芦笋品种NJ1192雄株高效再生体系的建立

通过对芦笋品种NJ1192雄株离体再生体系中的诱导愈组织伤、分化出芽、生根等过程进行研究,结果显示,以芦笋份绿色的嫩茎为外植体,最佳的愈伤诱导培养基是MS+0.5 mg/L NAA+1.0 mg/L 6-BA+0.8 mg/L 2,4-D,其愈伤组织诱导率可达95.6%;以MS+0.2 mg/L NAA+1.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L IAA作为诱芽培养基,诱芽率可达64.6%;将诱导出芽的材料在生根培养基上诱导生根,其中以MS+0.5 mg/L IBA+1.3 mg/L嘧啶醇的培养基生根率最高,达到74.5%。本研究获得了芦笋品种NJ1192雄株材料高效离体再生体系,为建立该品种的种苗组培生产以及遗传转化等基因工程平台的建立提供了较好的研究基础。     

宁夏优质水稻品种D10高效再生体系的建立

为了利用基因沉默技术定向改良宁夏香稻品种,短期内建立可获得成苗的高效成熟胚再生体系,以宁夏优质水稻品种D10成熟胚作为外植体,通过植物组织培养的方法,研究了培养基、外源激素、光照和温度对外植体培养及再生的影响。结果表明：不同培养基对愈伤组织诱导率有着不同的影响,MS培养基最低,N6D培养基最高;32℃持续光照培养的愈伤组织明显优于30℃ 12 h/d光照培养;在分化培养基中添加TDZ,发现浓度为1 mg/L的TDZ与低浓度的IAA结合使绿苗分化率提高到100%;另外添加2 mg/L ABA的N6D培养基中愈伤组织诱导率为100%。最终该品种的最优再生体系为：32℃持续光照培养并添加ABA 2 mg/L的N6D培养基;分化培养基为B5+TDZ 1mg/L+IAA 0.2mg/L;生根培养基为1/2MS+KT 2 mg/L+NAA 0.2 mg/L+CH 2 g/L+Sorb 30 g/L。本研究建立了宁夏优质水稻品种D10成熟胚再生体系。     

提高籼稻优质米品种成熟胚培养力的研究

以四个籼稻优质米品种的成熟胚为外植研究了培养基中的激素成分及琼脂浓度对培养力的影响。结果表明：（1）成熟胚组织培养力在品种间存在明显差异，99-WT15的诱导率最高，达93.0%，而中优早81仅为63.0%，相差30%；分化率以中早16最高，达62.0%，而中优早81和99-WTI15较低，分别为22.5%和15.6%。（2）基本培养基对诱导率无明显影响，但对分化率有后续效应，诱导培养基中以M8为基本培养基比以N6要高。（3）分化培养基中的激素配比对分化率的影响较大，2mg/L 6-BA与1mg/L NAA配比优于2mg/L KT与1mg/L NAA配比，分化率提高了11.9%。（4）提高琼脂浓度有利于成熟胚愈伤组织的变化，2%琼脂浓度的分化率比1%琼脂浓度的分化率提高4.3%～30.8%，平均提高13.2%。     

马铃薯不同品种茎段再生系统的筛选

研究了2种培养基系统对10个马铃薯不同品种无叶芽茎段的愈伤组织诱导和植株再生的影响。试验结果表明：②号培养基系统(MS+0.01mg/L NAA+2mg/L BA+5mg/L GA3)适合于供试材料中的大多数品种。愈伤组织诱导效果最好的品种是克新16号,愈伤率为98.74%;植株再生率最高的品种也是克新16号,再生率达90.32%。     

人参果‘长丽’叶片再生体系的建立

为了建立人参果遗传转化再生体系,以‘长丽’品种试管苗叶片为材料,研究了培养基种类、pH对人参果试管苗生长和激素组合对人参果叶片不定芽再生的影响。结果表明：培养基pH 5.7~6.0时,MS培养基有利于人参果试管苗的生长,培养24天时平均株高达8.5 cm;GS培养基有利于试管苗生根,培养24天试管苗的生根量达到13.8个/株。6-BA与TDZ配合使用,可显著提高叶片不定芽的再分化能力,在MS+6-BA 2.0 mg/L+TDZ 0.5 mg/L培养基上叶片的再分化率达到83.3%,再分化系数达8.5。本试验研究发现人参果叶片不定芽再生的适宜培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+TDZ 0.5 mg/L。     

