生防细菌H1、H2活性物质的萃取与抑菌活性

通过有机溶剂萃取的方法,获得黄瓜白粉菌生防菌H1、H2的活性物质,采用温室药效试验测定各萃取物对黄瓜白粉菌的抑菌活性,结果表明,生防菌H1石油醚、乙酸乙酯、氯仿、正丁醇萃取物及水相对黄瓜白粉菌的防效分别为62.79％、25.57％、17.11％、13.8％和12.1％,生防菌H2石油醚、乙酸乙酯、氯仿、正丁醇萃取物及水相防效分别为61.71％、36.24％、24.14％、22.30％和13.6％,其中,均以石油醚萃取物对黄瓜白粉菌的防效最为显著.     

放线菌H50发酵液抑菌活性及其稳定性测定

将沈阳农业大学微生物研究室分离的1株放线菌H50[链霉菌属(Streptomyces)]分别以植物病原菌真菌12株、细菌3株为供试菌,采用菌丝生长速率法和管碟法测定H50发酵液的抑菌活性以及发酵液的稳定性.发酵液的抑菌活性测定结果表明:H50发酵液对12株供试病原真菌均具有不同程度抑制作用,对其中6种病原真菌菌丝生长抑制率达50％以上,对油菜菌核病菌和黄瓜灰霉病菌的抑制率分别为98.3％和94.9％;H50发酵液对3种供试病原细菌中的枯草芽孢杆菌的抑制作用最强,抑菌圈直径为12.3mm.发酵液的稳定性检测结果表明:发酵液在80℃处理后抑菌活性开始下降,发酵液在pH值4.0～8.0条件下抑菌活性稳定,可见该菌株的代谢产物具有广谱抑菌活性和较强的热、酸、紫外光稳定性,具有潜在的开发价值.     

广谱生防细菌FW的鉴定及其抑菌机制的研究

从土壤中分离出的细菌FW,通过与4种病原真菌的对峙试验测定,可知其具有广谱的生防特性。通过对其形态、生理生化特性及16S rDNA序列等方面的研究,初步鉴定为枯草芽孢杆菌,该菌的无菌发酵液对各病原真菌的抑菌效果都达到了显著水平,对于草莓灰霉病菌的防治效果达到了83.7%,发酵滤液经硫酸铵沉淀、透析后得到抗菌活性物质,可初步确定其为抗菌蛋白。     

根际细菌对南方根结线虫的生防活性

离体和盆栽试验测定了9株根际细菌对番茄根结线虫(Meloidogyne incognita)的活性.结果表明,供试细菌中菌株Paenibacillus sp.TX-4、Bacillus cereus 1Re107和Pseudomonas fluorescens 2R37对根结线虫二龄幼虫(J2)致死率分别达82.02%、76.52%和70.06%,对卵的孵化抑制率分别为84.46%、82.70%和77.58%.温室盆栽试验结果表明,菌株Paenibacillus sp.TX-4,B.cereus 1Re107和P.fluorescens 2R37能显著(P<0.01)减少番茄根瘤指数;9个供试菌株对番茄生长有显著(P<0.01)的促生作用.     

拌种灵对植物病原细菌的抑菌活性

在离体条件下，采用浑浊度法测定病原菌的生长量，结果表明，拌种灵对稻白叶枯病菌，稻细菌性条斑病菌，柑桔溃疡病菌及大豆斑疹病菌的有效抑制中浓度分别为0．5745，1．3026，2．6257和7．4970ug.mL^-1，对丁香假单胞病菌，番茄青枯病菌和白菜软腐病菌基本无效，抖种灵对柑桔溃疡病菌的抑菌作用稍优于萎锈灵和噻枯唑，但低于浸种灵和硫酸链霉素，偏酸或偏碱的环境不影响抖种灵的抑菌作用，拌种灵能够抑制柑桔溃疡病菌菌体内葡萄糖的氧化代谢，拌种灵对病原细菌的作用机理有待进一步研究。     

