哺乳动物精子顶体反应检测方法研究进展

精子顶体反应检测有助于更准确评价精液品质,达到提高受精率的目的。依据精子状态,顶体反应的检测可分为固定检测和活体检测两类。为了更客观地了解受精过程,     

延边黄牛精子顶体反应3种检测方法的比较

试验以延边黄牛冷冻精子为材料,用肝素诱导精子体外获能后分别用考马斯亮蓝水溶液、考马斯亮蓝高氯、台盼兰-姬姆萨3种不同方法进行染色,并同时做延边黄牛卵母细胞穿卵试验,以求证精子顶体反应与体外受精率的相关性。     

诱发和检测牛精子顶体反应的一种简易方法

将冷冻保存的公牛精子解冻,冲洗,以高浓度悬浮于K-3培养液中。K-3溶液含有NaCl,CaCl_2和NaHCO_3。将此悬液预先孵育在39.5℃密闭玻璃管中,然后以台盼兰-姬姆萨(简称TG)染色,用田鼠试验以确定发生了顶体反应的精子。TG染色的涂片显示出四种类型不同着染的精子。发现仅在顶体后区未着色或淡兰色,以及顶体区未着色或部分浅红—深红着色的这两种精子的百分率与去透明带田鼠卵的穿透率之间有显著的正相关关系(r=0.732,P<0.05,n=12)。这样的精子被认为是发生了顶体反应的。公牛A与B,其精子样品预先分别在K-3培养液中孵育2小时和1～2小时,得到了很高的精子顶体反应的百分率(A 37％,B 43.8％～49.2％)和较高的卵子穿透率(A91.7％,B85.4％～97.7％)。这一结果表明公牛精子培养在只含NaCl_2、CaCl_2、NaHCO_3的培养液中,密封玻璃管中39.5℃孵育,即可发生顶体反应。TG方法可用于鉴定发生了顶体反应的精子。     

乳类动物精子的获能和顶体反应

介绍了在生殖过程中的2个重要的生理变化－获能和顶体反应，并综述了最近几年来在生殖生物学领域关于获能与顶体反应机制方面的最新成果，结果显示，cAMP,Ca^2 ，咖啡因等因素对精子获能有促进作用，ZP3，Ca^2 ,cAMP、肝素等因素对顶体反应有促进作用。所有研究成果表明，精子和获能和顶体反应与精了原生理变化有着密切关系。     

哺乳类动物精子的获能和顶体反应

介绍了在生殖过程中的2个重要的生理变化--获能和顶体反应,并综述了最近几年来在生殖生物学领域关于获能与顶体反应机制方面的最新成果.结果显示,cAMP、Ca2+、咖啡因等因素对精子获能有促进作用,ZP3、Ca2+、cAMP、肝素等因素对顶体反应有促进作用.所有研究成果表明,精子的荻能和顶体反应与精子膜的生理变化有着密切关系.     

钙离子载体诱导蓝狐精子顶体反应的研究

顶体反应(AR)是精子受精必不可少的过程之一,目前常用钙离子载体A23187(IA)来诱导精子AR.蓝狐(AlapoxZagopus)是食肉目犬科北极狐属珍贵毛皮兽.本试验对钙离子载体诱导的蓝狐精子AR的适宜浓度进行了筛选,旨在对蓝狐的体外受精和胚胎移植研究有所帮助.     

钙通道阻断剂对豚鼠精子顶体反应的影响

电压依赖性Ｃａ２＋通道阻断剂ｖｅｒａｐａｍｉｌ、ｎｉｆｅｄｉｐｉｎｅ、ｄｉｌｔｉａｚｅｍ和Ｄ６００等，对非同步培养系统中的获能早期豚鼠精子和同步培养系统已获能豚鼠精子的顶体反应，均呈显著的促进作用，但对同步培养系统未获能豚鼠精子的顶体反应无显著影响。在碱性条件下，Ｋ＋浓度在１０～６０ｍｍｏｌ／Ｌ范围内对精子顶体反应无显著影响。Ｌａ３＋在５０～２００μｍｏｌ／Ｌ浓度可完全抑制Ｃａ２＋诱导的已获能精子的顶体反应     

绵羊精子的顶体反应与精液品质相关的研究

<正> 在人工授精的工作中,冷冻精液解冻后精子的活力在0.3以上,就可输精或长期保存,但同一品种不同个体解冻后精子的活力虽相差不大,可情期受胎率有差异,这种差异究竟来自冻精本身还是输精技术,往往在科技人员间看法不一。本文就是为解释这一实践中的疑题而设计进行的。1 材料和方法1.1 精液的采集与冷冻本试验所用的绵羊冷冻精液来自山西省液氮冷冻中心,用假阴道来集精液,活     