铁线莲‘水晶喷泉’茎段组培再生体系的建立

本研究以铁线莲品种‘水晶喷泉’(Clematis Crystal Fountain’Fairy Blue’)的带芽茎段为初始外植体,通过研究灭菌时间、激素浓度配比、基础培养基类型等因素对茎段腋芽的诱导、增殖、再生苗生根的影响,从而建立该品种从外植体—腋芽诱导—不定芽增殖—生根得到完整的植株再生体系。结果表明：最佳灭菌条件为5%次氯酸钠溶液灭菌10 min,污染率为22.2%,成活萌芽率为44.5%;带芽茎段诱导腋芽最适培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.05 mg/L+蔗糖30 g/L pH值为6.0～6.2,6-BA/NAA比值为20,诱导率为100%,此时苗生长良好且株高较高;腋芽增殖最适培养基为DKW+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.05 mg/L+蔗糖30 g/L pH值为6.0～6.2,6-BA/NAA比值为40,增殖系数为5.6;最佳生根培养基为DKW+IBA 1.0 mg/L+蔗糖30 g/L pH值为5.7,生根率可达94.4%,本研究可为铁线莲品种‘水晶喷泉’的组织培养、规模化种植提供相关资料和遗传转化体系建立提供了科学依据。     

胡麻品种内亚7号下胚轴组织培养再生体系的建立

以胡麻品种内亚7号下胚轴为外植体,探索其下胚轴进行组织培养的培养基条件。结果表明,用75%的乙醇和1g/L的HgCl2溶液各处理种子3min是最佳的消毒方法。用MS+3.0mg/L 6-BA+0.25mg/L IAA培养基诱导外植体的出愈率最高,为98.48%,生长速率最大,是愈伤组织生长的最佳培养基。用MS+2.0mg/L 6-BA+0.5mg/L IAA培养基诱导不定芽的分化率最高,为95%,不定芽增殖系数最大,为7.67,是不定芽分化及增殖的最佳培养基;用MS+0.01 mg/L6-BA+0.75mg/L IAA培养基诱导不定芽的生根率最高,为52.26%,是不定芽生根的最佳培养基。由此建立的组织培养再生体系,其出愈率、愈伤组织的生长速率及不定芽的诱导率、增殖率高,生根情况良好,可作为胡麻品种内亚7号的适宜组织培养再生体系。     

樟子松无性系(GS1)胚性愈伤组织的初步诱导

本研究以樟子松无性系(GS1)为研究对象,探讨合子胚不同发育时期愈伤组织的诱导情况,探索不同培养基类型及不同激素配比对其愈伤组织诱导的影响,初步建立体胚发生技术体系,为樟子松(GS1)体胚发生技术建立和获得植株再生提供一定基础。本研究对樟子松无性系(GS1)合子胚不同发育时期进行观察并进行不同时期、不同激素体胚诱导。樟子松无性系(GS1)合子胚形态变化可划分为9个阶段,将这9个阶段的合子胚分别接种到不同培养基上进行诱导。结果显示,DCR培养基比MS和LM培养基更适合GS1愈伤组织的诱导和生长。第7阶段的合子胚在DCR+2,4-D 5.0 mg/L+NAA 1.0 mg/L+6-BA 0.5 mg/L培养基上愈伤组织诱导率最高,在DCR+2,4-D 3.0 mg/L+NAA 1.0 mg/L+6-BA 0.5 mg/L培养基上胚性愈伤组织诱导率最高。诱导过程会产生两种类型的愈伤组织,分别为白色透明状的愈伤组织和淡黄褐色愈伤组织。经显微观察有两种结构愈伤组织,一种是近球形的薄壁细胞结构,为非胚性愈伤组织;另一类是由胚性细胞和胚柄细胞组成的胚性细胞团。樟子松无性系(GS1)合子胚第7阶段的合...     