一株细菌对蔬菜病原真菌抑菌活性的研究

采用菌丝生长速率法测定分离自实验室的一株细菌对黄瓜灰霉病菌(Botrytis cinerea)、辣椒疫病菌(Phytophthora capsici)、黄瓜枯萎病菌(Fusarium oxysporum)的抑菌效果。结果表明,这株细菌对以上3种病原菌均有较好的抑制效果,其中对黄瓜灰霉病菌的抑制效果最好;细菌粗发酵液经一定强度的温度和酸碱处理后仍有一定的抑菌效果,抑菌效果在p H 5.1~9.0之间无显著差异;用胰蛋白酶处理后拮抗活性无明显变化;经硫酸铵处理过的粗发酵液,其上清液与沉淀均具有抑菌活性。     

产蛋白酶生防细菌的筛选及其对病原真菌的拮抗作用

从小麦根际土壤中分离到一株高产蛋白酶并对多种植物病原真菌具有拮抗作用的生防细菌T2.通过形态特征、生理生化及16S rDNA同源性序列分析,初步鉴定该菌为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis).其发酵液经硫酸铵沉淀后的粗酶液可明显抑制棉花枯萎病菌菌丝生长及孢子萌发,在显微镜下观察到棉花枯萎病菌孢子萌发的芽管短、孢子膨大变形呈泡囊状,菌丝呈串珠状膨大、细胞破裂、细胞质外渗,表明该细菌菌株产生的胞外蛋白酶可能与病菌菌丝生长受抑制密切相关.     

水稻纹枯病菌生防细菌的筛选

从水稻种子和植株内分离到 5 0种内生和表生细菌菌株 ,通过与水稻纹枯病菌的对峙培养 ,得到了 S- 1 1 ,S-1 3,S- 1 4和 S- 1 8共 4种对水稻纹枯病菌菌丝生长有明显抑制作用的菌株 .将这 4种菌株的菌悬液浸种杂交水稻威优46 ,形成细菌化种苗 ,4叶期接种水稻纹枯病菌 ,表现出良好的抗病性 ;将它们的菌悬液以 3× 1 0 9/ m L 喷雾 ,发现菌株 S- 1 8对水稻纹枯病有一定的防治作用 ,效果优于井岗霉素     

小麦全蚀病生防微生物筛选研究

通过对峙培养,从160株土壤微生物分离物中筛选出8株对小麦全蚀病菌生长有较强抑制作用的生防菌株,其中,真菌T4菌株抑菌活性最强,为63.41%;其次为S37、B22和YB024,抑菌率分别为60.37%,59.15%,53.17%。对8个生防菌株进一步进行了盆栽和田间小区防效试验,结果表明,放线菌菌株YB024对小麦全蚀病的防效最高,盆栽和小区试验防效分别达到56.90%和53.31%,优于对照杀菌剂立克秀拌种处理;其次为放线菌菌株S89,盆栽和小区试验防效分别为53.77%和36.88%;细菌菌株B22居第3位,盆栽和小区试验防效分别为52.73%和34.69%。     

稻瘟病生防细菌的筛选及其防效测定

为筛选得到对稻瘟病有良好防效的拮抗细菌,为稻瘟病的生物防治提供更多的菌源.采用稀释涂布法从对节白蜡(Fraxinus hupehensis Chiu,Shang et Su)及其根际分离细菌,通过平板对峙、离体叶片试验和盆栽试验筛选稻瘟病菌(Magnaporthe grisea)的拮抗菌株,测定其产胞外酶活性,并经16S rDNA序列分析对其进行鉴定.结果显示,从对节白蜡及其根际共分离得到193株细菌,经平板筛选得到7株对稻瘟病菌具有抑制作用的细菌,其抑制率为62.53％～75.47％,其中菌株YZU-S033和YZU-S061对稻瘟病菌的抑制率最高,在离体叶片试验中对稻瘟病的防效较强,分别为81.7％和69.4％.在盆栽试验中,菌株YZU-S033和YZU-S061的菌体悬浮液显著降低了稻瘟病的发病率,减轻了该病害的发病程度,其防效分别可达69.8％和64.0％,与对照药剂(枯草芽孢杆菌可湿性粉剂)的防效相当.这2株拮抗细菌均能产生蛋白酶和纤维素酶,其中YZU-S061还可分泌嗜铁素.经系统发育分析将菌株YZU-S033和YZU-S061均鉴定为贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis).结果表明菌株YZU-S033和YZU-S061对稻瘟病均具有良好的生防潜力和应用前景.     

