶3（NADK3）对超氧阴离子（O2-.）胁迫下抗氧化酶活性的影响。[方法]以拟南芥野生型（WT）和NADK3基因缺失突变体nadk3为材料,用活性电泳染色的方法分析了产生O2-.的甲基紫精（MV）处理后NADK3对超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化物酶（POD）和过氧化氢酶（CAT）活性的影响。[结果]正常生长条件下,WT和nadk3中SOD、POD和CAT活性较低,WT中SOD和CAT活性明显高于突变体,MV处理后显著增加了这两种植物中3种抗氧化酶的活性,其中突变体中SOD活性增加的幅度超过WT,但CAT活性增加的幅度低于WT。[结论]O2-.胁迫下,NADK3抑制SOD活性的增加,促进CAT活性的增加,说明NADK3参与拟南芥O2-.胁迫下SOD和CAT活性的调节。     

O-GlcNAc对冷应激下小鼠骨骼肌卫星细胞Caspase-3的影响

O-连接的N-乙酰葡糖胺糖基化修饰(O-GlcNAcylation)是一种存在于蛋白质Ser/Thr上的翻译后修饰,主要是由OGlcNAc催化转移酶(简称OGT)和O-GlcNAc水解酶(简称OGA)调控的动态过程。其过程与磷酸化相似,在多种细胞过程中扮演着重要的信号转导通路角色,并与神经退行性疾病、Ⅱ型糖尿病、癌症等许多疾病的发病机理密切相关。主要是在低温应激下,通过抑制剂来调控OGT和OGA,间接调控小鼠骨骼肌卫星细胞内O-GlcNAc的含量,来探讨O-GlcNAc对骨骼肌卫星细胞凋亡的作用。实验分为正常对照组、OGA高表达组、OGT高表达组,经过常温(37℃)和亚低温(32℃)不同条件的处理,采用ELISA方法检测Casp-3指标的变化。结果显示:冷应激处理后,人为调控骨骼肌卫星细胞内O-GlcNAc的含量后,所检测的指标有明显差异(P0.05)。结果说明:在低温应激条件下,O-GlcNAc降低会促进细胞凋亡,从而降低了小鼠骨骼肌卫星细胞的抗应激能力,对骨骼肌卫星细胞造成了一定的影响。     

盐胁迫对拟南芥叶片和下表皮细胞大小的影响（摘要）

[目的]探讨盐胁迫对拟南芥叶片发育的影响。[方法]用浓度分别为0、100和150mmol/L的NaCl溶液处理拟南芥幼苗7d和14d后,用改进的指甲油印迹法并借助计算机软件,测量了不同处理的叶片面积和下表皮细胞面积。并对不同处理的叶片和细胞面积进行了差异性检验和比较。[结果]盐胁迫下,拟南芥叶片的生长受到显著抑制。叶片大小、叶片下表皮细胞的大小都相应减小。[结论]叶片及表皮细胞的减小是植物盐胁迫条件下的重要生理指标。