韭菜根再生相关因素的研究

以韭菜"汉中冬韭"品种为试材,本试验筛选了种子消毒的最佳方法和不定芽生根的最佳培养基,研究了不同激素组合对韭菜根尖不定芽再生的影响。结果表明,韭菜种子表面消毒采用70%乙醇浸泡30s,再用0.1%升汞消毒10min为宜;以根尖为外植体,诱芽的最佳BA、NAA培养基组合为MS+BA2mg/L+NAA1mg/L,诱芽率为45.33%;如果加入KT,最佳组合为MS+BA1mg/L+NAA1mg/L+KT1mg/L,诱愈率为50%,芽分化率为38.89%。不定芽生根的最佳培养基为MS+IAA0.3mg/L,IAA浓度过大,反而抑制生根。另外,不同基因型的芽分化频率略有差别,以"汉中冬韭"品种最好。     

切花葱的再生

切花葱种球价格昂贵,目前通常一个种球的市场售价在20~38元之间。为了建立切花葱高效再生体系,以Lucy Ball和His Excellency两个切花葱品种为试验材料,研究了灭菌时间及灭菌剂浓度、外植体的选择、不同激素配比等因素对切花葱再生的影响。结果表明,最佳的灭菌方法为4%次氯酸钠处理20 min,污染率仅为18.2%,利用率达到了81.8%;最佳外植体为幼叶尖端,平均诱导率为92.6%;诱导不定芽直接再生效果最好的培养基为MS+NAA 1.0 mg/L+6-BA 0.2 mg/L,两个切花葱品种的诱导率分别为His Excellency85.71%,Lucy Ball 90.00%;最佳的生根培养基为1/2MS+0.2 mg/L NAA+0.2 mg/L IBA,生根率为41.67%。通过该方法即可利用切花葱幼叶尖端经直接再生途径诱导出新植株。     

新疆大叶紫花苜蓿(Medicago sativa.L)子叶、下胚轴、根的植株再生

随着植物抗逆性研究和植物转基因技术的发展，通过异源目的基因转化培育耐盐碱苜蓿品种的研究已引起人们的关注，植物受体高频再生体系的建立是异源转化高效的基础。选取新疆大叶紫花苜蓿种子萌发5~7d无菌苗的子叶、下胚轴及根为外植体，诱导愈伤培养基为MS+2,4-D 0.1~3.0 mg/L(8种不同水平)或MS+2,4-D 2.0 mg/L+ KT 0.01~0.5 mg/L(10种不同水平)，诱导芽培养基为MS+6-BA 0.5 mg/L+ NAA 0.05 mg/L，生根培养基为MS。结果表明，外植体在MS+2,4-D 2.0 mg/L+ KT 0.2 mg/L培养基中能够产生状态较好可再分化的愈伤组织，子叶、下胚轴、根的平均出愈率分别为93.1%、100%、100%。愈伤组织在MS+6-BA 0.5 mg/L+ NAA 0.05 mg/L培养基中培养40~80d中均可分化芽，子叶、下胚轴、根的芽平均分化率为50%、78%、50%，将2 cm以上的芽转入MS培养基中诱导生根，14d后，生根的小植株炼苗移入花土中，成活率达90%以上。子叶、下胚轴、根在该体系中均能获得再生植株，根也是一种较好的植株再生材料，以根为外植体进行植株再生的研究报道还较少。     

肇东苜蓿和Pleven6苜蓿离体再生体系的建立

以肇东紫花苜蓿和Pleven6紫花苜蓿的子叶、下胚轴为外植体,建立离体再生体系。结果如下：最佳愈伤诱导培养基：肇东苜蓿为MS+2.0mg/L2,4-D+0.5mg/ＬKT+3%蔗糖,Pleven6为MS+1.5mg/L2,4-D+0.5mg/LKT+3%蔗糖;分化培养基：MS+2.0mg/L6-BA+0.5mg/L NAA+3%蔗糖;分化继代培养基：MS+0.3mg/L6-BA+0.1mg/LNAA+0.3mg/LKT+3%蔗糖;生根培养基：1/2MS+0.5mg/LNAA+1.5%蔗糖。两个品种的子叶均较下胚轴分化时间短、分化效率高,肇东苜蓿诱导率和分化率明显高于pleven6苜蓿。     