抑菌植物的筛选及甘草对5种植物病原真菌抑菌活性的研究

为了寻找新的植物源杀菌剂,采用菌丝生长速率法测定了17种植物提取物对荔枝霜疫霉病菌Peronophythora litchi的抑菌活性.结果显示:辣蓼Polygonum lapathifolium、白花油茶Camellia oleifera甲醇提取物(干粉)10 mg/mL处理7 d后的抑菌率分别达74.37%、77.02%,而甘草Glycyrrhiza uralensis根甲醇提取物相同质量浓度时的抑菌率达到97.83%;甲醇对甘草的提取率为23.04%,甘草的甲醇提取物1和5 mg/mL处理对荔枝霜疫霉病菌菌丝生长的抑菌率分别为63.84%和80.68%,对荔枝霜疫霉病菌孢子囊芽管萌发的抑制中质量浓度(EC50)为0.47 mg/mL,对荔枝霜疫霉病菌、辣椒疫霉病菌Phytophthora capsici、芒果炭疽病菌Colletotrichum gloeosporioides、香蕉枯萎病菌Fusarium oxysporum f.sp.cubense和草莓叶斑病菌Cladosporium herbarum菌丝生长的EC50依次为0.62、0.89、9.70、6.42和4.53 mg/mL,表明甘草甲醇提取物具有较好的抑菌活性,有望继续研究开发成新的杀菌剂.     

真姬菇发酵液的抑菌谱及其稳定性研究

【目的】研究真姬菇发酵液的抑菌活性。【方法】制备真姬菇发酵液,采用杯碟法检测其对7种常见细菌和4种霉菌的抑制效果。以金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、肠球菌、化脓链球菌、大肠杆菌和沙门氏菌为指示菌,考察真姬菇发酵液中多糖和去多糖组分的抑菌活性。以金黄色葡萄球菌为指示菌,考察不同温度(4,37,80,100和121℃)、pH(2,4,5,7,8,10和12)和金属离子(Na+、Mg2+、K+、Ca2+、Zn2+和Fe3+)对发酵液抑菌活性的影响。【结果】真姬菇发酵液对参试的6种细菌有一定的抑制作用,对参试的枯草芽孢杆菌和4种霉菌基本无抑制作用;发酵液中的多糖无抑菌活性;温度和pH对发酵液的抑菌活性无显著影响,经过不同温度和pH处理后的发酵液,仍能保存86%以上的抑菌活性;供试金属离子对发酵液抑菌活性无显著影响,Zn2+和Fe3+对发酵液的抑菌活性有一定促进作用,而Na+、Mg2+、K+和Ca2+稍有抑制作用。【结论】真姬菇发酵液在各种环境条件均具有较高的稳定性,对多种细菌具有较好的抑菌效果,在一些食源性病原菌的防治方面有一定的应用前景。     

向日葵菌核病生防细菌的初步筛选

从供试的土壤中分离得到50个细菌分离物。经平板抑菌实验,筛选出10个对菌核菌(Selerotiniascleroti orum)有明显的拮抗作用的菌株。进一步对峙培养,拮抗细菌对菌核菌的拮抗效果最佳的为A03和DE,测其抑菌带宽度分别为6.3mm、12.1mm。     