TST三重染色在评定公牛精子顶体反应上的应用

<正> 前言 顶体反应是精子受精过程的重要步骤,也是估测精子受精能力的重要指标。本文就是从这个角度出发,采用TST三重染色法染色黑白花奶牛不同公牛个体解冻后的精子,观察精子的顶体反应率,同时测定了精子的活力,顶体完整率和畸形率,以及精清中钙的含量和乳酸脱氢酶(LDH)活性,从而来探讨TST三重染色法是否可作为评定精液品质的可靠方法。     

猪精子获能、顶体反应及冷休克对顶体酶抑制剂的影响

为了探究猪精子在获能、顶体反应及冷休克处理后对精子顶体酶抑制剂表达量的影响,以及顶体酶抑制剂在精子中何时被降解,低温是否会损伤顶体酶抑制剂,利用SDS-PAGE、Western blot分析射精精子、获能精子、顶体反应精子和冷休克精子组的总蛋白种类及猪精子顶体酶抑制剂表达量的变化。结果显示:射精精子处理组与获能精子、顶体反应精子处理组的顶体酶抑制剂表达量差异显著(P<0.05),且获能和顶体反应处理组间的差异不明显(P>0.05);射精精子与冷休克精子处理组的顶体酶抑制剂表达量差异极显著(P<0.01),且冷休克处理组的顶体酶抑制剂出现异常表达。推测:精子在获能或顶体反应期间,顶体酶抑制剂可能通过泛素-蛋白酶体途径被降解,释放出有活性的顶体酶;低温可能导致顶体酶抑制剂蛋白结构的改变或损坏,导致其表达量异常。     

鸡精子获能的检测

许多哺乳动物如大鼠、雪貂、金黄地鼠、绵羊、山羊、猪、马、牛等存在受精的精子有一个获能期的现象。本研究的目的是用一个体外试验获得一个直接的证据，以证明鸡的精子与卵子受精，是否需要一个获能期。     

公猪畸形精子的检测

<正>中国约有80%的规模化猪场在人工授精中没有检测精子的畸形率。其实大多数畸形精子不具有繁殖能力。因此,精液中精子的计数必须考虑到其中畸形精子所占的百分比。公猪畸形精子的检测是中国目前人工授精技术中比较缺失的环节,约有80%的规模化猪场在生产中没有检测精子的畸形率,这与人们对畸形精子的理解有关。公猪畸形精子对母猪的繁殖效率有着很大的影响,畸形检测有着重要的经济价值。畸形精子的检测是现代人工授精技术中不     

透明质酸对猪精子活率,获能,顶体反应及体外受精穿透率的影响

采用具有高繁殖力的种公猪的新鲜精液及冷冻精液，加入不同获能剂咖啡因及透明质酸，在３９．５℃、５％ＣＯ２培养箱中孵化培养。结果表明，透明质酸能够在体外条件下保持精子的活率，并维持在稳定的水平，鲜精为４２．６％～４７．８％，冻精为２０．４％～２５．６％。荧光剂Ｈｏｅｃｈｓｔ染色表明，透明质酸能够显著增加培养３６０ｍｉｎ后的活精子率。在无蛋白来源的ｍＢＯ培养液中，培养０～６０ｍｉｎ，精子发生自发的获能和顶体反应，而受获能剂影响，精子发生获能的时间带在各处理组之间显著不同：咖啡因处理组的获能时间带是６０～３６０ｍｉｎ，透明质酸处理组则是６０～１８０ｍｉｎ。体外受精试验表明，去除卵母细胞周围卵丘细胞时，透明质酸和咖啡因对精子穿透率的影响没有区别；而在卵丘细胞存在的前提下，咖啡因处理组的穿透率显著高于透明质酸处理组。     

利用硫酸软骨素诱导精子中的顶体反应预测(乳用)公牛的受精力

公牛精子和每毫升0或50微克的硫酸软骨素在试管里一起培养以诱发顶体反应。跟每一同样试验过程的对照样品相比较,计算由硫酸软骨素所诱发的顶体反应的百分增加数。从已知不发情率的8头公牛数据作为基础,预测参加人工授精的18头公牛的不发情率。所有26头公牛的平均化验变异系数为16.1％。根据实际不发情率和硫酸软骨素诱发的顶体反应百分增加率之间计算的多项式回归线间的相关系数,经过8头参照公牛和所有26头公牛的混合数据计算后分别为0.98和0.81。结论为:使用硫酸软骨素诱导精子中的顶体反应的实验室分析法能用于预测公牛的相对受精力。