两种全缘组铁线莲花卉的组培快繁

铁线莲具有极高的观赏价值,是近年来最流行的花园植物之一,通过植物组织培养技术是实现该属植物无性繁殖和产业化生产的最佳途径。本研究以3年生的‘粉红欣喜’和‘灵感’铁线莲的带芽茎段为外植体,进行组培快繁的研究。结果表明,适于‘粉红欣喜’的初代培养基为MS+1 mg/L BA,腋芽萌发率为100%且新生枝条形态正常;增殖最佳培养基为MS+0.5 mg/L BA+0.02 mg/L NAA,增殖系数为4.54;生根最佳培养基为1/2MS+1.5 mg/L IBA+1 mg/L IAA,生根率高达76.92%。适于‘灵感’初代培养基为MS+1.5 mg/L BA,新生枝条形态正常且萌发率为100%;增殖最佳培养基为MS+1.5 mg/L BA+1 mg/L KT+0.2 mg/L NAA,增殖系数为5.76;生根最佳培养基为1/2MS+1.5 mg/L IBA+0.5 mg/L IAA,生根率高达92.31%。本研究建立了‘粉红颀喜’和‘灵感’铁线莲完整的组织培养技术体系,为铁线莲优良种质资源的推广应用提供了理论基础。     

苎麻叶片组织培养再生植株的研究

摘要：以中苎一号叶片为外植体,研究了外植体消毒时间、培养基、生长调节物质对苎麻品种中苎一号叶片愈伤诱导、分化不定芽和生根的影响。其结果表明：先用75%酒精消毒10秒,再用0.1%升汞灭菌8分钟,同时滴入1-2滴1% HCL效果最好。中苎一号最佳叶片愈伤组织诱导基本培养基为1/2MS;最佳叶片愈伤组织诱导培养基组合为:1/2MS+0.05mg/L TDZ+0.01mg/L IAA+0.03mg/L 2,4-D;最佳愈伤分化培养基为: 1/2MS+0.5mg/L TDZ+0.02mg/L 2,4-D+0.03mg/L IAA;最佳生根培养基为:1/2MS+0.02mg/L TDZ+O.O5mg/L NAA+0.02mg/L IAA, 形成了较为完善的组织培养再生体系,再生率达到了26%以上     

香茶藨子茎尖愈伤组织诱导及植株再生

试验以香茶藨子茎尖为外植体,建立了愈伤组织诱导及植株再生体系。结果表明,诱导愈伤组织的最佳培养基为MS+NAA 0.5 mg/L+2,4-D 0.8 mg/L+6-BA 1.0 mg/L,诱导率为87.0%,愈伤呈紧密块状,生长良好;愈伤组织分化最佳培养基为MS+KT 1.5 mg/L+IBA 0.3 mg/L,愈伤分化率为55.53%;以1/2MS基本培养基添加IBA 0.5 mg/L,最利于生根培养。该体系的建立为香茶藨子规模化生产及遗传转化提供了技术平台。     

辣椒6421子叶外植体离体培养

以辣椒自交系6421子叶外植体为实验材料,通过筛选6-BA浸泡预处理浓度、优化不定芽诱导培养基、芽伸长培养基和生根培养基配方来提高辣椒子叶离体培养效率。结果表明:6-BA浸泡预处理子叶外植体最佳浓度为50 mg/L,最佳不定芽诱导培养基为MS+4.0 mg/L 6-BA,外植体浸泡处理1 min后接种至该培养基中,培养15 d后不定芽诱导率达93.21%;最佳不定芽伸长培养基为MS+6.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L IAA,培养20 d后芽伸长率可达23.21%;最佳生根培养基为1/2 MS+0.25 mg/L IAA+0.25 mg/L IBA,培养30 d后生根率可达90.12%。     