北极海洋沉积物可培养细菌多样性及抗植物病原真菌活性菌株筛选

根据菌落形态特征,从中国第4次北极科考采取的海洋沉积物BN05中分离到19株细菌,对其进行分子鉴定与系统发育分析,并利用平板扩散法从中筛选出对植物病原真菌尖刀镰孢菌(Fusarium oxysporum)具有明显抑制作用的活性菌株。分子鉴定与系统发育分析表明,从北极海洋沉积物中分离到的细菌主要为γ-变形杆菌纲(γ-Proteobacteria),分别属于假交替单胞菌属(Pseudoalteromonas)、假单胞菌属(Pseudomonas)、嗜冷杆菌属(Psychrobacter);1株属于放线菌门(Actinobacteria)的节杆菌属(Arthrobacter)。假交替单胞菌属是北极海洋沉积物BN05中可培养细菌中的优势菌群。活性菌株筛选结果表明,5株菌株对尖刀镰孢菌具有明显的抑制作用,其中菌株BN05-S-2和BN05-B-6属于假单胞菌属,菌株BN05-M-2、BN05-M-7和BN05-B-2属于假交替单胞菌属。     

生防菌株CAB-1抑菌物质产生的条件及其稳定性研究

[目的]探索生防菌株CAB-1的最优培养条件及其产生的抑菌物质稳定性。[方法]以黄瓜灰霉菌为靶标,分别采用改进牛津杯法和含药平板法测定抑菌物质活性,并对菌株CAB-1产生抑菌物质的发酵条件及抑菌物质特性进行了研究。[结果]菌株CAB-1产生抑菌物质的最适培养基为4号培养基,最佳发酵温度为31℃,最佳发酵时间为48h。菌株CAB-1所产的抑菌物质在60℃及其以下具有热稳定性;超声波（100W）处理20min对抑菌物质的活性没有影响,处理30min以上抑菌物质的活性显著下降;紫外线照射20、30、40min对抑菌物质的活性没有显著影响,照射50min后其活性显著降低;pH值为6、10、11时,抑菌物质的活性最高。[结论]该研究为利用生防菌株CAB-1开发新型微生物杀菌剂提供了依据。     

生防细菌Snb331对水稻干尖线虫活性的影响

研究了生防细菌Snb331发酵液原液及不同稀释液对水稻干尖线虫活性及运动行为的影响。结果表明,在1×(原液),2×,4×,6×,8×,10×稀释浓度下,水稻干尖线虫的校正死亡率分别是87.24%,66.75%,57.30%,44.87%,22.75%,18.09%,均与无菌水对照差异显著;其不同浓度的发酵液对水稻干尖线虫的行为影响不同,随着浓度的增大和时间的延长,对水稻干尖线虫活动频率的抑制也增强。     

松苗猝倒病不同病原物的致病性差异及其生防细菌的筛选

从3个湿地松苗圃土壤中分离出了66株松苗猝倒病的致病真菌,63个菌株为镰孢属真菌,2个为链格孢菌,1个为丝核菌属真菌。对66个真菌菌株进行松苗猝倒病的致病性测定表明:12个真菌菌株为无致病性或弱致病性真菌,17个镰孢属菌株为强致病性真菌,其余37个为中等程度致病性真菌。从湿地松幼苗根系分离到了细菌菌株320株,平皿拮抗测定表明其中的10个菌株对松苗猝倒病病原真菌有强拮抗作用,对松苗猝倒病有较大的生防潜力。16SrDNA序列分析表明这10个生防菌株的分类地位分别是:7株为洋葱伯克霍尔德菌,2株为枯草芽孢杆菌,1株为待定种。     

植物病害生防细菌的筛选策略综述

简要总结了当前植物病害生防细菌的主要类型,着重介绍目前国内外生放菌筛选策略研究进展方面的内容,并对目前研究中存在的问题与对策等方面进行归纳与讨论。     

蔬菜根结线虫生防细菌的筛选

从广西蔬菜地分离到359株细菌菌株,用其细菌菌悬液和发酵上清液对南方根结线虫Meloidogyne incoqnita的二龄幼虫进行处理,评价其对南方根结线虫的毒力.结果显示,有336株菌株的菌悬液对南方根结线虫二龄幼虫具有杀伤能力,其中49株菌株对南方根结线虫的室内校正死亡率达60%以上;用细菌发酵上清液处理二龄幼虫,也表现出对幼虫活性的抑制作用,48h后有8株菌株发酵上清液原液校正死亡率达80.00%以上.