荷兰菊不同外植体组织培养快繁体系

本试验分别以荷兰菊茎段、花托、叶片为外植体,通过不同的处理方式,建立其高频再生组培快繁体系。结果表明:茎段诱导丛生芽最佳培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.3 mg/L+GA30.5 mg/L,平均诱导不定芽数为4.95个;花托诱导不定芽最佳培养基为MS+6-BA 1.5 mg/L+NAA 0.6 mg/L,诱导率最高为75%;叶片诱导不定芽最佳诱导培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 1.0 mg/L,诱导率67.4%;最佳增殖培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.4 mg/L,其增殖倍数为8.3倍,且幼苗生长情况优于其它处理;最佳生根培养基为1/2 MS+NAA 0.4 mg/L。该研究建立了荷兰菊稳定高效的组培再生体系,为工厂化育苗与大面积推广奠定了基础。     

不同品种类型番茄的离体再生体系研究

以不同类型番茄品种中疏四号和中杂105为试材,通过对番茄幼苗子叶的离体培养,研究番茄不同类型品种的离体再生体系.结果表明,诱导愈伤组织及不定芽时,常规品种中疏四号最佳分化培养基为MS+ 6-BA 2.0 mg/L+ IAA 0.2mg/L,正常不定芽分化率为33.3％;F1品种中杂105最佳分化培养基为MS+ 6-BA 1.0 mg/L+ IAA 0.3 mg/L,正常不定芽分化率为28.57％;中疏四号最佳的生根壮苗培养基为MS+ NAA 0.5 mg/L,中杂105则为MS+ IAA 0.1 mg/L.中疏四号潮霉素敏感试验确定的最佳筛选浓度为5 mg/L.     

4个优良石榴品种叶片高频再生体系的建立

为提高石榴叶片再生率,增加再生芽数量及缩短再生周期,以‘泰山红’‘、泰山三白甜’‘、皮亚曼’‘、牡丹’4个石榴品种盆栽苗和无菌苗叶片为试材,研究培养基类型、生长调节剂配比、叶片来源和培养步骤对不定芽再生的影响。结果表明：MS是叶片再生最适培养基类型;无菌苗叶片比盆栽苗叶片更易再生不定芽;BA3.0mg/L+KT1.0mg/L+IBA0.3mg/L是叶片愈伤组织诱导、分化和不定芽形成过程中生长调节剂最佳配比;先在液体培养基上培养3~5天,再转至固体培养基比仅在固体培养基上效果更好,叶片再生率最高达98.47%,出芽数达7.51个。叶片不定芽的最佳单芽培养基和增殖培养基分别为B5+BA0.6mg/L+IBA0.5mg/L+椰汁100mL/L+PVP2.0g/L+GA31.0mg/L和B5+BA0.8mg/L+IBA0.5mg/L+椰汁100mL/L+PVP2.0g/L,增殖系数为5.56。适宜的生根培养基为B5+IBA1.0mg/L+椰汁100mL/L,生根率为89.63%。由此建立了石榴叶片高频再生体系。     

马铃薯品种Favorita再生体系的优化

以马铃薯品种Favorita脱毒试管苗的叶片与茎段为外植体,在愈伤诱导培养基上培养不同时间,然后转入到添加了不同浓度6-BA与ZTR组合的芽诱导培养基上,观察其对马铃薯愈伤组织诱导及芽分化的影响。结果表明:茎段与叶片在愈伤培养基(MS+1 mg/L IAA+0.2 mg/L GA3+0.5 mg/L 6-BA)上分别培养2 d、4 d、6 d后,再转入添加不同浓度6-BA和ZTR的芽诱培养基上,均可以100%产生愈伤组织;50 d后调查,诱导2 d的叶片组织转入添加1 mg/L IAA、0.2 mg/L GA3、2 mg/L 6-BA和1 mg/L ZTR的MS诱导培养基,再生率100%,诱导6 d的叶片组织转入添加1 mg/L IAA、0.2 mg/L GA3、0.5 mg/L 6-BA和2 mg/L ZTR,分化率100%;诱导2 d的茎段组织转入添加1 mg/L IAA、0.2 mg/L GA3、3 mg/L 6-BA和1 mg/L ZTR,分化率50%。